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GSTP1基因低表达与全氟辛烷磺酸致大鼠肝脏氧化损伤的关系研究
目的 探讨GSTP1基因低表达与全氟辛烷磺酸(PFOS)暴露致大鼠肝脏氧化损伤的关系,及其在PFOS肝毒性中的作用.方法 40只健康雄性SD大鼠随机分为空白对照组和PDFOS 0.5、5.0、20 mg/kg·bw·d 3个剂量组,经口灌胃染毒90 d,1次/d.染毒期间观察动物的毒性反应,检测肝脏病理改变及超微结构变化;硫代巴比妥酸法检测脂质过氧化产物MDA含量及总抗氧化能力T-AOC活性;荧光定量PCR方法检测GSTP1基因mRNA表达情况.结果 0.5、5.0和20 mg/kg· bw·d剂量组染毒大鼠均出现体重下降、精神状态差和躁动易激惹等中毒体征,20 mg/kg·bw·d剂量组体重降低明显、肝脏系数增加(P＜0.01).病理形态学发现各剂量组大鼠肝细胞不同程度的肿胀、胞浆空泡化及囊泡样脂滴沉积等毒性病理改变.与对照组比较,5.0和20 mg/kg·bw·d剂量组肝脏MDA含量显著升高(P＜0.01),伴随T-AOC活性降低.Real-time PCR结果显示,肝脏GSTP1基因mRNA表达水平在PFOS中、高剂量组呈现下降趋势,20 mg/kg·bw·d组下调明显(P＜0.05).GSTP1 mRNA表达水平与MDA含量呈显著负相关(r=-0.307,P=0.028).结论 PFOS暴露大鼠肝脏组织的GSTP1 mRNA表达水平下调.GSTP1基因转录抑制可能加剧肝脏氧化损伤发生发展,与PFOS的肝脏毒性有关.
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普鲁卡因酰胺诱导肝癌细胞启动子区甲基化的GSTP1基因重新表达
目的研究HepG2肝癌细胞GSTP1基因启动子区甲基化与GSTP1基因表达的关系,并探讨普鲁卡因酰胺用于诱导因甲基化失活的GSTP1基因重新表达的可能性.方法分别用5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)和普鲁卡因酰胺处理HepG2细胞后培养,甲基化特异性PCR(MSP)检测细胞中GSTP1基因的甲基化状况,RT-PCR和Western blot分别检测细胞中GSTP1 mRNA和GST-π的表达.结果 HepG2细胞在去甲基化药物处理前, GSTP1基因完全甲基化,GSTP1基因不表达;药物处理后,普鲁卡因酰胺组和5-Aza-CdR组GSTP1基因有表达.结论肝癌细胞GSTP1基因启动子区甲基化可抑制GSTP1基因表达,普鲁卡因酰胺与5-Aza-CdR一样能使启动子区甲基化的GSTP1基因重新表达.
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GSTP1遗传多态性对铂类化疗敏感性的影响
目的:研究谷胱甘肽-S-转移酶P1(glutathione S-transferases P1,GSTP1)基因第105位点的遗传多态性与恶性肿瘤患者对铂类药物化疗敏感性的关系.方法:收集50例经病理确诊且CT扫描证实有可测量病灶并接受以顺铂为主的化疗的恶性肿瘤患者,于化疗前抽取外周静脉血,采用基因测序的方法对GSTP1基因第105位点的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)进行检测,观察这些患者经2～4个周期化疗后的疗效,分析各基因分型与铂类药物化疗敏感性的关系.结果:GSTP1基因第105位点基因型的分布与病种无关(P>0.05).携带GSTP1基因第105位密码子的Ile/Ile、Ile/Val和Val/Val 3种基因型的患者对铂类药物化疗有效率分别为20.0%、36.4%和87.5%,携带纯合突变型Ⅴal/Ⅴal基因分型的患者的敏感性明显高于携带另外2种基因分型的患者(P<0.05).结论:GSTP1基因单核苷酸多态性可能与铂类药物化疗敏感性相关.
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GSTP1多态性与肺癌易感性关系的对照研究
目的:检测谷胱甘肽转移酶GSTP1遗传多态性在肺癌患者与正常人群体中的分布,探讨其基因型与肺癌易感性的关系.方法:应用病例-对照分析研究(对照组197例,肺癌病例组97例),抽提静脉血基因组DNA,应用PCR及多重PCR方法,检测GSTP1突变基因型在对照组与病例组的分布.结果:GSTP1突变基因型在病例组和正常对照组中的频率分别为68%和72.6%(P>0.05);统计分析表明,GSTP1突变基因型在肺癌患者组和正常对照组人群中的发生频率没有显著性差异.结论:GSTP1基因多态性与肺癌的易感性没有显著相关性.
