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地龙2号对大鼠肝纤维化TGF-β1,MMP-13及TIMP-1 mRNA和蛋白表达的影响
目的:研究蚯蚓提取物地龙2号对实验性肝纤维化大鼠转化生长因子-βl(TGF-β1),基质金属蛋白酶-13(MMP-13)及基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-l)mRNA和蛋白表达的影响.方法:采用四氯化碳皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型.♂Wistar大鼠52只随机分成6组:正常组、阴性对照组、模型组、阳性对照组、地龙2号大剂量组和小剂量组;8 wk末,用免疫组织化学染色法及RT-PCR检测肝组织中TGF-βl,MMP-13,TIMP-l mRNA和蛋白的表达.结果:地龙2号大、小剂量组肝组织内TGF-β1及TIMPlmRNA(TGF-βl:0.68±0.16 ys 0.90±0.29,0.66±0.14vs 0.90±0.29,后者P＜0.05;TIMP-l:1.0l±0.22 vs2.48±1.18,1.2l±0.38vs2.48±1.18,P＜0.01)及蛋白表达均显著低于模型组(TGF-βl:3.14±2.67vs8.22±2.99,3.00±1.90 vs 8.22±2.99,P＜0.0l;TIMP-1:3.57±2.23 vs 7.56±3.40,3.30±2.67 vs 7.56±3.40,P＜0.01),而MMP-13 mRNA(1.69±0.75 vs 0.62±0.21,1.82±0.71 vs 0.62±0.2l,P＜0.01)及蛋白表达则明显高于模型组(7.7l±1.25vs4.67±2.45,P＜0.01,8.50±2.88vs4.67±2.45,P＜0.01).结论:地龙2号可下调TGF-βl,TIMP-lmRNA及蛋白的表达,并上调MMP-13mRNA及蛋白的表达,从而抑制或减轻肝纤维化的形成.
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蚯蚓提取物对原发性肾病综合征患者凝血系统的影响
蚯蚓作为药材在我国有悠久的历史,入药具有清热、定惊、通络、活血、平喘等作用.国内外报道从蚯蚓中可提取到具有纤溶酶样作用的纤溶成份.我们用生化的方法,对蚯蚓组织中的有效成份进行提取,进行有关纤溶、抗凝的实验研究,以期探讨蚯蚓提取物治疗原发性肾病综合征的疗效及其可能机制.
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蚯蚓提取物治疗肾实质性高血压的研究
目的:探讨蚯蚓提取物治疗肾实质性高血压的效果及其疗效的机理.方法:对合并高血压18例原发性肾小球疾病和16例终末期肾衰患者给予口服蚯蚓提取物150 mg/次,每日3次,连服14 d,每天测定血压的变化,并在治疗前后取血测定血浆ET-1的含量.结果:肾小球疾病患者血浆ET-1含量与平均动脉压成正比(P＜0.05),口服蚯蚓提取物治疗后,平均动脉压较治疗前明显降低(P＜0.01),同时血浆ET-1的含量测定值也明显降低(P＜0.001),结论:口服蚯蚓提取物具有降血压作用,其疗效机理可能与降低肾小球病患者血浆内皮素含量有关.
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改良Lowry法和Bradford法测定蚯蚓提取物中蛋白质含量的比较
目的寻找精确反映蚯蚓提取物中蛋白质含量的测定方法.方法采用改良Lowry法和考马斯亮蓝染料结合法(Bradford法)测定蚯蚓提取物蛋白质含量;再使用两法测定标准牛血清白蛋白(BSA)水溶液在碱性蛋白酶水解前与后的蛋白质含量.结果在测定蚯蚓提取物中蛋白质含量时,改良Lowry法的测定结果明显高于Bradford法.未进行酶解的BSA水溶液,两法测定的蛋白质含量相当;使用改良Lowry法,BSA水溶液酶解前与后的蛋白测定值相近;而使用Bradford法时,测定BSA水溶液酶解后蛋白质含量的测定值较酶解前出现大幅下降.结论测定多肽含量多的生物样品中蛋白质含量时,改良Lowry法更为精确.由于蚯蚓提取物中大量多肽成分的存在,故对测定其蛋白质含量时,改良Lowry法能够更加精确、真实地反映蚯蚓提取物的蛋白质含量.
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蚯蚓提取物作用的研究进展
蚯蚓，在中药中又名地龙，据《本草纲目》记载，蚯蚓具有通经活络、活血化瘀、预防治疗心脑血管疾病，在中国传统医学中，蚯蚓可用于治疗多种疾病。达尔文曾称之为地球上有价值的动物。蚯蚓提取物中的多种组分具有抗凝溶栓、抗病毒抗菌、抗肿瘤、促进损伤组织修复等作用，因此本文就蚯蚓提取物的作用作一综述。
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蚯蚓提取物对K562细胞的生长影响和促凋亡作用
目的:探讨高纯度的蚯蚓提取物对人慢性粒细胞性白血病系K562细胞的作用及机制.方法:以人K562细胞为靶细胞,采用细胞计数及台盼蓝拒染法、光镜观察、细胞凋亡荧光染色法、DNA凝胶电泳等技术,观察蚯蚓提取物对K562细胞生长的影响.结果:①10～20mg/L蚯蚓提取物可促进K562细胞的增殖;②≥50mg/L的蚯蚓提取物可通过凋亡轻度抑制细胞生长,表现为细胞呈凋亡形态学改变,DNA琼脂糖凝胶电泳出现梯形条带,细胞凋亡的荧光染色显示细胞凋亡的特征.结论:小剂量的蚯蚓提取物可明显促进K562细胞的增殖,而高剂量则可诱导凋亡,但无细胞分化的形态学表现.
