首页 > 文献资料
-
宫颈癌组织中survivin与BCL-X表达及其相关性
目的 研究宫颈癌组织中 survivin、BCL-X的表达及其相关性.方法 用免疫组化SP法检测survivin、BCL-X在10例正常宫颈组织及51例宫颈癌组织中的表达.结果 Survivin在正常宫颈组织中不表达,在宫颈癌组织中表达阳性率为64.71%,Survivin表达阳性率与宫颈癌病理分级与临床分期呈正相关.Survivin表达阳性率与宫颈癌组织中 BCL-X表达正相关.结论 Survivin异常表达引起的凋亡抑制在宫颈癌发生、发展中起一定作用,其过表达提示宫颈癌预后不良.宫颈癌组织中survivin的表达与BCL-X的表达呈正相关.
-
细胞凋亡与肿瘤化疗的研究进展
化疗中的耐药性是导致肿瘤治疗失败的主要原因,细胞凋亡通路的异常改变是导致肿瘤化疗耐药的重要原因.现通过总结研究凋亡基因与肿瘤化疗的文献,分析凋亡基因,如Caspase、p53、Bax、Fas/FasLX系统、c-myc、Ras等与肿瘤化疗的关系,以及抗凋亡基因,如Bcl-x、bcr/abl、survivin等与肿瘤化疗的关系,为进一步探讨细胞凋亡与肿瘤化疗的关系提供参考.
-
特发性脊柱侧凸椎旁肌组织bcl-2等蛋白表达及细胞凋亡的研究
目的本研究通过比较脊柱侧凸患者胸弯顶点处凸侧、凹侧椎旁肌的bcl-2、Caspase-3及bcl-x表达的差异,以从分子生物学角度探讨椎旁肌在脊柱侧凸中可能的作用机制.方法选择2001年8月至2001年12月间于我院收治的胸椎侧凸畸形患者10例,采用免疫组织化学和Western杂交检测脊柱侧凸凸侧、凹侧椎旁肌组织中bcl-2、Caspase-3及bcl-x基因的表达,采用HE染色和SA染色检测椎旁肌组织肌纤维形态,TUNEL原位检测椎旁肌肌细胞的凋亡情况.结果脊柱侧凸患者凸侧肌肉组织bcl-2、Caspase-3及bcl-x蛋白的表达量均降低,以bcl-2降低为明显.脊柱侧凸患者及正常对照椎旁肌肉组织均存在个别细胞的凋亡,二者无明显差异.凸侧肌纤维比其凹侧及正常对照的肌纤维明显变细.结论神经-肌肉异常所致的椎旁肌的不对称有可能是特发性脊柱侧凸发生发展的一个重要因素,而这种不对称很可能与bcl-2、Caspase-3及bcl-x的表达不对称相关.
-
胰岛素对高糖状态下内皮细胞表达bcl-x、bax的影响
目的:探讨高糖状态下胰岛素对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达bcl-xL、bax的影响.方法:分离HUVEC.以不同浓度的葡萄糖、胰岛素孵育72 h,提取细胞RNA.内皮细胞表达bcl-xL、bax采用半定量逆转录聚合酶链反应(SQ-RT-PCR)法.结果:高浓度葡萄糖(33.3 mmol/L)使HUVEC表达bel-xL减少(P＜0.05),bax表达增加(P＜0.05);加入生理浓度(20.0 mU/L)或高浓度(1000.0 mu/L)胰岛素(INs)后bcl-xL表达增加(P＜0.05),加入高浓度INS后bax表达减少(P＜0.05).结论:高糖可使HUVEC表达bcl-xL减少,bax表达增加;胰岛素能加强bcl-xL减弱bax表达.提示胰岛素可以通过干预bcl-xL、bax表达影响内皮细胞凋亡.
