欢迎来到360期刊网!
学术期刊
  • 学术期刊
  • 文献
  • 百科
电话
您当前的位置:

首页 > 文献资料

  • 志贺菌TaqMan-MGB探针实时荧光聚合酶链反应快速检测方法的应用研究

    作者:梅玲玲;朱敏;张俊彦;占利

    目的 建立志贺菌TaqMan-MGB探针实时荧光PCR快速检测技术,为从患者、食品和环境中快速分离和鉴定志贺菌提供技术支撑.方法 根据志贺菌ipaH基因序列设计一对特异性引物和TaqMan-MGB探针;通过对PCR扩增体系和反应条件的优化,建立志贺菌TaqMan-MGB探针实时荧光PCR快速检测方法;用添加已知志贺菌浓度的样本验证方法敏感性;用志贺菌标准菌株、分离株以及大肠埃希菌、沙门菌、副溶血性弧菌、金黄色葡萄球菌等致病菌验证方法特异性.结果 用本研究建立的志贺菌TaqMan-MGB探针实时荧光PER检测方法检测志贺菌,其Ct值与模板浓度的对数值具有很好的对应关系(Y=-3.93×log(X)+37.34,R=0.999),低检测浓度为30 cfu/ml,3株志贺菌标准株,30株志贺菌分离株检测结果均为阳性;而沙门菌、副溶血性弧菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌等91株其他细菌的Ct值均>35或扩增曲线成一平滑直线.与常规分离鉴定方法比较差异无统计学意义(P>0.05,χ2=0.27).对于纯菌和食品样晶整个检测过程仅需2 h和10 h.结论 志贺菌TaqMan-MGB探针实时荧光PCR检测技术具有特异性强,敏感性高,易操作等优点,有很好的应用前景和研究价值.

  • TaqMan-MGB探针实时荧光定量-聚合酶链反应检测肺炎支原体方法的建立

    作者:顾一心;陶晓霞;刘立雍;张建中;赵飞

    目的 建立敏感、特异的TaqMan-MGB探针实时荧光定量-聚合酶链反应(real-time PCR)快速检测方法,为临床标本中肺炎支原体快速检测提供技术支持.方法 选取肺炎支原体重复序列RepMP23中保守区域设计、合成特异性扩增引物和TaqMan-MGB探针,建立并优化real-time PCR检测方法.对优化后的方法使用标准浓度核酸进行扩增效率、灵敏度及特异度评价,并与已报道的肺炎支原体荧光PCR方法进行比较.结果 本研究建立的TaqMan-MGB探针荧光PCR方法对肺炎支原体的检测限为0.2 cfu,比普通TaqMan real-time PCR检测限(3~5 cfu)提高了一个数量级.其检测标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线性关系(R2=0.999).用该方法扩增23种呼吸道常见病原菌染色体及人类染色体,结果均为阴性,特异度为100%.结论 TaqMan-MGB探针real-time PCR方法可快速、灵敏、特异地检测肺炎支原体,有很好的应用前景与价值.

  • 实时荧光定量聚合酶链反应检测血清2型猪链球菌的研究

    作者:白雪梅;张少敏;孙晖;叶长芸

    目的 基于TaqMan-MGB探针实时荧光定量聚合酶链反应(Real.time PCR)技术,建立针对血清2型猪链球菌的快速检测方法.方法 针对血清2型猪链球菌的csp2J基因序列,应用Beacon Designer 7.0,设计了引物和TaqMan-MGB探针,建立Real-time PCR检测方法;把目的 片段克隆到pMD18-T载体制作标准曲线;以常见致病菌及条件致病菌验证引物探针的特异性;制备血液模拟标本评价本方法在临床标本中的应用.结果 由标准曲线可知该方法可以检测到100拷贝/反应体系的目的 基因,特异性检测显示只有血清2型猪链球菌有荧光信号,其他常见致病菌及条件致病菌均无荧光信号,血液模拟标本中3.9×10<'2>cfu/ml的细菌含量可被检出.结论 以csp2J为目的 基因建立的血清2型猪链球菌Real-time PCR检测方法灵敏度高、特异性好、快速,可用于临床感染患者标本的初步筛查.

  • TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR检测克罗诺杆菌MMS基因方法的建立

    作者:谭翰清;蔡建生;谭海芳;林凤;程洁萍

    目的 建立克罗诺杆菌的特异、灵敏的TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR检测方法.方法 根据GenBank公布的克罗诺杆菌MMS基因高保守序列,设计特异引物和TaqMan-MGB探针,建立和优化反应体系,用25种其他常见致病菌评价反应体系的特异性,用克罗诺杆菌MMS基因重组质粒构建实时荧光定量PCR标准曲线,对重组质粒、纯菌和人工模拟污染样本进行灵敏度试验,并与FDA推荐的TaqMan探针实时荧光PCR比较,配对t检验分析两种方法对Ct值和荧光强度的差异.结果 采用TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR检测克罗诺杆菌MMS基因仅需40 min,与25种非目标菌无交叉反应,仅对克罗诺杆菌有特异性扩增;所构建方法线性关系良好,相关系数r2=0.999,扩增效率为99.972%,对重组质粒、纯菌、人工模拟污染样品标本的灵敏度分别达10拷贝/反应、3.8和38 cfu/ml;与FDA推荐的TaqMan探针实时荧光PCR相比,TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR的Ct值更小、△Rn值更高,灵敏度和分辨率差异均有统计学意义(Ct:t=-14.406,P<0.01;△Rn:t=14.230,P <0.01).结论 本研究建立的TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR反应体系能够快速、特异、灵敏地检测克罗诺杆菌MMS基因,可用于婴幼儿奶粉中克罗诺杆菌的快速筛查和鉴定,具有较大的的应用价值和推广价值.

  • TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR联合检测难辨梭菌菌属基因及毒素基因方法学的建立

    作者:邵冬华;季娜;梁国威;刘静

    目的:建立一种简便、快速难辨梭菌菌属鉴定及其毒素基因筛查的荧光定量PCR检测方法。方法采用TaqMan-MGB探针,通过real-time PCR分析系统,同时检测难辨梭菌菌属基因磷酸丙糖异构酶(Tpi)、A毒素(TcdA)、B毒素(TcdB)及缺失部分基因的A毒素(TcdAT),从特异度、灵敏度及其抗干扰性等方面评价该方法,并联合全自动酶联荧光免疫系统(VIDAS)检测50例临床不明原因腹泻病例粪便标本探讨其应用价值。结果难辨梭菌非产毒株Tpi基因(tpi)的检测下限是6×10-2 CFU/μl,产毒株tpi、tcdA、tcdB、tcdAT的检测下限为6×10-1 CFU/μl;难辨梭菌非产毒株tpi检测下限批内、批间变异率分别为2.1%和2.3%;产毒株tpi、tcdA、tcdB、tcdAT的检测下限批内、批间变异率依次为3.0%和3.4%、2.9%和3.2%、5.3%和5.7%、2.7%和2.8%。临床常见分离菌株及梭菌属其他细菌对检测无干扰。50例不明原因腹泻病例粪便标本中,采用TaqMan-MGB探针实时荧光PCR与VIDAS酶标免疫检测39例阴性标本其符合率为100%;6例两方法检测均为阳性;3例VIDAS酶标免疫检测为可疑及2例为阴性,经TaqMan-MGB探针实时荧光PCR检测为A-/B+菌株。结论建立的TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR具有高通量、高灵敏度和重复性好的特性,且可筛查携带缺失部分基因的TcdA难辨梭菌菌株。

  • 流行性腮腺炎病毒荧光定量逆转录-聚合酶链反应快速检测方法的建立

    作者:冯燕;卢亦愚;严菊英;史雯;周敏

    目的 建立以TaqMan-MGB荧光探针为特点的荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),用于检测流行性腮腺炎(腮腺炎)病毒(MuV)核酸.方法 针对MuV血凝素(H)基因保守区域设计特异性引物与TaqMan-MGB荧光探针,筛选并优化荧光定量RT-PCR反应体系与反应条件,用以提高方法的特异性、灵敏度与准确性;并通过体外克隆技术建立MuV基因拷贝数定量分析模型.结果 引物与探针的优化浓度分别为880mmol/L和280mmol/L,具有良好的保守性和特异性,与其它呼吸道病毒均无交叉反应;方法检测灵敏度为10拷贝/反应,相当于0.01TCID50,标准曲线线性范围为107~10拷贝/反应;从病毒核酸提取至检测完成仅需3h左右,操作简便,重现性好.结论 TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR方法特异、敏感、快速,为MuV的早期快速检测提供了一种新的检测技术.

