钠、氯离子对离体小鼠附睾大头精子的影响

我们从以往的小鼠精子畸形试验中发现,各类异常精子中,以大头精子发生率为高,且不稳定,影响了对试验结果的判断.

感染与精子膜WGA受体的相关性

精子膜WGA受体与受精、获能和胚胎发育密切相关,其含量的下降可影响男性生育能力.解脲脲原体感染是导致男性不育的因素之一.研究发现解脲脲原子核体感染引起的精子变化与将WGA加入精子悬液后精子的形态改变及凝集十分相似.

事故照射对人精子膜完整性的影响

精子膜是精子外层的细胞结构，对细胞内、外环境起着生理屏障作用，其完整性是精子功能的基础。已有研究表明，在人类精液冷冻保存中，由于冷冻-解冻过程的物理和化学效应，而影响人精子膜的完整性［1］，而且许多研究表明，在离体或全身照射条件下，电离辐射均能诱发人精子染色体畸变［2，3］。可见，人精子受到电离辐射作用后，其膜的完整性不可避免地受到影响。因此，阐明电离辐射对人精子膜完整性的影响，对受电离辐射作用后人精子生殖功能的研究具有重要意义。为此，本文作者应用同时显示精子尾膜和头膜完整性的低渗肿胀-伊红拒染(HOS-EY)结合试验，探讨事故照射对人精子头部和尾部膜完整性的影响。

茯苓多糖体外对大鼠精子膜及 DNA 的保护作用

目的：观察茯苓多糖体外对大鼠精子膜功能、精子 DNA 和存活力的保护作用。方法取大鼠精子制备精子悬液，并分为正常组（PBS），生理盐水组，阳性药对照组（维生素 C 组）和茯苓多糖低、中、高剂量组（0.5mg/ml，1.0mg/ml 和5.0mg/ml）。各对照物及茯苓多糖分别与精子悬液共同孵育后，检测精子膜完整性、DNA 损伤程度及存活力。结果低、中、高浓度的茯苓多糖在相同的条件下均可增加精子存活时间，提高精子存活率和活力，降低精子 DNA 损伤比率，对精子膜功能和 DNA 均具有一定的保护作用。其中1.0mg/ml 和5.0mg/ml（中、高）的茯苓多糖组作用明显优于维生素 C 组( P <0.05或 P <0.01)。结论茯苓多糖对大鼠精子膜和 DNA 有明显的保护作用，并可延长精子的体外存活时间。

哺乳动物精子膜与精卵识别相关的研究进展

哺乳动物的精卵识别是受精中一个复杂的、关键性的步骤,它涉及生殖的普遍规律性和种属特异性,其中精子膜成分可能与卵细胞透明带蛋白或糖基交替进行连续性识别.详细阐述精子膜与识别相关成分如:sp56、β-1,4-半乳糖转移酶、p95、顶体素原、PH-20、受精素β、精子粘连素、甘露糖等糖基受体,RSA及其作用机制,对受精秘密的揭示、避孕疫苗的研制及对生育率的控制等都具有十分重要的现实意义.

哺乳动物精子膜离子通道的研究进展

哺乳类动物精子膜上存在着2+,Na+,K+和Cl-等诸多的离子通道,这些离子通道在精子成熟、获能、顶体反应等一系列受精过程中发挥了极其重要的作用.不同的离子通道在精子膜上的分布不同,并且在精子的各种生理活动中起的作用也不同.其中Ca2+及其通道更被认为是触发受精过程中不可缺少的关键性因素之一.因此,对精子膜离子通道研究的进一步深入,能对受精机理有更深的了解,而且在避孕药物研发的思路上还可能有一个新的突破.

精子功能测定在男性不育诊断中的应用

我们于1997～1999年两年多时间对30例正常生育者和150例不育者进行了精子膜、顶体完整性及精子穿透能力(爬高试验)等精子功能试验测定.

非梗阻性不育患者精子膜超微结构研究

目的：研究非梗阻性不育患者精子膜超微结构的改变，探讨非梗阻性不育患者精子膜超微结构缺陷对男性不育的影响。方法利用透射电镜对临床非梗阻性不育患者新鲜精液标本中精子膜的超微结构进行观察。结果在电镜下，发现该不育男性患者精子多存在质膜、顶体外膜和/或顶体内膜等畸变，膜结构呈多形态超微结构异常的现象，此外，精子核、颈部和线粒体、微管等超微结构也存在病理性改变。结论精子膜超微结构畸变是非梗阻性男性不育原因之一。

