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  • 猪链球菌血清未分型菌株的荚膜多糖基因簇分析

    作者:邱小彤;郝琴;白雪梅

    目的 从基因水平上探究猪链球菌菌株血清不可分型的原因及cps基因簇序列变异规律.方法 根据GenBank登记号下载并提取41株猪链球菌血清未分型菌株的cps基因簇序列,根据wzy序列确定菌株的cps型别,并与相应血清型标准菌株的cps基因簇进行序列比对研究.结果 41株血清未分型猪链球菌中,共有37株菌的cps型别属于已知血清型.其中18株与其对应的血清型标准菌株的cps基因簇相比出现部分cps基因的插入、缺失、倒转、替换和移码突变等变异;另有19株与其对应的血清型标准菌株的cps基因簇序列相同或相似,除携带血清24型cps基因簇的菌株LSS23、LSS31、LSS37与血清24型标准菌株88-5299A的cps基因簇同源性为96%外,其余16株与其各自的标准菌株的cps基因簇同源性均超过99%.此外,有4株血清未分型菌株属于已知的新cps型别.结论 由于猪链球菌cps基因簇序列变异频繁,导致荚膜多糖抗原型别呈多样化趋势,传统的血清凝集方法无法有效应对,亟需引入更灵敏的分子血清分型技术开展监测.

  • 2006-2016年四川省猪链球菌血清2型多位点序列分型分析

    作者:廖虹瑜;罗隆泽;曾林子;祁腾;杨小蓉

    目的 了解四川省2006-2016年猪链球菌血清2型菌株的分子流行病学特征,分析10年间分离株之间的关联,为四川省人感染猪链球菌病防控提供参考依据.方法 通过聚合酶链反应法扩增猪链球菌基因组上的7个管家基因片段并进行测序,对2006-2016年四川省猪链球菌病例样本中分离的27株猪链球菌血清2型菌株进行多位点序列分型分析.结果 27株猪链球菌血清2型菌株分为2个ST型,其中19株为ST7型,其余为ST1型;2006-2007年以ST7型为主,2007年后主要为ST1型.结论 近年四川省人感染猪链球菌病均为散发,未出现暴发疫情,可能与流行菌株的ST型变化相关.

  • 猪链球菌wzy基因与血清型别的相关性分析

    作者:王建平;杜鹏程;白雪梅;郑翰

    目的 分析wzy基因序列与血清分型相关性,评价基于wzy基因的基因组水平血清分型的可行性.方法 建立了33个已知血清型(1 ~31,33与1/2型)及21种新型cps型别(NCL1 ~ 20与Chz型)的wzy基因的氨基酸序列数据库,用来检索公开发表的767个有传统血清分型结果的基因组序列,以确定它们的分子血清型别,并与其用传统血清分型结果进行比对.结果 767个基因组中,有765个基因组含有1种且仅含有1种数据库中的wzy基因,剩余的2个基因组携带数据库中没有的wzy基因,本研究中将其cps型别命名为NCL21.94.13% (722/767)基因组的分子血清型别与其传统血清分型结果一致.在二者结果有差异的基因组中,其cps基因簇的核苷酸序列与其传统血清分型结果相应的血清型标准菌株cps序列有明显的差异.结论 基因组水平检测血清型特异性的wzy基因的分型策略,显著优于传统的血清分型方法.

  • 猪链球菌的药物敏感性及耐药基因检测

    作者:白雪梅;叶长芸;张少敏;赵爱兰;徐建国

    目的 探讨猪链球菌对各类药物的耐药性及其耐药基因的检测.方法 我们对2005-2007年分离自四川、广西、贵州、广东等地的56株猪链球菌用api-strep生化鉴定条进行生化鉴定,采用微量稀释法进行药物敏感性分析,PCR检测耐药基因.结果 在所检测的13种抗生素中,56株猪链球菌对青霉素、氨苄西林、头孢噻肟、头孢曲松、头孢吡肟、美罗堵南、左旋氟沙星、氯霉素、红霉素、阿齐霉索、克林霉素、万古霉素均敏感,但均对四环素耐药.使用PCR方法检测了编码四环素耐约的tet(K)、tet(L)、tet(M)、tet(D)、tet(Q)等基因,发现所有检测的菌株均携带tet(M)基因.结论 猪链球菌可能在进化过程中获得了tn(M)基因,而tet(M)的扩散可能和在饲养过程中大量使用四环素类药物添加剂有关.

