首页 > 文献资料
-
卵母细胞体外成熟在体外受精-胚胎移植中的应用
随着辅助生殖技术的发展,体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer, IVF-ET)已经成为治疗不孕症的常规手段,广泛应用于不孕不育症的临床治疗.但目前IVF-ET的临床妊娠率较低,国外报道为28%[1],国内报道为43.3%[2].
-
人类未成熟卵母细胞体外成熟技术的研究进展
随着辅助生殖技术的发展,人类未成熟卵母细胞体外成熟(in vitro maturation,IVM)技术成为治疗不孕症的新途径,具有广阔的应用前景,是目前生殖医学领域的研究热点.本文就近年来IVM技术的研究进展综述如下.
-
促性腺激素在促排卵周期未成熟卵母细胞体外培养中的应用
目的：评价卵泡刺激素和人绒毛膜促性腺激素在促排卵周期未成熟卵母细胞体外培养过程中的应用价值。方法收集控制性超促排卵周期行单精子显微注射（ICSI）过程中得到的未成熟卵母细胞（MⅠ期和 GV 期），随机分为加促性腺激素培养组和不加促性腺激素培养组，培养24～28 h 后成熟卵母细胞进行 ICSI 授精，并观察胚胎发育情况，记录成熟率、受精率、卵裂率和优胚率。结果对于 MⅠ期卵母细胞，是否使用促性腺激素不影响其24 h成熟率、受精率、分裂率和优胚率（P ＞0．05）。对于 GV 期卵母细胞，培养液中加入促性腺激素能提高优质胚胎率（31．3％ vs 4．2％，P ＜0．05），但两组的成熟率、受精率和卵裂率差异无统计学意义（P ＞0．05）。结论控制性超促排卵中获得的未成熟卵母细胞进一步体外培养，无论是否添加促性腺激素都可自然成熟，在 GV 期卵母细胞的体外培养过程加入促性腺激素可获得更高的优胚率。
-
未成熟卵母细胞体外成熟培养技术研究进展
1935年,Pincus和Enzmanz[1]观察到兔的未成熟卵母细胞在体外培养条件下可以自发完成卵母细胞的成熟过程,自此在生殖领域引入了一个新的概念即卵母细胞体外成熟(in vitro maturation,IVM).自1991年Cha[2]等报道IVM技术取得第1例妊娠以来,IVM技术已应用于治疗多囊卵巢综合征(PCOS)的不孕,预防卵巢过度刺激综合征(OHSS),并与体外授精-胚胎移植技术(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF -ET)结合治疗患有严重遗传病或者因病切除卵巢的患者.大量哺乳类及人类卵母细胞体外成熟的研究表明,卵母细胞体外发育潜能明显低于体内成熟,临床妊娠率低(20%～35%).目前我们对卵母细胞成熟和获得发育潜能方面的分子机理及生理生化过程了解尚不深入,这提示IVM技术还有待进一步的探索研究.
-
核抑制剂(Roscovitine)对促排周期人未成熟卵母细胞体外成熟安全性的初步研究
目的 观察核抑制剂(Roscovitine)对人未成熟卵母细胞体外成熟(in vitro maturation,IVM)安全性的影响.方法 获取促排周期的GV期未成熟卵随机分为两组,实验组(经二步法):未成熟卵母细胞先用含有200 vmol/LRoseovitine的培养液培养6 h,然后转入IVM成熟培养液培养24～36 h;对照组:直接用IVM成熟培养液培养24~36h.观察两组卵母细胞成熟情况并应用激光扫描共聚焦显微镜观察培养成熟后MⅡ期卵母细胞纺锤体和染色体的形态.结果 实验组共获未成熟卵母细胞61个,经体外成熟培养后50个卵成熟,其中39个卵可观察到纺锤体与染色体,纺锤体的形态异常者为15个,染色体异常者11个;对照组共获未成熟卵母细胞60个,经体外成熟培养后43个卵成熟,其中32个卵可观察到染色体与纺锤体,纺锤体形态异常者14个,染色体异常者11个.结论 Roscovitine能可逆性抑制体外培养的人卵母细胞的核成熟,但未对纺锤体及染色体形态产生不良影响.