-
局灶性脑缺血再灌流过程中凋亡细胞相关基因的研究
目的为了研究NO在局灶性脑缺血再灌流过程中对神经细胞的作用机制，特别是NO与细胞凋亡的关系。方法利用RT-PCR方法观察了细胞凋亡相关基因Bcl-x和ICE在NNLA干预后局灶性脑缺血鼠脑组织中的表达水平。结果局灶性脑缺血再灌流模型中凋亡相关基因的检测结果显示：(1）Bcl-x的表达在手术侧缺血期呈下降趋势，在再灌流期呈升高趋势；非手术侧改变不明显。(2）小剂量NNLA具有抑制Bcl-x表达的作用。(3）ICE的表达在缺血期表现为下降，而再灌流期则改变不明显；非手术侧均有升高趋势。结论在局灶性脑缺血再灌流过程中，Bcl-x通过其表达量的增加，具有抑制细胞凋亡的作用。同时Bcl-x 还有可能通过抑制ROS激活ICE的过程或直接抑制ROS的生成达到抑制凋亡的作用，所以ICE的表达水平下降则可能与Bcl-x升高有关。NO在局灶性脑缺血再灌流过程中同时影响Bcl-x和ICE的表达，这种影响与其对病理改变的影响是一致的。
关键词： 一氧化氮 神经细胞凋亡 BCL-X 白细胞介素-1β转换酶 -
SLE病人外周血白细胞Bcl-2和Bcl-X mRNA表达研究
测定SLE病人外周血白细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bcl-X mRNA表达量,探索凋亡在SLE发病中的作用和意义.采用荧光标记RT-PCR半定量方法,以β-actin为内参照,对50例SLE病人、24例RA病人和24例正常人外周血白细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bcl-X mRNA表达水平进行了检测.结果显示,SLE病人Bcl-2表达低于正常人(1.3728±1.2905 Vs 1.8418±1.01579,P＜0.01),Bcl-Xs表达明显高于正常人(3.1126±2.0136 Vs 1.3275±0.6619,P＜0.0001),亦高于RA病人(3.1126±2.0136 Vs 1.3061±0.5307,P＜0.0001),Bc1-xl无明显改变;而RA病人Bcl-2表达低于正常人(1.0066±0.5821 Vs 1.8418±1.01579,P＜0.01),Bcl-Xs和Bcl-xl表达与正常人相比均无统计学差别.SLE病人外周血白细胞抗凋亡的基因表达降低而促进凋亡的基因表达增加,提示凋亡在SLE发病中可能具有一定作用和意叉.
-
大鼠液压脑损伤后Bcl-2、Bcl-x和Bax蛋白表达的改变
目的：探讨液压脑损伤后凋亡相 关基因bcl-2、bcl-x和bax在蛋白水平的表达变化规律及神经细胞凋亡的分子生物学机制 。方法：应用免疫组化方法分别检测大鼠中型液压脑损伤后不同时程B cl-2、Bcl-x和Bax蛋白表达情况。结果：伤后6 h，打击侧海马CA 3区Bcl-2和Bcl-x蛋白表达显著下降，Bax的表达无明显变化，（Bcl-2+Bcl-x）/Bax比 率下降主要由于前者下降所致。伤后1～3 d，Bax蛋白表达显著增加，Bcl-2和Bcl-x的表 达下降相对缓慢，（Bcl-2+Bcl-x）/Bax比率同样减小。结论：bc l-2基因家族参与了液压脑损伤后神经细胞凋亡，该基因家族不同成员的表达变化与神经 细胞凋亡有关。
-
新生大鼠缺氧缺血脑损伤后bcl-x mRNA的表达
目的探讨新生大鼠脑缺氧缺血后死亡相关基因bcl-x mRNA表达的变化及其与脑缺氧缺血所致细胞凋亡的关系.方法通过建立新生大鼠缺氧缺血性脑病动物模型,应用快速竞争性RT-PCR技术对缺氧缺血后不同时间点的缺血侧大脑组织中bcl-x mRNA的表达进行半定量分析,并在相同缺血基础上观察缺氧1.5小时、2.5小时和3.5小时对bcl-x mRNA表达的影响.结果缺氧缺血后,新生大鼠脑bcl-xs(bcl-x短型) mRNA 的表达自缺氧结束后即刻即有明显增强,24小时达高峰,此后逐渐下降, 7天时回复至正常基线水平.随着缺氧时间的延长即缺氧程度的加重,bcl-xs mRNA的表达有增强趋势,缺氧1.5小时组、2.5小时组及3.5小时组之间bcl-xs mRNA表达水平的差异均具显著性意义(P<0.01).bcl-xs mRNA的表达高峰与缺氧缺血后脑细胞凋亡的高峰时相相吻合.缺氧缺血对bcl-xl(bcl-x长型) mRNA的表达无影响.结论缺氧缺血可诱导新生大鼠脑bcl-xs mRNA表达增强.在一定范围内,其表达强度与缺氧程度成正相关.bcl-xs过表达在缺氧缺血后脑细胞凋亡的调控过程中起着一定的作用.
