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金黄色葡萄球菌毒素基因的检测及临床应用
目的:了解医院获得性金黄色葡萄球菌(HA-SA)和社区获得性金黄色葡萄球菌(CA-SA)所携带肠毒素、表皮剥脱性毒素(ETs)、中毒性休克综合征毒素-1(TSST-1)及杀白细胞素基因(PVL)的特点. 方法:应用PCR法检测肠毒素A、B、C、D、E基因,ETs A、B基因,TSST-1以及PVL. 结果:116株金黄色葡萄球菌中,85株为HA-SA,检出肠毒素A基因6株,肠毒素C基因1株,肠毒素D基因1株,PVL2株;31株为社区获得性金黄色葡萄球菌,检出肠毒素A基因1株,肠毒素B基因1株,肠毒素D基因1株,PVL7株;所有菌株均未检测到肠毒素E、ETs A、B和TSST-1基因. CA-SA PVL检出率显著高于HA-SA,两者比较差异有统计学意义(P＜0.005),而肠毒素、ETs和TSST-1基因检出率比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:金黄色葡萄球菌可分泌多种毒素,在分离金黄色葡萄球菌的同时,应注意其毒素检测.
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金黄色葡萄球菌L型产B型肠毒素及其基因的研究
目的:探讨金黄色葡萄球菌(金葡菌)L型肠毒素B的产生量及其基因存在情况.方法:将金葡菌诱导成稳定L型后,用ELISA法检测葡萄球菌肠毒素B(SEB),用PCR法检测SEB基因.结果:金葡菌L型SEB的产生量与原菌比差别无显著性(P＞0.05),PCR发现478 bp的阳性条带.结论:金葡菌变异为L型后SEB产生量不变,其基因也未丢失.
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产B型肠毒素金黄色葡萄球菌及其L型某些致病物质的比较
目的:比较产B型肠毒素金黄色葡萄球菌(金葡菌)及其L型的某些致病物质.方法:检测金葡菌L型产生血浆凝固酶、耐热核酸酶及肠毒素B的情况,并与原菌进行比较.结果:金葡菌L型使血浆延迟至24 h发生凝固,耐热核酸酶的透明环减小,肠毒素B的光密度(OD)值未见明显减少.结论:金葡菌L型仍能产生致病物质,其致病力减弱.
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平阳县农贸市场食品金黄色葡萄球菌污染状况及耐药性研究
目的 了解平阳县农贸市场出售食品中金黄色葡萄球菌污染状况及药物敏感性,为制定食品卫生安全防控措施提供依据.方法 采集6个乡镇16个农贸市场的6大类食品样品共313份,根据GB 4789.10-2010进行金黄色葡萄球菌分离和鉴定,对肠毒素阳性菌株进行药敏试验.结果 金黄色葡萄球菌总检出率为12.1％(38株),检出率较高的分别为猪肉(16.1％)、牛肉(14.3％)和水产干制品(15.4％);38株金黄色葡萄球菌产肠毒素菌株检出率36.8％(14/38).药敏试验结果:对万古霉素、头孢唑啉和替考拉宁敏感;耐药率高的是青霉素和阿莫西林(均92.9％),对苯唑西林、红霉素、四环素、庆大霉素、链霉素、利福平、环丙沙星有不同程度耐药.结论 平阳县农贸市场出售食品中存在金黄色葡萄球菌污染,特别是产肠毒素菌株增加食物中毒发生的风险,应加强监督管理,确保食品卫生安全.
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食品中金黄色葡萄球菌及肠毒素检测与耐药性分析
目的 了解温州市食品中金黄色葡萄球菌污染状况、产肠毒素特性及耐药性.为防止由金黄色葡萄球菌引起的食源性疾病及临床用药提供依据.方法 按GB/T 4789.10-2008对样品进行金黄色葡萄球菌检验.同时用PCR分析肠毒素基因(SEA-SEE).进行药敏试验.结果 在12种273份样品中分离出金黄色葡萄球菌23株.检出率8.4％.其中鲜榨果汁.速冻米面制品和冰激凌检出率达16.7％;阳性菌株肠毒素总检出率为34.8％;对苯唑西林(凝固酶阳性)、青霉素、复方磺胺甲恶唑、红霉素耐药性分别达13.4％、91.3％、21.7％、21.7％.并表现出多种耐药谱.结论 温州市食品存在金黄色葡萄球菌污染.尤其在冷冻食品、鲜榨果汁中较严重;食源性金黄色葡萄球菌产肠毒素情况应该引起监督部门重视;食品中金黄色葡萄球菌对多种药物耐药.临床治疗应选择敏感药物.
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一起金黄色葡萄球菌肠毒素食物中毒的实验分析
目的 通过实验室检测,查明一起食物中毒原因,以防止类似事件发生.方法 采集4份可疑食品标本,按国家有关标准进行沙门菌、志贺氏菌、致泻大肠埃希氏菌、副溶血性弧菌和金黄色葡萄球菌及肠毒素检测.结果 从牛肉酱标本中分离到金黄色葡萄球菌,用全自动荧光免疫分析系统检测出金黄色葡萄球菌肠毒素.结论 根据现场流行病学调查和实验室检测结果,证实为一起由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒.
