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新生儿化脓性脑膜炎的临床特点与早期诊断
目的:探讨新生儿化脓性脑膜炎(以下简称新生儿化脑)的临床特点及早期诊断方法,为提高本病临床鉴别与早期诊断水平提供补充资料.方法:选择2015年9月～2016年10月新生儿重症监护病房(NICU)收治的85例新生儿化脑疑似病例,常规检查后留取1mL脑脊液标本行PCR(聚合酶链式反应)检测,以脑脊液检查为金标准观察PCR检测结果差异.结果:85例疑似病例中有32例确诊为新生儿化脑,其余53例排除化脑,此部分患儿经荧光定量PCR检测有1例显示阳性,PCR终确诊阳性病例30例,其中13例为G+,17例为G-,检测灵敏度为90.6％,特异度为98.1％,阳性预测值为96.7％,阴性预测值为94.5％.结论:新生儿化脑早期体征不明显,PCR与脑脊液检查相比操作简单灵敏度高,通过PCR可提高新生儿化脑早期诊断水平.
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羊水中解脲支原体和沙眼衣原体感染及对母婴的影响
目的探讨羊水中解脲支原体(UU)和沙眼衣原体(CT)的感染情况及对母婴造成的影响.方法应用聚合酶链式反应技术(PCR)检测126例剖宫产分娩产妇羊水中UU、CT感染.结果 126例剖宫产产妇羊水中检测出UU阳性7例,占5.56%,CT阳性4例,占3.17%.UU宫内感染与胎膜早破有关,且宫内UU、CT感染产妇其新生儿黄疸、眼结膜炎、肺炎的发病率均明显高于非感染组.结论羊水中可检测出UU、CT感染,其感染率为8.73%,宫内UU、CT感染与胎膜早破、新生儿黄疸、眼结膜炎和新生儿肺炎有关.
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性传播疾病三种病原体检测结果分析
目的通过对三年间北京市密云地区淋病奈瑟菌(NG)、沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(UU)检测的结果分析,了解三种病原体的感染情况,为临床医生诊断和治疗及流行病学研究提供依据.方法应用聚合酶链式反应(PCR)技术对2000～2002年550例有性传播疾病(STD)相关临床症状及体征的患者的泌尿生殖道标本进行淋病奈瑟菌(NG)、沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(UU)的检测.结果550份标本中,三种病原体阳性共127份,总检出阳性率23.10%.2000年感染的阳性检出率21.47%,2001年感染的阳性检出率22.34%,2002年感染的阳性检出率27.08%.单一病原体感染108例,2种病原体混合感染19例.在3年中NG的阳性检出率15.82%,CT的阳性检出率6.36%,UU的阳性检出率4.36%.在127份阳性标本中,21～40岁年龄组检出病原体103份,占全部阳性例数的81.10%.结论性传播疾病(STD)呈逐年上升趋势,主要集中在青壮年人群;以NG单一感染为主,也伴有2种病原体的混合感染,提示泌尿生殖道感染病人应重视对这三种病原体的检出,避免漏检,及时诊断和治疗由这些病原体引起的性病,防止性传播疾病(STD)的扩散.
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CA组织HPV分型检测的临床分析
目的 探讨徐州地区患尖锐湿疣的女性,在其外阴及附近的尖锐湿疣组织中,HPV基因型的感染情况以及临床的意义.方法 从2017年4月-12月341例尖锐湿疣标本中提取HPV的基因组,先通过PCR对DNA进行扩增,再利用反向杂交技术,通过基因芯片对其进行分型检测.结果 ①HPV呈阳性的有247例,占72.43％.22岁-41岁为患者集中年龄段.②在247例HPV阳性受检者中,有193例单一感染,占78.13％;54例多重感染,占21.87％.在HPV单一感染患者中,6型和11型是主要的感染亚型.在HPV多重感染患者中,共出现了5种多重感染型,主要以二重感染为主.在多重感染患者中,高危型和低危型同时存在的混合型感染为主要感染类型.结论 徐州地区尖锐湿疣的女性患者的好发年龄段为21岁-41岁,单一感染为主要感染类型,6型和11型为主要感染类型,多重感染中,混合感染比例较大.
