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一起由两种病原菌感染引起的食物中毒分析
目的 通过实验检测一起食物中毒的病原菌.方法 依据GB/T 4789-2010、GB/T4789-2012、GB/T4789-2014、WS271-2007、《2017年食源性致病菌监测工作手册》对患者肛拭子、呕吐物进行进行检测.结果 在6名患者的2份呕吐物和6份肛拭子标本中,1份呕吐物检出金黄色葡萄球菌1株,肠毒素为A、C,1份肛拭子中检出金黄色葡萄球菌1株,未检出肠毒素,另2份肛拭子检出致泻性大肠埃希菌2株,均为肠聚集性大肠埃希菌(EAEC),产毒素类型均是:uidA、astA.结论 综合流行病学调查、临床表现和实验室检测结果 分析,判定是由产肠毒素A、C金黄色葡萄球菌株和EAEC引起食物中毒.建议各级卫生监督部门要加大监督检查力度,从而减少食物中毒的发生,保障人民健康.
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应用全自动荧光酶标仪测定金黄色葡萄球菌肠毒素
2001年4～6月本区发生3起金黄色葡萄球菌所致的、散发性的食物中毒.我们应用法国梅里埃公司生产的mini VIDAS即全自动荧光酶标仪,进行金黄色葡萄球菌肠毒素测定,结果均为强阳性反应,现报道如下.
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食品中金黄色葡萄球菌的肠毒素检测及耐药性
目的了解食品中金黄色葡萄球菌对药物的敏感性及产肠毒素的情况,对食物中毒检测提供理论依据和指导临床用药.方法药物敏感性试验采用1997年美国NCCLS药敏试验(纸片法)方法进行,用反向被动乳胶凝集试验检测肠毒素.结果金黄色葡萄球菌除对万古霉素、替考拉宁敏感外,对其余10种存在不同程度的耐药;金黄色葡萄球菌产肠毒素总检出率为38%,其中A型为25%,C型为12.5%,其次为D型为5%,E型为2.5%,B型未检出.结论检测食物中毒及食品样品中的金黄色葡萄球菌时,应考虑肠毒素的检测;临床治疗金黄色葡萄球菌感染,应建立在体外药敏试验的基础上,有针对性地选择抗菌药物.
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一起金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒检测分析
金黄色葡萄球菌(金葡菌)是葡萄球菌致病力强的细菌.广泛分布于空气、土壤、水及食具中.人和动物具有较高的带菌率.健康人的咽喉、鼻腔、皮肤、头发等常带有产肠毒素的菌株,故易于经手或空气污染食品,特别是春夏季容易引起食物中毒.
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一起由金黄色葡萄球菌引起食物中毒的实验室分析
2008年12月8日,安阳县辛村乡王某在家庭聚会10人集体用餐时,8人发生食物中毒,经流行病学调查、临床表现、实验室检查综合分析,确认本次中毒为金黄色葡萄球菌所致.现报告如下.1 流行病学调查 12月8日,安阳县辛村乡王某家庭聚会集体用餐时,8人在用餐后2 h陆续出现以吐泻为主要症状的胃肠道反应,发病短潜伏期是2 h,迟发病在4 h.其中住院6人,均在相同时间进食相同食物,饭菜为米饭、胡萝卜炒肉、包菜、酸豆角.其中2人未食胡萝卜炒肉未发病.
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一起婚宴食物中毒调查
2001年8月1日,莱芜市某酒店发生了一起由结婚喜宴引发的食物中毒,卫生监督人员接到举报已是第2天下午.由于当事人举报不及时,未能采到婚宴的剩余食品,仅根据当天婚宴的菜谱,对可疑食品进行了采样.
