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常用梅毒检测方法的比较和评价
目的 本文主要比较和评价梅毒的4种检测方法的灵敏度和特异性,为选择筛查梅毒的方法提供参考,进而总结出简单快捷的佳筛查方法,用于大批量标本的诊断.方法 用快速血浆反应素试验(RPR)、甲苯胺红快速反应素试验(TRUST)、梅毒螺旋体抗体体外诊断胶体金法(SYP)、酶联免疫吸附试验(ELISA)同时检测226例血清标本,其中经梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)法确证97份为梅毒患者血清,129份血清为对照组.结果 RPR、TRUST、SYP、ELISA这四种方法的灵敏度分别为93.81％、94.84％、97.94％、98.97％,特异性分别为95.35％、96.12％、98.45％、99.22％.结论 ELISA法的灵敏度和特异性明显高于其他三种方法,RPR、TRUST这两种方法适用于筛选试验,也可应用于梅毒治疗疗效观察,SYP法适用于大规模体检、急诊手术,ELISA法适于用复检试验、手术或输血前的试验.
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ELISA及冷凝集试验在早期肺炎支原体肺炎中的诊断价值
目的 探讨对比酶联免疫吸附试验(ELISA)及冷凝集试验在早期肺炎支原体肺炎中的诊断价值.方法 对120高危肺炎支原体肺炎分别实施ELISA与冷凝集试验的受检者临床资料进行回顾性分析,将痰液细菌培养和分离的鉴定结果 作为"金标准",对比两种检测方式对此类疾病的诊断价值,根据发热时间比较确诊者ELISA和冷凝集试验阳性率.结果共有82例诊断为肺炎支原体肺炎,发生率为68.33％.ELISA诊断早期肺炎支原体肺炎的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确度均高于冷凝集试验(P<0.05);在确诊者中,不同发热时间ELISA诊断阳性率均高于冷凝集试验(P<0.05).结论 相较于冷凝集试验,ELISA诊断早期肺炎支原体肺炎的价值更高,且诊断准确度并不受发热时间的限制.
关键词： 酶联免疫吸附试验(ELISA) 冷凝集试验 肺炎支原体肺炎 -
3262名孕妇单纯疱疹病毒-Ⅱ型近期感染的监测
目的:为了解孕妇单纯疱疹病毒-Ⅱ型(HSV-Ⅱ型)近期感染状况.方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对3262名孕妇静脉血标本进行了HSV-Ⅱ-IgM检测.结果:在上述3 262名孕妇中检测出HSV-Ⅱ-IgM阳性标本41例,阳性率为1.26%.结论:孕妇单纯疱诊病毒-Ⅱ型近期感染应引起临床医师关注.
关键词： 孕妇 单纯疱疹病毒-Ⅱ型 酶联免疫吸附试验(ELISA) -
多厂家抗-HCV ELISA检测结果分析
探讨多厂家抗-HCV ELISA试剂检测结果不一致的原因.选用4个国产厂家和2个进口厂家试剂对175份样品进行抗-HCV检测,并对其中17份检测结果不一致的样品和1份6个厂家试剂检测均为弱阳性的样品用抗-HCV ELISA分片段试剂进行检测,用SPSS13.0软件对检测结果进行统计分析.结果显示,6个厂家试剂对175份标本的检测结果,同为阴性85份,同为阳性38份,有52份样品检测结果不一致.18份结果不一致的样本用分片段试剂测定的结果为:Ⅰ试剂的假阴性率为75.00%(9/12);Ⅱ试剂的假阴性率为25.00%(3/12);Ⅲ试剂的假阴性率为66.67%(8/12);Ⅳ试剂的假阴性率为33.33%(4/12);Ⅴ试剂的假阴性率为58.33%(7/12);Ⅵ试剂的假阴性率为33.33%(4/12).采用II+V的组合实验检测假阴性率为8.33%(1/12),有很明显的降低.结论:试剂盒包被抗原成份的差异可能是检测结果不一致的重要原因,选择包被抗原成份互补的试剂盒分别进行初筛和复检实验是减少假阴性结果,保障血液安全的重要手段.