  • 人感染猪链球菌病例1例报告

    作者:杨科;杨继宝;姜永全;罗永平;杨正培;杨军;康中菊

    2005年12月28日14:30分,贵州省黎平县疾病预防控制中心(CDC)接到广西自治区三江县CDC的疫情通报:黎平县村民潘某,在该县中医院住院死亡,疑似为人感染猪链球菌病例.

  • 浙江省金华市首例人感染猪链球菌病流行病学调查

    作者:庞志峰;章光明;吴斌

    对浙江省金华市首例人感染猪链球菌病病例的诊治经过、流行病学史进行调查,总结病例特征并为疾病防控提供建议.病例血液中检出猪链球菌血清2型菌株,临床分型为普通型,感染途径为接触病死猪.建议加强猪链球菌病监测、健康教育及职业暴露人群个人防护.

  • 江苏省苏州市1例人感染猪链球菌病例调查

    作者:赵梦娇;张梦寒;王小龙;周红俊;冯录召;邹燕;张丽杰;陈立凌;张钧

    目的 调查苏州市1例人感染猪链球菌病例的流行病学和病原学特点,为防控提供依据. 方法 现场访谈查看患者的感染途径和感染来源,并进行溯源调查;对患者及80份生猪扁桃体、鼻咽拭子标本中分离的菌株进行VITEK2 compact生化鉴定和聚合酶链式反应检测,检测种属特异性基因(16S rRNA )和4种毒力基因(cps-2J 、sly 、ef和mrp ).结果 经流行病学调查,患者可能在清洗猪肉过程中经手部伤口感染.患者分离株种属特异性16S rRNA基因、毒力基因cps-2J、sly和ef基因均呈阳性.2份猪鼻咽拭子标本经生化鉴定为猪链球菌2型,毒力基因sly呈阳性.结论 该病例可能为偶然感染强毒株.健康猪群猪链球菌2型检出率低、毒力低,不足以威胁健康人群;应保持警惕,做好生猪检疫工作,加强监测和宣传教育,在接触生猪制品时,做好个人防护,防止感染猪链球菌病.

  • 实时荧光定量聚合酶链反应检测血清2型猪链球菌的研究

    作者:白雪梅;张少敏;孙晖;叶长芸

    目的 基于TaqMan-MGB探针实时荧光定量聚合酶链反应(Real.time PCR)技术,建立针对血清2型猪链球菌的快速检测方法.方法 针对血清2型猪链球菌的csp2J基因序列,应用Beacon Designer 7.0,设计了引物和TaqMan-MGB探针,建立Real-time PCR检测方法;把目的 片段克隆到pMD18-T载体制作标准曲线;以常见致病菌及条件致病菌验证引物探针的特异性;制备血液模拟标本评价本方法在临床标本中的应用.结果 由标准曲线可知该方法可以检测到100拷贝/反应体系的目的 基因,特异性检测显示只有血清2型猪链球菌有荧光信号,其他常见致病菌及条件致病菌均无荧光信号,血液模拟标本中3.9×10<'2>cfu/ml的细菌含量可被检出.结论 以csp2J为目的 基因建立的血清2型猪链球菌Real-time PCR检测方法灵敏度高、特异性好、快速,可用于临床感染患者标本的初步筛查.

