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钙结合蛋白Calbindin-D28k在遗传性高钙尿结石大鼠肾组织中的表达及其作用
目的 研究钙结合蛋白Calbindin-D28k在遗传性高钙尿结石(GHS)大鼠肾脏中的表达,并探讨其在特发性高钙尿症发病中的作用.方法 分别取16只GHS大鼠与16只正常对照组(NC)大鼠新鲜肾脏组织,Western印迹检测Calbindin-D28k蛋白表达水平,实时荧光定量PCR检测其基因表达水平.结果 GHS大鼠Calbindin-D28k蛋白表达水平显著高于NC大鼠(4值分别为0.49±0.02和0.20±0.01,P＜0.05),GHS组Calbindin-D28k mRNA表达水平是NC组的1.21倍[2-(△△CT)值分别为1.21和1.0,P＞0.05].结论 Calbindin-D28k的表达上调可能是由GHS大鼠的维生素D受体高表达和高尿钙所引起,在尿钙重吸收中起重要作用,但不是导致特发性高钙尿症的关键分子.
关键词： 尿路结石 钙结合蛋白质类 特发性高钙尿症 Calbindin-D28k -
Calbindin-D28k与肌动蛋白在人健康及龋坏牙齿中的分布
目的探讨Calbindin-D28k与肌动蛋白在健康和龋坏人恒牙中的分布相关性及意义.方法用免疫组化方法分别检测Calbindin-D28k与肌动蛋白在正常、中龋和深龋人牙中的表达并观察比较.结果正常组Calbindin-D28k在前期牙本质远髓2/3区域染色阳性,肌动蛋白在成牙本质细胞及位于矿化牙本质中的细胞突呈阳性;中龋组位于前期牙本质中的成牙本质细胞突Calbindin-D28k与肌动蛋白均呈强阳性,Calbindin-D28k在病损区前期牙本质全层呈阳性且较正常组明显增强;深龋组Calbindin-D28k染色部位主要位于成牙本质细胞核.结论在第三期牙本质形成活跃的成牙本质细胞中Calbindin-D28k与肌动蛋白的分布变化具有一致性,均与牙本质基质的分泌有关.
关键词： Calbindin-D28k 肌动蛋白 成牙本质细胞 第三期牙本质 -
小鼠肾发育中Calbindin-D28k的定量分析
目的 观察Calbindin-D28k在小鼠肾发生发育中的表达规律.方法 应用蛋白印迹技术对各组小鼠肾Calbi-ndin-D28k的表达进行定量栓测.结果 胚龄12 d Calbindin-D28k表达量极低;胚龄14 d到胚龄16 d表达量增加;胚龄16 d到胚龄18 d表达量无显著性变化;胚龄18 d到生后7 d表达量明显增加;生后7 d到生后14 d,Calbindin-D28k表达量减少.生后14 d到生后40 d,Calbindin-D28k表达量无显著性差异.结论 从胚龄12 d到生后7 d期间Calbindin-D28k表达的逐渐增强与小鼠肾钙离子转运能力的完善可能有一定的关系.
关键词： Calbindin-D28k 小鼠 肾发育 -
Calbindin-D28k在胚胎期小鼠肾组织的表达
目的 观察Calbindin-D28k在胚胎发育不同时期小鼠肾组织中的表达规律,探讨Calbindin-D28k在胚胎小鼠肾发育中的作用.方法 应用免疫荧光技术及蛋白印迹技术(Western blotting)对胚龄10、12、14、16、18 d小鼠肾组织中Calbindin-D28k的表达进行定性观察和半定量分析.结果 Calbindin-D28k在胚龄12 d胎鼠肾输尿管芽开始微弱表达,之后随胚龄增加其表达量逐渐增加.胚龄12 d在输尿管芽表达;胚龄14 d在输尿管芽Y型分支表达;胚龄16 d在榆尿管芽壶腹表达,且在S小体与输尿管芽壶腹连接处有少量表述;胚龄18 d定位于连接小管、皮质集合管上皮细胞胞浆内.结论 推测Calbindin-D28k可能对胚胎小鼠肾集合管系的发育有一定作用.