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3种胃癌细胞株中GSTP1基因表达及其启动子区甲基化状态的研究
目的 研究候选基因GSTP1在胃癌细胞株中的表达及其启动子区的甲基化状态,初步探讨胃癌细胞株GSTP1基因表达水平与其启动子区甲基化的相关性.方法 采用RT-PCR和Western blot技术分别检测GSTP1在人胃癌细胞株MGC803、BGC823和SGC901中的mRNA和蛋白表达水平.甲基化特异性PCR(MSP)法检测启动子区域甲基化状态.分别用不同浓度的去甲基化药物5-氮杂胞苷处理GSTP1基因启动子区高甲基化状态细胞后,再检测GSTP1基因蛋白表达水平.结果 人胃癌细胞株BGC823和SGC7901中GSTP1 mRNA和蛋白里阳性表达,MGC803中mRNA和蛋白里阴性表达;BGC823和SGC7901细胞GSTP1基因启动子区域未发生甲基化,而MGC803细胞启动子区呈高甲基化状态;经5-氮杂胞苷药物干预后,MGC803细胞的CSTP1蛋白表达明显增强.结论 胃癌MGC803细胞株中GSTP1基因表达沉默与启动子区高甲基化状态有关.
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TaqMan-MGB探针检测GSTP1外显子5 SNP可行性研究
目的:评估TaqMan-MGB探针基因分型方法检测已知SNP的可行性,并与传统的PCR-RFLP方法比较.方法:高通量的TaqMan-MGB探针基因分型方法已被用来检测单核苷酸多态性(SNP).在321例样本中,同时用TaqMan-MGB探针基因分型方法和PCR-RFLP方法检测GSTP1外显子5 SNP.结果:2种方法所得结果完全一致.野生型(AA)226例(70.4%),杂合子(AG)92例(28.7%),纯合突变型3例(0.9%).结论:TaqMan-MGB探针基因分型方法是一种能快速、高度特异性、高度自动化检测SNP的方法,可用于大规模的基因分型.
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5-杂氮-2'-脱氧胞苷对前列腺癌PC3细胞系生长以及抑癌基因GSTP1、RASSF1A转录的影响
目的:观察DNA去甲基化药物5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-aza-CdR)对前列腺癌细胞株PC3抑癌基因GSTP1和RASSF1A 转录改变以及细胞增殖活性的影响.方法:用不同浓度5-aza-CdR(2、5、10 μmol/L)处理前列腺癌细胞株PC3,利用甲基化特异性PCR(MSP)法检测用药前PC3细胞株GSTP1、RASSF1A启动子甲基化状态;采用实时荧光定量RT-PCR法检测用药过程中GSTP1和RASSF1A mRNA转录改变;用MTT法和流式细胞术检测用药前后PC3肿瘤细胞增殖活性改变.结果: GSTP1、RASSF1A启动子区域出现甲基化现象.与对照组相比,药物组培养24 h后 GSTP1和RASSF1A mRNA表达未发生明显改变;培养48 h后5、10 μmol/L药物组GSTP1和RASSF1A mRNA表达出现上调;72 h后各浓度药物组均检测出两基因mRNA表达升高(P<0.05).药物组培养24和48 h未出现明显的细胞增殖抑制现象和细胞周期改变;培养72 h后,药物组细胞增殖抑制显著(P<0.05),细胞周期改变明显(P<0.05),阻滞于G0/G1期.结论:GSTP1和RASSF1A基因在PC3前列腺癌细胞系中的失表达可能与其启动子CpG岛高甲基化有关;5-aza-CdR能在一定程度上抑制PC3细胞增殖,干扰细胞周期,提高GSTP1和RASSF1A的转录水平.