-
声带早期癌DNA分析及p53、Ki-67和bcl-X的表达
目的以声带原位癌和早期微小浸润癌为主要研究对象,探讨声带从良性到恶性病变各阶段中DNA倍体及基因表达的变化,并结合其临床生物学行为,深入了解其实质.方法对18例声带肿瘤性病变做激光扫描细胞DNA分析并进行随访.对62例声带病变,以声带原位癌(CIS)和早期微小浸润癌(EMIC)为主,与声带浸润性癌、声带息肉分别分为3组,检测p53、Ki-67和bcl-X的基因表达并作各组间对比.结果 DNA倍体分析表明CIS、EMIC和浸润性癌不同,前两者几乎都是二倍体,而后者90%为异倍体;随访结果示CIS、EMIC病人无1例死于肿瘤; 还发现DNA二倍体和有DNA凋亡峰的肿瘤患者预后好,而肿瘤呈异倍体的患者预后差.免疫表型:p53蛋白在声带肿瘤性病变中表达异常高;86%的CIS、EMIC和91%的浸润性癌都表达p53蛋白,阳性指数分别为2.35和2.26,同时此两组的Ki-67的阳性平均指数也分别为29%和27%,与声带息肉差异有显著性(P<0.01).另一方面,bcl-X的表达从良性病变到恶性病变呈递减态势,以浸润性癌中下降明显,与息肉病变差异有显著性(P=0.002).结论声带良性病变、CIS、EMIC及浸润性癌在基因表达和DNA倍体上表现有所不同,提示它们各自之间有本质的差别,声带原位癌的表现界于良恶性之间,在治疗上有必要提倡保守疗法.另外,p53和Ki-67的共同检测对癌变和癌的诊断有很大意义.
-
反义寡核苷酸处理伊马替尼耐药慢粒细胞后Bcl-x剪接异构体的变化
目的 探讨反义寡核苷酸Vivo-Morpholinos(vMO)处理对伊马替尼(Imatinib,IM)耐药慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)细胞中Bcl-x基因选择性剪接的影响.方法 将IM(1μM)组、荧光标记的vMO、IM联合vMO组(IM+vMO)、 空白对照组分别与IM耐药CML细胞株K562/G01细胞进行共培养48h,通过RT-PCR和Western Blot分别检测K562/G01细胞胞内Bcl-x剪接异构体Bcl-xL/Bcl-xS mRNA和蛋白比值变化.结果 分别与IM组和vMO组处理K562/G01细胞相比,IM+vMO组的Bcl-xL mRNA和蛋白表达量显著降低,同时Bcl-xS mRNA和蛋白表达量明显升高,而对照组中Bcl-x剪接异构体变化不明显.结论 K562/G01细胞在vMO处理后Bcl-xL/Bcl-xS mRNA和蛋白比值显著下调.
