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流式细胞术检测弱表达D抗原的探讨
曾有报道采用流式细胞术定量分析红细胞膜D抗原密度(D antigen density),为此提出采用敏感的流式细胞术常规检测D抗原弱阳性表型,本研究旨在探讨其可行性.2010年至2011年间采用盐水法、间接抗人球蛋白试验(IAT)和吸收放散试验检测到6例D抗原弱阳性表型和7例DEL型样本,通过RHD基因定型、合子型分析和RHD基因序列测定,鉴定3例为弱D15型,3例为部分DV Ⅰ-Ⅲ型,7例为DEL型且均携带RHD1227A等位基因.取正常RhD阴性2例和正常Rh(D)阳性样本2例作对照,采用流式细胞术分别检测上述弱D15型、部分DV Ⅰ-Ⅲ型和DEL型,观察其平均荧光强度.结果表明,流式细胞术检测弱D15和部分D型DV Ⅰ样本的平均荧光强度与Rh(D)阴性对照有显著性差异(P＜0.05),可判读为D抗原阳性；7例DEL红细胞样本的平均荧光强度与Rh(D)阴性对照均无显著性差异(P＞0.05),检测结果均可判读为阴性,其中包括1例DEL,其红细胞样本的吸收放散检测结果为强阳性,即使IAT检测的结果也显示为“±”,合子型分析显示为RHD+/RHD+纯合子,流式检测亦为阴性.结论:流式细胞术检测D抗原的敏感度与IAT相近,低于吸收放散试验；用于检测弱D或部分D型不如IAT简便实用,用于检测DEL型其敏感度不够.
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Rh弱D及Del样本的检测研究
为了研究初筛为RhD(-)样本中弱D及Del的检测,采用常规血清学方法初筛RhD,用间接抗人球蛋白试验(IAT)检测弱D,应用三氯甲烷/三氯乙烯吸收放散法检测Del.结果表明:在26 200例献血者中,常规血清学初筛D(-)者56例(2.14‰),其中经IAT实验确认为弱D型者5例,吸收放散试验确认Del型者9例,且与CE表型相关.结论:为了临床输血安全,经常规血清学检测RhD阴性者,应当再用间接抗球蛋白试验及吸收放散实验检测是否为弱D及Del.
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罕见ABO血型Bel亚型1例报道
目的：探讨对无偿献血者ABO血型中亚型的鉴定方法，保证临床输血安全。方法对1例无偿献血者血型进行正确的鉴定和分析。结果检测出此例血型为稀有的Bel亚型。结论吸收放散试验在无偿献血血型鉴定中非常重要。
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吸收放散试验在高效价冷凝集素导致的血型鉴定和交叉配血困难时的临床应用价值
目的：分析因高效价的冷凝集素导致的正反定型不符合和交叉配血困难时的解决方案。方法选择因高效价冷凝集素的存在而导致的交叉配血和血型鉴定异常的8例患者作为研究对象，对患者血浆采用吸收放散方法清除冷凝集素后再进行血型鉴定和交叉配血。结果运用吸收试验和放散试验可以有效的减少冷凝集素对实验过程和结果的干扰。结论吸收放散法可有效的减少甚至去除冷凝集素，使得检验结果真实可靠。
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吸收放散试验在高效价冷凝集素致ABO血型鉴定不符及交叉配血不合的应用
目的 通过采用吸收放散试验有效解决高效价冷凝集素导致的ABO 血型正反定型不符及交叉配血不合的问题,探讨疾病状态下患者血清中高效价冷凝集素对交叉配血试验的影响.提出吸收放散试验是免疫血清学实验中非常重要的技术手段.方法 ABO 血型正反鉴定、自身对照试验、吸收放散试验、不规则抗体筛选、交叉配血用直接抗人球蛋白法、聚凝胺法配血.结果 采用吸收放散的方法有效的解决冷凝集素对试验的干扰,ABO 血型正反鉴定相符,自身凝集散开,凝聚胺或抗球蛋白交叉配血,主次侧均无凝集.结论 重视高效价冷凝集素对血型鉴定和交叉配血的影响,灵活运用吸收放散法,进行抗体筛查以证实与已知特异性抗体反应的抗原活性物质的存在.区分冷凝集素与特异性抗体在鉴定ABO血和交叉配血中的不同意义,通过应用不同介质:盐水介质、凝聚胺介质或经典抗球蛋白介质,在不同温度:室温、4 ℃、37℃分别进行交叉配血试验,排除血清中是否有其他不规则抗体; 亚型或由于疾病导致的抗原抗体减弱造成凝集使配血不合,通常经37 ℃水浴后冷凝集消失,如经37℃水浴后冷凝集仍然存在,考虑有特异性抗体存在,通常配血不合.