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纯化的蚯蚓蛋白对多种血液系统瘤细胞系的作用
目的:探讨纯化的蚯蚓蛋白提取物(以下简称蚯蚓提取物)体外对多种血液系统瘤细胞的作用及机制.方法:以人慢性粒细胞白血病K562细胞、人骨髓瘤KM3细胞、小鼠急性淋巴细胞性白血病L6565细胞以及小鼠淋巴瘤SRS-B2细胞为靶细胞,采用细胞计数及台盼蓝拒染法、光镜观察、细胞凋亡荧光染色法、DNA凝胶电泳等技术,观察蚯蚓提取物对上述细胞生长的影响.结果:①蚯蚓提取物对K562细胞具有双向作用,小剂量可促进K562细胞的增殖,大剂量可通过凋亡轻度抑制细胞生长;②≥50mg/L的蚯蚓提取物可明显抑制L6565细胞的生长,细胞坏死和凋亡可能是其共同的作用机制;③100～250mg/L的蚯蚓提取物可通过细胞毒作用促使SRS-B2细胞死亡,此种作用呈现剂量和时间依赖;④对KM3细胞作用不明显.结论:蚯蚓提取物对不同的细胞具有不同的作用,其作用也是通过不同的机制实现的.
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蚯蚓提取物抗肿瘤作用的研究进展
蚯蚓,又名地龙,是我国传统中药材之一,已有4000余年入药历史.蚯蚓可用于高血压、出血、溃疡、烧烫伤、癫痫等疾病的治疗.近年来蚯蚓提取物的抗肿瘤作用已引起广泛重视.从鲜蚯蚓中提取的蚯蚓提取物含有多肽、蛋白质及RNA、DNA、维生素等多种活性成分.近年来,蚯蚓提取物的抗肿瘤作用引起国内外学者的重视,成为目前研究的热点,本文旨在对蚯蚓提取物的抗肿瘤作用及其机制作一综述.
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"地龙2号"抗肿瘤作用的初步观察
"地龙2号"(No.2 of earthworm's extraction, EE2)为蚯蚓提取物,采用特殊生化技术提取而成.我们以小鼠种植性肿瘤肉瘤180(S180)和艾氏腹水瘤(EAC)为研究对象,初步观察了EE2的抗肿瘤作用.
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蚯蚓活性成分的抗肿瘤作用
从蚯蚓中提取的各种活性成分主要具有纤溶酶、抗肿瘤、抗菌作用.文章主要综述了蚯蚓活性成分的抗肿瘤作用及其各种机制的研究进展.
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蚯蚓提取物中蛋白质含量测定方法的研究
目的 寻找能够精确反映蚯蚓提取物中蛋白质含量的测定方法.方法 采用改良Lowry法和考马斯亮蓝染料结合法(Bradford法)测定蚯蚓提取物蛋白质含量;分别使用2法测定标准牛血清白蛋白(BSA)水溶液在碱性蛋白酶水解前后的蛋白质含量.结果 改良Lowry法的测定结果明显高于Bradford法.BSA水溶液酶解前,2法测定的蛋白质含量相当;使用改良Lowry法,BSA水溶液酶解前后的蛋白测定值相近;而使用Bradford法测定BSA水溶液蛋白质含量时,酶解后的测定值较酶解前出现大幅下降.结论 在测定多肽含量多的供试品中蛋白质含量时,改良Lowry法测定更为精确.蚯蚓提取物中存在大量的多肽成分,所以对其进行蛋白质含量测定时,改良Lowry法能够更加精确、真实地反映蚯蚓提取物的蛋白质含量.
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蚯蚓提取物体内和体外抗肿瘤作用的研究
目的探讨蚯蚓提取物对Eca-109、Hella、K562细胞的生长抑制作用及机制.方法应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色分析,流式细胞仪测定细胞凋亡、细胞周期及观察小鼠体内肿瘤体积和重量.结果蚯蚓提取物Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ中只有成分Ⅱ的高、中剂量(900,450 mg/L)对Eca-109、Hella、K562细胞有明显的抑制作用.体内300,600mg/L灌胃小鼠对肿瘤有明显的抑制作用.Hella细胞检测有凋亡细胞出现,细胞周期检测,细胞被阻滞在GO-G1期,DNA合成受阻故使肿瘤细胞受抑制,肿瘤体积缩小.结论蚯蚓提取物Ⅱ对肿瘤细胞增殖有明显的抑制作用,主要通过细胞凋亡和肿瘤细胞受阻于GO-G1期,使DNA合成减少.
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蚯蚓提取物对微循环障碍形成的保护作用
目的研究蚯蚓提取物对金黄地鼠血液微循环障碍形成的保护作用及其机理.方法以高分子右旋糖酐所致血液微循环障碍模型为基础,采用直观图像图示法和体外红细胞聚集试验,研究蚯蚓提取物对金黄地鼠颊囊血液微循环障碍的改善及体外红细胞聚集情况.结果以20、100、200 mg/kg剂量经口给予蚯蚓提取物3 d,可明显减少体内微血管中血细胞聚集团块和加快微血流速度(P＜0.01),各观察时间点的红细胞聚集均显著低于阴性对照组(P＜0.01);体外试验表明,在中、低切变率时,体外红细胞聚集状态得到明显改善,红细胞主要呈串珠及缗钱状,与阴性对照组相比有显著性统计学差异(P＜0.05).结论蚯蚓提取物对微循环障碍形成具有一定的保护作用,是一种微血流改善剂.