-
一种简易的促排卵周期挽救性卵子体外成熟培养技术
[目的]探讨人类成熟卵丘细胞在未成熟卵母细胞体外成熟培养中的作用,并建立一种简易的实施技术.[方法]在控制性促排卵周期有未成熟卵母细胞时,将同周期成熟卵丘复合体切出部分卵丘细胞,用1 mL注射器抽打分散细胞,贴壁培养.113个治疗周期中,298枚生发泡期卵母细胞经3种不同培养液(A、B、C)体外成熟培养(同一病人的生发泡期卵被随机分到某同一组中):第1组28个周期中73枚(A液):基础培养液+卵泡液;第2组40个周期中115枚(B液):A液+分散贴壁的卵丘细胞;第3组45个周期中110枚(C液):A液+分散贴壁的卵丘细胞+促卵泡生成激素+表皮生长因子.观察其成熟率、受精率及可用胚胎获得率等.[结果]24 h成熟率:组间比较有显著性差异(A:45.2%,B:61.7%,C:78.2%.P＜0.05);25～48 h无显著意义.成熟卵的正常受精率在59%～67%之间,组间比较无显著差异;与第1组(54.5%,11.0%)相比,第2组(83.3%,25.2%)、第3组(90.7%,37.3%)的卵裂率和挽救率均有显著性差异(P＜0.05),可用胚胎获得率组间比较依次呈现上升趋势(66.7%,82.9%,83.7%).[结论]来自控制性促排卵周期的成熟卵丘细胞经简易吹打分散后贴壁培养,可能能协同卵泡液中或外加的生长因子,促进未成熟卵母细胞的体外成熟,而本研究技术简易有效,可用于挽救促排卵周期的未成熟卵.
-
人类不成熟卵体外培养的应用
1935年Pincus和Enzmann在家兔的实验中发现,若将不成熟卵母细胞从卵泡中释放出来,它在体外适当培养基中可发育成熟.这一现象使人们开始联想到从体内抽取的不成熟卵母细胞可在体外培养成熟,并可用来挽救发育中即将退化的卵母细胞,同时可能应用于临床提供卵子用于体外受精.人不成熟卵细胞的体外成熟(in vitro maturation, IVM),由Cha[1]首先报道成功从手术穿刺卵巢获得不同成熟阶段的未成熟卵母细胞,在体外培养到成熟卵母细胞而进行体外受精和胚胎移植.随后Trounson等[2]报道在阴道B超引导下穿刺2～10 mm直径的卵泡,未接受促激素刺激的多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵巢获得不成熟卵进行体外培养并获得成功妊娠.
-
体外成熟培养-胚胎移植技术治疗多囊卵巢综合征11例临床分析
我中心对11例多囊卵巢综合征(polyeystic ovary syndrome,PCOS)患者施行体外成熟培养-胚胎移植技术(in vitro maturation-embryo transfer,IVM-ET),初步探讨IVM的治疗价值和影响凶素,现报告如下.
-
卵母细胞体外成熟技术研究进展
卵母细胞体外成熟技术作为辅助生殖技术重要组成部分,不但能提高卵母细胞利用效率,减少卵巢过度刺激综合征的发生,也为赠卵及女性生育力保存提供了更多选择.近年来,随着生殖医学的快速发展,卵母细胞体外成熟技术研究和临床应用得到了快速发展,但仍面临成熟率低、受精率低、优质胚胎率低及妊娠率低等问题.本文就卵母细胞体外成熟技术的研究进展和发展前景作一简要综述.
-
卵母细胞体外成熟应用于42个不孕症周期的分析
本研究从患者卵巢中获取未成熟卵母细胞通过体外培养成熟后行单精子卵胞浆内注射受精,培养至卵裂期,移植后获临床妊娠9例,其中新鲜周期分娩-健康女婴,系贵州省首例通过卵母细胞体外成熟技术成功受孕并分娩的婴儿.1 材料与方法1.1一般资料选择2009年3月至2010年12月因多囊卵巢综合征或拟行常规IVF-ET促排卵过程中卵泡数目多、为防止出现卵巢过度刺激综合征改行卵母细胞体外培养的35例、42个周期不孕患者均列人本研究.患者年龄26-39岁,平均年龄30.31岁.