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荧光PCR技术在ICU抗菌药物使用患者中检测真菌感染的临床意义
目的 分析比较聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法与传统培养法在重症加强护理病房(intensive care unit,ICU)抗菌药物使用患者中检测真菌感染的临床意义.方法 我院使用多种抗菌药物的患者,取痰液60份,血液30份.将每例标本采集两份,一份真菌培养,另一份冻箱保存,到一定数量后用PCR方法检测真菌.结果 在90份临床标本中,二种方法均检测出白色念珠菌、 热带假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌,以白色念珠菌为多.二种方法对念珠菌所检出率无显著性差异.结论 PCR检测疑似菌感染临床标本具有快速简便,稳定性好、敏感性和特异性均较理想的特点,值得临床实验室推广使用.
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乙型肝炎病毒及其检测技术研究进展
随着对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)认识的增加,乙肝在世界范围内得到了广泛的关注.由于自身结构和酶的特点,乙型肝炎病毒具有突变率高的特点,增加了其检测的难度.现阶段,针对HBV的检测技术主要有基于血清学水平的检测技术和基于分子生物学的检测技术.本文从HBV的简介、检测技术、治疗方法和前景展望四个方面展开综述.
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急性白血病病人WT1mRNA表达及临床意义
目的 研究肾母细胞瘤基因1 (WT1) mRNA在急性白血病(AL)病人骨髓中的表达及其临床意义.方法 采用RQ-PCR方法检测65例初治AL病人骨髓中WT1 mRNA的相对表达量,并随访观察其中53例病人疾病不同阶段骨髓中WT1 mRNA表达水平.结果 65例AL病人中,78.5％的病人骨髓中WT1 mRNA表达阳性,急性淋巴细胞白血病(ALL)和急性髓系白血病(AML)病人骨髓中WT1 mRNA阳性表达率分别为62.5％和80.4％.初诊组、复发组、未缓解(NR)组病人骨髓中WT1 mRNA相对表达量显著高于完全缓解(CR)组(Z=-6.089～-5.450,P＜0.01);WT1 mRNA阳性组病人的CR率明显低于阴性组病人(P=0.012).结论 AL病人WT1 mRNA表达水平与疾病的发生发展密切相关,可作为临床疗效评估、预后判断及微小残留病检测的指标.
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视网膜色素膜炎与人类MHC-DQ基因易感性的相关研究
[目的]探讨视网膜色素膜炎与人类MHC-DQ基因的相关研究.[方法]采用聚合酶链式反应和顺序特异性引物基因分析方法(PCR-SSP),对视网膜色素膜炎患者29例及30例无血缘关系的健康人的人类主要组织相容性复合体(MHC)DQ各等们基因及亚基因进行了检测分析.[结果]实验显示:MHC-DQ B1 0301基因有可能是视网膜色素膜炎的相关基因之一.[结论]PCR-SSP具有快速、简便、敏感、准确和可靠等优点,值得推广.
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SYBR GreenⅠ熔链曲线分析检测醛糖还原酶C(-106)T单核苷酸多态性
[目的]建立一种单核苷酸多态性检测方法.[方法]用序列特异性引物和荧光染料SYBR Green Ⅰ聚合酶链式反应(PCR)方法结合熔链曲线分析,对醛糖还原酶C(-106)T单核苷酸多态性进行检测和分型.[结果]3例经检测为C/C、C/T和T/T基因型通过测序得到证实.[结论]SYBR GreenⅠ PCR熔链曲线分析操作简便,结果准确,可作为单核苷酸多态性检测新方法.
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老年功能性肠病与高血压缺血性肠病的相关性
目的:分析老年功能性肠病与高血压缺血性肠病的相关性.方法:选取我院2014年1月-2017年收治的老年患者99例作为观察研究对象,以33例功能性肠炎患者作为A组,33例老年高血压兼具缺血性肠炎患者作为B组,以33例未患肠病的老年志愿者作为对照组.分析三组患者的临床并发症进行总结,并将各组患者的聚合酶链反应(PCR)结果中的ACE基因型以及CMA基因型进行分析.结果:(1)A组的临床并发检出率78.79%高于B组的57.58%,差异具有统计学意义(P<0.05);(2)B组患者的CMA基因GG基因型频率高于A组和对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),A组与对照组差异不具有统计学意义(P>0.05);三组ACE基因DD基因频率差异不具有统计学意义(p>0.05),B组D基因频率大于A组和对照组,差异具有统计学意义(p<0.05);结论:老年功能性肠病与高血压缺血性肠病存在相关性.
