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白膜层细胞来源的富血小板血浆的制备及其对间充质干细胞增殖特性的影响
目的:从成分血分离过程中废弃的白膜层细胞中分离富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP),为实验研究和临床应用提供大量获得PRP的途径.方法:比较白膜层细胞来源的PRP与全血来源的PRP的制备步骤,电镜观察不同PRP的形态特点,采用血细胞分析仪比较其成分构成,流式细胞术检测PRP中血小板特异标记CD41a和CD42b的表达情况,CCK-8法检测PRP对间充质干细胞增殖的影响.结果:白膜层细胞来源的PRP与全血来源的PRP具有相似的形态,接近的成份构成,表达较高水平的CD41a和CD42b;更为重要的是白膜层细胞来源的PRP能够显著促进间充质干细胞增殖.结论:白膜层细胞可以用来制备PRP,其具有和全血来源PRP相似的生物学特性,且收获量更多.本研究探索了一种可以大量获取PRP的可能途径,这为PRP相关的实验研究提供有利的支持.
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汇集白膜层血小板的制备及洗涤工艺探索
目前,临床应用的浓缩血小板(PCs)主要有3种制备方法,即富含血小板血浆(PRP-PCs)法、白膜(BC-PCs)法和单采血小板.我国临床应用的血小板以单采血小板为主,手工采集全血制备的PCs多是采用PRP-PCs法,由于1例患者需要输注数袋手工PCs才能达到治疗效果,所以临床应用的很少,造成了手工采集全血中血小板资源的巨大浪费.而国外特别是欧美国家已经认识到汇集BC-PCs的诸多优点,使汇集BC-PCs在临床应用占的比例越来越大.但是,无论哪一种方法制备的PCs,都有可能使对血浆蛋白或血浆中抗体过敏的患者发生过敏反应或非溶血性发热反应.为避免血液资源的浪费,纠正和预防因输注血小板引起过敏反应或非溶血性发热反应,笔者探索了汇集BC-PCs的制备、洗涤工艺,报告如下.
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洗涤汇集白膜层血小板应用研究
浓缩血小板(PCs)在临床治疗中发挥着重要作用.目前,我国临床应用的主要是以献血者血浆做悬浮介质的单采血小板.由于手工采集的全血中血小板的绝对含量较少,1例患者需要输注数袋手工PCs才能达到治疗效果,所以手工PC在临床应用的很少,造成了手工采集全血中血小板资源的巨大浪费.
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血小板保养液洗涤血小板的低渗休克反应试验
血小板的低渗休克反应(hypotonic shock response,HSR)试验是检测血小板在低渗环境中发生肿胀而后又可恢复其原有形状的能力.HSR是反映血小板功能的重要指标[1,2].上世纪80年代末期,欧洲国家研制了多种血小板添加液(PAS),如表1所示,PAS-Ⅱ、PAS-Ⅲ、PAS-ⅢM(改进的PAS-Ⅲ)和Composol都是在PlasmaLyte A处方的基础上不断完善的结果,PAS-Ⅱ是第一个被欧洲血站系统广泛应用的PAS,据文献报道[3-7]具有镁离子、钾离子的PAS-ⅢM能够使血小板的特性保持的更好.因HSR是反映血小板功能的重要指标但不是唯一指标,因此本文也用其他方法测定了血小板的形态、质量、功能和代谢产物.笔者对用汇集白膜层(BC)方法制备的汇集血小板(汇集BC-PC),用PAS-ⅢM洗涤后,在22℃平行震荡仪中延时保存72 h期间的不同时段进行了HSR恢复率检测,以评估用PAS-ⅢM洗涤汇集BC-PC在保存期内的功能和质量状况.
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白膜层过夜贮存制备的浓缩血小板保存期间的活化情况
白膜层过夜贮存国内外已有报道[1,2],该技术的应用对缓解由于血小板的需求量不断增加以及对减缓因献血员献血时间的不规则而导致的相关工作负担的增加都有所帮助[2].但是对于白膜层过夜贮存所制备的浓缩血小板在保存期间的活化情况的有关报道却很少,笔者对该血小板在保存期的情况进行了有关试验,报道如下.