-
Fyn诱导Bcl-X选择性剪切调控胰腺癌细胞凋亡的机制研究
目的:明确非受体酪氨酸激酶Fyn在胰腺癌侵袭转移中的作用;探究Fyn是否参与Bcl-X基因的选择性剪切的调控,并阐明其分子机制.方法:对三种侵袭转移能力不同的胰腺癌细胞进行Fyn激酶活性测定,明确Fyn活性与胰腺癌侵袭转移能力之间的关系.将携带激酶活性缺失的KD-Fyn(KinaseDead-Fyn)的腺病毒转染BxPC3胰腺癌细胞,Transwell侵袭实验、TUNEL法分别检测抑制Fyn活性前后BxPC3侵袭能力以及凋亡水平的改变.RT-PCR检测Bcl-X基因两种剪切体比例的变化.结果:转染KD-Fyn以后,Fyn激酶活性明显下降,降低至正常水平的1/2以下.抑制Fyn活性,转染组穿膜细胞数由原来的108± 14降为54±7,明显降低了BxPC3胰腺癌细胞侵袭运动能力,促进凋亡.RT-PCR证实,抑制Fyn活性明显改变了凋亡相关基因Bcl-X的选择性剪切方式.Bcl-X(s)/Bcl-X(L)的剪切比例由0.57±0.08改变为2.12±0.15.在裸鼠成瘤实验中,转染Fyn的裸鼠成瘤能力为100％(12/12),而转染KD-Fyn的裸鼠成瘤能力降低为16.7％ (2/12),抑制Fyn活性可以明显抑制BxPC3胰腺癌细胞在裸鼠中的成瘤能力.结论:抑制Fyn的激酶活性,可以下调胰腺癌细胞的侵袭转移能力,而这种作用是通过影响Bcl-X基因选择性剪切方式改变,进而影响胰腺癌细胞凋亡实现的.
-
完全弗氏佐剂抑制NOD鼠胰岛β细胞凋亡及其机制
目的:探讨完全弗氏佐剂(complete Freund's adjuvant,CFA)对非肥胖糖尿病(nonobese diabetic,NOD)鼠胰岛β细胞凋亡及凋亡相关基因Fas,FasL和Bcl-x表达的影响.方法:将4周龄NOD雌鼠随机分为CFA组(n=5)和生理盐水(NS)对照组(n=5),给CFA组鼠后脚板注射50 μLCFA,对照者鼠后脚板注射等量NS.监测血糖,若血糖连续2 d≥11.1 mmol/L即诊断为糖尿病.当NOD鼠发生糖尿病或至30周龄时,处死动物,取胰腺组织制成薄切片,HE染色观察胰岛炎,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记(TUNEL)及ABC免疫组织化学双标记染色观察并计数凋亡的胰岛β细胞,ABC免疫组织化学法染色观察并记数Fas,FasL和Bcl-x表达阳性细胞.结果:至NOD鼠30周龄时,CFA处理组鼠无1只发生糖尿病,对照组鼠有3只发生糖尿病;CFA处理组的胰岛炎积分低于NS对照组(1.820±0.962 vs.3.020±1.040,P＜0.05);CFA处理组胰岛β细胞凋亡率、Fas阳性细胞率、FasL阳性细胞率均低于NS对照组[(10.2±2.8)%vs.(15.9±6.5)%,(54.9±14.5)%vs.(75.7±12.9)%,(20.3±10.4)%vs.(27.9±12.0)%,P＜0.05],Bcl-x阳性细胞率高于NS对照组[(74.9±10.7)%vs.(66.0±18.3)%,P＜0.05].结论:CFA能够减轻NOD鼠胰岛β细胞凋亡,其机制与减少促凋亡基因Fas和FasL表达及增加抑制凋亡基因Bcl-x表达有关.
-
四逆汤诱导延迟预适应抗心肌缺血再灌注后心肌细胞凋亡的机制探讨
目的:探讨四逆汤预处理后诱导的心肌延迟预适应能否抑制心肌缺血再灌注(MI/R)后心肌细胞凋亡的发生及其可能机制.方法:SD大鼠分为正常对照组、假手术组、缺血再灌注组、四逆汤预处理组.缺血再灌注组采用经典大鼠冠脉结扎,缺血1 h,再灌1 h.四逆汤预处理组给予四逆汤灌胃(5 ml·kg-1·d-1)连续3天,末次灌药24 h后心肌缺血1 h,再灌1 h.流式细胞仪测定心肌细胞凋亡率,RT-PCR法检测bcl-xl mRNA/bcl-xs mRNA的表达情况并进行线粒体内凋亡诱导因子(AIF)的Western blotting分析.结果:四逆汤预处理24 h后可以减少MI/R后心肌细胞凋亡率,升高bcl-xl mRNA/bcl-xs mRNA表达的比值,减少AIF自线粒体的释放.结论:四逆汤诱导的延迟预适应可以减少MI/R造成的细胞凋亡,机制与其保护线粒体有关.
