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FGF10及其受体FGFR2Ⅲb在小鼠肾脏发育中的表达
目的 观察FGF10及其受体FGFR2Ⅲb在小鼠肾脏发生发育中的表达和分布,探讨其在肾脏发生发育中的作用.方法 选取胚龄12、14、16及18 d和出生后1、7、14、21及42 d小鼠肾组织,用免疫组织化学和Western blot,检测FGF10和FGFR2Ⅲb的表达.结果 胚龄12 d组FGF10及FGFR2Ⅲb开始在输尿管芽微弱表达；随着肾脏发育成熟,FGF10及FGFR2Ⅲb主要表达于远端小管和集合管；FGF10在近曲小管表达,近直小管无表达；FGFR 2Ⅲb在近端小管无阳性表达；生后肾组织及发育各阶段肾小体未见FGF10及FGFR2Ⅲb表达.Western blot显示随着胚(日)龄的增加,FGF10及FGFR2Ⅲb在肾脏的表达量先增后减.结论 FGF10和FGFR2Ⅲb在肾脏发生发育过程中发挥重要作用.
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细胞内吞受体megalin 和cubilin在胚胎期小鼠肾的表达
目的 研究细胞内吞受体megalin和cubilin在胚胎发生发育小鼠肾的表达,及其与肾小管发生发育的相关性. 方法 采用免疫组织化学方法 检测不同胚龄小鼠肾(每组5只)megalin和cubilin的表达.同时,结合透射电镜观察肾近端小管与细胞内吞功能相关的细胞器的发育变化. 结果 胚龄9.5d时,megalin和cubilin表达于中肾管及中肾小管上皮细胞游离面.胚龄11d至18d,两受体表达于输尿管芽上皮细胞游离面,在S小体期肾小管近腔面呈弱阳性表达,肾小管胞内吞体及溶酶体少见,微绒毛稀疏.随着近髓肾单位细胞内吞体及微绒毛发育成熟,两受体表达局限于近端小管近腔面及刷状缘. 结论 megalin和cubilin 在胚胎肾发生发育中,从表达在分化早期所有小管近腔面胞质,到局限于成熟期近端小管游离面刷状缘,提示两受体协同重吸收功能是随着近端小管上皮细胞的发育而逐渐形成的.
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小鼠肾发育过程中肝细胞生长因子及其受体的表达
目的 观察肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)及其受体(c-Met)在小鼠肾发育中的时空性表达,探讨其与肾发育的关系.方法 采用免疫组织化学技术结合体视学方法对不同胚龄及生后日龄小鼠肾组织HGF和c-Met的表达及其含量变化进行系统观察和定量分析.结果 HGF和c-Met在各期的肾小体、皮质肾小管及集合管均有表达,且随胚(日)龄增加在各期肾小体、皮质肾小管及集合管的表达是先增后减.结论 推测HGF和c-Met可能对肾各结构的发育以及成熟肾的形态维持起重要作用.
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小鼠肾集合管发育中的细胞凋亡与整合素α2的表达
目的 观察小鼠肾集合管发育过程中细胞凋亡与整合素α2的表达,探讨小鼠集合管发育过程中整合素α2及细胞凋亡的作用.方法 应用免疫组织化学及灰度值测量、TUNEL染色及细胞凋亡指数检测方法对胚龄(E)17、18d及生后日龄(P)1、3、7、14、21、40d的小鼠肾集合管中整合素α2的表达和细胞凋亡情况进行观察分析.结果 整合素α2于E17d的集合管开始出现,至P7d达到高峰,之后无明显含量的变化.TUNEL染色显示细胞凋亡早出现于P1d的集合管,P7d达到高峰,之后无明显变化.结论 整合素α2及细胞凋亡对集合管的发育过程起一定的作用,整合素α2对细胞凋亡有一定的影响作用.
