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上皮间质转化相关蛋白在结肠癌及同期肝转移组织中的表达差异
目的 研究结肠癌伴随肝转移患者原发灶及转移组织中E钙黏素,N黏黏素和波形蛋白的表达差异.方法 选取62例结肠癌患者,分为3组:无转移的结肠癌组(n=42),伴肝转移的结肠癌原发灶组(n=20)和肝转移灶组(n=20).用荧光定量PCR、Western blot和免疫组化法检测E钙黏素,N-钙黏素和波形蛋白的表达,及其与结肠癌临床病理特征的关系.结果 伴肝转移组结肠癌较无转移结肠癌组、E-钙黏素表达下调(P<0.01),N-钙黏素和波形蛋白表达上调(P<0.05).结肠癌原发灶与肝转移灶相比较,E-钙黏素表达平均吸光度值0.10±0.01比0.06±0.02(P<0.01);N钙黏素表达平均吸光度值0.07±0.02比0.09±0.01(P<0.05);波形蛋白表达平均吸光度值0.06±0.01比0.09±0.02(P<0.01).E钙黏素、N钙黏素和波形蛋白的表达与TNM分期和淋巴结转移均密切相关(P<0.05).结论 E-钙黏素,N-钙黏素和波形蛋白在结肠癌及伴随肝转移组织的表达差异对其预后可能具有重要意义.
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海藻糖对低温保存皮肤中E钙黏素表达的影响
目的 将非渗透性低温保护剂海藻糖用于人类皮肤的低温储存,观察海藻糖对冻存皮肤组织中E钙黏素的影响,探讨海藻糖的低温保护作用.方法 新鲜成人皮肤组织分为新鲜对照组、海藻糖-二甲基亚砜(T-D)组、二甲基亚砜-丙二醇(D-P)组均在-196 ℃液氮冻存7 d,第14天复温,免疫组织化学染色对各组间皮肤进行比较.结果 与新鲜皮片组相比,0.5 mol/L T-D能够很好保护皮肤组织,E钙黏素的蛋白表达量与新鲜皮肤组相似.结论 海藻糖与二甲基亚砜联合应用能较好地保护皮肤组织E钙黏素,其对皮肤组织的保存效果优于传统的低温保护剂.
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妇科肿瘤与E钙黏素启动子甲基化研究进展
E钙黏素是细胞间重要的黏附因子,介导同型细胞间的黏附,其基因启动子区域异常甲基化可影响基因的转录进而影响其蛋白的表达,在肿瘤的浸润和转移中起到了一定的作用.近年来在对妇科恶性肿瘤的多项研究中发现了E钙黏素启动子区域异常甲基化,并与宫颈癌、子宫内膜癌、卵巢癌及滋养细胞肿瘤的发生发展有关,而改变DNA甲基化状态将极有可能成为将来肿瘤基因治疗的候选靶点.就E钙黏素基因启动子甲基化与妇科肿瘤相关性研究进展进行综述.
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结肠癌原发灶及其淋巴结转移灶中E钙黏素和基质金属蛋白酶9的表达
目的 研究E钙黏素(E-cad)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)在结肠癌原发灶及其淋巴结转移灶中的表达,探讨其与结肠癌侵袭和转移的关系.方法 采用免疫组织化学方法检测E-cad和MMP-9在128例结肠癌原发灶和淋巴结转移灶中的表达.结果 未伴淋巴结转移的原发灶中E-cad的高表达率明显高于伴淋巴结转移的原发灶(P ＜ 0.05),MMP-9的高表达率明显低于伴淋巴结转移的原发灶(P ＜ 0.05).原发灶E-cad的高表达率同分化程度相关(P ＜ 0.05).在不同组织学类型及高、中度分化的结肠癌中,原发灶中E-cad的高表达率均明显高于转移灶(P ＜ 0.05).在不同分化程度伴淋巴结转移原发灶中,E-cad和MMP-9的高表达率均存在负相关性(P ＜ 0.05).结论 E-cad和MMP-9的表达均与结肠癌的组织分化程度和侵袭、转移相关,检测二者的表达将有助于判断结肠癌的转移和预后.
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浸润性乳腺癌组织中E-cad基因表达和启动子甲基化的检测及其意义
目的:观察乳腺癌组织中E钙黏素(E-cad)蛋白表达与乳腺癌临床特点、病理学特征以及E-cad基因启动子甲基化的关系,探讨其作为乳腺癌早期诊断和预后评估指标的可行性和临床意义.方法:收集62例乳腺癌组织标本和20例乳腺增生组织标本,采用免疫组织化学法检测E-cad蛋白表达情况;采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测E-cad基因启动子甲基化状态.结果:E-cad蛋白阳性表达以细胞膜为主,乳腺癌组织中E-cad蛋白的阳性表达率(51.6％)低于乳腺增生组织(80.0％)(P＜0.05);乳腺癌组织中E-cad基因甲基化率(62.9％)高于乳腺增生组织(35.0％)(P＜0.05);乳腺癌组织中,E-cad蛋白表达水平与肿瘤临床分期、组织分化程度和淋巴结转移有关联(P＜0.05);与患者年龄、肿瘤大小、部位及雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、表皮生长因子受体2(Her-2)的表达无关联(P＞0.05);E-cad蛋白阴性表达的乳腺癌组织中,E-cad基因启动子甲基化率(76.7％)高于E-cad蛋白阳性表达的乳腺癌组织(50.0％)(P＜0.05).结论:启动子甲基化导致的E-cad蛋白表达降低与乳腺癌发生发展有关联,E-cad可能成为乳腺癌患者早期诊断和预后评估的指标.