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T淋巴细胞趋化因子受体5表达上调介导了肠毒素超抗原对肺动脉内皮的损伤
目的 观察革兰阳性菌肠毒素活化的T淋巴细胞(T细胞)对人肺动脉内皮细胞(HPAEC)的损伤作用,初步探讨其损伤机制.方法 将葡萄球菌肠毒素B(SEB)活化后的T细胞上清加入HPAEC,检测内皮细胞趋化因子的分泌情况;用Transwell小室观察内皮细胞分泌的趋化因子对T细胞趋化的影响.用10 ng/ml SEB刺激的T细胞与HPAEC共培养,检测T细胞与内皮细胞的黏附率;用原位末端缺刻标记法(TUNEL)检测内皮细胞凋亡情况.结果 不同浓度T细胞培养上清刺激的HPAEC都表现出趋化因子随刺激时间延长而释放增加的趋势,72 h后1×10-2、1×10-1、1×100T细胞中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1,ng/ml)分别为1.240±0.103、4.200±0.305、6.500±0.500,巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α,ng/ml)分别为0.210±0.015、0.287±0.012、0.531±0.037,正常T细胞表达和分泌因子(Rantes,ng/ml)分别为1.420±0.074、7.634±0.630、15.700±1.300,其中Rantes表现出早期(6 h)快速释放和后期(12、24、48、72 h)延迟释放的特点.与未经SEB作用的对照组相比,超抗原组的T细胞从Transwell小室上室趋化移动至聚碳酸酯膜的数量(个)显著增多(86.38±14.50比16.50±2.50,P＜0.01＝;与T细胞组比较,超抗原组24 h T细胞黏附率显著增加[(15.50±1.08)%比(1.60±0.22)%,P＜0.01＝,加入1 μg/ml甲基化Rantes组T细胞黏附率[(4.39±0.66)%]较超抗原组显著下降(P＜0.01＝;黏附到下层HPAEC的T细胞趋化因子受体5(CCR5)/CD4较100 ng/ml SEB诱导3 d的单个核细胞(PBMC)增加了约2.5倍,CCR5/CD8增加了约2.8倍;与正常培养的HPAEC组比较,超抗原组HPAEC细胞凋亡指数增加[(32.50±4.50)%比(3.50±0.50)%,P＜0.01＝.结论 SEB活化的T细胞增加了对HPAEC的趋化和黏附,进一步导致HPAEC的损伤;这种趋化作用的增强与SEB活化的T细胞表面CCR5表达上调有关.
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艰难梭菌在儿童中的定植与感染
艰难梭菌是可以在次级端形成芽孢的革兰阳性杆菌,是引起抗生素相关性腹泻(antibiotic-associate diarrhea,AAD)的常见病原菌之一,约15%～39%的AAD由艰难梭菌引起,且在成人中随着年龄的增长其发病率呈现增高的趋势[1].
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13例毒蕈中毒致多脏器损害的预见性护理
毒蕈即野生毒蘑菇,夏秋时节自然界分布极广,外形与可食用的蘑菇相似,易被误食而中毒.其主要毒素为肝毒素、神经毒素、胃肠毒素、溶血毒素等,能兴奋交感神经,引起溶血、肝、肾、中枢神经等多脏器的损害[1].
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产毒性大肠杆菌不耐热和耐热肠毒素基因克隆及序列分析
目的:用基因工程方法克隆产毒性大肠杆菌(ETEC)不耐热肠毒素(LT)和耐热肠毒素(ST)基因,以制备检测ETEC的单克隆抗体.方法:利用PCR技术扩增LT和ST基因并将它们插入T-easy载体中,采用全自动测序仪进行核苷酸序列分析.结果:DNA序列分析表明,克隆的ETEC-LT-B DNA序列与GenBank公布序列比较在17、69、101、102位点有碱基变异,同源性98.9%;ETEC-STDNA序列与GenBank公布序列一致.结论:成功获得正确的ETEC的LT和ST基因,为其重组表达及后续研究奠定了实验基础.
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食源性金黄色葡萄球菌肠毒素及耐药性分析
目的 了解乌鲁木齐市日常食品中分离出的金黄色葡萄球菌的肠毒素分布情况以及耐药性特征.方法 金黄色葡萄球菌的分离以及肠毒素的鉴定依据国标GB 4789.10-2010《食品卫生微生物检验金黄色葡萄球菌检验》进行,利用法国梅里埃全自动微生物生化鉴定系统(VITEK2-compact)对菌株进行生化鉴定和药敏试验.同时对分离出的阳性菌株进行肠毒素测定及分型.结果 2013-2014年检测乌鲁木齐市日常食品样品6类823份,检测出38株金黄色葡萄球菌.通过对金黄色葡萄球菌肠毒素分型,共有12株产生肠毒素,携带率为31.6％.对阳性菌株进行耐药性分析,其中对万古霉素和头孢噻肟敏感,敏感率为100.0％;对青霉素的耐药程度较高,耐药率为71.1％;对诺氟沙星、氧氟沙星、甲氧苄啶敏感性较高,对其他几种抗生素都有不同程度的耐药.结论 乌鲁木齐市食品中存在金黄色葡萄球菌潜在的危害,主要来源于肉制品;金黄色葡萄球菌的产毒能力较强,且耐药性较强,应合理用药.
