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CD40对烟草烟雾暴露肺气肿小鼠肺部CD8+T细胞毒性功能的影响
目的 探讨CD40对烟草烟雾暴露肺气肿小鼠肺部CD8+T细胞毒性功能的影响.方法 40只雄性C57小鼠按随机数字表法随机分为CI40+/+对照组、CD40+/+烟熏组、CD40-/-对照组、CD40-/-烟熏组4组,烟熏组采用烟草烟雾暴露24周建立小鼠肺气肿模型.各组肺组织分别采用HE染色观察肺部病理改变并计算肺泡平均内衬间隔;免疫组织化学法检测CD8+T细胞和穿孔素+、颗粒酶B+细胞百分比;实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测穿孔素、颗粒酶B、白细胞介素(IL)-27mRNA表达;酶联免疫吸附(ELISA)法检测IL-27细胞因子水平.结果 CD40+/+烟熏组肺组织明显破坏,可见大量炎症细胞浸润;CD40-/-烟熏组肺组织破坏及炎症细胞浸润程度较CD40+/+烟熏组轻.CD40+/+烟熏组肺泡平均内衬间隔显著高于CD40+/+对照组、CD40-/-对照组和CD40-/-烟熏组[(37.2±3.6)比(24.0±3.4)、(22.5±2.4)、(29.9±1.7) μm](均P＜0.05);CD40-/-烟熏组高于CD40+/+对照组及CD40-/-对照组(均P＜0.05).CD40+/+烟熏组CD8+、穿孔素+、颗粒酶B+细胞百分比[(16.3±2.3)％、(11.4±2.1)％、(10.7±1.9)％]均显著高于CD40+/+对照组[(8.3±1.6)％、(5.1±1.2)％、(4.6±1.0)％]、CD40-/-对照组[(6.4±1.5)％、(4.3±1.0)％、(4.2±1.0)％]、CD40-/-烟熏组[(8.6±1.7)％、(5.6±1.3)％、(5.5±1.3)％](均P＜0.05).CD40+/+烟熏组穿孔素、颗粒酶B、IL-27 mRNA相对表达量[(20.3±7.3)、(18.3±12.3)、(2.2±0.7)]均显著高于CD40+/+对照组[(9.4±4.8)、(10.6±3.8)、(1.3±0.6)]、CD40-/-对照组[(8.1±3.1)、(7.7±3.5)、(1.1±0.5)]、CI40-/-烟熏组[(12.9±6.2)、(10.4±4.6)、(1.5±0.4)](均P＜0.05).CI40+/+烟熏组细胞因子IL-27水平显著高于CID40+/+对照组、CD40-/-对照组、CD40-/-烟熏组[(3 242 ±754)比(1 627 ±710)、(1 600±680)、(1 850±583)ng/L](均P＜0.05).结论 CD40基因敲除可以抑制烟草烟雾暴露肺气肿小鼠肺部CD8+T细胞毒性功能,减轻肺气肿程度.
关键词： TNF受体相关因子3 CD8阳性T淋巴细胞 肺气肿 小鼠 -
CD40对烟草烟雾暴露小鼠肺组织Foxp3+Treg细胞的影响
目的 观察烟草烟雾暴露下CD40对小鼠肺内叉头/翼状螺旋转录因子阳性调节性T细胞(Foxp3+ Treg)的影响.方法 野生型与CD40-/-C57BL/6小鼠各20只,分别按随机数字表法分为两组,即:野生型对照组、野生型烟熏组与CD40-/-对照组、CD40-/-烟熏组,每组各10只.烟熏组香烟烟雾暴露24周建立小鼠肺气肿模型,HE染色观察小鼠肺组织的改变,计算肺泡平均内衬间隔(MLI).免疫组化法观察肺组织中Foxp3+细胞百分数,实时定量PCR与Western印迹法检测肺组织中Foxp3 mRNA与蛋白的表达.酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组小鼠肺组织中白细胞介素(IL)-10,IL-35水平.结果 CD40-/-烟熏组MLI显著低于野生型烟熏组[(30.0±1.7)比(37.3±3.7)μm],高于CD40-/-对照组[(23.2±2.5)μm],野生型烟熏组显著高于野生型对照组[(22.2±1.7) μm](均P ＜0.05).CD40-/-烟熏组肺组织中Foxp3+细胞数量均显著高于野生型烟熏组和CD40-/-对照组[(16.89±0.75)％比(9.65 ±0.74)％和(13.58±0.51)％],野生型烟熏组显著低于野生型对照组[(12.13±0.81)％](均P ＜0.05).CD40-/-烟熏组肺组织中Foxp3的mRNA与蛋白表达量均显著高于野生型烟熏组和CD40-/-对照组,野生型烟熏组显著低于野生型对照组(均P＜0.05).CD40-/-烟熏组肺组织匀浆中IL-10水平均显著高于野生型烟熏组和CD40-/-对照组[(231±25)比(80±31)和(183±29)ng/L],野生型烟熏组显著低于野生型对照组[(192±37)ng/L](均P＜0.05).CD40-/-烟熏组肺组织匀浆中IL-35水平均显著高于CD40-/-对照组、野生型对照组、野生型烟熏组[(208±29)比(118 ±29)、(148±36)、(137±37)ng/L](均P＜0.05).结论 敲除CD40基因可促进烟草烟雾暴露小鼠肺内Treg细胞分化,阻断CD40-CD40配体通路可能有助于改善烟草烟雾暴露所致的肺气肿改变.
关键词： TNF受体相关因子3 T淋巴细胞 调节性 肺气肿 小鼠