关键词： Calbindin-D28k 肾发育 小鼠 -
成年大鼠小脑Purkinje神经元不表达神经元特异性的钾离子氯离子共转运体2
目的:观察神经元特异性标记物钾离子氯离子共转运体2(KCC2)在成年大鼠小脑皮质的表达.方法:成年SD大鼠,4%多聚甲醛灌注固定,取脑,冷冻切片,KCC2和小脑Purkinje神经元标记物Calbindin-D28K在小脑的免疫荧光双标,激光共聚焦显微镜观察.结果:KCC2在颗粒细胞层神经元有丰富的表达,但在Purkinje神经元表达很弱.结论:神经特异性的KCC2可能不是成年大鼠的Purkinje神经元的离子型γ-氨基丁酸受体发挥抑制性作用的主要因素.
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钙结合蛋白calbindin-D28k在人输卵管组织的表达
本研究旨在探讨育龄妇女输卵管中钙结合蛋白calbindin-D28k(CaBP-D28k)的表达和变化.33例月经规律、有正常生育史的育龄妇女,因子宫肌瘤、子宫腺肌症行子宫切除术(一并切除输卵管),输卵管取材均包括峡部、壶腹部和伞部,按月经周期分为增生早期组6例,增生中期组5例、增生晚期组5例,分泌早期组7例,分泌中期组5例和分泌晚期组5例.采用免疫组织化学法和逆转录聚合酶链反应法检测CaBP-D28k在人输卵管组织中的表达.结果显示,人输卵管组织中存在CaBP-D28k蛋白及mRNA表达.CaBP-D28k蛋白表达于输卵管上皮细胞的胞浆中,在月经周期同一时期,输卵管峡部、壶腹部、伞部的表达无明显差别(P＞0.05).在月经周期中,CaBP-D28k蛋白表达在增牛早、中期低,而在增生晚期和分泌早期明显增高(P＜0.05),分泌中、晚期显著下降(P＜0.05).CaBP-D28k蛋白阳性表达分布在月经周期中出现再分布,在增生早、中期呈灶状或片状弥散分布在胞浆中,增生晚期和分泌早、中期CaBP-D28k蛋白呈聚集的颗粒状集中在细胞顶部,至分泌晚期则仍呈灶状或弥散状分布;CaBP-D28k mRNA表达也随月经周期发生变化,在增生晚期和分泌早朗明显增高(P＜0.05).结果表明,人输卵管组织中存在CaBP-D28k蛋白及mRNA表达,且具有周期性变化.
关键词： 输卯管 Calbindin-D28k 免疫组织化学 逆转录聚合酶链反应 -
过表达calbindin-d28k在卡铂诱导子宫内膜癌细胞凋亡中的作用及机制
[目的]研究过表达钙结合蛋白calbindin-d28k对卡铂诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡的影响及其可能的作用机制.[方法]构建calbindin-d28k基因真核过表达calbindin-d28k质粒,稳定转染子宫内膜癌Ishikawa细胞;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及免疫印迹方法检测细胞中靶基因mRNA及蛋白的表达;MTT法检测不同浓度卡铂作用下子宫内膜癌Ishikawa细胞的存活率Hoechst 33258染色法观察卡铂诱导的子宫内膜癌Ishikawa细胞胞核变化.[结果]卡铂对子宫内膜癌Ishikawa细胞的佳作用浓度为100μg/ml,可显著性上调细胞活性Caspase-3蛋白的表达(P＜0.05);稳定转染组Ishikawa细胞calbindin-d28k mRNA水平上调约10倍,蛋白水平升高约1.6倍(P＜0.05);过表达calbindin-d28k后,卡铂诱导子宫内膜癌Ishikawa细胞的凋亡作用减弱,活性Caspase-3蛋白的表达水平下调约7倍(P＜0.05).[结论]过表达calbindin-d28k蛋白可抑制卡铂诱导的子宫内膜癌Ishikawa细胞的凋亡作用,并与通过下调Caspase-3有关.
