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Roscovitine促进增殖期PC12细胞凋亡
目的探讨细胞周期蛋白依赖激酶(CDK)抑制剂Roscovitine导致增殖期PC12细胞死亡的性质和CDK调控的细胞周期与细胞凋亡的关系.方法利用培养的增殖期PC12细胞模型,进行MTT细胞活性检测、Hoechst 33342胞核荧光染色和倒置显微镜观察.结果分别用5、10、20、50和100 μmol/L浓度的Roscovitine溶液处理细胞12 h,细胞存活率呈剂量依赖性下降;另外,50 μnol/L浓度的Roscovitine分别处理细胞4、12、24和48 h,细胞死亡也呈现时间依赖性.细胞死亡的形态学表现是细胞皱缩、核染色体固缩和核碎片形成.结论 Roscotivine导致的增殖期PC12细胞凋亡与CDK调控的细胞周期蛋白有关.
关键词： 细胞周期蛋白依赖激酶 细胞周期 抑制剂 凋亡 PC12细胞 -
甾体类性激素对培养的胸腺上皮细胞增殖相关信号转导的调节
目的探讨甾体类性激素(sex steroid)对胸腺上皮细胞增殖相关信号转导的调节机制. 方法用免疫印迹法(immunoblotting)及免疫组织化学法(immunohistochemistry)研究甾体类性激素在体外培养大鼠胸腺上皮细胞株(IT-45R1)蛋白激酶C相关的信号转导途径中的作用机制. 结果 (1)甾体类性激素诱导的胸腺上皮细胞的增殖受甾体类性激素和血浆抑制因子相互作用产生的质膜相关信号途径的调节;(2)细胞周期蛋白依赖激酶系在胸腺上皮细胞的细胞周期中起重要作用;(3)5α-双氢睾酮在10-10mol/L增强细胞周期蛋白依赖激酶系的调节,而17β-E2则呈浓度依赖性抑制细胞周期蛋白依赖激酶系的调节. 结论胸腺上皮细胞增殖相关信号的转导是几条途径相互作用的结果.
关键词： 胸腺上皮细胞 性激素 增殖 细胞周期蛋白依赖激酶 信号转导 -
Springbio蛋白芯片技术研究气虚质及鼻咽癌气虚癌变差异蛋白表达
目的 利用蛋白芯片技术研究气虚质及鼻咽癌气虚癌变差异蛋白的表达. 方法 选择具有典型气虚质的鼻咽癌及鼻咽炎各4例作为研究对象,采用可同时检测722个蛋白的Springbio蛋白芯片技术及协方差分析方法,检测气虚质差异蛋白、鼻咽癌差异蛋白以及鼻咽癌气虚癌变差异蛋白的表达情况,探索其特征蛋白. 结果 相比于正常质,气虚质蛋白主要以下调表达为主,下调蛋白19个( P<0.05) ,气虚质下调的蛋白主要包括角蛋白及细胞周期蛋白依赖激酶;相比于鼻咽炎,鼻咽癌蛋白既可上调表达亦可下调表达,上调表达有13个蛋白,下调表达有9个蛋白;CD115/CSF-1R和角蛋白既在气虚质下调,又在鼻咽癌下调,Cdk1/p34cdc2和p170 /MDR-1蛋白在气虚质下调,在鼻咽癌却上调. 结论 气虚质存在着特定的蛋白表达特征,表现为角蛋白及细胞周期蛋白依赖激酶的低表达,集落刺激因子1受体及角蛋白低表达为鼻咽癌气虚癌变特征蛋白.
关键词： 鼻咽癌 气虚 角蛋白 集落刺激因子1受体 细胞周期蛋白依赖激酶 -
研究慢性粒细胞性白血病病理发生中下游信号传导和分子调控的干细胞模型
目的获得慢性粒细胞白血病人原代干祖细胞模型,旨在研究慢粒白血病病理发生中信号传导的分子机制.方法转导b3a2 bcr/abl cDNA 到正常人CD34+细胞中构建人原代慢性粒细胞性白血病模型.采用细胞免疫组化测定了p210BCR/ABL在CD34+细胞中的表达;细胞粘附、迁移实验进行模型鉴定;FACS法测定了p210BCR/ABL转导及对照CD34+细胞p27kip和MDR-1 Pgp的表达.结果相对于对照的CD34+细胞,转导了bcr/abl的CD34+细胞对纤粘连蛋白(fibronectin, FN)的粘附性下降;而在FN上的迁移能力增强;在低浓度细胞因子或血清条件下表现为凋亡延迟;细胞的粒系克隆形成单位数量明显增多, 这一模型再现了原代慢粒白血病的异常表型特征,并以此模型发现p210BCR/ABL转染CD34+细胞上调了p27Kip水平并可诱导MDR-1 Pgp异常表达.结论该模型适用于慢粒病理发生中的信号分子传导及分子调控研究,提示了慢粒耐药的分子机制.