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PMEPA1在前列腺癌中的表达及临床意义
目的 探讨一种编码受雄激素诱导的前列腺跨膜蛋白基因--PMEPA1 (transmembrane prostate androgen induced RNA)的表达,预测前列腺癌非激素依赖型变化的临床意义.方法 采用实时荧光定量PCR检测PMEPA1及GSTP1 mRNA在前列腺癌细胞系LNCaP、PC-3、良性前列腺增生上皮细胞及33例前列腺癌和16例前列腺增生组织中的表达情况.结果 GSTP1及PMEPA1在前列腺癌细胞系中的表达均下调.GSTP1在6.1%的前列腺癌患者中表达上调,在81.8%的患者的前列腺癌组织中表达下调,在12.1%的患者中表达无明显差异;PMEPA1在27.3%的前列腺癌患者的前列腺癌组织中表达上调,在27.3%的患者中表达下调,在45.4%的患者中表达无明显差异.统计分析表明,GSTP1的表达与年龄有关,与PSA、TNM分期、有无骨转移及分化程度无显著关系;PMEPA1的表达与肿瘤的分化程度及是否有骨转移有关,而与年龄、PSA、TNM分期无显著关系.结论 PMEPA1有可能作为区分临床预后较差的前列腺癌的分子学标记,但需要进一步做大样本的研究.
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韩国人CYP450 1A1、CYP450 2E1和GSTM1、GSTT1、GSTP1基因座遗传多态性分析
目的调查代谢相关的CYP4501A1、CYP4502E1和GSTM1、GSTT1、GSTP1基因座在韩国人群中的遗传多态性分布状况.方法采用多重聚合酶链式反应、聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性技术,分析300名韩国健康大学生的 CYP1A1基因3′端限制性内切酶 Msp Ⅰ位点、 CYP2E1基因 5′端转录调节区Pst Ⅰ位点和 GSTM1、GSTT1缺失与存在、 GSTP1基因第5外显子BsmAⅠ位点的基因型,计算基因型和基因频率.结果 CYP1A1基因型频率为m1/m1型39.7%、m1/m2型49.7%、m2/m2型10.7%,基因频率为m1 0.645、m2 0.355. CYP2E1基因型频率为c1/c1型66.7%、c1/c2型30%、c2/c2型3.3%,基因频率为C1 0.818、C2 0.182. GSTM1基因缺失型频率为53.3%. GSTT1基因缺失型频率为54.7%. GSTP1基因型频率为Ile/Ile型62%、Ile/Val型34.3%、Val/Val 型3.7%,基因频率为Ile 0.792、Val 0.208.基因分布符合Hardy-Weinberg平衡定律.结论韩国人 CYP1A1、CYP2E1、GSTM1、GSTT1基因分布与我国人群较为相近,半数以上人缺乏 GSTM1和 GSTT1基因,纯合缺失型频率超过印度人的3倍.
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HCC患者GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化状态研究
目的检测人原发性肝癌(HCC)中抑癌基因GSTP1的启动子区CpG岛甲基化的状况,并探讨其在肝癌发生中的作用. 方法以已知的GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化阳性的乳腺癌细胞株MCF-7为阳性对照,以11例正常人外周血单核细胞(PBMC)DNA为阴性对照,用甲基化特异性PCR(MSP)的方法对26例肝细胞癌患者的癌、远癌组织中GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化的状态进行检测.结果在26例原发性肝癌中GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化在癌组织为88%(23/26),在远癌组织中为69%(18/26);而在11例正常人外周血单核细胞均为甲基化阴性.结论抑癌基因GSTP1基因启动子区CpG岛高甲基化可能是肝癌发生早期的分子事件,在人原发性肝癌的发生发展中具有重要的作用.
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GSTM1和GSTP1基因多态性与卵巢癌发生风险的关系
目的 探讨GSTM1和GSTP1基因多态性与卵巢癌发生风险的关系.方法 选择2013年1月至2015年6月在北京大学深圳医院确诊为卵巢癌的手术患者124例为病例组,选取同时期来本院体检的健康女性124例为对照组.于清晨抽取所有研究对象4mL外周静脉血,用于multiplex-PCR和PCR-RFLP检测研究对象的GSTM1和GSTP1基因的多态性,并对结果进行分析.结果 病例组GSTP1基因GG型分布频率为28.2％,与健康对照组相比差异有统计学意义(x2=5.511,P＜0.05),且GSTP1基因GG型可能会增加患卵巢癌的风险(OR=2.259,95％ CI:1.14 ～4.50,P＜0.05),携带GSTP1基因GG型患者患卵巢上皮性癌的比例明显高于卵巢非上皮性癌(x2 =4.017,P＜0.05);而GSTM1各基因型分布与健康对照组相比差异均无统计学意义(均P＞0.05),且与卵巢癌的发生风险无关联.结论 GSTP1基因多态性与卵巢癌的发病风险有关联,其GG型可能会增加卵巢上皮性癌的发病风险;而GSTM1基因则与卵巢癌的发病风险无关.