两种精子优选法对精子活率、尾部低渗肿胀率和形态正常精子百分率的影响

目的:评价Percoll密度梯度离心和上游精子分离方法对人精子活率、尾部低渗肿胀率和形态正常精子百分率影响.方法:收集12例男性不育症患者精液样本,分别采用Percoll密度梯度离心和上游精子分离方法(简称上游法)进行精子优选,应用伊红-Y染色分析优选前后精子活率和尾部低渗肿胀率,应用改良巴氏染色法分析优选前后精子形态.结果:①Percoll法和上游法优选后精子活率和尾部低渗肿胀率均明显高于优选前(P＜0.01),两种优选法间比较精子活率和尾部低渗肿胀率差异均无显著性(P＞0.05).Percoll法和上游法优选后B-G型精子尾部低渗肿胀率均明显高于优选前(P＜0.01),两种优选法间比较B-G型精子尾部低渗肿胀率差异均无显著性(P＞0.05).②Percoll密度梯度离心法和上游法优选后形态正常精子百分率均明显高于优选前(P＜0.05),上游法优选后形态正常精子百分率明显高于Percoll法优选后形态正常精子百分率(P＜0.05).上游法优选后锥型头、无定型头和颈/中段缺陷形态异常精子百分率均明显少于优选前(P＜0.05);Percoll法优选后锥型头、无定型头和尾部缺陷形态异常精子百分率均明显少于优选前(P＜0.05);上游法优选后无定型头、颈/中段缺陷和尾部缺陷形态异常精子百分率明显低于Percoll优选后(P＜0.05).结论:Percoll法和上游法优选后精子活率、尾部低渗肿胀率和形态正常精子百分率较优选前明显改善,此两种优选法均可广泛应用于生殖医学,其中上游法优于Percoll法.

兽医男科学中精子膜细微变化的检测

在过去十年中由于流式细胞仪在兽医精子学中得到越来越多的应用,许多新的细胞膜完整性检测方法被开发出来.这些检测方法比精子的运动性监测等其它的检测更有助于预测生殖能力,因而显得十分重要.精子质量评估的主要部分演变为能在较早时期检测到精子损伤的检测.利用磷脂移位测试法,能通过荧光探针结合流式细胞仪评估大量精子的细胞膜渗透性和流动性早期的变化.

活性氧与男性不育

氧对在氧环境中生存的细胞而言,是个矛盾.少量、持续的活性氧(reactive oxygn spies,ROS)刺激有利于维持细胞的正常功能.过量的活性氧引起氧化应激,损伤机体的氧化防御系统.精子膜含有大量多聚脂肪酸,而细胞中含有低浓度氧化物清除酶,所以精子特别容易受到ROS诱导的损伤.有报道:25%～40%不育男性的精液可检测到高水平的ROS [1].由于高水平ROS对精子功能的潜在毒性,所以ROS越来越受到关注.

正常生育男性精子膜孕激素受体的放射性配基结合分析

目的:研究体外获能2 h后正常生育男性精子膜上的孕酮结合位点.方法:用上游法分离活力良好的精子并于体外获能2 h,然后进行多点结合饱和实验,在7个总结合管内分别加入精子悬液和浓度递增的孕酮-11α-葡萄糖醛酸甙-[125I]碘化酪胺(125I-孕酮),在相应的非特异管内除加入与总结合管等量的精子悬液和125I-孕酮外,另加入10 μmol/L孕酮,于4 ℃孵育1 h,终止孵育后分别测定各管以及离心后沉淀的放射性,运用Scatchard函数的单位点多点饱和法数学模型,用小二乘回归法计算平衡解离常数(Kd)和大结合容量(Bmax).结果:Kd为(0.61±0.04) nmol/L,Bmax为(830±344)结合位点数/细胞,对回归方程进行的显著性检验表明r=-0.980,P＜0.01.结论:正常生育男性精子膜上存在一种高亲和力和低容量性孕酮结合位点即孕激素受体.

吸烟者精浆对非吸烟者精子功能的毒性效应

目的: 吸烟已被公认具有普遍的健康危害,并且有证据表明吸烟对男、女生殖健康均有影响.本研究的目的就是提供证据说明吸烟通过改变精液和精子质量来影响男性的生育能力. 方法: 我们评价了吸烟者(SM)的精浆(SP)(用PBS进行不同浓度的稀释,1/0;1/1;1/2;1/6;1/10)对非吸烟者(NSM)精子的直接影响. 结果: 非吸烟者的精子暴露于吸烟者的精浆一定时间,可导致因丙二醛水平升高所致的精子膜完整性受到破坏、精子活力下降和环(在明胶载玻片上因顶体反应导致环绕精子头部的清晰区带)的数量减少. 结论: 吸烟者的精子暴露于非吸烟者的精浆导致精子功能障碍改善,提示,去除吸烟者的精浆,然后重新加入含足量抗氧化体系的精浆,可能对各种辅助生育技术应用于吸烟者有临床意义.