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肺癌组织中细胞周期蛋白依赖激酶、细胞周期蛋白D2和P16表达及其意义
目的探讨细胞周期蛋白依赖激酶(CDK4)、细胞周期蛋白D2(CyclinD2)和P16在人类肺癌组织中的表达及意义.方法采用免疫组化SP法检测69例肺癌组织中CDK4、CyclinD2和P16的表达并行统计学分析.结果69例肺癌组织中CDK4、CyclinD2和P16的阳性率分别为49.3%,39.1%和50.7%,与正常支气管粘膜比较有显著性差异(P＜0.01).CDK4、P16的表达与肺癌淋巴结转移有关(P＜0.01,P＜0.05).P16的表达与CDK4、CyclinD2的表达呈显著负相关(P＜0.01).结论CyclinD2高表达与肺癌的发生有关,CDK4和P16的异常表达与肺癌的侵袭和转移有关,可作为判断肺癌淋巴结转移和估计预后的重要指标.
关键词： 肺肿瘤 细胞周期蛋白依赖激酶 细胞周期蛋白D2 p16 免疫组织化学 -
尿毒净Ⅱ号对人肾系膜细胞Cyclin D1及CDK4表达的影响
目的:探讨尿毒净Ⅱ号对人肾小球系膜细胞Cyclin D1、CDK4的影响.方法:应用流式细胞术、免疫组化、Western blot方法,在培养的人胚胎肾小球系膜细胞,分别检测尿毒净Ⅱ号对系膜细胞Cyclin D1、CDK4以及DNA倍体的影响.结果:尿毒净Ⅱ号明显抑制血清加内皮素-1(ET-1)刺激的系膜细胞Cyclin D1、CDK4表达,增加G0/G1期细胞,降低S+G2/M期细胞(与对照组比较P<0.01),呈一定的量效依赖关系.结论:尿毒净Ⅱ号通过抑制细胞Cyclin D1、CDK4,阻止系膜细胞由G1期进入S期,延缓了细胞周期进程,从而抑制系膜细胞增殖.
关键词： 尿毒净Ⅱ号 肾系膜细胞 细胞周期素 细胞周期蛋白依赖激酶 -
新仙灵骨葆胶囊调控成骨细胞G1期调节蛋白抗骨质疏松的实验研究
目的:观察新仙灵骨葆胶囊调控成骨细胞G1期调节蛋白抗去卵巢大鼠骨质疏松的作用.方法:去卵巢制备大鼠骨质疏松模型,大鼠随机分为假手术组,模型组,仙灵骨葆胶囊组(350 mg/kg),新仙灵骨葆胶囊低、中、高剂量组(53、105、210 mg/kg),各组灌胃相应药物10 mL/kg,连续12周.末次给药后进行骨密度仪分析大鼠的椎骨、股骨、胫骨的骨密度;检测股骨生物力学性能;计算子宫指数;取第3腰椎,免疫组织化学方法检测成骨细胞中细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖激酶(CDK4)、癌基因蛋白p21的表达.结果:与模型组比较,新仙灵骨葆胶囊可显著抑制大鼠体质量,增加子宫指数和椎骨、股骨、胫骨的骨密度,改善大鼠的生物力学性能,降低第3腰椎成骨细胞Cyclin D1、CDK4、p21蛋白水平.结论:新仙灵骨葆胶囊对去卵巢大鼠所致的骨质疏松症有良好的治疗效果,其作用机制可能是通过调控成骨细胞G1期调节蛋白而影响成骨细胞增值.
