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抗突变型瓜氨酸波形蛋白与类风湿关节炎活动性相关分析
类风湿关节炎(RA )是一种累及多关节、甚至内脏器官的一种慢性自身免疫病,其发病率为0.5%~1%[1]。在过去对R A的研究中,临床表现和类风湿因子(RF )始终是诊断 RA必不可少的条件,但随着对RA和RF研究的深入,发现RF虽然敏感性高,但特异性差[2],且相当部分 RA 临床表现不典型,给广大风湿科医师诊断带来了不小麻烦。因此,2009年美国风湿病学会(ACR )联合欧洲抗风湿病联盟(EULAR)不仅提出了RA新的诊断标准,并要求重视抗环瓜氨酸肽蛋白抗体(A C‐PA )在RA 诊断中的作用[3]。作为 ACPA 的典型代表,抗突变型瓜氨酸波形蛋白(M C V )和抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体在RA诊断中(尤其早期RA )特异性相当[4],但前者敏感性更高,与 RF相当。可能原因是 CCP 为人工合成,其相对分子质量比MCV小20倍,仅有1~2个抗原决定簇,而MCV具有45个可被瓜氨酸化的潜在抗原凹位。不仅如此,已有研究显示RF、抗CCP抗体与 RA 病情活动性指标DAS28[5][根据触痛关节数、肿胀关节数、红细胞沉降率(ES R )、患者自我症状等评分评价RA活动性的有效指标]具有一定相关性[6],但很少有研究显示MCV与RA活跃性的关系。因此本研究旨在通过 M C V 与28个关节疾病活动指数(DAS28)关系的研究,探讨MCV 在 RA活跃性中的作用,为广大专科医师判断RA活跃性方面提供一条可行的途径。
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游离前列腺特异性抗原在诊断前列腺疾病中的价值
血清游离前列腺特异性抗原(F-PSA)是区分良性与恶性前列腺疾病更敏感、更准确的指标,是现在人们研究的新热点.PSA是前列腺上皮细胞分泌的具有类胰凝乳蛋白酶活性的血清蛋白酶,由237个氨基酸组成的单链糖蛋白,相对分子为34000,基因定位在19号染色体,大量存在于前列腺上皮组织和精液中.因为只有前列腺组织能够合成这种蛋白,故有较高的组织特异性.PSA在血清中以3种不同分子形式存在:(1)以自由分子形式存在的游离PSA(F-PSA),(2)与α1抗糜蛋白酶结合形成复合物的PSA(PSA-ACT),(3)与α2巨球蛋白酶形成复合物的PSA(PSA-AMG).由于PSA-AMG不具有免疫活性,因此不能被现有的化学试剂检测到,T-PSA(血清前列腺特异性抗原)是F-PSA、PSA-ACT的总和.在正常人体内PSA主要以结合形式存在,FPSA约占TPSA的20%~30%.
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基因释放剂在结核分支杆菌热休克蛋白70 DNA模板制备中的应用
聚合酶链反应(PCR)是分子生物学研究中广泛使用的技术,但其影响因素较多,常导致基因扩增效率低下。我们分别用试剂盒提取法和基因释放剂(genereleaser)提取法进行模板制备,得到了不同质量的基因模板,PCR的扩增效率也不同,现报告如下: 材料与方法结核分支杆菌H37RV,由中国生物制品检定所提供;结核分支杆菌热休克蛋白(hsp 70)引物由上海生工公司合成;DNA提取试剂盒购自上海华舜公司;基因释放剂为美国Bioventures公司产品,分别按照试剂盒说明进行DNA提取。PCR扩增参数为:50 μl反应体系,94℃预变性3 min;93℃变性1.5 min、60℃退火2 min、72℃延伸4 min,共35个循环,后再72℃延伸10 min。PCR产物作琼脂糖凝胶电泳,溴化乙锭染色,紫外线下观察分析。 结果研究设计目的基因片段大小应为1 800 bp。采用试剂盒提取DNA制备模板,未见产物;而用基因释放剂的方法制备模板,则在相对分子质量标准1 489 bp和1 882 bp之间靠近后者处,有一清晰扩增带,为目的基因。
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气道黏蛋白唾液酸化的研究进展
一、气道黏蛋白概述气道黏蛋白是上皮细胞、黏膜下腺体细胞及肿瘤细胞产生的分泌型或膜结合型O-糖基化大分子蛋白.结构呈高度多样性,相对分子质量差异大,可高达数百到数千千道尔顿,糖链包绕在蛋白核心外面,所占比例约50%~90%.黏蛋白是气道先天性防御系统的重要组成部分,除保护、润滑外,还可介导细胞与细胞、信号分子及其他外源性物质间的相互作用[1].
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癌胚抗原CEA168~183多表位肽的免疫原性研究
本研究旨在通过免疫信息学手段预测癌胚抗原(CEA)表位,选择富含T、B细胞免疫优势表位的短肽并对其免疫原性进行分析.一、材料与方法1.材料:限制性核酸内切酶Xhol Ⅰ、BamH Ⅰ、T4连接酶、核酸相对分子质量标准DNA Marker和预染蛋白Marker购自MBI公司.6×His-Tag单克隆抗体购自Bethyl公司.BALB/C小鼠,6~8周,雄性.