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大鼠肾发育中Wnt4蛋白的表达
目的：探讨大鼠肾发育中Wnt4蛋白的表达规律及Wnt4蛋白对大鼠肾发育的影响。方法选取胚龄（E）18、20 d和生后（P）0、1、3、5和7 d的大鼠肾脏，应用免疫组织化学技术，定性分析该时间段内大鼠肾组织中Wnt4蛋白的表达部位及其变化情况；应用蛋白印迹检法，定量分析该时间段内大鼠肾组织中Wnt4蛋白表达量的变化。结果免疫组化结果显示，从E 18 d～P 7 d，Wnt4蛋白在近端小管，在生肾区的输尿管芽、逗号小体以及S小体的表达较强，在远端小管的表达较弱，在肾小体的表达由强到弱。蛋白印迹检测结果显示，Wnt4蛋白的表达量E 18 d时开始逐渐降低，P 1 d时到达低点，然后开始回升，P 7 d时再次降低。结论在大鼠肾发育中，Wnt4蛋白通过启动经典的Wnt/β-catenin信号通路参与调控肾单位的发育，启动非经典的Wnt/PCP信号通路参与调控近端小管的延长，其可能与肾单位的形成以及近端小管的发育密切相关。
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经典Wnt信号通路在后肾发育中的作用
胚胎学研究发现,输尿管芽与后肾间充质间的相互诱导作用是后肾发育的关键环节.关于调控后肾发育信号通路的研究是近20年来研究的热点.其中,经典Wnt信号通路被认为在后肾发育过程中发挥重要作用,这一信号通路的正常开启与关闭可能与后肾发育及肾脏疾病的发生密切相关.本文主要阐述近年来关于经典Wnt信号通路在后肾发育中作用的研究新进展.
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Wnt11基因在肾脏的表达及意义
Wnt信号通路是近年来的研究热点,对细胞的增殖、分化和迁移起巨大的调节作用.Wnt信号通路包括经典Wnt信号通路和非经典Wnt信号通路.Wnt11是非经典Wnt信号通路上一个非常重要的信号分子,是肾脏发育的重要的因子,在胚胎后肾的发育中起着积极的调控作用,在成熟肾脏处于沉默状态.有研究表明其在肾脏纤维化中重新表达.该文就其在肾脏发育中的作用及其与肾脏纤维化的关系作一综述.
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Megalin在胚胎期小鼠肾脏中的表达
目的 观察胞吞受体megalin在胚胎发育不同时期小鼠肾脏中的表达.方法 采用免疫组织化学技术及体视学方法检测胚龄9.5、11、14、16、18d小鼠肾脏megalin的表达.结果 Megalin在胚龄9.5d小鼠表达于中肾管上皮细胞游离面,胚龄11d表达于输尿管芽的上皮细胞游离面,胚龄14d megalin表达量逐渐增多,主要分布于输尿管芽的壶腹部和发育中的肾近端小管上皮细胞游离面及较成熟的近端小管刷状缘.胚龄16d至胚龄18d megalin主要表逸于近端小管的刷状缘,肾小球内也有微量表达.结论 Megalin在胚胎肾发生中的表达存在着时空顺序,可能与肾小管,乃至肾单位的分化及成熟有关.
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小鼠肾发育中Calbindin-D28k的定量分析
目的 观察Calbindin-D28k在小鼠肾发生发育中的表达规律.方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾Calbi-ndin-D28k的表达进行定量栓测.结果 胚龄12 d Calbindin-D28k表达量极低;胚龄14 d到胚龄16 d表达量增加;胚龄16 d到胚龄18 d表达量无显著性变化;胚龄18 d到生后7 d表达量明显增加;生后7 d到生后14 d,Calbindin-D28k表达量减少.生后14 d到生后40 d,Calbindin-D28k表达量无显著性差异.结论 从胚龄12 d到生后7 d期间Calbindin-D28k表达的逐渐增强与小鼠肾钙离子转运能力的完善可能有一定的关系.