-
胰泰复方对慢性胰腺炎胰腺纤维化大鼠Bcl-x和p53表达的影响
目的 观察胰泰复方对慢性胰腺炎胰腺纤维化大鼠Bcl-x和p53表达的影响.方法 将大鼠分成4组,空白组、模型组、中药对照组、中药治疗组.空白组腹腔注射0.9％氯化钠注射液;其余各组腹腔注射L-精氨酸,制备慢性胰腺炎大鼠模型.造模成功,各组实行相应治疗2个月.治疗结束后,采用免疫组织化学法检测各组大鼠胰腺组织的Bcl-x和p53蛋白表达.结果 模型组、中药对照组和中药治疗组中的Bcl-x蛋白表达水平显著低于空白组;中药治疗组中的Bcl-x蛋白表达水平高于中药对照组和模型组;模型组、中药对照组和中药治疗组中的p53蛋白表达水平显著高于空白组;中药治疗组中的p53蛋白表达水平低于中药对照组和模型组(均P＜ 0.05或P＜ 0.01).结论 胰泰复方可以减缓慢性胰腺炎胰腺纤维化进程,其分子机制可能与Bcl-x蛋白表达上调及p53蛋白表达下调相关.
-
bcl-x、 bax基因表达与肝细胞癌临床病理特征的关系
目的研究凋亡相关基因 bcl-x及 bax在肝细胞癌 (hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达与 HCC临床病理学特征的关系及其意义。方法采用免疫组织化学方法，检测石蜡包埋的 HCC标本中凋亡相关基因 bcl-x及 bax的表达。结果在 40例 HCC中， bcl-x和 bax阳性者分别为 20 例和 19例； 14例肝硬变 bcl-x和 bax 阳性者分别为 12例和 11例。 bcl-x和 bax 在 HCC细胞中的表达均低于肝硬变 (均 P＜ 0.05)； bcl-x和 bax在高中分化型 HCC细胞中的表达均高于低分化型。 AFP≤ 400μ g/L的患者二者的表达均高于 AFP＞ 400μ g/L的患者。在临床分期为Ⅰ～Ⅱ期的 HCC细胞中的表达均高于Ⅲ期 , 彼此间均有显著性差异；而在男性与女性患者间 , 在年龄＞ 60岁与＜ 60岁患者间，均无显著性差异 (均为 P＞ 0.05)。凋亡相关基因 bcl-x及 bax在 HCC细胞的表达呈正相关 (r=0.5602, P＜ 0.001)。结论凋亡相关基因 bcl-x和 bax在 HCC细胞中的表达，对肝癌细胞的凋亡具有调节作用 , 并与 HCC的分化程度、临床分期和 AFP的水平有关。
-
急性白血病患者bcl-x基因表达的初步探讨
目的 探讨凋亡调控基因bcl-x在急性白血病(AL)患者中的表达状态及其临床意义.方法 应用半定量反转录聚合酶链反应技术检测bcl-x(bcl-xL、bcl-xs)在44例AL患者AL细胞中mRNA水平的表达.结果 抑凋亡基因bcl-xL在AL初治组中的表达比完全缓解和正常对照组明显增高(P＜0.01),同时在复发患者中的平均表达水平是初治患者的1.96倍(P＜0.01).促凋亡基因bcl-xs在各组间的表达差异无统计学意义(P＞0.05).bel-xL基因高度表达(bcl-xL≥0.50)在复发组的发生率为66.7%,比初治组(20.7%)明显增高(P＜0.01).bcl-xL基因高度表达患者临床治疗无效率为86.7%,与非高度表达组(19.2%)比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 bcl-xL的高度表达可作为AL患者不良预后的监测指标;bcl-xL的高表达可以降低AL的化疗敏感性而且是AL复发的高危因素,AL的发病可能与抑凋亡基因bcl-xL的高表达有关.
