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CPA恒温扩增技术检测炭疽芽胞杆菌方法的建立
目的 建立一种简便的新型交叉引物恒温核酸扩增结合层析试纸条方法,快速可视化检测炭疽芽胞杆菌核酸.方法 通过序列比对挑选出炭疽芽胞杆菌质粒上的特异性基因pXO2,设计引物、探针并合成标记,建立核酸恒温扩增反应体系,用金标免疫层析试纸条快速检测扩增产物,并测试方法的灵敏度和特异性.结果 建立的核酸恒温扩增结合金标条方法检测炭疽芽胞杆菌,采用阳性质粒DNA优化实验条件,灵敏度可达5.4pg/反应体系;建立的检测方法检测炭疽Sterne疫苗株的灵敏度为6× 103 CFU/ml;与枯草芽胞杆菌、苏云金芽胞杆菌、矮小芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌、蕈状芽胞杆菌等相似菌株无交叉反应.结论 本研究建立的方法对炭疽芽胞杆菌检测具有很好的敏感性、特异性,为生物恐怖因子现场检测提供了新方法,在国境检疫及公共卫生安全领域有较好的应用前景.
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恒温扩增技术在分子诊断中的应用
聚合酶链反应(PCR)技术是近年来广泛应用于科学研究和临床检验的一项技术.目前传统的PCR技术中核酸的扩增存在效率不高且需要专用的仪器设备等缺陷,而恒温扩增技术由于引物种类多样,检测方法多变,从而克服了传统PCR核酸扩增技术的缺点,使其越来越多地被应用于分子诊断中.经国内外学者的研究证实,恒温扩增技术有着广泛的应用前景,现着重对恒温扩增技术予以综述.
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恒温扩增技术在病原体检测中的应用
感染性疾病是重要的公共健康卫生问题之一，据世界卫生组织统计，全世界每年有1300万以上的人群死于感染性疾病［1］。感染性疾病主要由细菌和病毒引起，其次是真菌和寄生虫。某些不同的病原体感染可引起临床症状相似，但致病机制、发病进程完全不同，需要采取不同治疗方法。早期及时确定感染原因，合理使用抗菌药物可使严重感染的生存率下降5倍［2］。因此，对于发病率和病死率非常高的感染性疾病，早期明确诊断十分重要，不仅指导临床有效用药，还阻止耐药病原体蔓延，所以建立快速、准确、敏感且低廉的病原体诊断方法颇为重要。
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晶芯呼吸道病原菌核酸检测技术与痰培养在临床中的应用
目的 应用恒温扩增技术,在微流控碟式芯片上进行反应,检测痰液中13种临床常见的下呼吸道病原菌,并与常规痰培养检测法的结果进行比较.方法 对80例疑似下呼吸道感染的患儿痰液进行呼吸道病原菌核酸检测和痰培养检测,以痰培养为金标准,评价晶芯呼吸道病原菌核酸检测技术的应用价值.结果 与痰培养结果相比,晶芯呼吸道病原菌核酸检测技术的敏感度和特异度分别为98％ 和72％,K值为0.77.结论 晶芯呼吸道病原菌核酸检测技术采用恒温扩增微阵列基因芯片技术,操作简便快速,可同时对痰液中13种临床常见的呼吸道病原菌定性检测,具有较高的敏感度和特异度,提高了检测率和准确性,具有一定的临床应用价值.
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乙型肝炎病毒及其检测技术研究进展
随着对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)认识的增加,乙肝在世界范围内得到了广泛的关注.由于自身结构和酶的特点,乙型肝炎病毒具有突变率高的特点,增加了其检测的难度.现阶段,针对HBV的检测技术主要有基于血清学水平的检测技术和基于分子生物学的检测技术.本文从HBV的简介、检测技术、治疗方法和前景展望四个方面展开综述.