关键词： 子宫内膜癌 卡铂 凋亡 Calbindin-D28k -
Calbindin-D28k与肌动蛋白在培养人牙乳头细胞中的共定位
目的 观察Calbindin-D28k与肌动蛋白在体外培养人牙乳头细胞中的共定位情况.方法 采用细胞培养技术和免疫荧光双标记结合激光共聚焦显微镜技术对体外培养人牙乳头细胞中Calbindin-D28k与肌动蛋白进行检测.结果 Calbindin-D28k与肌动蛋白在培养人牙乳头细胞中均有表达,且染色均主要位于胞浆,Calbindin-D28k较肌动蛋白更具普遍性,胞核偶有弱阳性.二者的共定位只发生于核周及近核胞浆,其范围和密度在细胞之间有所差异.结论 Calbindin-D28k与肌动蛋白可能通过相互作用来行使某些特定功能.
关键词： Calbindin-D28k 肌动蛋白 牙乳头细胞 免疫荧光双标记 -
Calbindin-D28k与肌动蛋白在大鼠切牙成牙本质细胞的分布
目的探讨Calbindin-D28k与肌动蛋白在大鼠下颌切牙成牙本质细胞中分布的相关性及其意义.方法用免疫组化方法分别检测Calbindin-D28k与肌动蛋白在大鼠下颌切牙成牙本质细胞中的表达并观察比较.结果大鼠下颌切牙唇侧区域的冠方2/3成牙本质细胞Calbindin-D28k与肌动蛋白表达均为阳性,且都集中于成牙本质细胞突;根尖区和舌侧成牙本质细胞均为阴性.结论 Calbindin-D28k与肌动蛋白在大鼠下颌切牙成牙本质细胞中的分布具有一致性,与牙本质的形成密切相关.
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上皮钙通道基因在维生素D受体和Calbindin-D28k双基因敲除鼠中的变化
目的 研究上皮钙通道TRPV5和TRPV6基因与维生素D受体(VDR)和钙结合基因Calbindin-D28k的关系,以及肾钙的重吸收减少是否与TRPV5和TRPV6基因表达减少有关.方法 制备VDR和CaBP-D28k双基因敲除小鼠,普通和高钙食物喂养下,检测野生型鼠(WT),CaBP-D28(-/-),VDR(-/-),和VDR(-/-)/CaBP-D28k(-/-)鼠的体重、摄食量及血尿参数值,用实时RT-PCR的方法检测各种鼠肾脏TRPV5和TRPV6的mRNA水平.结果 普通饮食下,双基因敲除小鼠尿钙的分泌和血清甲状旁腺激素水平更高.TRPV5和TRPV6两者的表达在CaBP-D28k敲除鼠中均无变化,而在VDR敲除鼠和双基因敲除鼠中下调的幅度相当.高钙饮食下,VDR及双基因敲除小鼠的血离子钙水平正常.所有小鼠这两个基因的表达普遍降低,而在VDR和双基因敲除鼠中的表达更低.结论 这些结果证实了上皮钙通道基因受钙和维生素D的调节,CaBP-D28k的缺失对两者无影响.肾钙的重吸收减少与TRPV5和TRPV6基因表达无明显关系.
关键词： 肾脏 TRPV5基因 Trpv6基因 维生素D受体 Calbindin-D28k -
大鼠脊髓钙调蛋白Parvalbumin和Calbindin-28KD阳性神经元的形态与分布特征
目的 观察证实钙调蛋白Parvalbumin( PV)和Calbindin-28KD (CB)阳性神经元在大鼠脊髓不同节段不同区域内的形态及分布特征.方法 成年雄性SD大鼠常规灌注固定,取第5～8颈髓、3～6胸髓和1～5腰髓节段;振动切片之后进行免疫组化PAP单标记；光镜观察阳性神经元的形态和分布特征、并进行计数和测量;用Excel软件对阳性神经元数量、胞体大小、突起数量进行统计处理.结果 PV阳性神经元主要存在于后角的Ⅱ层和胸核、中间带外侧、中间内侧核、前角的Ⅷ层；CB阳性神经元主要存在于后角Ⅰ～Ⅱ层、中间带,前角的Ⅷ～Ⅸ层之间.后角细胞较中间带及前角细胞数量多,胞体小,突起少.在不同区域,两种阳性神经元的细胞数量,胞体大小,突起数目都存在统计学差异(P＜0.05)；而在不同节段同一区域的比较中,只有腰前角PV阳性神经元的胞体比较大(P＜0.05).结论 PV阳性神经元在胸核及中间内侧核的聚集以及阳性纤维在薄楔束和后角Ⅱ层胶状质内的密集分布提示其与机体痛觉传入、本体感觉及内脏感觉的联系;CB阳性神经元在前角Ⅷ～Ⅸ层之间的特征性分布说明其与闰绍细胞功能有关；两种钙调蛋白在脊髓不同节段之间的形态及分布基本无差别提示它们的功能并没有特异地对应于躯体或内脏.