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一起由金黄色葡萄球菌肠毒素引起食物中毒的实验分析
目的 查明引起食物中毒事件发生的原因,追查致病菌污染来源,为监督执法提供依据.方法 采集标本16份,根据国家相关标准进行沙门菌、志贺菌、致泻大肠埃希菌、副溶血弧菌和金黄色葡萄球菌检测.结果 从7份标本中分离到金黄色葡萄球菌,通过PCR检测,证实均含肠毒素(A、B、D).根据实验室检测结果,结合病人临床表现和流行病学调查,判定是一起因食用被金黄色葡萄球菌污染的食物引起的中毒.结论 卫生监督机构应严格执法,加强相关人员的培训和健康体检,加大对群众进行科普知识的宣传力度,避免类似事件发生.
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福建省食源性致病菌监测网金黄色葡萄球菌肠毒素检测结果分析
目的 了解食品中金黄色葡萄球菌(SA)分离株产生肠毒素(SE)的能力及分型.方法 对2010-2011年福建省食源性致病菌监测网SA分离株进行产毒试验,分别用全自动酶联荧光免疫法和葡萄球菌肠毒素试剂盒进行检测并分型.结果 74株分离株中有28株产肠毒素,产毒株检出率37.8％,肠毒素以A、D型检出率较高,分别为32.1％和21.4％.不同来源食品检出率不同,熟肉制品中检出率高(54.2％),其次为凉拌菜(42.9％)和豆制品(40.0％).结论 SA产毒菌株的污染状况不容忽视,应加强对熟肉制品生产的管制.
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乳腺炎金黄色葡萄球菌肠毒素和毒素休克综合征毒素-1的调查研究
目的 用PCR方法对14个奶牛场分离得到的临床型乳腺炎金黄色葡萄球菌(金葡菌)124株,隐性乳腺炎金葡菌213株,山羊临床型乳腺炎金葡菌12株进行超抗原毒素sea,seb,sec,sed.see和tst基因的分子调查,结果表明:奶牛标本肠毒素基因和tst基因的阳性率为27.42%,隐性乳腺炎为1.41%,山羊标本为33.3%.奶牛标本产生毒素的类型以SEA,TSST-1和SEC为主,山羊标本产生肠毒素的类型以SEC为主.对于肠毒素基因和tst基因PCR阳性的金葡菌同时用ELISA和RPLA检测,3种方法检测结果基本一致.
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应用多重PCR方法鉴定粪样和食品中分离的产气荚膜梭菌
目的用国标方法和多重PCR方法检测粪样和食品中产气荚膜梭菌分离株.方法采集粪样和食品样品按照国标方法进行分离鉴定,再应用多重PCR方法进行基因型鉴定.结果 346份粪便样品分离与鉴定出了69株产气荚膜梭菌,275份食品样品分离到97株产气荚膜梭菌.经过生化试验鉴定和多重PCR方法鉴定,证实均为A型产气荚膜梭菌,携带β2毒素的产气荚膜梭菌共为53株,另检出了2株肠毒素阳性A型产气荚膜梭菌.结论初步摸清了我国的粪便中和食品中的产气荚膜梭菌的动态分布.并在食品中发现了导致人食物中毒的肠毒素阳性A型产气荚膜梭菌,为分子流行病学研究提供了重要理论依据.
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重组超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B基因的克隆和序列分析
目的采用基因工程技术制备金黄色葡萄球菌B型肠毒素(SEB).方法根据SEB已知序列,设计一对引物,用PCR方法从金黄色葡萄球菌染色体DNA上扩增出基因片段,克隆到原核表达质粒pET32a 上,转化大肠埃希菌JM109感受态细胞,经酶切和PCR鉴定,然后进行测序.结果 PCR扩增产物大小为740bp, 重组质粒经双酶切PCR鉴定表明已正确重组,测序结果与已知序列基本吻合.结论成功地克隆了金黄色葡萄球菌B型肠毒素,为下一步研究发病机制奠定基础.
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脆弱拟杆菌肠毒素致病机制研究进展
脆弱拟杆菌(Bacteroides fragilis)作为一种革兰氏染色阴性、杆状、两端钝圆而浓染,有荚膜、无芽胞、无动力的专性厌氧细菌,分产肠毒素型和非产肠毒素型.脆弱拟杆菌作为人及动物肠道正常菌群的一部分,主要存于结肠中.
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重组金黄色葡萄球菌肠毒素A突变体D227A蛋白的表达、纯化和鉴定
建立从金黄色葡萄球菌肠毒素A突变体D227A原核表达系统pET32a-SEAD227A-E.coliBL21DE3中,表达、纯化和鉴定重组金黄色葡萄球菌肠毒素A突变体D227A(rSEA-D227A)蛋白的方法.采用不同浓度的IPTG(0.1、0.5和1.0mmol·L-1)诱导原核表达系统表达rSEA-D227A,10%SDS-PAGE检测表达产量,Ni-NTA亲和层析法纯化rSEA-D227A,采用HPLC检测其纯度,Western-blotting进行免疫学鉴定.从已构建的金黄色葡萄球菌肠毒素A突变体D227A原核表达系统中成功表达和纯化了rSEA-D227A蛋白,产量约占细菌总蛋白的38.2%,纯度为88.7%.为后续进一步研究该蛋白的生物活性奠定基础.