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化学治疗联合靶向COX-2 siRNA对大鼠胃癌组织JAM-1、E-cadherin及β-catenin蛋白表达的影响
目的 探讨化学治疗联合靶向环氧合酶-2(COX-2)siRNA对大鼠胃癌组织连接附着分子1(JAM-1)、E钙黏素(E-cadherin)及β-连环素(β-catenin)蛋白表达的影响.方法 45只健康SD大鼠按照随机数字表法分为观察组、阴性对照组和对照组,每组各15只.观察组采用化学治疗联合COX-2 siRNA转染的胃癌细胞接种干预,阴性对照组采用化学治疗联合阴性siRNA转染的胃癌细胞接种干预,对照组采用未经siRNA转染的胃癌细胞接种干预,比较3组大鼠胃癌组织的 COX-2、JAM-1、E-cadherin 及β-catenin蛋白表达水平.结果 经COX-2 siRNA转染的胃癌SGC7901细胞凋亡率显著高于阴性siRNA转染组(P= 0.000)和未经转染的SGC7901组(P= 0.000);观察组大鼠肿瘤体积抑制率[(75.8±5.4)%]显著高于阴性对照组[(11.9±4.7)%](P= 0.000);观察组COX-2蛋白表达显著低于阴性对照组(P= 0.000)和对照组(P= 0.000);观察组大鼠肿瘤组织JAM-1、E-cadherin及β-catenin蛋白表达阳性率显著高于阴性对照组和对照组(P<0.05).结论 化学治疗联合靶向COX-2 siRNA可有效抑制大鼠胃癌组织中的COX-2蛋白表达,从而抑制肿瘤组织侵袭转移相关黏附分子 JAM-1、E-cadherin、β-catenin蛋白表达,提高治疗效果.
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丹参注射液对高糖诱导的大鼠腹膜间皮细胞的过氧化损伤及E钙黏素和α平滑肌肌动蛋白表达的影响
目的 研究丹参注射液对高糖作用下的大鼠腹膜间皮细胞过氧化损伤及E钙黏素和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响.方法 体外培养大鼠原代腹膜间皮细胞,第3代细胞经无血清培养基同步培养24 h后分为正常对照组、高糖诱导组(25 mg/mL葡萄糖)、甘露醇对照组(25 mg/mL甘露醇)和丹参干预组(15 mg/mL丹参注射液+25 mg/mL葡萄糖),测定各组细胞内丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性；采用RT-PCR技术和Western blotting方法检测各组细胞内E钙黏素和α-SMA的mRNA和蛋白表达.结果 与正常对照组比较,高糖诱导组细胞内ROS和MDA含量增高,而SOD活性降低,E钙黏素mRNA和蛋白的表达减少,α-SMA mRNA和蛋白的表达增加,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).与高糖诱导组比较,丹参干预组细胞内ROS和MDA含量减少,SOD活性增强,E钙黏素mRNA和蛋白的表达增加,而α-SMA mRNA和蛋白的表达减少,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 丹参注射液可明显减轻高糖诱导的腹膜间皮细胞的过氧化损伤,其对细胞内E钙黏素和α-SMA表达的调控作用可能与延缓腹膜纤维化作用有关.
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Foxm1对非小细胞肺癌细胞迁移、浸润的影响
目的:探讨Foxm1在非小细胞肺癌细胞EMT过程中的作用进而研究其对非小细胞肺癌细胞迁移和浸润能力的影响.方法:采用Western blot和RT-PCR技术检测不同非小细胞肺癌细胞系中Foxm1和EMT相关因子的表达水平.小RNA转染技术干扰H1299细胞中Foxm1的表达.Transwell试验观察Foxm1对非小细胞肺癌细胞迁移浸润能力的影响.结果:Foxm1在四种非小细胞肺癌细胞中均有表达,且H1299表达量相对较高,H1650表达量相对较低.分别以上述两种细胞为试验对象,结果显示Foxm1的表达与EMT相关分子E-cadherin、Vimentin的表达呈明显相关性.CCK-8结果显示:Foxm1抑制剂Thiostrepton处理72h后对H1299、H1650的IC50值分别为1.21μmol/L和3.08μmol/L.Thiostrepton处理和干扰后,Foxm1和Vimentin的表达量明显下降.Transwell小室迁移试验24h后,空白组、阴性对照组和干扰组穿膜细胞数分别为42.6±6.9,36.3 ±4.2,4.6±1.1；侵袭试验24h后,空白组、阴性对照组和干扰组穿膜细胞数分别为12.3 ±3.4,10.0 ±1.4,3.1 ±2.6.结论:Foxm1在非小细胞肺癌细胞中可能通过调节EMT进程来促进肿瘤细胞的迁移和浸润能力.
