首页 > 文献资料
-
Caveolae及其蛋白质组学研究进展
Caveolae是细胞表面50～100 nm大小的凹陷,它参与细胞的胞吞、胞饮作用、胆固醇的转运和信号转导,是细胞的信号处理中心,具有广泛的抑制信号转导的作用.Caveolae的结构蛋白caveolin-1是胆固醇结合蛋白,参与胆固醇的转运和信号转导.另外,caveolae对血管壁脂质稳态和eNOS功能都起着重要的调节作用,其功能紊乱是动脉粥样硬化发病机制中的重要环节.蛋白质的翻译后修饰及在亚细胞结构内的定位对蛋白质功能的发挥起着重要的作用,而传统的蛋白质组学以研究全细胞总蛋白的变化为主.Caveolae作为细胞表面的一个重要的细胞膜结构受到了人们的普遍关注,因此出现了一系列针对caveolae的功能蛋白质组学的研究.本文结合作者实验室近年来的研究以及国内外的研究现状,从多个角度对caveolae的研究进展进行概要介绍.
-
Caveolae/Caveolins与病毒感染
Caveolae是直径为50～100nm的细胞表面特异性内陷结构,Caveolins是它的主要标志蛋白.Caveolae/Caveolins在许多生理、病理活动中起重要作用.近年来还发现,Caveolae/Caveolins介导了许多病毒的感染,参与了病毒的吸附、穿入、转运、生物合成、组装及出泡等环节.这一病毒感染途径的发现,有助于抗病毒新药的开发和肿瘤治疗新领域的开辟.
-
Caveolin-1与组织再生
Caveolae (little cave)是1953年Palade在电子显微镜下发现的细颈瓶状的细胞膜内陷结构,当时命名为plasmalemmal vesicles.1955年,Yamada将其命名为Caveolae[1].该结构含有胆固醇、鞘磷脂(sphingomylin)、鞘糖脂(glycosphingolipids),是一个不溶于去垢剂的膜区域,约50～100 nm,可单个或葡萄串状成簇出现,或由多个Caveolae融合而成长管状结构,并以Caveolin蛋白为标志分子[2].
-
内皮细胞caveolae,caveolin-1的生理功能
Caveolae是一种直径为50～100nm的细胞质膜表面特异性内陷结构.Caveolin-1是一个相对分子质量为21×103～24×103的完整膜蛋白,是组成caveolae的主要蛋白质成分.它们富含于多种类型的细胞内,其中内皮细胞是含量丰富的细胞类型之一.内皮细胞caveolae与caveolin-1在物质转运、内皮组织通透性、动脉粥样硬化发生发展以及信号转导过程中发挥着重要的调节作用.
关键词： Caveolae Caveolin-1 内皮细胞 生理功能 -
Caveolae/caveolin及其对心血管系统调控作用的研究进展
Caveolae是细胞膜表面特异性内陷微区,caveolin是caveolae的结构蛋白,维持caveolae的结构和功能.Caveolae/caveolin参与细胞的多种生命活动,包括胆固醇的转运、信号转导和细胞的胞吞、胞饮作用.Caveolae/caveolin参与了心血管系统多种调控作用,包括对内皮细胞的一氧化氮合酶、平滑肌细胞的增殖、心肌收缩、心肌肥厚以及动脉粥样硬化等均存在调控作用.
-
apelin-13下调caveolae可促进血管平滑肌细胞增殖
背景:结合课题组以往研究成果,提出caveolae 可能参与apelin-13 促血管平滑肌细胞增殖的假设.目的:实验观察细胞膜特殊凹陷结构caveolae 参与G蛋白偶联受体APJ 的内源性配体apelin-13 促进大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用.方法:采用组织贴块法培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,用MTT 方法观察血管平滑肌细胞增殖,Western Blotting 方法观察信号蛋白表达,免疫共沉淀技术检测信号分子复合物的形成.结果与结论:①caveolae 结构破坏剂β-环糊精(5 mmol/L,25 h)可明显增强apelin-13 诱导的血管平滑肌细胞增殖.②apelin-13(0,1,2,4,8 μmol/L)刺激血管平滑肌细胞,caveolin-1 的表达下调,在1 μmol/L 时下调明显.③β-环糊精(5 mmol/L)破坏caveolae 后,可使apelin-13 下调caveolin-1 表达的作用增强.④对照组(体积分数为0.1%胎牛血清孵育)及处理组(apelin-13 刺激)caveolin-1 与PI3K 及ERK1/2 均有复合物形成,在apelin-13 刺激的情况caveolin-1-PI3K 复合物减少、caveolin-1-ERK1/2 复合物减少,即apelin-13 可能促进caveolin-1 与PI3K 及ERK1/2 解离.结果提示细胞膜特殊凹陷结构caveolae 参与apelin-13 促血管平滑肌细胞增殖作用.