伊红Y水试验法应用研究进展

基于体外活体染色技术、低渗肿胀试验和水试验原理建立的伊红Y水试验方法可同步检测精子头部和尾部、精子膜结构和功能的完整性,在中国已被临床广泛应用.伊红Y水试验方法学上的3个特点包括:①同时对精子头部和尾部进行检测,全面评估精子膜各部位损伤的内在联系,便于观察;②用蒸馏水代替常用的配方溶液,避免不同渗透压或不同比例糖和电解质溶液对精子膜有不同作用影响水分子通过精子膜,既简化了方法,又使反应标准化;③检测时间短,可以重复检测,适合治疗前后反复检测.本文综述伊红Y水试验法的基本方法及其改进,在精子功能检查、男性不育常规精液分析、睾丸穿刺精子质量评估、精液冷冻保存程序研究、受微波辐射男性精子膜完整性等相关研究方面的应用.

精子膜功能与精液分析各项参数关系探讨

目的:研究精子膜功能与精液自动化分析各项参数的关系.方法:使用精子膜功能检测试剂盒和精子质量检测仪对162例受检者进行精子膜功能检测及精液自动化分析.结果:生育组与不育组精子膜功能有非常显著性差异(P＜0.01):精子膜功能正常组与异常组CASA各项参数除精子平均移动角度、精液量、酸碱度无显著性差异外,其它均有显著性差异.结论:精子膜功能检测可作为CASA的必要补充,同时结合CASA在男性不育症的诊断、治疗和科研等方面有重要的临床意义.

正常生育男性及不明原因男性不育症患者精子膜非基因型孕酮受体的研究

精子膜功能试剂盒的临床应用对比研究

目的:研究精子膜功能试剂盒的临床应用价值. 方法:使用该试剂盒与精子尾部低渗膨胀试验和伊红Y水试验对33例正常生育男性和65例不育症患者进行比较观察. 结果:该试剂盒与精子尾部低渗膨胀试验和伊红Y水试验检测结果均呈显著的相关性,三种方法精子膨胀率生育组分别为(66.55±4.87)%, (65.82±4.68)%, (68.69±5.59)%;不育组分别为(45.74±13.87)%, (46.88±13.66)%, (49.38±12.62)%. 结论:精子膜功能试剂盒快速简便、结果准确,可代替精子尾部低渗膨胀试验和伊红Y水试验检测精子膜功能并在临床推广应用.

一氧化氮对精子膜功能完整性的影响

目的:研究一氧化氮(NO)对人精子膜功能完整性的影响.方法:采用镀铜镉还原荧光法检测NO代谢产物硝酸盐(NO-3);伊红Y水试验检测精子膜功能完整性.用考马斯亮蓝(CBB)G250染色法检测顶体完整率,用NO供体硝普钠(SNP)与精子共同体外作用后涂片染色,在显微镜下分析顶体反应率.结果:生育组精液NO含量(40.8±1.5)nmol·L-1,精子膜功能完整率:B-E型和为(64±4)%,精子头部未着色(73±10)%和精子顶体完整率(91±6)%,与不育组(78.5±1.6)nmol·L-1,(44±11)%、(59±16)%和(71±10)%呈非常显著性差异(P＜0.01).NO对精子顶体反应率在低浓度为(80±4)%,中浓度为(76±3)%,高浓度为(25±4)%.结论:NO对精子膜功能具有两重性,在低浓度时有保护作用,而在高浓度时对精子膜有毒害损伤作用.其机制可能是低浓度NO与活性氧迅速结合,减少脂质过氧化反应,保护了精子膜的损伤,高浓度NO与活性氧结合后,过量的NO作用于精子膜的不饱和脂肪酸,增加了精子膜脂质过氧化反应而损害精子膜功能.

人精子膜甘露糖结合蛋白的研究

我们运用Percoll密度梯度离心技术从正常捐精者的精液中分离出成熟精子并使其获能,经含1%穿通(Triton)X-114 Tris缓冲液溶解,超声粉碎及离心分离后获得人精子可溶性蛋白悬液.随后运用蛋白质亲和层析及SDS-PAGE电泳技术分离人精子可溶性蛋白质,经银染后发现:用山羊抗人巨噬细胞甘露糖受体(anti-macrophage mannose receptor, AMMR)IgG包被的Affi-Prep Hz support珠能结合人精子中一种分子量为29 KD的蛋白质,而对照组为正常山羊血清(normal goat,NG)IgG包被珠,其结果却呈阴性.后运用精子膜生物素标记及蔗糖密度梯度离心技术进一步标记分离人精子膜可溶性蛋白质,证实了这种与AMMR IgG结合的蛋白质为甘露糖结合蛋白,存在于人精子膜上.精子膜甘露糖结合蛋白可能与精卵识别的起始过程有相当密切的关系.