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158例分泌物标本在聚合酶链式反应与培养法检测解脲支原体的结果比较
目的 比较聚合酶链式反应(PCR)与培养法检测解脲支原体在泌尿生殖道感染中的临床意义.方法 应用聚合醇链式反应与培养法同时对158份取尿道拭子(男)或宫颈拭子(女)标本进行解脲支原体的检测,对两种方法的检测结果进行比较分析.结果 PCR法检测158份拭子标本解脲支原体阳性率为25.9％ (41/158),培养法阳性率为13.3％(21/158).PCR与培养法检测解脲支原体差异极其显著(P＜0.005).结论 PCR与培养法相比较具有敏感、快速和特异的特点,PCR用于分泌物解脲支原体标本检测在诊断泌尿生殖道感染中有着重要的意义.结论 聚合酶链式反应(PCR)检测解脲支原体是一种男女适用的、灵敏的、快速的诊断试验,在检测解脲支原体诊断泌尿生殖道感染中有着重要临床意义.
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母体血浆中游离胎儿DNA在产前诊断中的应用
目的:建立一种从孕妇血浆中检测胎儿DNA的无创性产前诊断新方法.方法:对30例孕7-41周妇女血浆进行聚合酶链式反应,特异性扩增的胎儿基因为Y染色体上的DYZ1位点,扩增片段的大小为149bp.30例孕妇血浆均经过酚-氯仿法提取DNA作为模板,进行聚合酶链反应.结果:20例妊娠男性胎儿孕妇中有17例出现DYZ1基因扩增条带,检出率为85.0%.10例妊娠女性胎儿孕妇中未出现阳性扩增条带,无假阳性结果.本研究中早、中、晚孕期性别符合率分别为80%、80%、90%,总符合率为85%.结论:使用酚-氯仿法提取血浆中的DNA,可以提高模板的浓度和纯度,改善PCR条件,提高了结果的准确性,作为无创性产前诊断方法有望应用于临床.
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地中海贫血的实验室诊断方法研究进展
地中海贫血是由于珠蛋白合成肽链时受阻致使α链或β链合成不足或缺失为特征而引发的特异性隐性遗传病,该病高发于从地中海沿岸的意大利、希腊、马耳他、塞浦路斯到东南亚各国的广大地区,我国南方也是本病的高发地区[1-2].因此提高地中海贫血诊断的准确率,减少误诊及漏诊显得尤为重要.本文对地中海贫血的实验室诊断方法 的研究进展进行综述,可以为地中海贫血临床实验室的诊断方面做出相应的技术选择,更好的服务于临床.
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南京地区乙型肝炎病人HBV基因型的分子生物学特性及临床意义
目的研究南京地区乙型慢性肝病病人HBV基因型与CP和前C区基因变异及与病情的关系.方法选取慢性乙型肝炎(CH)44例,慢性重型乙型肝炎(CSH)4例,肝硬化(LC)29例病人血清,测定HBV S基因序列以确定其基因型,测定HBV CP和前C区序列以确定其变异状况.结果南京地区乙肝病人的HBV基因型以B型和C型为优势基因型,分别为48.1%和51.9%;LC病人的C型检出率显著高于CH组(69.0%vs43.2%,x2＝4.67,P<0.05);C型HBV感染者的CP双变异发生率显著高于B型组(67.5%vs40.5%,x2＝4.58,P<0.05).结论南京地区乙肝病人的HBV基因型以B型和C型为优势基因型.C基因型病毒易发生CP双变异,并且导致病情向肝硬化发展.
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人转化生长因子β1质粒真核表达载体的构建与鉴定
目的构建并鉴定人转化生长因子β1(TGF-β1)基因真核表达载体.方法设计含XbaI和XhoI酶切位点的TGF-β1cDNA引物,采用RT-PCR法,扩增TGF-β1cDNA片段,纯化PCR产物,XbaI和XhoI双酶切并连接至pcDNA3,转化感受态大肠杆菌DH5α,酶切鉴定阳性重组子,并进行序列测定.结果琼脂糖凝胶电泳显示,用XbaI和XhoI双酶切后可形成两条带,分子量分别为1.2kb和5.38kb,符合物理图谱,表明载体成功构建,并且测序结果与预期结果完全一致.结论成功构建了人TGF-β1基因真核表达载体.