  • 实时荧光PCR检测Nam Dinh病毒方法的建立及初步应用

    作者:梁克峰;刘渠;王德全;周健明;金玉娟;陈应坚;李静媚;甘莉萍;杨慧

    目的 建立一种快速、特异检测Nam Dinh病毒(NDiV)的实时荧光PCR方法.方法 根据GenBank和本实验室分离的NDiV进行序列比对,找出保守序列(RdRp)并设计特异引物和TaqMan-MGB探针,通过调整引物、探针浓度,优化其反应条件,对方法做灵敏度、特异性、稳定性实验,以评价反应体系.结果 NDiV的TaqMan-MGB实时荧光PCR检测方法用时短,灵敏度高,低检测下限为0.1PFU.与登革热1~4血清型病毒、流行性乙型脑炎、人呼吸道合胞病毒、轮状病毒、星状病毒、腺病毒无交叉反应,特异性良好;将4份核酸含量不同的标准样品重复检测5次,平均Ct值变异系数范围为1.67%~3.68%,稳定性较高.通过监测,龙岗区蚊虫携带NDiV概率为18.00%.结论 NDiV的TaqMan-MGB实时荧光PCR方法是一种快速、特异、灵敏、稳定性好的方法,可应用于流行病学环境监测,提高病毒的快速检测能力.

  • TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR检测恙虫病东方体方法的建立

    作者:付秀萍;贺金荣;张景山;王景泉

    目的 建立敏感、特异、定量Real-timePCR方法,用于恙虫病东方体的检测.方法 根据恙虫病东方体56 kD外膜蛋白基因序列设计引物和探针,建立实时荧光定量PCR检测方法.结果 建立的TaqMan-MGB探针具有良好的特异性,建立的荧光定量PCR标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线性关系(r=0.99),灵敏性评估发现每个20μlPCR反应管中只要有26个拷贝的目的基因即可被检测到,即低检出浓度为2拷贝/μl,并且具有较好的重复性.结论 建立的荧光定量PCR方法具有很高的特异性和敏感性,可用于恙虫病东方体感染的快速检测.

  • 等位基因特异性引物和TaqMan-MGB探针双抑制野生等位基因扩增的实时荧光定量PCR检测JAK2V617F突变率

    作者:梁国威;邵冬华;何美琳;曹清芸

    本研究建立在外周血基因组DNA中定量检测JAK2V617F突变率的荧光定量PCR检测方法并探讨其临床应用价值.在实时荧光定量PCR分析系统中,应用等位基因突变引物和等位基因野生TaqMan-MGB探针共同抑制JAK2 V617F野生等位基因扩增,从而特异性地扩增JAK2V617F突变等位基因.通过测定不同JAK2V617F突变率标准品及其循环阈值(Ct值),建立JAK2 V617F突变率定量测定方法,并对89例表观健康人外周血基因组DNA中JAK2V617F突变率进行检测.结果表明,建立的方法定量检测JAK2V617F突变率的下限为0.1%,检测JAK2V617F突变率的批内、批间平均变异率分别为4.1%和6.1%.对89例表观健康人外周血基因组DNA中JAK2V617F突变率检测显示,其中2例为JAK2V617F阳性,突变率分别为0.64%和0.98%.结论:建立的JAK2V617F突变率定量检测方法具有检测灵敏度高和重复性好的特性,适合骨髓增殖性疾病的诊断及疾病进程和疗效监测.本方法检测原理可用于各种单碱基突变率的检测,具有广泛的应用前景.