-
Caveolin-1在大鼠肝脏不同发育阶段的表达及意义
胞膜窖(Caveolae)是一种细瓶颈状的细胞膜内陷结构,由Palade等(1953)首次发现,后来由Yamada命名.Caveolin-1是相对分子质量为21 000～24 000的整合膜蛋白,是胞膜窖的主要结构成分.至今已克隆到caveolin基因家族中的3个成员:CAV1、CAV2和CAV3.因组织分布和序列结构的不同,又可产生5种mRNA和6种基因产物,分别命名为窖蛋白1α、1β、2α、2β、2γ和3[2].
-
Caveolae、caveolin-1与消化系统肿瘤发生发展关系的研究进展
全文对小窝(caveolae)、caveolin-1在信号传导中的调控作用和在消化系统肿瘤发生发展中的作用作一综述,为消化系统肿瘤细胞的信号干预治疗提供新思路.
关键词： Caveolae Caveolin-1 消化系统 肿瘤 信号传导 -
Caveolin-1在载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化形成中的变化
目的:探讨caveolin-1在apo E基因敲除小鼠动脉粥样硬化形成过程中的变化.方法:取正常和apo E基因敲除小鼠(品系均为C57BK/6J)作为研究对象,分别观察不同周龄apo E基因敲除小鼠血清甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白的含量及主动脉横断面积、斑块面积的变化.免疫组织化学染色法对caveolin-1进行半定量及定位分析,Western-blotting检测caveolin-1在主动脉的表达.结果:apo E基因敲除小鼠的血清甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白水平与对照组比较显著升高,并随小鼠周龄增加而升高;斑块面积及斑块面积与主动脉面积的比值也随小鼠周龄增加而增大.免疫组织化学染色法显示,caveolin-1在实验组血管内膜表达呈阳性减弱,其程度随周龄增加有减少趋势.免疫印迹检测显示实验组caveolin-1的表达与对照组比较有所减弱,并与小鼠周龄呈负相关.结论:apo E基因敲除小鼠主动脉内皮细胞caveolin-1表达下调,可能与其动脉粥样硬化形成有关.
关键词： Caveolae Caveolin-1 apo E 动脉粥样硬化 基因敲除 -
平滑肌细胞caveolae在大鼠肾动脉收缩反应调控中的作用研究
目的 探讨平滑肌细胞caveolae在大鼠肾动脉对不同血管活性药物收缩反应中的作用及其机制.方法 采用单独甲基-β-环糊精(methyl-beta-cyclodextrin,MCD)或MCD和胆固醇(cholesterol,CHO)孵育肾动脉以减少和增加平滑肌细胞caveolae含量,并与未处理组[二甲基亚砜(DM-SO)组比较].采用电镜观察caveolae数量,采用血管环张力描记技术检测肾动脉对氯化钾(potassium chloride,KCl)、苯肾上腺素(phenylephrine,PE)和血管紧张素Ⅱ(angiotensin,AngⅡ)的收缩反应,采用蛋白免疫印迹(Western blot)检测法、荧光实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测caveolin-1及血管紧张素受体1型(Angiotensin type 1 receptor,AT1R)的基因和蛋白表达,采用免疫沉淀和Western blot检测caveolin-1与AT1R的结合.结果 MCD单独孵育可显著降低平滑肌细胞caveolae数量,而MCD与CHO共孵育则可使其恢复,MCD或CHO孵育均未影响caveolin-1基因和蛋白表达.MCD与CHO预处理后,肾动脉对KCl和PE的收缩反应无明显改变.但与未处理组相比,MCD单独孵育可使动脉对AngⅡ的收缩反应强度显著降低(P＜0.05),收缩敏感性显著减弱(P＜0.05),而MCD与CHO共孵育则可使动脉对AngⅡ的收缩反应强度及敏感性恢复正常水平.CHO与MCD对AT1R的蛋白表达水平无明显影响.在正常动脉,AngⅡ作用后caveolin-1与AT1R的结合显著增加(P＜0.05),而在MCD孵育动脉,这种反应被明显抑制,CHO则可使其恢复正常水平.结论 平滑肌细胞caveolae是大鼠肾动脉收缩功能调控的重要机制,其主要通过影响caveolin-1与AT1R的结合而调控其下游通路.