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以CDK为靶标治疗肿瘤的研究进展
细胞周期失调引起的增殖失控是肿瘤发生的重要特征之一,人们很早就意识到细胞周期调控分子是肿瘤药物设计的有效潜在靶标.在细胞周期调控中,蛋白磷酸化是推动细胞周期进展的重要事件,而细胞周期蛋白依赖激酶(cyclin -dependent kinase,CDK)是细胞周期中蛋白磷酸化的主要调节分子.在许多肿瘤中,CDK的活性发生失调,这也被认为是肿瘤发生发展的一个重要原因 [1].许多科研工作者试图通过抑制CDK活性来治疗肿瘤,并取得一定进展.现将以CDK为靶标进行肿瘤治疗的进展综述如下.
关键词： 细胞周期蛋白依赖激酶 细胞周期蛋白 抗肿瘤药 综述文献 -
细胞周期抑制剂治疗肿瘤的进展
细胞周期是细胞生命活动的基本过程，它控制着细胞从静止期转向生长增殖期。细胞周期蛋白依赖激酶（Cdks）和细胞周期蛋白（Cyclins）是整个细胞周期调控机制中的核心分子。细胞周期调控异常与细胞癌变密切相关，90％以上的肿瘤，尤其是胶质瘤和软组织肉瘤中 Cdks 都有过度表达。进一步分析指出，Cdks 和 Cyclins 被作为治疗肿瘤的关键靶点，它们受抑制时能导致肿瘤细胞的死亡，抑制 Cdks 还能阻滞 Cyclins 转录。Ⅰ期临床研究提示，细胞周期素蛋白激酶抑制剂（CDKIs）有较高的安全性；Ⅱ期临床研究提示，CDKIs 联合细胞毒性化疗药物作用肿瘤细胞有更好的前景，且 CDKIs 的使用剂量和时间顺序决定着其佳使用效果。本文阐述了 Cdks 和 Cyclins在肿瘤细胞周期中的表达，对 Flavopiridol、Indisulam、AZD5438、SNS-032（BMS-387032）、Bryostatin-1、PD 0332991等 CDKIs 在肿瘤靶向性治疗中的研究作一综述。
关键词： 细胞周期蛋白依赖激酶 细胞周期蛋白 细胞周期素蛋白激酶抑制剂 肿瘤 -
细胞周期相关激酶的肿瘤机制
细胞周期相关激酶(CCRK)作为一种新发现的细胞周期依赖激酶活化激酶,主要参与细胞周期的调控.相关研究证实CCRK在多种肿瘤细胞中均有过表达,且与患者不良预后密切相关,提示CCRK参与了肿瘤的发生发展过程.
关键词： 基因表达调控 肿瘤 细胞周期蛋白依赖激酶 细胞周期 -
P16、cyclinD1和CDK4在膀胱移行细胞癌中表达的临床意义
目的 探讨细胞周期调控系统相关因子在膀胱移行细胞癌中表达的临床意义.方法 应用免疫组化染色方法检测P16、cyclinD1和CDK4在92例膀胱癌中的表达,运用x2检验统计分析.结果 ①在膀胱癌组织中P16表达下调;cyclinD1和CDK4表达上调.②92例膀胱癌中,P16保留表达率随分级、分期的增加而下降,在复发肿瘤中下降;③92例膀胱癌中,cy-clinD1和CDK4保留表达率随分级、分期的增加而增加,在复发肿瘤中增加.结论 P16、cyelinD1和CDK4的表达和膀胱移行细胞癌的生物学行为密切相关,在膀胱癌的发生发展中有重要意义.
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葛根粗提物和葛根素对小细胞肺癌H446细胞肿瘤相关蛋白表达水平的影响
目的 探讨葛根粗提物(CP)及葛根素(SP)对人小细胞肺癌H446细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、Fas、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、细胞周期蛋白依赖激酶(CDK2)、CDK4和p27蛋白表达水平的影响.方法 应用免疫组化法检测空白对照组(CO组)、CP组及SP组H446细胞中PCNA、Fas及CDK2表达水平,流式细胞仪检测三组CyclinD1、CDK4和p27蛋白表达水平.结果 CP组PCNA、CDK2、CDK4表达水平显著低于CO组(P均<0.05),CyclinD1表达水平显著低于CO组和SP组(P均<0.05),Fas和p27蛋白表达水平显著高于CO组和SP组(P均<0.05);SP组CDK2、CDK4、CyclinD1表达水平显著低于CO组(P均<0.05),Fas和p27蛋白表达水平显著高于CO组(P均<0.05).结论 CP及SP可能抑制H446细胞的增殖,促进其凋亡;CP较SP作用显著.
