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细菌鞭毛染色方法及其应用
细菌鞭毛纤细,直径只有10~30 nm,远低于光学显微镜的分辨率,只有采用特殊的染色方法才能在普通光学显微镜下观察其形态.由于细菌鞭毛染色在细菌鉴定中起着很重要的作用,故以下将对其方法及其应用进展作一论述.
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国人肺静脉组织学研究
目的研究肺静脉的组织学特性,以探讨其参与肺静脉触发性阵发性房颤的发生与维持的组织学基础.方法12例非心脏原因死亡患者[男7例,女5例,死亡年龄(46±17)岁]的心脏及肺组织(由大连医科大学中日临床病理中心提供的尸检标本)放入10%甲醛溶液中固定.1周后进行标本的取材,将标本置于10%甲醛溶液中固定24h,然后进行HE染色、Masson染色和α-Smooth muscle actin的免疫组化染色,光学显微镜下观察.
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免疫球蛋白基因SNC66和SNC73在正常肠粘膜和大肠癌组织中表达的研究
SNC66基因和SNC73基因是采用减式杂交技术,从正常人大肠粘膜cDNA文库中筛选得到的两个大肠癌负相关基因[1]。为进一步明确免疫球蛋白基因SNC66和SNC73在正常大肠粘膜和大肠癌组织中的表达情况,了解它们的生物特性[2,3],我们采用cRNA/mRNA原位杂交技术,对这2个基因在大肠癌组织及同一患者的正常粘膜中的表达情况作了配对研究,观察它们在正常粘膜与肿瘤之间,以及粘膜上皮与间质或淋巴组织之间的表达情况,以明确此两基因与大肠癌的相关性。 1.材料与方法:浙江大学医学院附属第二医院手术切除的大肠癌标本及同一患者相应的正常大肠粘膜组织共收集37例。其中男性26例,女性11例,中位年龄57岁。其中29例临床病理资料完整。探针的制备及原位杂交:用SNC66基因和SNC73基因的在IgA1同源区的部分序列,构建出重组质粒pGEM7SNC66和pGEM7SNC73,各合成出地高辛标记的一对cRNA探针,其中之一为与目标mRNA互补的有效的反义探针,作为实验探针;另一为与目标mRNA同序的正义探针,作对照探针。配对材料进行原位杂交[4],在光学显微镜下观察,紫蓝色为阳性信号。统计学处理采用χ2检验。
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激光共聚焦显微镜观察眼部蠕形螨
检查睑缘炎患者是否感染蠕形螨,通常的方法是拔取睫毛,在光学显微镜下观察并计数(精粹图片1)。该方法的有创性、取样造成的疼痛感以及无法将取样部位蠕形螨全部带出等,往往限制了医师对感染整体情况的把握。激光共聚焦显微镜可直接观察蠕形螨感染部位以及睑板腺处的蠕形螨感染情况,清晰显示蠕形螨的数量、形态(精粹图片2),弥补了传统检查方法的欠缺,具有无创、便捷、全面等特点。
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5499例骨髓细胞形态学检查分析
自从1927年Arinkin将骨髓穿刺术应用于临床以来,在光学显微镜下观察血液细胞形态学变化,对开展血液系统生理学和病理学的研究,对血液系统疾病诊断、鉴别诊断,具有非常重要的作用.本文总结分析我院1994~2003年10年间骨髓检查5499例,结果如下.
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肝脏活检标本纤维化评估方法的研究进展
肝纤维化(hepatic fibrosis)是肝脏对抗各种慢性损伤的一种修复反应,其实质是肝组织中细胞外基质(extracellular matrix,ECM)过度沉积。长期慢性刺激使纤维化持续发展,终可发展至肝硬化甚至肝癌,大大增加患者死亡率。病理诊断目前仍然是诊断肝纤维化的金标准,对肝纤维化进行确切地评估不仅有助于掌握疾病严重程度,而且对判断疾病预后、评价治疗效果都有不可替代的作用。目前临床常用的肝纤维化分期的评估系统各具优缺点,随着非线性光学显微技术发展,新的肝纤维化定量分析方法逐渐成熟。本篇文章概述了肝脏活检标本纤维化评估方法研究的新进展。
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边缘系统相关膜蛋白mRNA在纹状体边缘区的转录分析
纹状体边缘区(Marginal djvision,MrD)由舒斯云教授于1988年首先发现并进行了大量研究,发现该区域与学习、记忆有关,并提出其可能为边缘系统的一部分.为证实这一假设,本研究在大鼠脑组织切片中对边缘系统特定标记分子-边缘系统相关膜蛋白(Limbic system-associated mcmbrane protein.LAMP)mRNA在该区域的转录进行了测定.实验取雄性SD大鼠10只,10%水合氯醛腹腔麻醉后,剖开胸腔,切开右心房,将穿刺针通过左心室进入升主动脉,4℃生理盐水冲洗后,4%多聚甲醛灌注固定,30%蔗糖中沉底后,应用冰冻切片机-20℃下切片,厚度为30μm.采用核酸分子原位杂交技术对LAMP的mRNA转录进行测定.原位杂交所用探针由含53个碱基的寡核苷酸构成,其序列取自大鼠LAMP的cDNA第918至970个核苷酸,由中科院上海生化所DNA合成室合成,应用地高辛标记,杂交完毕后,应用NBT显色,光学显微镜下观察.
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珠海地区1201例骨髓细胞学检查资料分析
自1927年Arin Kin将骨髓穿刺应用于临床以来,在光学显微镜下观察血细胞形态的变化,对于开展血液系统生理学和病理学的研究有着重要的意义[1 ] .并成为临床诊断中一个重要的常规性检验项目.尽管血液系统疾病诊断的新方法与新技术日新月异,但这一基础的方法至今在诊断和研究血液系统疾病中有着不可替代的作用.本文对我院22年来1201例骨髓细胞学检查资料进行分析、讨论.
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丫啶橙荧光染色结膜印迹细胞检查法
眼部印迹细胞检查是一种采用醋酸纤维素滤纸或生物孔膜获取结、角膜表层细胞标本的一种检查法[1].在判断结膜细胞功能状态方面,目前多采用醋酸纤维素滤纸,采取不同部位的结膜细胞固定后,经过碘酸雪夫氏(PAS)染色及苏木素染色,光学显微镜下观察.该方法所用试剂品种较多,染色步骤繁多,染色用时较长,一张片子大约需1 h左右,才能出结果.我们在查阅大量文献的基础上,根据既往细胞染色的经验,采用一种透明纤维素滤膜取材,建立了丫啶橙荧光染色法进行结膜印迹细胞学检查,取得了满意的效果,现报告如下.