-
平滑肌细胞caveolae在自发性高血压大鼠肾叶间动脉收缩功能改变中的作用研究
目的 探讨平滑肌细胞caveolae在自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)肾叶间动脉对血管紧张素Ⅱ (angiotensin Ⅱ,Ang Ⅱ)的收缩反应改变中的作用及其机制.方法 采用Wistar Kyoto (WKY)大鼠作为对照组,SHR为实验组(两组大鼠均为Wistar京都种大鼠),分别对SHR和WKY大鼠采用血管环张力描记技术检测肾叶间动脉对Ang Ⅱ的收缩反应,采用甲基-β-环糊精(methyl-beta-cyclodextrin,MCD)孵育以减少平滑肌细胞caveolae含量,采用电镜观察caveolae数量,采用荧光实时定量PCR (quantitative real-time PCR,qRT-PCR)及蛋白免疫印迹(Western blot)法检测血管紧张素受体1型(qngiotensin type 1 receptor,AT1R)的基因和蛋白表达,采用免疫沉淀和Western blot检测caveoin-1与AT1R的结合.结果 与WKY组大鼠相比,SHR组肾叶间动脉对Ang Ⅱ的收缩反应强度及敏感性均明显增加(P＜0.05),平滑肌细胞caveolae数量显著增加(P＜0.05),MCD孵育可使SHR组肾时间动脉对Ang Ⅱ的收缩强度部分恢复,使其敏感性恢复正常.与WKY组相比,SHR组肾叶间动脉的AT1R蛋白表达显著增加(P＜0.05),AngⅡ作用后caveolin-1与AT1R的结合显著增强(P＜0.05),MCD孵育后AT1R的蛋白表达降低,但仍高于WKY组,而caveolin-1与AT1R的结合恢复正常水平.结论 平滑肌细胞caveolae增加参与介导SHR肾叶间动脉对Ang Ⅱ收缩反应改变,其可能通过增加平滑肌ATIR含量以及caveolin-1与AT1R的结合而增强收缩反应强度及敏感性.
-
窖蛋白-1与肺癌的研究进展
1953年Palade在电子显微镜下发现血管内皮细胞表面有一些颈瓶状的内陷结构.1955年Yamada在膀胱上皮细胞表面发现同类结构,并将其命名为胞膜窖(Caveolae).胞膜窖是细胞质膜表面特异性的内陷微区,亦称为细胞质膜微囊、小凹.
-
脂筏在高血压发病机制中的作用
原发性高血压的发病机制尚未完全明确,随着脂筏结构与功能的不断阐明,它与高血压之间的关系越来越密切.脂筏与细胞的许多重要功能有关,高血压的多种信号转导事件的发生是通过定位于脂筏及caveolae的细胞膜受体,所以脂筏在高血压的发生发展过程中起了重要的调控作用.与高血压发病机制相关的因素,如内皮型一氧化氮合成酶、细胞外钙受体、NADPH氧化酶、Rho激酶、胰岛素受体、Ca2+以及转化生长因子和丝裂原蛋白激酶信号转导通路等,这些蛋白和信号分子都定位于脂筏或者受脂筏调控,从而为脂筏与高血压发病机制之间的关系提供了更加充分的证据.本文将对各相关蛋白和信号转导与高血压的形成原因作一综述.
-
Caveolae/Caveolin-1在血管生成和平滑肌细胞增殖中的作用
目的 小凹(cavcolae)是细胞膜上的特异性凹陷,小凹蛋白(caveolin)是构成Caveolae的标志性蛋白,起到维持Caveolae结构的作用并参与胞吞和胞内运输作用、胆固醇运输、信号传导等过程.Caveolin-1富含于多种类型的细胞内,其中内皮细胞和平滑肌细胞是含量丰富的细胞类型,对血管生成和平滑肌细胞增殖起重要作用.
-
Caveolae及Caveolin-1对恶性脑肿瘤微血管通透性的影响
Caveolae是胞吞转运(transcytosis)的主要途径,在脑微血管内皮细胞中微量表达,限制物质转运,参与构成血脑屏障.Caveolin-1是组成Caveolae的必需结构成分和主要功能蛋白.恶性脑肿瘤微血管通透性增加,与内皮细胞中Caveolae增加、内皮细胞间紧密连接改变密切相关,受到Caveolin-1的调控影响.本文就Caveolin-1、Caveolae对于恶性脑肿瘤微血管通透性影响的研究进展作一综述.