关键词： Calbindin-D28k 小鼠 肾发育 -
成纤维细胞生长因子受体2在小鼠肾发生发育中的表达
目的 观察成纤维细胞生长因子受体2(FGFR2)在小鼠肾发生发育中的表达规律和定位,探讨FGFR2与小鼠肾发生发育的关系.方法 应用免疫组织化学技术和蛋白印迹技术(Western blotting)对胚龄12、14、16、18 d和生后1、7、14、21、40 d小鼠肾组织中FGFR2的表达进行定性观察和定量分析.结果 FGFR2在生肾区输尿管芽微弱表达,在生后肾组织及各期肾小体未见表达.随着肾脏发育成熟,FGFR2主要表达于远端小管,且远直小管表达较强,远曲小管表达较弱;近端小管和集合管无阳性表达.蛋白印迹检测显示随着胚日龄的增加,FGFR2在肾组织的表达量逐渐增多.结论 推测FGFR2在肾组织的表达可能与远端小管的发育密切相关.
关键词： 成纤维细胞生长因子受体2 肾发育 小鼠 -
Calbindin-D28k在胚胎期小鼠肾组织的表达
目的 观察Calbindin-D28k在胚胎发育不同时期小鼠肾组织中的表达规律,探讨Calbindin-D28k在胚胎小鼠肾发育中的作用.方法 应用免疫荧光技术及蛋白印迹技术(Western blotting)对胚龄10、12、14、16、18 d小鼠肾组织中Calbindin-D28k的表达进行定性观察和半定量分析.结果 Calbindin-D28k在胚龄12 d胎鼠肾输尿管芽开始微弱表达,之后随胚龄增加其表达量逐渐增加.胚龄12 d在输尿管芽表达;胚龄14 d在输尿管芽Y型分支表达;胚龄16 d在榆尿管芽壶腹表达,且在S小体与输尿管芽壶腹连接处有少量表述;胚龄18 d定位于连接小管、皮质集合管上皮细胞胞浆内.结论 推测Calbindin-D28k可能对胚胎小鼠肾集合管系的发育有一定作用.
关键词： Calbindin-D28k 肾发育 小鼠 -
小鼠胚胎肾程序性细胞死亡行为的超微结构变化
目的:观察小鼠胚胎肾发育过程中程序性细胞死亡行为的超微结构变化.方法:应用透射电子显微镜技术对不同胚龄(E12、14、16、18 d)胎鼠的肾程序性细胞死亡进行系统观察.结果:在小鼠胚胎肾中,细胞凋亡多见,出现在肾发育的各个时期和各个结构中,程序性坏死和副凋亡少见,只出现在发育中的肾单位内.程序性细胞死亡的结局包括被吞噬、被血流带走和经尿液排出.结论:细胞凋亡、程序性坏死和副凋亡构成了小鼠胚胎肾发育过程中的程序性细胞死亡,以细胞凋亡为主,程序性坏死和副凋亡为辅.肾发育过程中程序性死亡的细胞尸骸经尿液排出是一个与肾结构特征有关的处理方式.
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层黏连蛋白和纤维连接蛋白在肾发育中的表达
目的:观察层黏连蛋白(LN)和纤维连接蛋白(FN)在小鼠肾发育中的时空性表达,探讨其与肾发育的关系.方法:采用免疫组织化学技术,结合免疫印迹法,检测不同胚龄及生后日龄小鼠肾组织LN和FN的表达及其含量变化.结果:LN在输尿管芽、各期肾小体、肾小管及集合管的基底膜处均有表达,并随肾的发育其表达量逐渐增加；FN在除逗号小体以外的各期肾小体、肾小管和集合管的基底膜处均有表达,随肾的发育其表达量逐渐增加.结论:LN和FN可能对小鼠肾发育以及成熟肾各结构的维持起重要作用.
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小鼠胚胎肾细胞凋亡与胀亡的超微结构
目的:观察小鼠胚胎肾发育中细胞凋亡与胀亡的超微结构.方法:应用透射电子显微镜对不同胚龄大鼠肾进行了系统观察.结果:作为细胞程序性死亡的胀亡出现在发育的肾中,但与凋亡相比出现的频率不高.凋亡与胀亡的不同仅在于细胞质的表现.结论:在肾发育中细胞凋亡仍然为主要的程序性细胞死亡,胀亡只处于辅助地位.