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西宁市生鲜乳中金黄色葡萄球菌及其肠毒素污染状况调查
目的 对西宁市生鲜乳当中金黄色葡萄球菌及其肠毒素污染情况进行调查,动态了解全市乳类及其制品的安全性,为今后进一步开展食品安全风险评估提供科学依据.方法 采集西宁市辖区内的养殖场乳头奶202份、原料奶200份,以及乳制品生产企业成品奶200份,参照GB 4789.10-2010的方法对金黄色葡萄球菌进行定量及定性检验,同时对金黄色葡萄球肠毒素进行定性检验.结果 乳头奶当中金黄色葡萄球菌检出率为28.71％,原料奶检出率为38.50％,成品乳未检出,原料奶检出率高于乳头奶及成品乳,差异有统计学意义(x2=92.114,P＜0.001).在检出为阳性的58份乳头奶中,金黄色葡萄球菌污染范围10～ 99 CFU/ml的样品占48.28％,污染范围100～999 CFU/ml的样品占34.48％,污染范围1 000～9 999 CFU/ml的样品占17.24％.77份检出阳性的原料奶中金黄色葡萄球菌污染范围10～99 CFU/ml的样品占19.48％,100～999 CFU/ml的样品占49.35％,污染范围1 000～9 999 CFU/ml的样品占20.78％,超过10 000 CFU/ml的样品占10.39％,原料奶的污染程度高于乳头奶,差异有统计学意义(x2=16.555,P＜0.01).乳头奶当中金黄色葡萄球菌肠毒素检出率为2.97％,原料奶检出率为1.00％,成品乳中未检出肠毒素,原料奶检出率高于乳头奶及成品乳,差异有统计学意义(x2=7.009,P＜0.05).结论 西宁市生鲜乳中金黄色葡萄球菌及其肠毒素污染情况不容乐观,尤其原料奶污染较为严重,今后应进一步加强奶源管理,避免由于金黄色葡萄球菌及肠毒素污染引起的食物中毒.
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一起由金黄色葡萄球菌及其肠毒素引发食物中毒的实验室检测与分析
目的 查明引发食物中毒的致病菌,运用基因分型技术对致病菌进行溯源分析,为食物中毒诊断提供依据.方法 采用食品安全国家GB 4789系列标准方法对致病菌进行分离、鉴定.金黄色葡萄球菌肠毒素分型检测采用酶联免疫吸附法(ELISA),肠毒素基因的检测采用实时荧光定量PCR的方法,利用脉冲场凝胶电泳(Pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)进行同源性分析,全自动药敏接种判读仪(AIM-Vizion)进行耐药分析.结果 4份标本中都检测出金黄色葡萄球菌,4株菌均产A型肠毒素,携带sea基因,剩余食物分离株与病人分离株PFGE带型相似性为93.8％,具有高度同源性,菌株对5种抗生素耐药.结论 本次食物中毒由肠毒素A型的金黄色葡萄球菌所致,实时荧光定量PCR可以弥补传统ELISA的不足.PFGE可迅速锁定传染源.提醒相关部门要加大合作和监督力度,保障食品安全.
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一起金黄色葡萄球菌食物中毒的鉴定分析
目的 对一起疑似细菌性食物中毒事件进行病原菌的检测,结合流行病学调查内容确定其致病因子.方法 依据国标及相关标准,将传统手工分离培养方法与实时荧光PCR相结合进行菌株鉴定;利用miniVIDAS全自动荧光酶标免疫测试系统和金黄色葡萄球菌肠毒素胶体金快速检测试剂盒,检测肠毒素并分型,同时进行药敏试验以了解病原菌的耐药性.结果 在采集的剩余饮品和2例病人的肛拭子中均检出金黄色葡萄球菌和A型肠毒素,分离出的3株金黄色葡萄球菌从培养特性、生化反应、实时荧光PCR仪鉴定情况到药敏试验,结果均一致.结论 此次食物中毒为剩余饮品中金黄色葡萄球菌A型肠毒素所致,采用实时荧光PCR等快速检测方法可以大大提高实验室检测的快速性、灵敏性和准确性.同时提醒各级卫生监督部门要加大监督力度,保障食品安全.
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急性毒蕈中毒致中毒性肝炎16例诊治体会
毒蕈中毒是常见的植物毒中毒性疾病,常发生于夏秋季节,世界上约有毒蕈200余种,我国已发现有190多种,食用后能致死的达30多种[1].引起毒蕈中毒的毒素包括:胃肠毒素、神经精神毒素、血液毒素、原浆毒素,其中原浆毒素可引发中毒性肝炎型毒蕈中毒,该型极为凶险,发病率占毒蕈中毒的9.26%,病死率约40%[2].我院2005年3月-2007年9月收治4起集体误食毒蕈中毒致中毒性肝炎病例16例,治疗预后良好,现报告如下.