  • 姜黄素抑制猪链球菌诱导的炎症反应的体外研究

    作者:温晓婷;黄元铭;王智昊;韩存芝

    目的 观察姜黄素对猪链球菌诱导的小鼠脾细胞促炎性细胞因子的影响,探讨姜黄素对猪链球菌引起的急性中毒性休克的干预作用.方法 采用乳酸脱氢酶释放法检测猪链球菌和姜黄素的细胞毒作用,酶联免疫吸附试验和流式细胞术检测相关炎症因子.结果 所选剂量猪链球菌和姜黄素均未发现明显细胞毒作用.猪链球菌诱导脾细胞产生了促炎性细胞因子IL-6、TNF-α、IL-12和较高剂量的IFN-,γ以及少量的IL-1β,同时也产生了抗炎因子IL-10.姜黄素对促炎因子都有抑制作用同时降低了促炎因子与抗炎因子的比例.结论 姜黄素能够降低猪链球菌诱导小鼠脾细胞产生的促炎因子而发挥抗炎作用.

  • 大黄提取物对猪链球菌生物被膜的消除作用

    作者:张忠斌;高天;丁文雅;林小兵;张金娜;田明

    目的:考察大黄提取物对猪链球菌生物被膜消除作用的影响.方法:采用扫描电镜法观察猪链球菌生物被膜的形成情况;利用TCP法测定浓度为31.2 mg/mL,15.6 mg/mL,7.8 mg/mL和3.9 mg/mL大黄水提物对猪链球菌生物被膜的消除效果;考察不同作用时间6 h、12 h和24 h大黄提取物对链球菌生物被膜的消除的影响.结果:当大黄提取物浓度大于7.8 mg/mL时大黄水提物对猪链球菌生物被膜具有显著的消除作用;当药物的作用时间大于12 h时,猪链球菌生物被膜的消除效果较好.结论:本研究确定了中药大黄提取物对猪链球菌生物被膜具有消除作用,且其消除效果具有剂量依赖性和时间依赖性.

  • 江西省2006年人感染猪链球菌病监测分析

    作者:程慧健;杨梦;袁辉;王健;汪尤利;徐磊;丁晟;徐晓倩;陈福辉;曹金萍;邓运兰

    目的 了解人群、猪群感染猪链球菌Ⅱ型的情况.方法 对可疑病例进行实验室诊断;在景德镇、崇仁县监测点采集猪扁桃体标本270份,鼻拭子标本257份利用选择性培养基培养分离菌株,对可疑菌落进行生化、血清学鉴定和PCR检测,开展猪链球菌Ⅱ型感染状况监测.结果 全省全年发现1例人间病例,职业为屠夫,发病前3d宰杀过来自外省的病猪,宰杀过程中手部有伤口.在监测点采集的猪扁桃体和鼻拭子标本检测未发现猪链球菌Ⅱ型.结论 2006年江西省发现1例因宰杀外地病猪引起的人感染猪链球菌病例;监测点未发现生猪感染猪链球菌Ⅱ型.

  • 猪链球菌致病性研究及其公共卫生意义

    作者:陆承平;姚火春;范红结;华修国;孙建和;顾宏伟;王楷;赵冉;濮俊义;张炜

    链球菌(Streptococcus suis)具有35个血清型,其中2型为常见,而且是人畜共患病原菌.1998年在江苏[1]和2005年在四川大范围暴发引致猪和人死亡的急性传染病,经诊断,均是猪链球菌2型(SS2)感染所致.

  • 四川省一起伴中毒性休克综合征的人感染猪链球菌2型暴发

    作者:杨维中;余宏杰;景怀琦;徐建国;陈志海;祝小平;汪华;刘学成;王世文;刘伦光;祖荣强;罗隆泽;向妮娟;刘红露;钟文君;刘莉;孟玲;袁珩;高永军;杜化茂;欧阳宾;叶长芸;金冬;吕强;崔志刚;黄燕;张守印;安向东;黄婷;周兴余;冯燎;庞启迪;舒跃龙;王宇