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斑马鱼在足细胞研究中的应用及其进展
模式生物斑马鱼已广泛应用于肾发育和疾病的研究。斑马鱼肾结构、功能、细胞组成类型均与人类肾相似，此外，斑马鱼肾发育迅速，基因编辑技术成熟，易于进行高通量基因功能筛查研究，是肾发育和疾病研究的理想模式生物。足细胞损伤是肾小球疾病发生发展的关键环节，是导致蛋白尿、肾小球硬化及肾功能进行性恶化的重要病理基础。文中将简述斑马鱼肾结构功能，斑马鱼肾滤过功能评估方法，斑马鱼足细胞损伤模型，以及斑马鱼应用于足细胞研究的新进展。
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成纤维细胞生长因子受体4在人发育肾和病理肾中的表达
目的 观察成纤维细胞生长因子受体4(Fibroblast growth factor receptor4,FGFR4)在人发育肾组织和儿童常见肾脏疾病中的表达,研究成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)及其受体(FGFR4)在人发育肾和病理肾中的作用,为肾脏病理发生机制研究提供新思路.方法 采用免疫组化法分析FGFR4.在18例8～34周龄胎儿肾组织和82例儿科常见肾脏疾病,包括原发性肾病综合征、急性肾炎、紫癜性肾炎、单纯性血尿的表达,并作与肾脏病理积分的相关性分析.结果 ①肾发生带内FGFR4表达微弱,肾囊泡和S型小体的上支和中间支,即原始肾小管上皮细胞部位有微弱表达,间充质、压缩间充质细胞未见表达,输尿管芽及其末端壶腹和C-期足细胞表达不明显.M-期肾小球和近端小管无阳性细胞染色,远端小管和集合管表达较为明显.②所有病理切片均存在FGFR4不同程度阳性的表达,较正常对照组明显增加,其中肾小球区表达微弱,主要在足细胞部位;肾小管区表达较为强烈,主要部位在远端小管,表达密集部位的小管结构明显异常,表现为细胞萎缩、管腔扩大,尤其部分近端小管更为明显.③原发性肾病综合征与其他3种肾脏疾病的各部位FGFR4表达均未见明显差异(P＞0.05).肾近端小管和远端小管各病理类型间FGFR4表达差异无显著性,足细胞FGFR4表达在紫癜性肾炎组明显高于其他各病理类型组(P＜0.05).④相关性分析发现,近端小管FGFR4表达与肾小管病理积分呈正相关,其他各部位表达均与病理积分呈负相关(均P＜0.05).结论 FGF-FGFR4 对早期肾单位的形成可能不起关键作用,而是与其后期较成熟阶段肾小管和集合管发育的调控有关.FGFR4 可能参与儿童原发性肾病综合征、急性肾炎、紫癜性肾炎、单纯性血尿的病理发生,表达程度增多与肾脏病理损害有一定关系,表达适度增多有利于足细胞和肾小管损伤修复,过表达则可能加重病理损害.
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大鼠肾发育中的β-catenin表达
目的 探讨大鼠肾发育中β-catenin的定性及定量表达.方法 采用免疫组织化学和蛋白质印迹法(Westem blot)测定胚龄18和20 d的胎鼠和生后0、1、3、5和7d的仔鼠肾组织内β-catenin的表达及含量变化.结果 免疫组织化学法显示,β-catenin主要在生肾区的输尿管芽、逗号小体、S小体和皮质迷路中的远端小管表达,而近端小管表达微弱.Western blot检测显示β-catenin的表达从胚龄18 d(E18 d)到生后7 d(P7 d)逐渐减少.结论 β-catenin在小鼠生肾区和远端小管的发育中发挥重要作用.
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先天性肾缺如及发育不全的分子机制研究进展
先天性肾缺如(renal agenesis,RA)及发育不全(renal dysplasia,RD)是先天性肾脏及尿路畸形(congenital anomalies of the kidney and urinary tract,CAKUT)中常见、严重的形式之一,部分患者可隐匿进展至终末期肾衰竭,故越来越多的研究者致力于其机制的研究.除物理及化学因素外,遗传因素在发病机制中的地位备受重视.近年来,通过对基因敲除小鼠模型及包括RA或RD畸形综合征的研究,研究者发现众多参与后肾发育调控网络的基因缺陷均可导致RA或RD.本文从人类肾脏胚胎发育的角度,结合文献,综述RA及RD的有关分子机制研究的进展.