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黏着斑激酶与细胞周期调控
黏着斑激酶为胞浆内重要的信号转导分子,处于多种信号通路的交汇点,被激活后可促进细胞增殖.其促增殖作用是通过调控细胞周期实现的.黏着斑激酶生物学功能的研究有利于拓宽与黏着斑激酶相关疾病的治疗靶点.
关键词： 黏着斑激酶 细胞周期 细胞周期蛋白 细胞周期蛋白依赖激酶 -
小分子化合物H-131抑制胃癌细胞增殖及机制
目的 研究小分子化合物H-131对人胃癌细胞SGC7901、BGC823、MKN-45增殖的抑制作用及其相关机制.方法 应用不同浓度的化合物H-131处理人胃癌细胞SGC7901、BGC823和MKN-45,采用MTT法检测该化合物对细胞增殖的影响,流式细胞术检测其对细胞周期的影响,Western blot检测化合物对周期调控蛋白Cyclin D1和CDK4表达的影响.结果 化合物H-131能够以剂量依赖的方式抑制人胃癌细胞SGC7901、BGC823及MKN-45的增殖,并且能够抑制上述细胞G1期向S期的转化.Western blot结果显示H-131能够以剂量依赖的方式下调胃癌细胞SGC7901中Cyclin D1和CDK4的蛋白表达水平.结论 化合物H-131能够通过下调胃癌细胞中Cyclin D1和CDK4的表达水平,抑制胃癌细胞G1期向S期的转化,进而抑制胃癌细胞增殖.
关键词： 胃癌 H-131 细胞株 细胞周期蛋白D1 细胞周期蛋白依赖激酶 -
p21WAF1/CIP1与大肠癌的相关性研究概况
细胞周期正常有序完成,受控于精密的分子调控机制,细胞周期蛋白激酶抑制物(cyclin kinase inhibitor,CKI)在该机制中起重要作用,细胞增殖抑制基因p21WAF1/CIP1(wide-type p53-acfivateA factor 1,WAF1/cyclin-depedent kinase interact-ing protein 1,CIP1,下述p21概指p21WAF1/CIP1)是CKI所包含的双重组特异性家族(CIP/KIP)的代表[1,2],具有广泛细胞周期蛋白依赖激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)抑制活性,在细胞周期调控中起负调节作用,表达异常可致使细胞周期调节紊乱,而导致细胞增殖失控,引起肿瘤发生,研究显示,p21基因对大肠癌的发生、发展、转归及预后密切相关.本文将p21与大肠癌临床病理学特征及预后的相关性研究作一介绍.
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苯并芘对HELF细胞周期及相关基因表达的影响
背景与目的:探讨苯并芘(benzo[a]pyrene,BaP)影响人胚肺成纤维细胞(HELF)周期的途径和作用机制.材料与方法:用5μmol/L的BaP处理HELF细胞后,采用细胞计数,流式细胞仪检测BaP对细胞生长和周期的影响,用PCR和Western-blotting检测BaP对细胞周期相关基因mRNA和蛋白的影响.结果:BaP处理HELF细胞后,显著促进细胞的生长,在处理后第8 d时细胞数目约增加50%(P＜0.01),细胞体积增大,促进细胞由G1期向S期和G2/M期的转换.mRNA和蛋白检测结果显示:BaP处理细胞后可以促进p53、cyclin D1、CDK2、CDK4和p21 mRNA及蛋白的表达(P＜0.05或P＜0.01),抑制cyclin E mRNA及蛋白的表达(P均＜0.01),而对cyclin A和p27 mRNA及蛋白表达没有明显影响(P均＞0.05).结论:BaP对HELF细胞周期的调控逃脱了p53-p21的关卡作用,而通过诱导cyclin D1、CDK2和CDK4的表达来加快细胞周期的进程,该途径为cyclin A和p27非依赖型.