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凝固酶阴性葡萄球菌致医院内感染的危险因素分析
凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)院内感染日益增多.该类菌为条件致病菌,它可产生溶血素、杀白细胞素、肠毒素,并且有吞噬作用.近年来,其耐药性逐渐增加.北京军区总后医院CNS检出率从1999年的34%上升到2000年的52%,且出现多重耐药现象.
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金黄色葡萄球菌食物中毒病原检测及方法比较
目的:可疑金黄色葡萄球菌食物中毒事件病原学检测,传统的分离培养与荧光PCR检测方法的方法比较 .方法:本实验采用国家标准方法对食物中毒标本进行金黄色葡萄球菌分离培养,并对食物中毒标本及分离的阳性菌株作肠毒素定性测定;用荧光PCR(FQ-PCR)方法对可疑食品及患者呕吐物标本进行金黄色葡萄球菌快速检测. 结果:用国标方法,9份呕吐物标本中7份分离出金黄色葡萄球菌,阳性率77.78%,荧光PCR快速法检测相同标本,9份呕吐物均呈阳性,阳性率100%,食品卤香干检出金黄色葡萄球菌,8个阳性菌株C型肠毒素检出率100%.结论:该中毒确诊为金黄色葡萄球菌C型肠毒素中毒,中毒食品为卤香干.荧光PCR检测法快速、灵敏,尤其适用于药后患者标本及已加热杀菌的可疑中毒食品的检测,作为初筛、辅助诊断手段,在食物中毒病原检测中值得广泛推广.
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多重PCR检测金葡菌肠毒素基因型的研究
目的应用多重聚合酶反应(PCR),建立检测金黄色葡萄球菌肠毒素(SE)基因方法.方法用溶菌素和蛋白酶K制备模板DNA,用多重聚合酶链反应扩增的方法,对临床分离的金黄色葡萄球菌130株进行扩增.结果金黄色葡萄球菌肠毒素血清型A(SEA)阳性的占23.1%(30/130),血清型B(SEB)阳性的占43.1%(56/130),血清型C(SEC)阳性的占11.6%(15/130),血清型D(SED)阳性的占6.12%(7/130),血清型EA(SEE)阳性的占2.31%(3/130);femA基因片段在多重PCR中作为内部参照避免了假阴性结果的出现.结论多重PCR技术检测金黄色葡萄球菌肠毒素基因型,具有敏感、快速、特异的特点,是一种可靠的实验诊断手段.
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金黄色葡萄球菌肠毒素单克隆抗体制备与应用
目的制备抗B型金黄色葡萄球菌肠毒素单克隆抗体.方法纯化B型金黄色葡萄球菌肠毒素(SEB)免疫BALB/C小鼠的脾细胞与SO2/0骨髓瘤细胞融合,经筛选及克隆化,共获得6株能稳定分泌抗B型金黄色葡萄球菌肠毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞株并进行了鉴定.结果6株单克隆抗体除两株属于Ig G2A外,其余均属于IGG1亚类,其培养上清和腹水的滴度分别为1:256～1:512和1:12 800～1:25 600,6株单克隆抗体均不与SEA发生交叉反应,仅有2株与SEC1有弱交叉反应.WESTERN-BLOT实验显示出一条特异性带,位于分子量28.5KDA处,证明了其特异性.结论成功获得抗B型金黄色葡萄球菌肠毒素单克隆抗体,为检测SEB打下了基础.
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双抗体夹心ELISA法检测葡萄球菌B型肠毒素
目的建立一种敏感、快速的酶免疫测定方法,用于定量检测人工污染食品中金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB).方法采用生物素-链亲素系统放大的双抗体夹心酶联免疫吸附方法,以兔抗葡萄球菌肠毒素B(SEB)多克隆抗体作为包被抗体,以生物素标记的抗SEB单克隆抗体2D1作为第二抗体进行测定.结果在0.078～10.000μg/L的浓度范围内,SEB标准品浓度与吸光度值线性关系良好,相关系数为r=0.987 6,平均变异系数为4.99%.结论该方法灵敏度高、准确性好、稳定性强,而且简便、快速,适用于食品样品中SEB的定量测定.
关键词： 金黄色葡萄球菌 肠毒素 酶联免疫吸附试验(ELISA)