    目的调查2005年7月中旬四川省资阳市一家医院报告5例以败血症休克为主要临床表现的聚集性病例的病因.方法建立了病例主动发现、报告的加强监测系统,根据病例的流行病学暴露史和临床表现进行临床诊断;采集患者标本进行细菌分离培养和生化反应鉴定,应用PCR方法对猪链球菌2型的种属和毒力基因进行检测和序列测定;与当地往年报告的流行性脑脊髓膜炎发病数进行比较.结果2005年6月10日至8月21日,四川省共报告了68例实验室确诊人感染猪链球菌病例,发病前都有屠宰、洗切、加工等病(死)猪的直接暴露史.其中26例(38%)表现为中毒性休克综合征,15例(58%)死亡.其他病例临床表现为轻型败血症或脑膜炎.分离菌株应用PCR方法检测猪链球菌2型的种属和毒力基因(tuf、16S rRNA、cps2J、mrp、sly、ef)均为阳性.同期还报告了136例有相似暴露史,但缺乏实验室确诊依据的临床诊断病例.结论证实该起发生在四川省部分农村地区直接暴露于病(死)猪后的疾病为猪链球菌2型感染暴发.推测这种罕见的、表现为高病死率的中毒性休克综合征可能是由于感染某种高致病性菌株循环所致.

  • 中国10省市健康母猪体内猪链球菌致病血清型分布及其耐药性研究

    作者:张纯萍;宁宜宝;张仲秋;宋立;丘惠深;高和义;范学政

    目的 为调查中国健康母猪体内猪链球菌的主要致病血清型分布和不同血清型猪链球菌的耐药性差异.方法 采集国内10个省市的健康母猪扁桃体并从中分离鉴定出猪链球菌421株,经与标准血清的凝集反应了解其主要致病血清型分布,并用微量肉汤法对不同血清型的猪链球菌进行耐药性检测,经统计分析了解小同血清型猪链球菌的耐药性差异.结果 健康母猪体内所分离猪链球菌的优势(致病)血清型依次为9、3和7型,所占比例分别为26.6%、23.5%和15.7%.在能分型的其他血清型中,猪链球菌2型所占的比例为7.4%;耐药性研究结果表明,不同血清型的猪链球菌对抗菌药物的耐药性不同,猪链球菌2型对所测12种药物的敏感性强.结论 健康母猪体内猪链球菌的致病血清型分布结果再次证明猪链球菌是一种条件性致病菌,不同血清型的猪链球菌感染应根据抗生素敏感件测试结果选用不同的药物进行合理防治.

  • 山东省首例人感染猪链球菌病例流行病学调查

    作者:刘伟;高中静;寇增强;胡彬;孙喜红;颜丙新;张清胜;姜文国

    猪链球菌是一种常见的引起猪感染的病原体,常见的致病类型为血型2型[1].2014年3月山东省济宁市报告1例可疑人感染猪链球菌感染病例,经山东省疾病预防控制中心(CDC)分离鉴定,确认为猪链球菌2型,为山东省首例人感染猪链球菌病例.1.对象与方法:调查对象为该病例、接诊医务人员、病例家属以及病例相邻摊位猪肉分割销售、屠宰人员.

    关键词: 猪链球菌 流行病学
  • 广西河池市人感染猪链球菌流行病学调查

    作者:黄革;李建明;黄大浩;罗庶干

    对河池市两家医院报告收治的"疑似人感染猪链球菌病"病例进行调查.结果报道如下.1.对象与方法:①2006年8月18日、9月6日和2007年7月1日河池市两家医院分别报告各收治了1例"疑似人感染猪链球菌病"病例.河池市疾病预防控制中心(CDC)组织专业人员进行现场流行病学个案调查;采集疑似病例、不明原因发热病例和部分密切接触者的血液和/或脑脊液标本以及宰杀病死猪(犬)场所泥土等标本送检.