-
卵母细胞体外培养在多囊卵巢综合征中的应用
未成熟卵母细胞体外成熟培养为解决多囊卵巢综合征不孕患者生殖、生育问题提供新的治疗途径.取卵前使用小剂量的卵泡刺激素或人绒毛膜促性腺激素可提高临床妊娠率;卵子大小、培养时间以及培养系统在未成熟卵母细胞体外成熟培养过程中起着重要作用.
-
低氧培养对未成熟卵体外成熟及胚胎发育潜能的影响
目的:研究辅助生殖技术超促排卵治疗中获得的未成熟卵在低氧培养体系中的发育潜能.方法:卵胞质内单精子显微注射(ICSI)或体外受精-胚胎移植中(IVF-ET)短时受精中挑选出的GV(germinal vesicle)期卵母细胞80枚,MⅠ(metaphase Ⅰ)期卵母细胞124枚,随机分为实验组和对照组,实验组置于低氧分压(体积分数5％)的三气培养箱中、对照组置于高氧分压(体积分数20％)常规培养箱中进行体外成熟培养(IVM)及随后的囊胚和胚胎培养.IVM后成熟的卵母细胞进行ICSI受精,观察受精率、卵裂率及囊胚形成率.结果:实验组GV期未成熟卵体外培养至MⅡ卵的成熟率、双原核(2PN)率、卵裂率、囊胚形成率及优质囊胚率与对照组无统计学差异(P＞0.05).但实验组MⅠ期卵培养至MⅡ卵的成熟率[96.8％(60/62)]、2PN率[80％(48/60)]、囊胚形成率[43.8％(21/48)]及优质囊胚率[20.8％(10/48)]均高于对照组[分别为58.1％(36/62),52.8％(19/36),11.8％(2/17)和0.0％(0/17)],差异有统计学意义(P＜0.05),而2种培养体系的卵裂率无统计学差异.结论:超促排卵中获得的未成熟卵,特别是MⅠ期裸卵在低氧培养体系中进行体外成熟及后续的胚胎培养,有利于获得优质囊胚.
关键词： 体外成熟培养(IVM) 未成熟卵母细胞 氧分压 -
PCOS患者未成熟卵体外成熟培养后妊娠结局分析
目的:探讨PCOS患者未成熟卵母细胞体外成熟(in vitro maturation,IVM)治疗的有效性和安全性.方法:分析比较PCOS合并不孕症自愿要求行IVM或IVF治疗的患者临床结局.结果:IVF组的平均优质胚胎数明显高于IVM组(P＜0.05),两者的临床妊娠率(39.22％ vs 40.32％)和着床率(24.37％ vs 23.89％)无差异(P＞0.05).IVM组的妊娠丢失率为38.0％,高于IVF患者(21.1％,P＜0.05),出生婴儿(单胎)的平均体质量组间无统计学差异(P＞0.05).结论:对于PCOS患者进行IVM治疗可以获得与IVF周期相类似的临床妊娠率和着床率;但是IVM治疗后流产率明显增加.
关键词： 多囊卵巢综合征(PCOS) 未成熟卵母细胞 体外成熟(IVM) 流产 -
人类未成熟卵母细胞玻璃化冷冻研究
目的:探讨玻璃化冷冻未成熟卵母细胞的有效性.方法:根据有无颗粒细胞将实施玻璃化冷冻的GV期卵母细胞分为含颗粒细胞(非裸卵)组和不含颗粒细胞(裸卵)组;将部分GV期卵母细胞体外培养至M Ⅱ期卵母细胞实施玻璃化冷冻,比较非冷冻IVM组与M Ⅱ卵玻璃化冷冻组间、裸卵组与非裸卵组间的存活率、成熟率、受精率、卵裂率及囊胚形成率.结果:非裸卵组的成熟率大于裸卵组(P＜0.05),而存活率、受精率、2-细胞形成率、＞2-细胞形成率之间均无统计学差异(P＞0.05).另外,非冷冻IVM组与GV玻化组间成熟率、受精率、卵裂率均存在显著性差异(P＜0.05):非冷冻IVM组与M Ⅱ期卵玻化组间成熟率、受精率、卵裂率间均存在统计学差异(P＜0.05);GV玻化组与M Ⅱ玻化组间存活率、成熟率、受精率、卵裂率间均无统计学差异(P＞0.05).结论:玻璃化冷冻未成熟卵母细胞需要保留颗粒细胞,同时初步构建了人GV期卵的玻璃化冷冻联合IVM技术的雏形.