关键词： 脊髓 Parvalbumin Calbindin-D28k -
钙结合蛋白Calbindin-D28K在人健康和龋坏牙齿中免疫定位
目的：探讨Calbindin-D28K(CaB)在牙髓损伤修复过程中的作用。方法：用免疫组化ABC法观察CaB在健康和龋坏人恒牙牙髓中的表达，并用图像分析系统进行半定量分析。结果：CaB在正常和龋病牙髓中成牙本质细胞、前期牙本质、血管内皮细胞及神经纤维中均有表达。在中龋和深龋组部分牙髓细胞CaB弱阳性表达。中龋组成牙本质细胞数目增多，胞浆、胞突及部分胞核强阳性。深龋组前期牙本质层变薄，成牙本质细胞空泡变性，见单层扁平的成牙本质样细胞，胞浆及核染色强阳性。成牙本质细胞浆中CaB含量在中、深龋组明显增加。血管内皮细胞中三组间CaB含量无显著性差异。结论：CaB可能在牙髓细胞向成牙本质样细胞分化及修复性牙本质和反应性牙本质形成过程中起重要作用。
关键词： Calbindin-D28k 牙髓 龋病 免疫组化 图像分析 -
钙结合蛋白Calbindin-D28K在人牙胚发育过程中的表达
目的:研究人牙胚不同发育时期Calbin din-D28K(CaB)的表达,以期分析CaB在人牙体硬组织形成过程中的作用,为探明人牙齿矿化过程中经细胞钙转导机制提供实验依据.方法:免疫组化ABC染色. 结果:人牙胚蕾、帽状期成釉器无CaB的表达;钟状早期成釉器的内釉细胞及部分牙乳头表面处于分化状态的细胞弱阳性染色;钟状晚期成釉器的成釉细胞、成牙本质细胞及部分胞核呈现强阳性染色.结论:CaB参与了人釉质及牙本质的形成过程,并且在人牙胚发育过程中的CaB表达具有时间特异性及细胞特异性.
关键词： Calbindin-D28k 免疫组化 牙胚 人 -
钙结合蛋白Calbindin-d28k在雌(女)性生殖中的作用
钙结合蛋白Calbindin-d28k(CaBP-d28k)是一种维生素D依赖性钙结合蛋白,参与了多种生殖事件.本文综述了CaBP-d28k的结构特点,在雌(女)性生殖系统的表达、作用及其调节.
关键词： 钙结合蛋白 Calbindin-D28k 女性 生殖 -
人卵巢组织中钙结合蛋白Calbindin-d28k蛋白和基因的表达
目的:分析钙结合蛋白Calbindin-d28k(CaBP-d28k)在人卵巢组织中的表达.方法:收集人卵巢组织标本23例,采用免疫组织化学方法和逆转录聚合酶链反应法检测CaBP-d28k在人卵巢中的蛋白及mRNA表达.结果:人卵巢中存在CaBP-d28k蛋白及其mRNA表达,CaBP-d28k蛋白定位于卵泡中的卵母细胞、颗粒细胞,以及少量的卵泡膜细胞和黄体中的粒黄体细胞和膜黄体细胞的胞浆中.卵泡各时期CaBP-d28k蛋白阳性表达强度由弱渐强依次为原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡.结论:人卵巢中多种细胞表达钙结合蛋白CaBP-d28k,其表达随卵母细胞成熟而增强.
关键词： 卵巢 Calbindin-D28k 免疫组织化学 逆转录聚合酶链反应