关键词： Caveolae Caveolin-1 血脑屏障 胞吞转运 脑肿瘤微血管 -
Filipin Ⅲ对肺泡巨噬细胞caveolin-1的影响
目的:探索FilipinⅢ对肺泡巨噬细胞caveolin-1的影响.方法:采用肺泡灌洗的方法分离提取小鼠原代肺泡巨噬细胞,免疫细胞化学染色鉴定其纯度,Western印迹分析FilipinⅢ处理30min后caveolin-1蛋白水平的变化.利用细胞系RAW264.7观察FilipinⅢ处理后15min、30min、1h、2h、4h、6h的caveolin-1的动态变化.结果:FilipinⅢ处理30min后原代肺泡巨噬细胞及RAW264.7细胞caveolin-1的蛋白水平都有增加.结论:FilipinⅢ可以提高肺泡巨噬细胞及RAW264.7细胞caveolin-1的蛋白表达.
关键词： FilipinⅢ Caveolin-1 Caveolae 肺泡巨噬细胞 -
Caveolae在CGRP保护人脐静脉内皮细胞中的作用及机制
目的：探讨Caveolae对降钙素基因相关肽( CGRP)抑制过氧化氢( H2 O2)诱导的人脐静脉内皮细胞( HUVECs)损伤作用的影响及其机制。方法体外培养HUVECs,分别用CGRP和/或H2 O2处理细胞,光学显微镜观察细胞形态学和密度的变化；流式细胞术观察细胞的增殖和周期分布；β-环糊精(β-CD)用于破坏caveolae结构；Western-blot检测caveolin-1表达。结果与正常组比较,CGRP组细胞密度增加,S期细胞数明显增多,H2 O2组细胞密度降低,S期细胞数明显减少；CGRP预孵育细胞能抵抗H2 O2引起的细胞数目减少；β-CD剥夺胆固醇,破坏caveolae结构,HUVECs形态学发生改变,但CGRP诱导的细胞密度和细胞增殖进一步提升,恢复胆固醇后,该作用被取消。与对照组比较,CGRP组细胞 caveolin-1表达水平降低(P<0.05)；H2O2组细胞 caveolin-1水平上升(P<0.05),给予CGRP预孵育后,能显著逆转H2O2诱导的caveolin-1表达(P<0.05)；β-CD破坏caveolae结构后,增强CGRP下调HUVECs caveolin-1表达的作用(P<0.05),增加胆固醇Caveolae结构有所恢复且该作用被削弱。结论 Caveolae结构完整性对CGRP保护H2 O2损伤HUVECs有一定影响,破坏caveolae结构能增强CGRP对H2 O2损伤的HUVECs的增殖作用,其机制可能与增强CGRP下调氧化应激导致的caveolin-1的表达有关。
关键词： 过氧化氢 降钙素基因相关肽 Caveolae Caveolin-1 内皮细胞 -
内皮细胞Caveolae及其蛋白Caveolins、Cavins研究进展
1 小凹、小凹蛋白与小凹调节蛋白1.1小凹(Caveolae)1953年Palade[1]首次通过电子显微镜观察到内皮细胞质膜上存在类似亚细胞结构的囊泡,设想这种囊泡可在细胞间游走穿梭,所以起名为质膜囊泡(plasmalemmal vesicles).两年后Yamada[2]也观察到与Palade相似的结果,将这种囊泡称小凹(caveolae),是拉丁字小洞(cave)的意思.大多数细胞都有小凹,但尤以内皮细胞、脂肪细胞和肺泡壁细胞为多.小凹由胆固醇、鞘酯和蛋白质组成,直径大约为50 ～ 100 nm,形态多种多样,但大部分都是烧瓶形.主要参与胆固醇转运、大分子内吞和胞饮及信号转导等过程[3].
-
Caveolin-1、Caveolae和动脉粥样硬化
Caveolae是细胞表面直径为50～100 nm的胞膜穴样内陷, 主要由胆固醇、糖基鞘磷脂、鞘磷脂和一些结构蛋白如Caveolin组成.Caveolin-1是Caveolae的主要组成成分,它与细胞骨架蛋白间接偶联来维持Caveolae的内陷形态.Caveolae和Caveolin-1在参与动脉粥样硬化的各种细胞如内皮细胞、巨噬细胞、平滑肌细胞表面都有表达,它们通过对各种细胞功能和多个信号转导途径的调节参与对动脉粥样硬化的形成和发展.
关键词： 动脉粥样硬化 Caveolae Caveolin-1 -
Caveolae和胰岛素信号转导
近年来研究发现细胞膜上的结构caveolae和胰岛素信号转导关系密切,提示caveolae可能在2型糖尿病的发病机制中起着一定的作用,本文简要介绍了caveolae及其特异蛋白caveolin的生物学特性,并综述了caveolae、caveolin和胰岛素信号转导途径中的胰岛素受体、葡萄糖转运子4(GLUT4)的关系.