-
冻融体外受精-胚胎移植周期人未成熟卵母细胞的体外成熟及纺锤体结局
目的:探讨冻融的不同状态人未成熟卵母细胞体外成熟后纺锤体状态与受精率的关系.方法:随机收集本中心108个体外受精-胚胎移植周期(IVF)中183枚不同状态废气的成熟卵母细胞,分为:卵丘-卵母细胞复合物组,48枚;裸卵组,135枚,其中第一次减数分裂中期(MI)65枚,生发泡期(GV)70枚.玻璃化冷冻保存,经解冻、体外培养成熟后,应用Polscope成像系统观察纺锤体,然后行卵胞浆内单精子显微注射受精,记录各指标情况.结果:①卵丘-卵母细胞复合物组与裸卵组的存活率、体外成熟率、纺锤体出现率、受精率比较,均无统计学差异(P＞0.05);②GV组的存活率显著高于MI组(P＜0.05),而前者的体外成熟率显著低于后者(P＜0.05);③各组体外成熟后有纺锤体出现的卵母细胞受精率均显著高于无纺锤体组(P＜0.05,P＜0.01).结论:冻融IVF周期不同状态的人未成熟卵母细胞都有一定发育潜能;有纺锤体出现的冻融人未成熟卵母细胞质量较高.
关键词： 玻璃化冷冻 未成熟卵母细胞 体外培养 Polscope成像系统 纺锤体 -
体外成熟卵母细胞体外受精方式的探讨
目的:探讨经体外成熟卵母细胞是否可采用常规IVF方式授精.方法:自愿捐献的常规废弃的未成熟卵母细胞经体外成熟后的卵母细胞206个,随机分为3组:A组(n=69),授精时尽可能保存卵丘细胞并行常规IVF授精；B组(n=68),授精前将卵丘细胞完全拆除后行常规IVF授精；C组(n=69),将卵丘细胞完全拆除后行ICSI授精.常规IVF授精的精/卵个数比约为50 000:1.比较3组卵子的受精率、卵裂率和优质胚胎率.结果:A组与C组在受精率(82.61％vs 85.51％)、卵裂率(94.74％ vs 94.92％)、优质胚胎率(42.59％ vs 46.43％)3个方面均无统计学差异(P＞0.05),A组、C组的受精率、卵裂率均显著高于B组(14.71％,50.00％)(P＜0.01),B组没有优质胚胎出现.结论:体外成熟后的卵母细胞在卵丘细胞较完整时可进行常规IVF方式授精.
关键词： 未成熟卵母细胞 体外成熟培养(IVM) 体外授精(ⅣF) 卵丘细胞 -
人类不同时期未成熟卵母细胞玻璃化冷冻后发育潜能的比较
目的:探索未成熟卵子的佳冷冻时期. 方法:收集卵胞质内单精子显微注射-胚胎移植(ICSI-ET)周期中未成熟的卵母细胞,按其成熟度分为生发泡期(GV组)卵子179枚和第一次减数分裂中期(MⅠ组)卵子323枚,所有卵子均经玻璃化冷冻,解冻后行体外成熟(IVM)培养,ICSI受精,观察比较GV组和MⅠ组解冻后存活、体外成熟、受精及胚胎发育情况.结果:GV组复苏存活率显著高于MⅠ组(83.24％ vs 75.54％,P=0.045),MⅠ组体外成熟率、受精率、卵裂率、优质胚胎率均略均高于GV组,但无统计学差异(P＞0.05),MⅠ组可利用胚胎率显著高于GV组(78.67％ vs 60.53％,P=0.041).结论:超促排卵周期中未成熟卵母细胞先玻璃化冷冻保存,再行体外培养是可行的.GV期卵母细胞复苏存活率高于MⅠ期卵母细胞,但MⅠ期卵母细胞冻融后发育潜能优于GV组卵母细胞.