  • 实时荧光PCR快速检测嗜肺军团菌的研究

    作者:许海红;梅玲玲;朱敏;谢鑫友;金红;杨肃文

    目的 建立TaqMan-MGB探针实时荧光PCR快速检测嗜肺军团菌技术,为临床和环境样品检测嗜肺军团菌提供可实用工具.方法 在对嗜肺军团菌mip序列进行分析、比较基础上,设计一对特异性引物和TaqMan-MGB探针,通过实时荧光PCR反应条件和反应体系的优化,实现对嗜肺军团菌的快速检测;用克隆到pMD-19T载体上的嗜肺军团菌mip基因阳参片段和不同菌株验证方法的敏感性和特异性.结果 当用热裂解法提取DNA,25μl的反应体系中包括上、下游引物(20μmol/L)各0.6μl,探针(20μmol/L)0.4μl,模板DNA 6.0μl,反应条件为预变95℃20 S,变性95℃10 s,退火50℃ 40 s,40个循环时,TaqMan-MGB探针实时荧光PCR技术对嗜肺军团菌mip基因阳参片段低检测浓度为0.71拷贝/μl,其循环阈值(Ct值)与模板浓度具有极好的对应关系(r=0.999);1株嗜肺军团菌标准株、12株嗜肺军团菌分离株的Ct值在13.23~16.04之间,而包括金黄葡萄球菌、鼠伤寒沙门菌、副溶血性弧菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、痢疾志贺菌共计76株其他菌PCR Ct值均大于30;整个检测过程仅需1.5 h.结论 TaqMan-MGB探针的嗜肺军团菌实时荧光PCR检测方法具有特异性和敏感性、易操作、结果准确可靠等优点,可用于嗜肺军团菌检测.

  • 脑膜炎奈瑟菌荧光定量PCR法检测

    作者:杨艳;汪川;苏红卫;汪春梅;刘衡川

    目的 评价新型水解探针(TaqMan-MGB探针)荧光定量PCR法在检测脑膜炎奈瑟菌中的应用价值.方法 分别采用TaqMan-MGB探针荧光定量PCR法、常规PCR法和传统分离培养法检测230例元症状者咽拭子标本,比较3种方法 的检出率.结果 3种方法 的阳性检出率分别为10.43%,6.52%和3.48%;TaqMan-MGB探针荧光定量PCR法的检出率高于常规PCR法和传统分离培养法(P<0.001).结论 TaqMan-MGB探针荧光定量PCR法检测脑膜炎奈瑟菌具有灵敏、特异、快速方便的特点,可为流脑流行病学调查提供一种快速、方便的病原学诊断手段,具有实用价值.

  • 牛副流感病毒3型TaqMan-MGB荧光定量PCR检测方法的建立

    作者:闻晓波;张玲玲;张峣;刘阳阳;倪宏波;冉旭华

    目的 建立检测牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)的TaqMan荧光定量PCR方法.方法 根据GenBank中公布的BPIV3序列,选取P基因上保守区域设计特异性引物及TaqMan-MGB探针.优化反应体系,建立实时荧光定量PCR方法,并对方法的特异性、重复性和敏感性进行验证.结果 标准曲线在104~108 copies/μl范围内具有良好的线性关系,R2达到0.999,斜率为-3.203,扩增效率为105.2%.利用该方法对BPIV3a及BPIV3c进行检测,结果为阳性,对牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)、牛传染性鼻气管炎病毒(infectioils bovine rhinotraeheitis virus,IBRV)进行检测,结果呈阴性.3个浓度质粒标准品,重复3次检测,CV均小于1.5%.建立的方法对质粒的小检出量为1.0×102 copies/μl.结论 建立了能够检测BPIV3a及BPIV3c的TaqMan-MGB探针实时定量PCR方法,该方法特异性较强,重复性及敏感性良好,为早期诊断及定量分析提供了更快速、稳定、可靠的方法.

  • 实时荧光PCR法快速检测乙型肝炎病毒基因YMDD突变株

    作者:陈建;王缦;陈华;王卓莹;华兵

    目的 建立一种敏感、特异、快速的实时荧光PCR定量检测乙型肝炎病毒基因YMDD突变株的方法,为临床治疗提供指导.方法 设计引物和TaqMan-MGB探针,利用TaqMan-MGB探针技术,建立实时荧光定量PCR法.检测临床HBV-YMDD变异标本36份和野生型HBV标本20份,并将其YMDD变异结果与DNA测序结果进行比较.结果 该方法检测灵敏度为101拷贝/μl;特异性为100%;低检测限度为101DNA拷贝/30μl反应体系;实时荧光PCR方法测得YMDD野生株20份,变异株36份,与DNA测序结果完全一致,符合率为100%.结论 应用TaqMan-MGB探针的实时荧光定量PCR方法检测YMDD变异株基因,具有灵敏、特异和精确等优点,对临床监测拉米夫定耐药具有重要意义.

