首页 > 文献资料
-
流感病毒A/PR/8/34重配母本株高免疫原性HA蛋白制备及鉴定
制备流感病毒经典重配过程中所需的A/PR/8/34母本株血凝素蛋白(Hemagglutinin,HA)抗血清.A/PR/8/34流感病毒灭活纯化后经菠萝蛋白酶消化.5%~20%蔗糖连续密度梯度离心法纯化HA蛋白.单向免疫扩散法(Single Radial Immunodiffusion,SRID)筛选目的蛋白.SDS-PAGE法鉴定目的蛋白.纯化的A/PR/8/34 HA蛋白免疫兔子制备抗血清,血凝抑制试验(Hemoglutination Inhibition Assay,HI)测定HA抗血清效价,经SRID法鉴定HA抗血清纯度.成功制备了高免疫原性A/PR/8/34 HA蛋白;兔抗血清HI滴度可达10240,SRID法鉴定为高纯度HA抗血清.制备了流感病毒经典重配中关键试剂,摸索成功整套技术方法,为我国自主研发季节性流感疫苗株奠定了基础.
-
脊髓灰质炎灭活疫苗
1 背景 1955年美国引入脊髓灰质炎(脊灰)灭活疫苗(IPV)并广泛应用,60年代初口服脊灰疫苗(OPV)出现后,IPV的用量迅速下降,占美国全年疫苗总用量的不足2%.1978年一种含有更强抗原物质、更加有效的IPV研制成功,这就是现在使用的唯一的一种IPV.第1批这种高免疫原性的疫苗于1987年在美国批准使用,几个国家的研究结果显示,增效的IPV比以往的IPV对儿童和成人有更强的免疫原性.
-
流感病毒经典重配中X-157母本株HA抗血清制备
目的 制备流感病毒经典重配过程中所需的X-157母本株血凝素蛋白(Hemagglutinin,HA)抗血清.方法 X-157株流感病毒灭活纯化后经菠萝蛋白酶消化HA蛋白,蔗糖连续密度梯度离心法纯化,SDS-PAGE法鉴定纯化HA蛋白,免疫兔子收集抗血清,血凝抑制试验法(Hemoglutination Inhibition assay,HI)测定抗血清效价,单向免疫扩散法(Single Radial Immunodiffusion,SIRD)鉴定HA抗血清纯度.结果 成功制备了高免疫原性X-157株HA蛋白,兔抗HA血清HI滴度可达2560,SIRD鉴定为高纯度HA抗血清.结论 制备了流感病毒经典重配中关键试剂,摸索成功整套技术方法,为我国自主研发季节性流感疫苗株奠定了基础.
-
重组变应原研究开发的新策略
变应性疾病一般指Ⅰ型过敏性疾病,表现为变应性眼鼻炎、变应性哮喘等,影响了世界人口的15%~25%,血清抑制治疗(SIT)是惟一病因治疗.近十几年来,分子生物学技术的发展解决了许多重要变应原DNA的分离、编码、表达和纯化等问题,合成的重组变应原去除了粗制天然变应原提取物中的无关物质,减低了血清抑制治疗的风险,但仍存在免疫效果不理想等问题.近年随着基因工程技术应用于变态反应学,合成高免疫原性而变应原性低的重组低致敏性变应原或衍生物疫苗(hypoallergenic allergy vaccines)成为重组变应原研究开发的新策略[1].本文对近年应用于诊断和治疗的新型重组变应原及衍生物简介如下.
-
RhD阴性献血员的筛查及其在输血医学上的应用
自40年代Rh血型系统被发现以来,因其和新生儿溶血病(HDN)及溶血性输血反应有关,在输血医学中,其意义仅次于ABO血型系统,而Rh抗原因其高免疫原性而具临床价值[1].我们通过用血清学微孔法对郑州地区的54392名献血员进行了RhD检测,共筛选出RhD阴性献血员133人,取得了较好的社会价值.
-
一维和二维电泳分析斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原
人不是斯氏狸殖吸虫的适宜宿主,幼虫寄生后可引起多种肺外型感染,病原学检查困难[1],临床诊断主要依靠免疫学检查,除检测方法外,诊断用抗原的特异性是影响检测效果的关键因素.故分析和检测并殖吸虫的特异抗原组分,在并殖吸虫病的免疫诊断和抗原的分离纯化方面均具有重要意义.本文采用一维、二维电泳和免疫印迹技术分析斯氏狸殖吸虫成虫可溶性抗原,试图鉴别特异的、高免疫原性斯氏狸殖吸虫蛋白和多肽,为开发特异、敏感的免疫学诊断方法、研制抗斯氏狸殖吸虫药物和疫苗提供参考资料.
-
乙肝五项指标检出模式与HBV-PreS1检测的对比观察及临床应用
乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)感染人体后引起的疾病.HBV基因组是一个环状、部分双链的DNA分子,分为S、C、P和X基因区,编码相应的前S1、前S2和S蛋白.这三种蛋白均为HBsAg的组成成份.前S1蛋白位于病毒颗粒表面,具有高免疫原性;前S2蛋白上有多聚人血清白蛋白的结合位点,参与HBV感染肝细胞过程[1].本文通过对187例乙肝病人进行乙肝五项指标和HBV-PreS1检测,以观察两者相关性和临床应用价值.
-
高免疫原性胶质瘤细胞疫苗的体外抗瘤作用
热休蛋白70(HSP70)与主要组织相容性抗原复合体I类分子(MHC-I)是参与内源性抗原提呈的两类重要分子[1,2].本研究旨在观察模型HSP70及MHC-I类分子高表达人多形性胶质母细胞瘤GBM U251细胞疫苗体外诱导的抗瘤作用.
-
靶向小衣壳蛋白 L2的具有广泛保护性的VLP 型 HP V疫苗的临床前优化
理想的预防人类乳头瘤病毒( HPV)疫苗应该具备以下特性,即能够提供广泛的保护性和持久的免疫应答,能够应对所有高危人乳头瘤病毒类型,单一剂量注射后即产生免疫效果,在无需制冷的条件下能够长期保存。基于以上要求,作者已经研制出由噬菌体病毒样颗粒( VLP s )组成的HP V候选疫苗,该噬菌体病毒样颗粒具有广泛的HPV16次要衣壳蛋白L2来源的中和表位。免疫接种16L2 VLPs可诱导出高效价、能够引起广泛交叉中和抗体,该中和抗体能够抵抗多种类型的HPV。在该项研究中,作者介绍了两种改进的候选疫苗,以期提高疗效和在发展中国家的临床适用性。首先评估抗原剂量和加强免疫对免疫原性的作用。用含明矾或不含明矾的剂量为2~25μg的16L2-MS2 VLPs免疫小鼠,结果显示,各种剂量下16L2-MS2 VLPs均具有高度的免疫原性,且小浓度明矾具有佐剂作用。虽说加强免疫可以提高抗体效价,实际上单一免疫接种也能够引起持续时间较长的强烈抗体应答。作者也研制出一种用于提高疫苗稳定性的方法。使用喷雾干粉设备,以多糖和氨基酸的结合物作为蛋白质的稳定剂,制造出L2 VLP s的干粉型疫苗。喷雾干燥型的L2 VLP s并不影响VLP s再建物的完整性和免疫原性。喷雾干燥型的VLP s在室温下稳定,37℃可以保存一个月以上,且该VLPs具有高免疫原性。总之,这些增强改进措施的目的在于,促进实现下一代以VLP 为基础的HP V 疫苗的制备,强调美国和全球在疫苗经济负担能力方面的差异,并且对疫苗在农村或偏远地区人群中的普及性进行评估。