关键词： 抗-HCV 酶联免疫吸附试验(ELISA) 分片段试剂 -
90例病毒性胃肠炎患者粪便中诺如病毒检出情况分析
目的 了解病毒性胃肠炎患者中诺如病毒感染情况. 方法 收集北京市2007年2月5~17日共计90例病毒性胃肠炎患者的粪便标本,应用逆转录聚合酶链反应法 (RT-PCR) 和酶联免疫吸附试验 (ELISA) 检测粪便中诺如病毒核酸或抗原,并对RT-PCR阳性标本的PCR产物进行克隆测序. 结果 90例病毒性胃肠炎患者的粪便标本中,35例 (38.89%) RT-PCR为诺如病毒核酸阳性,序列分析结果显示,诺如病毒GⅡ型34例 (97.14%),GⅠ型1例 (2.86%);90例中,39例 (43.33%) 为ELISA检测诺如病毒抗原阳性.以RT-PCR检测结果作为金标准进行比较,ELISA的灵敏度和特异度分别为97.14% (34/35) 和90.91% (50/55) . 结论 诺如病毒是病毒性胃肠炎的主要病原,以GⅡ型流行为主.ELISA快速、简便,其灵敏度和特异度较高,可作为诺如病毒感染的初筛试验.
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猪囊尾蚴液、固相多种抗原对囊虫病免疫诊断效果评价
目的筛选适合多种寄生虫病流行区使用的特异性较高的囊虫病免疫诊断抗原. 方法制备猪囊尾蚴各类型液相抗原和固相抗原,用ELISA或IEST检测囊虫病流行区患者阳性血清抗体,比较各种抗原的敏感性和特异性. 结果猪囊尾蚴全囊及囊液尿素溶性抗原与水溶性纯化抗原ELISA检测囊虫抗体的特异性差异无显著性(P>0.05).固相抗原IEST有敏感性好、操作简易的特点. 结论猪囊尾蚴全囊尿素溶性纯化抗原是较理想的囊虫病ELISA诊断抗原,有诊断应用价值.固相石腊切片抗原IEST较为适合流行区现场或基层应用.
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日本血吸虫抗体检测试剂盒(IHA法)现场筛查效果的评估
目的 评估日本血吸虫抗体检测试剂盒(IHA法)的现场筛查效果. 方法 选择安徽省长江流域3个血吸虫病流行区7个流行村的6～65岁居民为查病对象,在用改良加藤厚涂片法(Kato-Katz法,一粪三检)合并尼龙绢集卵孵化法进行病原学检测的同时,采用日本血吸虫抗体检测试剂盒(IHA法)进行血清特异抗体检测,评估其现场筛查效果,并与胶体染料试纸条法(DDIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结果比较. 结果 7个村共有3 004人同时接受2种病原学检测和3种血清免疫学检测,IHA、DDIA和ELISA法的阳性率分别为40.81％、59.79％和59.25％,与病原学检测阳性率2.46％比较差异有统计学意义(P＜0.005).以病原学检测为金标准,IHA法的特异度、约登指数、一致率和阳性预测值高于DDIA和ELISA法,分别为60.48％、52.37％、61.25％和5.55％;敏感度和阴性预测值分别为91.89％和99.66％,均介于DDIA法和ELISA法之间.IHA法与DDIA和ELISA法的一致率分别为65.25％和69.91％,IHA检测结果与DDIA和ELISA比较差异均有统计学意义(P＜0.05);病原学检测阳性者中,IHA法与DDIA和ELISA法的一致率均为90.54％,IHA检测结果与DDIA和ELISA比较差异无统计学意义(P＞0.05). 结论 日本血吸虫抗体检测试剂盒(IHA法)适用于血吸虫病流行区人群筛查,但需进一步提高该试剂盒的特异度,大限度地排除阳性者中已经治愈的中远期感染者.