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前带反应伴溶血致ABO定型困难
1病例报告例1:女,40岁,主因全身乏力1个月,咳嗽3天入院,临床诊断急淋L1,于入院当日申请用血,血型鉴定:正定型为O型,反定型肉眼观察患者血清与A细胞不凝集.遂进行进一步检查:①型物质测定,唾液中只分泌H物质;②红细胞H物质测定,取Rc、Oc、A1c分别测H物质含量,凝集程度Rc-Oc＞A1c;③受检者红细胞与10份O型血清反应皆不凝集;④吸收放散试验,用患者红细胞分别吸收抗A、抗B,吸收前后效价均为1:32,其放散液不凝集A型、B型红细胞.
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B亚型伴抗B抗体的鉴定与分析
ABO血型鉴定是临床输血工作中的一项重要任务,是保障输血安全的重要环节.在血型鉴定中,除正常的ABO血型外,还存在一些抗原性较弱的ABO亚型,给输血工作造成困难从而影响临床治疗.B亚型同时伴有抗B抗体的存在,导致血型正、反定型不相符,增加了血型鉴定的难度.随着实验室检测技术的发展,血型基因鉴定技术逐渐被临床应用,现将两例B亚型伴抗B抗体的分析研究报道如下.
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ABO血型亚型鉴定结果分析
目的:分析ABO血型正反定型不符标本中亚型的确认试验结果.方法:应用正反定型、吸收放散试验和唾液血型物质抑制中和试验检测ABO血型正反定型不符标本.结果:共检出24例AB0血型亚型,共9个亚型,其中B3、Bx等B亚型较多,占本例检出的54%.结论:当血型正反定型不相符时,应优先考虑亚型的可能性,必须进行正反定型、吸收放散试验和唾液血型物质实验以确定红细胞上的弱抗原或血清中的弱抗体.
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冷凝集素引起血型正反定型部分不合一例
患者女,56岁.已婚,孕3产2,既往患肺结核已治愈.宫颈活体病理检查:宫颈鳞状细胞癌Ⅱb.术前血红蛋白119 g/L、血小板112×109/L、白细胞6.7×109/L.术中备血,初检患者血型ABO 系统正定型为AB,反定型为A.所用材料包括:长春抗A、抗B、抗击D 标准血清,上海血液中心提供的血型抗体筛查谱细胞,台湾贝索凝聚胺试剂盒,长春微柱凝胶配血卡,长春抗人球蛋白微柱凝胶配血卡.A、B、O 血型正反血型鉴定、Rh(D)血型鉴定、交叉配血试验吸收放散试验、不规则抗体筛查均按全国检验操作规程进行,凝聚胺试验、微柱凝胶试验按操作说明书进行.
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ABO血型正反定型不符血型血清学分析
输血作为临床治疗或辅助治疗手段之一,挽救了无数危重病人的生命,而ABO血型的正确鉴定是安全输血的基础和保证,常规的ABO定型,必须包括用已知抗体特异性的试剂血清检查红细胞的抗原(正定型,红细胞定型),以及用已知血型的试剂红细胞检查血清中的抗体(反定型,血清定型)[1],只有正反定型相符时才能正确鉴定血型,但在实际工作中,交叉配血前复查血型时,有时遇到ABO血型正反定型不符.现将我们在工作中遇到的正反定型不符及处理方法报告如下.
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ABO血型正反定型不一致59例原因分析
正确鉴定红细胞血型是确保输血安全的首要条件,但在临床输血和采供血机构血型判定等实际工作中,经常出现ABO血型正反定型不一致的情况.本文对2004年1月至2005年6月期间出现的ABO正反定型不一致的血样用试管法做正反定型,吸收放散试验,唾液血型物质测定等方法进行检验,并对检验结果进行综合分析.报告如下.
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河北地区发现6例RHD(711delC)基因型分布
一直以来RhD血型因其在临床输血和产科学上的重要性及其自身的复杂性而成为研究的热点.RhDel表型是一种变异的极弱RhD阳性血型,长期以来Del型的个体一直被当作RhD阴性对待,随着研究的深入,发现Del型血液可能会引起Rh真阴性受血者产生抗D[1,2],其血清学反应特征为盐水介质反应和间接抗人球蛋白实验呈阴性,吸收放散试验呈阳性,在分子水平上1227A是其重要的遗传标记[3].
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1例RhD阴性献血者检出抗-D+C+G和抗-E抗体
我站在对RhD阴性献血者血型确认的同时,对每份RhD阴性血标本做常规表型鉴定和不规则抗体筛查,如后者阳性,则用谱细胞对不规则抗体进行鉴定.1例RhD阴性献血者2010年7月参与无偿献血时,检出血浆中存在IgG类不规则抗-D抗体.2011年5月再次无偿献血时,通过抗体鉴定发现血浆中存在IgG类的抗-D+C+G抗体和抗-E抗体,报告如下.