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冠状沟型尿道下裂一期修复术20例护理体会
1986年5月~1998年2月,我院对20例冠状沟型尿道下裂患儿行一期修复术,取得满意效果.现将护理体会报告如下.1 资料与方法1.1 临床资料 冠状沟型尿道下裂20例,2.5~14岁,均为初治病例,16例伴不同程度的阴茎下弯畸形和尿道外口狭窄.1.2手术方法①扩大尿道外口:19例切口纵径长6~10 mm,1例长14mm,用"7-0"无损伤线将皮肤和尿道黏膜间断缝合.②阴茎头下屈矫正:在冠状沟和尿道外口间依下屈程度做6~12 mm横切口至海绵体白膜浅层,分离筋膜层和白膜层的粘连,远端至龟头号,使龟头腹侧略翘起,近端至尿道外口,左右至两侧中线,牵拉龟头松解影响伸直的筋膜层和皮肤,至龟头可充分伸直后纵缝切口.
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白膜层静置时间对浓缩血小板回收率的影响
目的 评价重离心后的白膜层静置0h、0.5 h、1h、2h后浓缩血小板回收率,提高白膜法制备浓缩血小板的质量.方法 通过对48袋全血随机分成4组,先重离心后分离出白膜层,再将白膜层静置0h(0h组)、0.5 h(0.5 h组)、1h(1h组)、2h(2h组)后再轻离心制成浓缩血小板,计算各组浓缩血小板的回收率.结果 白膜层在室温静置0.5 h组(71.3±9.0)和0h组(68.5±8.4)浓缩血小板回收率差异无统计学意义(P>0.05);静置1h组(79.6±9.8)、2h组(81.4±9.6)与0h组相比其浓缩血小板回收率有明显的提高,差异有统计学意义(P<0.05);静置2h组其浓缩血小板回收率较1h组有所提高,但其差异无统计学意义(P>0.05).结论 白膜法制备浓缩血小板时,将经过重离心后的白膜层静置1~2h再轻离心制备血小板能提高浓缩血小板的回收率.
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在心脏外科手术中输注过滤和去白膜层的血液后HLA和RBC免疫状态:一项随机的对照研究
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取自白膜层的浓缩血小板与单采的浓缩血小板的生化和功能差异
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147.取自白膜层的浓缩血小板的完全自动化处理
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输用去除白膜层的RBC传播肺炎衣原体缺乏证据
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白膜层过夜贮存对血小板影响因素的观察
自1985年荷兰红十字血库的Kuby Pietersz博士报导用白膜法分离、制备血小板后[1~4],该技术被广泛地采用.初的研究表明:要想得到满意的血小板分离效果,要求采集的全血在当天完成分离、制备.这意味着下午采集的全血必须在当晚分离、制备成浓缩血小板,这种严格的时间限制增加了成分制备的工作负担.笔者根据国外文献及多年工作实践,用白膜层过夜贮存来取代当天分离制备浓缩血小板,并对血小板白膜层过夜贮存的影响因素进行观察,报告如下.
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冰冻解冻去甘油红细胞制备中去白膜预处理的必要性研究
目的 了解非去除白膜层和去除白膜层方法制备的冰冻解冻去甘油红细胞中红细胞回收率和白细胞残留量,探寻简单并符合国家标准质控指标的制备方法.方法 取33份红细胞悬液,分成2组,A组为非去除白膜层预处理共11份,B组为去除白膜层预处理共22份,-50℃速冻后置入-65℃冰箱保存,10-20d后取出解冻,均采用ACP215自动去甘油制成冰冻解冻去甘油红细胞.检测未处理红细胞悬液、解冻后去甘油前和去甘油红细胞成品中的红细胞回收率及白细胞残留量.结果 A组成品红细胞回收率明显高于B组[分别为(84.27±3.21)%和(80.64±4.70)%],白细胞残留量略>B组,但仍在国标允许范围之内(0.75±0.14%).结论 ACP215制备冰冻解冻去甘油红细胞可采用非去除白膜层的预处理方法,制品质量符合国家标准,而且操作自动简便.
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手工采集血小板的制备与临床应用
近年来,随着血细胞分离机的推广应用,我国机采血小板的用量逐年上升,而手工采集的血小板在临床的应用越来越少,造成手工采集全血中血小板资源的严重浪费.而在国外,尤其是欧美国家,手工采集的血小板始终占血小板用量的大多数.何以手工采集的血小板在我国不能大量应用?手工采集的血小板有无比较优势?笔者就国内外手工采集血小板的应用研究进展作一介绍.