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13价肺炎链球菌结合疫苗中的6A和6B诱导对新发现血清型6C和6D的交叉保护抗体
目的 血清型6C和6D是近些年新发现的肺炎链球菌血清型.本研究的目的是考察肺炎链球菌13价结合疫苗PCV13(1、3、4、5、6A、6B、7F、9V、14、18C、19A、19F和23F)里的6A和6B能否诱导对新血清型6C和6D的交叉保护抗体,以及它们对交叉保护抗体的贡献.方法 PCV13、6A和6B荚膜多糖分别与CRM197的结合物PCV6A和PCV6B分别于第0天、第14天和第28天以等剂量肌肉注射免疫新西兰兔.免疫前和第35天采血分离血清.采用世界卫生组织( WHO)推荐的定量酶联免疫吸附试验(ELISA)检测兔血清中针对6A、6B、6C和6D荚膜多糖的抗体浓度,并采用WHO肺炎链球菌血清学参考实验室的调理吞噬试验(OPA)检测兔血清抗体针对6A、6B、6C和6D的杀菌功能.结果 PCV13能够诱导兔产生针对6A和6B荚膜多糖的抗体,该抗体不仅能够与6C和6D荚膜多糖产生交叉反应,而且能够识别靶细菌6A、6B、6C和6D并激活补体,在激活补体的调理下,靶细菌被分化的HL60细胞吞噬,它们对靶细菌6A、6B、6C的杀菌滴度大致相当,但略高于对6D. PCV6A能够诱导兔产生针对6A荚膜多糖的抗体,该抗体能够与6B、6C和6D荚膜多糖产生交叉反应,它对靶细菌6A、6B和6C的调理吞噬滴度高于对6D. PCV6B能够诱导兔产生针对6B荚膜多糖的抗体,该抗体能够与6A、6C和6D荚膜多糖产生交叉反应,它对靶细菌6A、6B和6C的调理吞噬滴度高于对6D. PCV13、PCV6A和PCV6B免疫后针对6A、6B、6C和6D的荚膜多糖特异性抗体浓度和杀菌滴度均较免疫前有显著性升高(P<0. 01).结论PCV13能够诱导兔产生针对6A和6B的抗体,它们不仅能够与6C和6D的荚膜多糖产生交叉反应,而且能够交叉保护6C和6D. PCV13中的6A和6B均对产生6C和6D的交叉保护抗体有贡献,其中对6C的贡献多于对6D.
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评价肺炎球菌结合疫苗免疫原性的兔模型的建立
目的 建立一种适用于评价肺炎球菌结合疫苗免疫原性的动物模型.方法 以13价肺炎球菌结合疫苗(PCV13)肌肉注射新西兰兔,3针剂,间隔2周;在不同的时间点采集血清.采用世界卫生组织(WHO)标准定量酶联免疫吸附试验方法(ELISA)检测兔血清中的血清型特异性抗体浓度,采用WHO肺炎链球菌血清学参考实验室的调理吞噬试验方法(OPA)检测兔血清中血清型特异性抗体杀菌功能.结果 兔血清中特异性抗体浓度高低和抗体杀菌功能强弱吻合,并且二者随着时间的消长趋势具有非常好的一致性.结论 兔可用于肺炎球菌结合疫苗PCV13免疫, 并以定量ELISA和OPA检测血清抗体浓度和功能,是评价肺炎球菌结合疫苗免疫原性的合适动物模型.