  • 猪链球菌分泌蛋白的免疫蛋白质组学研究

    作者:孙强正;罗霞;叶长芸;肖迪;郑翰;景怀琦;徐建国

    目的 寻找猪链球菌(S.suis)SC84菌株分泌蛋白中具有抗原活性的蛋白,为S.suis特异诊断抗原和新的疫苗候选抗原的筛选提供线索.方法 采用免疫蛋白质组学和介质辅助激光解吸电离飞行时问质谱(MALDI-TOF MS)技术,分析和鉴定S.suisSC84菌株分泌蛋白中能与感染病例恢复期血清发生免疫杂交的蛋白点.结果 在S.suis SC84菌株分泌蛋白的免疫杂交膜上,共发现14个具有抗原活性的蛋白点,其中11个点可以在考马斯蓝染色胶上找到匹配点.11个蛋白点经质谱鉴定,分属于8种蛋白,全部定位于胞壁或胞外.其中溶菌酶释放蛋白、溶血素、细胞外因子为S.suis 已知的抗原蛋白;5'-核苷酸酶、ribonucleases G和E、金属内肽酶等为新发现的具有抗原活性的蛋白;所有的蛋白均能在测序菌株S.suis 05ZYH33基因组中找到相应的编码基因.结论 在S.suis 分泌蛋白中发现了新的具有抗原活性的蛋白,可能作为S.suis特异诊断抗原和疫苗候选抗原,用于诊断试剂和疫苗的研究.

  • 猪链球菌脉冲场凝胶电泳分析方法的建立

    作者:王丽丽;叶长芸;许彦梅;崔志刚;景怀琦;金东;杜华茂;张守印;白雪梅;赵爱兰;徐建国

    目的 建立一种可共享的猪链球菌脉冲场凝胶电泳分析(PFGE)方法.方法 利用PulseNet技术优化猪链球菌PFGE分子分型方法,提出新的分析方案,包括胶块的制备、内切酶的选择、电泳条件等.利用DNAStar的Mapdraw软件对猪链球菌基因组序列进行分析,发现在242种内切酶中,Swa Ⅰ、Sma Ⅰ、Apa Ⅰ种酶比较适合.结果 通过对34个血清型共100株菌的分析,发现使用Swa Ⅰ可获得59种带型,使用Sma Ⅰ可获得53种带型,使用Apa Ⅰ可获得43种带型.其中以Swa Ⅰ的分辨率好.结论 提出猪链球菌的Swa Ⅰ PFGE分析方法,并对条件进行优化,较原方法所需时间短、图像清晰,更具有可重复性,基本具备推广的条件.

  • 猪链球菌分子生物学分型研究进展

    作者:李伟;徐建国

    猪链球菌(Streptococcus suis)是重要的人畜共患病病原,在世界范围内广泛分布,因在屠宰或猪肉加工环节中接触病猪而感染该菌,病例的临床表现主要是败血症、脑膜炎、心内膜炎、关节炎、休克及永久性耳聋等[1].猪链球菌可以在正常猪的鼻腔、扁桃体、上呼吸道等处存在,这种无症状携带被认为是猪链球菌传播和扩散的重要原因之一[1].

  • 人-猪链球菌病流行病学研究进展

    作者:吴德;罗会明;郑慧贞

    猪链球菌是一种人兽共患病原菌,呈世界性分布,其中以北欧和东南亚地区为突出.自20世纪50年代人们首次发现猪链球菌以来,世界各地均发生因感染猪链球菌而导致大量猪死亡的报道,特别是在养猪业较为发达的国家和地区,如荷兰和英国.因此,该病严重影响了各国养猪业的发展.直到1968年,Perch等[1]在丹麦首次报道了猪链球菌感染人的病例之后,相继又在欧洲、亚洲、澳大利亚、拉丁美洲等部分国家发现猪链球菌感染人的病例.统计数字表明,截止1989年,世界发生人-猪链球菌感染引发的脑膜炎病例共108例[2].近几年来,人-猪链球菌感染病例明显上升.

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