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人类抗凋亡基因survivin的克隆及其原核表达
目的:克隆人类抗凋亡基因survivin(SVV),实现SVV基因在大肠杆菌中的高效表达.方法:提取胃癌细胞系SGC-7901总RNA,RT-PCR扩增人SVV全长cDNA,克隆于载体pGEM-T,酶切、测序鉴定.将人类SVV基因全长cDNA克隆入原核表达载体pRSET,实现该基因在大肠杆菌BL21(DE3)中的高效表达.结果:得到人SVV基因全长cDNA,经测序与SVV基因的已知序列相同,原核表达所获融合蛋白经SDS-PAGE电泳与已知SVV基因的蛋白质表达产物大小相近.结论:克隆出人SVV基因的全长cDNA,并克隆入原核表达载体pRSET,并在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达.
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干细胞技术带来"福音"
近,美国<科学>杂志报道,韩国和美国科学家首次成功利用克隆人类胚胎培育出了人类干细胞.当前,干细胞生物学和干细胞生物工程的飞速进展与重大突破正日益引起人们的高度关注,已经成为继人类基因组测序之后具活力、有影响和具应用前景的生命前沿学科.
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2001 10大悬念
1克隆人真要横空出世?支持也好,反对也罢,克隆人正款款向人类走来.去年克隆人还只限于各种传言,新世纪开始没多久,意美两国权威科学家却相继宣布携手共同展开克隆人的努力,英国政府也解除了克隆人类初级胚胎的禁令,从而打开了一个神秘的禁区.
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NHE-1基因与心血管疾病
胞膜离子交换蛋白Na+-H+交换泵(Na+-H+ exchanger,NHE)是广泛存在哺乳动物细胞的一种重要跨膜蛋白,是细胞膜上的一种糖蛋白,通常以胞内一个Na+,胞外一个H+进行电中性的跨膜交换.NHE在体内参与细胞内pH (intracellur PH,pHi)调节、细胞容量的调节、离子转运过程、细胞周期的调节以及细胞增殖过程离子转运等[1-4].自1989年Sardet实验室成功克隆人类NHE-1cDNA以来[5],到目前为止,已克隆了八亚型NHE的cDNA,分别为NHE 1~8[6-9],它们在结构上相似,功能上相关,共同构成了脊椎动物胞膜离子转运泵的一个基因家族.在肿瘤、高血压、糖尿病、先天性心脏病、冠心病等疾病中,已发现NHE-1亚型的mRNA表达水平显著增高.因此,研究它们的活性调节机制,将可能为这些疾病的诊治提供新的手段.现将NHE-1的分子结构、功能、活性调节及其与心血管疾病的关系作一综述.
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促红细胞生长素在围手术期的临床应用进展
促红细胞生长素(EPO)是一种刺激骨髓造血的糖蛋白类激素,它主要由肾脏皮质-髓质交界处的球旁细胞合成,是促进红系祖细胞增生、分化和成熟的内分泌激素,并对机体供氧状况发挥重要的调控作用.自1983年成功地克隆人类EPO基因后,其产物重组人促红细胞生长素(r-hEPO)被成功用于治疗肾性贫血及肿瘤等疾病伴发的贫血.