  • TaqMan-MGB探针检测GSTP1外显子5 SNP可行性研究

    作者:张薇;单可人;吴昌学;李毅;肖雁;赵艳;齐晓岚;谢渊;何燕;官志忠;任锡麟

    目的:评估TaqMan-MGB探针基因分型方法检测已知SNP的可行性,并与传统的PCR-RFLP方法比较.方法:高通量的TaqMan-MGB探针基因分型方法已被用来检测单核苷酸多态性(SNP).在321例样本中,同时用TaqMan-MGB探针基因分型方法和PCR-RFLP方法检测GSTP1外显子5 SNP.结果:2种方法所得结果完全一致.野生型(AA)226例(70.4%),杂合子(AG)92例(28.7%),纯合突变型3例(0.9%).结论:TaqMan-MGB探针基因分型方法是一种能快速、高度特异性、高度自动化检测SNP的方法,可用于大规模的基因分型.

  • 阪崎克罗诺杆菌TaqMan-MGB探针实时荧光PCR快速检测技术研究

    作者:黄焘;周蒂;王莉萍

    [目的]建立阪崎克罗诺杆菌TaqMan-MGB探针实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)快速检测方法.[方法]在阪崎克罗诺杆菌保守序列设计一对特异性引物和TaqMan-MGB探针,通过对PCR反应条件和扩增体系的优化,建立阪崎克罗诺杆菌TaqMan-MGB探针实时荧光PCR检测方法;用已知浓度的阪崎克罗诺杆菌验证其敏感性;用阪崎克罗诺杆菌、大肠埃希菌、鸭沙门菌株、柠檬酸杆菌等菌株验证其特异性;用婴幼儿配方粉等食品开展TaqMan-MGB探针实时荧光PCR技术与常规检测方法符合性比较. [结果]本研究建立的阪崎克罗诺杆菌实时荧光PCR检测技术,反应循环(cycle threshold,CT)值与模板浓度的对数值具有良好的对应关系[(Y)=-3.06×log(X)+36.63,R2=0.999],低检测浓度为100 CFU/mL,经36℃增菌8h低检测限可达1 CFU/mL,敏感性较普通TaqMan探针高10倍;11株阪崎克罗诺杆菌CT值均小于30,而大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、柠檬酸杆菌等30株菌株CT值大于30或扩增曲线成一平滑直线;隔天连续5次反应CT值变异系数小于5%;140件不同批次不同婴幼儿配方粉、192件婴幼儿谷物辅助食品检测结果与常规分离培养比较,差异无统计学意义(x2=0.624,P>0.05). [结论]阪崎克罗诺杆菌TaqMan-MGB探针实时荧光PCR快速检测技术具有特异性强、敏感性高、易操作等优点,适用于婴儿配方粉等食品开展阪崎克罗诺杆菌快速检测与监测工作.

  • PTPN22基因1123G>C单核苷酸多态性与系统性红斑狼疮相关性的研究

    作者:冯雪;李永哲;张吉林;秦绪珍;张洋;包书萌;佟大伟;张蜀澜;胡朝军

    为探讨蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型22(protein tyrosine phosphatase nonreceptor 22,PTPN22)基因1123G>C(rs2488457)单核苷酸多态性(SNP)与系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)的相关性.采用Taqman-MGB探针建立了1123G>C位点的实时荧光定量PCR的分型方法,对104例SLE患者、105例其他风湿病患者、101例健康体检者进行分型.同时采用间接免疫荧光法检测抗核抗体(ANA)、抗双链DNA(dsDNA)抗体.结果显示SLE组PTPN22基因SNP CC基因型与其他风湿病组及健康对照组有显著性差异(P<0.05),SLE组PTPN22基因CC基因型(基因频率:0.221)明显高于其他风湿病组(包括AS、SS、PBC组)、健康对照组(基因频率:0.030),其他风湿病组PTPN22基因SNPCC基因型与健康对照组无统计学意义(P>0.05),SLE组C等位基因频率为0.447明显高于其他风湿病组和健康对照组.此结果符合Hardy-Weinberg平衡定律.SLE组PTPN22各基因型ANA、抗dsDNA抗体差异无统计学意义(P>0.05).因而PTPN22基因SNP与SLE患者有一定的相关性,由于SLE患者地区和种族差异,PTPN22基因变异位点可能不同.

  • TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR用于中华按蚊kdr基因突变检测的研究

    作者:白亮;朱国鼎;唐建霞;张超;刘耀宝;李菊林;曹俊;高琪

    目的 建立一种用于中华按蚊杀虫剂抗性相关kdr基因突变检测的实时荧光定量PCR方法.方法 根据中华按蚊kdr基因序列及其L1014位点常见的突变类型设计一对引物和三条TaqMan-MGB探针,对TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR反应体系和条件进行了优化,选择经测序鉴定后的6种中华按蚊kdr基因常见类型对该方法进行验证,并用该方法对50个实验室和113个现场中华按蚊样本进行检测.结果 实时荧光定量PCR方法能对中华按蚊kdr基因6种不同的基因型进行检测,单管法可判断kdr基因L1014是否发生突变,双管法可对具体突变类型进一步鉴别.经检测,50个实验室样本均为野生型纯合体,而113个现场样本中,仅12个样本为野生型纯合体,其余101个样本均发生了L1014F或L1014C突变,突变频率为87.61%.结论 TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR可用于中华按蚊kdr基因L1014位点突变的检测.

  • 实时荧光定量PCR检测CYP2C9*3及VKORC1_C1173T基因多态性方法的建立

    作者:顾梦月;张希根;张楚麟;康楠楠;陈楚圆;刘煜

    建立实时荧光定量PCR法检测人药物代谢基因CYP2C9*3及VKORC1_C1173T多态性,并确定适反应条件.该方法采用TaqMan-MGB(Minor groove binder,小沟结合物)探针技术,针对每个待检测位点设计特定的引物和探针,并优化引物、探针浓度;建立和优化反应体系,设计合理的PCR Enhancer组分;并对TaqMan-MGB探针特异性、敏感性和重复性进行评价,同时对部分实时荧光定量PCR产物样品进行测序验证.结果表明,TaqMan-MGB探针法对2个等位基因检测结果准确,检测方法特异性高;所构建方法线性关系良好(R2≥0.991),扩增效率为95.2%~109.9%,标准曲线斜率为-3 ~-3.5;检测灵敏度可达10拷贝/反应;随机样品TaqMan-MGB探针检测结果与测序结果一致.所建立用于基因多态性检测的TaqMan-MGB探针法具有简便、快速、准确、高效等特点,检测原理可用于各种SNP分型检测,具有广泛的应用前景.

  • GITRL基因SNP-rs2236876分型方法的比较

    作者:吴晶晶;仝佳;陈娟;袁靖;田洁;汤新逸;王胜军

    目的:对3种单核苷酸多态(single nucleotide polymorphism,SNP)分型方法进行比较,选择准确有效的SNP分型方法对GITRL SNP-rs2236876A/G进行基因分型。方法:采用Taqman-MGB探针法,限制性片段长度多态性聚合酶链式反应(cleaved amplification polymorphism sequence-tagged sites,PCR-RFLP )法和直接测序法对 GITRL SNP-rs2236876A/G进行分型并比较。结果:PCR-RLFP法分型结果直接通过电泳图可见,适合少量的实验对象;Taqman-MGB探针法通过不同的荧光区分不同的基因型,适合大量的实验对象;直接测序法交由测序公司测定,样本数量浮动范围较大,费用较高。结论:Taqman-MGB探针法适用于GITRL基因rs2236876A/G基因分型,PCR-RFLP法适用于基因分型结果的验证,直接测序法适用于鉴定有争议的PCR-RFLP法的验证结果。

  • TaqMan-MGB探针对HCV基因的检测及分型研究

    作者:林秀蓉;陈巧绘;林海

    目的 建立快速准确检测丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)常见基因分型方法,为丙型肝炎临床诊断和治疗提供依据.方法 对40例HCV-RNA阳性血清标本,通过逆转录为cDNA后,进行TaqMan-MGB探针检测、分型.结果 HCV-RNA阳性血清40例,共检出39例,其中1b型29例,占74.36%,2a型5例占12.82%,3b型6例占13.38%.结论 所测患者的基因型以1b为主,3b次之,2a相对较低;TaqMan-MGB探针分型的符合率达97.5%.

37 条记录 1/2 页 « 12 »

360期刊网

专注医学期刊服务15年

  • 您好:请问您咨询什么等级的期刊?专注医学类期刊发表15年口碑企业,为您提供以下服务:

  • 1.医学核心期刊发表-全流程服务
    2.医学SCI期刊-全流程服务
    3.论文投稿服务-快速报价
    4.期刊推荐直至录用,不成功不收费

  • 客服正在输入...

x
立即咨询