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大肠埃希菌的β-内酰胺酶与耐药表型分析
大肠埃希菌是常见的临床分离菌,是常见产β-内酰胺酶(BLA)耐药菌之一,也是医院获得性感染的常见的条件致病菌.该菌常引起各种肠内外的感染.是消化道感染和泌尿道感染的主要病原菌[1],在环境卫生和食品卫生学中,常被用作粪便污染的卫生学检测指标.其致病因素主要与侵袭力、内毒素、肠毒素有关[2].大肠埃希菌很多菌株都已获得耐一种或几种抗生素的质粒,耐药性非常普遍,因此抗生素治疗应在药物敏感试验的指导下进行.
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金黄色葡萄球菌肠毒素的检测及结果分析
目的 了解引起临床感染的金黄色葡萄球菌(SA)携带肠毒素(SE)的情况.方法 对从临床标本中分离出的260株SA,用反向间接血凝试验检测其肠毒素,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检测按2005年美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的检测头孢西丁方法进行.结果 260株SA中有172株携带肠毒素,占66.2%,主要为SEA型10.8%(28/260)、SEB型14.6%(38/260)、SEC型10.0%(26/260),同时携带二种或二种以上肠毒素的占23.8%(62/260);其中MRSA134株,全部携带肠毒素,且以SEA、SEB、SEC为主,分别为19.4%、16.4%、13.4%;甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)126株,携带肠毒素率为30.0%(38/126),以SEB为主,占9.5%.结论 临床上SA分离株大部分都携带肠毒素,且以SEA、SEB、SEC为主,MRSA的带毒率高于MSSA.
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福州某养殖场金黄色葡萄球菌的污染现状及耐药性研究
目的 了解福州某养殖场中金黄色葡萄球菌的污染状况及耐药情况.方法 2015、2016年于某养殖场猪育肥前期后期分别采集生猪活体的猪生物活体、猪场环境表面涂抹、饲料等样品158份,进行金黄色葡萄球菌的分离鉴定、肠毒素的分型及耐药性实验.结果 158份样品中共有13份样品检出金黄色葡萄球菌,检出率为8.23％,其中育肥前期的79份样品中检出3株金黄色葡萄球菌,检出率为3.80％;育肥后期的79份样品检出10株金黄色葡萄球菌,检出率为12.66％(P＜0.05).13株菌株中产肠毒素阳性率为92.31％,以SEE型居多占50.00％,SEA的检出率为25.00％、SEC和SEB的检出率为41.67％、SED的检出率为33.33％.13株菌株中对环丙沙星、阿莫西林、青霉素、四环素、氯霉素、庆大霉素、苯唑西林、链霉素、头孢他啶、红霉素等常见抗生素表现出高度耐药,高达100％;头孢噻肟耐药率53.80％、磺胺复合物耐药率为46.15％.结论养殖场育肥后期金黄色葡萄球菌的污染率高于育肥前期;13株金黄色葡萄球菌多重耐药现象较严重,产肠毒素特性较高.
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1995～2010年滕州市腹泻病人致泻性大肠杆菌检测结果分析
[目的]探讨滕州市致泻性大肠杆菌病原学特征,为制定相关措施提供依据.[方法]对1995～2010年滕州市级索、西岗镇腹泻病监测点及市财贸医院、市中心人民医院腹泻病门诊腹泻病人资料进行分析.[结果]共检测腹泻病人粪便标本2 756份,检出致泻性大肠杆菌482株,检出率为17.49％.其中ETEC占61.20％,EPEC占22.20％,EIEC占16.60％.病原菌检出率,男性为55.37％,女性为44.63 ％(P＞0.05)；0～4岁为26.64％,5～19岁为20.32％,ETEC肠毒素类型呈以ST为主(LT＞ST＞ST/LT).[结论]致泻性大肠杆菌在引起婴幼儿腹泻病中占有一定重要地位.
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一起由金黄色葡萄球菌污染牛奶引起的食物中毒
2001年9月10日, 无棣县某小学有28名学生食物中毒,经检验、生化测定、肠毒素测定证实系由饮用被产C型肠毒素的金黄色葡萄球菌污染课间奶所引起.
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眼内容物培养出蜡样芽胞杆菌一株
蜡样芽胞杆菌广泛分布于自然界,常生存于水、土壤、乳制品中,有时正常人的粪便中也可检出,属条件致病菌,该菌可产生肠毒素能引起食物中毒,还可引起人眼部感染结膜炎、角膜炎等.
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急性腹泻245株弧菌的分离与鉴定
每年夏季是肠道传染病流行和发病的高峰,引起夏季肠道感染的主要病原菌是弧菌属的细菌.其共同点是它们在体内进行大量繁殖的同时,可产生肠毒素和类毒素,造成患者呕吐、腹泻、脱水和酸中毒,甚至休克死亡.