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RhD阴性献血者中DEL表型的调查
在常规盐水法检查RhD抗原阴性的个体中有相当一部分存在减弱的RhD抗原,只能通过间接抗人球蛋白试验(IAT)检出,常常表现为弱D表现型(包括弱D、部分D、DEL型等).采用更敏感的吸收和放散试验,仍可在IAT确认的Rh阴性个体中检测出一部分D抗原阳性的个体,称为D放散型(DEL).因此,我们随机抽取316名已确认为RhD阴性献血者进行吸收放散试验,现报告如下.
关键词： DEL型(D放散型) 献血者 吸收放散试验 -
RhD阴性Du和Del检测及临床意义
目的 探讨初筛为RhD阴性样本中Du及Del的检测及其临床意义.方法 采用常规血清学方法初筛RhD,用抗人球蛋白试验(AHG)检测Du,应用三氯甲烷/三氯乙烯吸收放散法检测Del.结果 在100例RhD阴性中经AHG实验确认为Du型者1例(1%),吸收放散试验确认Del型者8例(8%).结论 Du、Del型血清学筛选容易漏检为RhD阴性,为了临床输血安全,经常规血清学检测RhD阴性者,应当再用间接抗球蛋白试验及吸收放散实验检测是否为Du及Del.
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Rh弱D、Del的检测及意义
目的:探讨初筛为Rh(D)阴性样本中弱D、Del的检测及临床意义.方法:采用常规血清学方法初筛Rh(D)血型,用微柱凝胶抗人球蛋白试验检测弱D,用吸收放散试验检测Del,用PCR-SSP法检测样本RhD基因8个外显子结构.结果:常规血清学初筛Rh(D)阴性60例中经微柱凝胶抗人球蛋白试验确认为弱D4例,占6.67%;56例Rh(D)阴性标本经吸收放散试验后确认13例为Del,占21.67%;对其中2例弱D和5例Del标本的D基因8个外显子检测都完整存在,排除了弱D、Del的10例Rh(D)阴性标本其基因检测有完全缺失和部分缺失两种可能.结论:为了临床输血安全,常规血清学检测Rh(D)阴性者,应当再用抗人球蛋白试验或吸收放散试验检测是否为弱D或Del.
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利用脐血分析O型血清的抗-AB
目的探讨O血清抗AB的抗体性质和效价.方法分别用脐血红细胞和成人红细胞作为吸收细胞完成吸收放散试验.利用A(B)细胞吸收O血清,然后采用适当的放散方法对放散液的抗B(A)的效价进行测定. 结果利用脐血作为吸收细胞,4℃吸收放散试验抗AB效价为4～32,37℃吸收放散试验抗AB效价为4～16;利用成人细胞作吸收放散试验,4℃抗AB效价为4～16,37℃吸收放散试验抗AB效价为0～4.两种温度下利用脐血细胞与利用成人细胞作为吸收细胞吸收放散试验的结果的差异有显著性(P＜0.01). 结论 O血清抗AB既有IgM性质,也有IgG性质,IgM性质抗AB效价为4～32,IgG性质抗AB效价为4～16.
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长春地区RhDel表型及基因的探讨
目的 研究长春地区献血者Del表型及基因型特征.方法 对181份经抗人球方法确认的RhD阴性血样,采用吸收放散试验筛选并检测Del表型,采用序列特异性引物PCR(PCR-SSP)检测DEL等位基因RHD1227A.结果 吸收放散试验共检出Del样本44份,在Rh阴性血中占24.3%,长春与深圳、香港、台湾、海南、云南地区的Del表型占RhD阴性血液比例的差异无统计学意义(P＞0.05),与上海、新疆、日本地区的差异有统计学意义(P＜0.05).PCR-SSP结果共检出45份携带RHD1227A等位基因.在181份血样中,吸收放散试验及PCR-SSP均阳性35份;吸收放散试验阳性且PCR-SSP阴性9份;吸收放散试验阴性且PCR-SSP阳性10份.吸收放散试验及PCR-SSP两种方法检出率的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PCR-SSP方法是一种检测Del表型的有效方法.吸收放散试验和PCR-SSP方法联合检测RhD血型,有助于避免假阳性和假阴性.
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类抗-G与类抗-D抗体引起的自身免疫溶血性贫血病1例
RH血型系统的相关不规则抗体是引起临床疑难交叉配血的主要因素,增加了临床输血的风险.该系统不规则抗体可单独存在,也可以联合抗体的形式存在,其中抗-G可认为是抗-D、抗-C的联合抗体,抗-G通常伴随抗-D出现.类抗体是带有某种明显特异性的自身抗体,本例报道即为类抗-G与类抗-D自身抗体引起的自身免疫溶血性贫血病,现报道如下.
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Ael亚型引起血型鉴定困难1例
正确地鉴定血型是临床输血的关键[1].在临床上由于遗传因素引起血型变异,进而导致血型鉴定错误时有发生.本文报道因遗传因素引起血型为Ael亚型导致血型鉴定困难1例.临床资料胡某,女,28岁.怀孕9个月,几天前在外院作产前体检时,因血型鉴定困难遂到本院做血型鉴定.血型鉴定时正反定型不符,正定为"O",反定为"A"型.