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梅毒临床诊断的3种检测方法的应用评价
目的 评价酶联免疫吸附试验(ELISA)、快速血浆反应素试验(RPR)和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)对梅毒病人诊断的敏感性和特异性.方法 同时用ELISA、RPR和TPPA试剂对4 825例住院及门诊病人血清进行检测,TPPA试验作为确认试验,从而得出其他两种方法的敏感性和特异性.结果 ELISA法的阳性率95.06%(385/405),假阳性率0.66%(29/4 420);RPR法阳性率70.12%(284/405),假阳性率0.45%(20/4 420);2种方法即ELISA、RPR法均阳性为275例,检出率为67.90%(275/405),假阳性率为0.11(5/4 420).结论 ELISA法是一种高敏感性的梅毒血清学诊断检测方法,ELISA与TPPA相关性良好,可作为确证试验.RPR只能作为辅助试验,如果3种方法结合使用,可使假阳性率下降.
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肺炎支原体抗体测定血清学方法的临床价值比较
目的:比较酶联免疫吸附试验(ELISA)、颗粒间接凝集试验、胶体金渗滤试验及冷凝集试验等四种方法检测肺炎支原体抗体的临床价值.方法:分别用酶联免疫吸附试验、颗粒间接凝集试验、胶体金渗滤试验、冷凝集试验来检测临床已确诊的47例肺炎支原体感染小儿患者血清中的肺炎支原体抗体.结果:47例小儿患者血清酶联免疫吸附法阳性13例,阳性率27.66%;颗粒间接凝集试验阳性23例,阳性率48.94%;胶体金渗滤试验阳性5例,阳性率10.64%;冷凝集试验阳性9例,阳性率19.15%.结论:颗粒间接凝集试验测定肺炎支原体IgM抗体可提高肺炎支原体感染的早期诊断率,且操作简便、敏感度高,易于推广.
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ELISA测定操作中的注意事项
联免疫吸附试验(ELISA)是20世纪70年代初在酶免疫组织化学的基础上发展起来的,是将抗原或抗体吸附于固相载体上,加入检样和酶结合物反应后,再利用酶催化其底物呈色的反应,来检测抗体或抗原的方法.因其操作简单、试剂保存期长、对环境污染小等优点现在广泛地用于各种生物化学物质的免疫测定.在多年的工作操作中我们总结出以下几点注意事项,供同道们参考.
关键词： 酶联免疫吸附试验(ELISA) 注意事项 -
运用实时荧光定量RT-PCR和ELISA方法定量检测SHIV的对比分析
目的 建立一种实时、灵敏、特异的针对人/猴免疫缺陷病毒(SHIV)的RNA载量检测方法,通过与酶联免疫吸附试验(ELISA)进行比较,成为监测SHIV病毒体外复制过程的常用方法.方法 体外转录制备RNA标准品,利用TaqMan EZ逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)试剂盒的反应体系和针对SHIV gag保守区91个碱基的TaqMan探针与引物,建立一步法实时荧光定量RT-PCR.三种SHIV感染性分子克隆体外转染293T细胞,在不同的时间点采样,通过实时荧光定量RT-PCR和ELISA两种方法监测SHIV病毒复制过程.结果 两种方法监测的病毒复制过程基本一致,转染后2～48小时病毒复制出现明显的对数生长期,之后进入平台期,p24浓度大约103pg/ml,而RNA载量大约在108拷贝/ml.两者具有很好的相关性(r2＝0.834;P0.001).实时荧光定量RT-PCR灵敏度更高,检测范围更广,费用更低.结论 所建立的一步法检测SHIV病毒载量的实时荧光定量RT-PCR方法,可以作为监测SHIV体外扩增的常用方法.
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丙型肝炎病毒抗体检测的几种方法的临床应用
丙型肝炎的检测方法包括初筛试验科确认试验,主要包括1)酶联免疫吸附试验;2)胶体金法快速试验;3)化学发光试验;4)免疫印迹试验;5)荧光定量PCR法检测HCV-RNA本文旨在临床常用的几种丙肝检测技术的比较来更好更时的确诊丙肝为临床提供依据.
关键词： 丙型肝炎病毒 酶联免疫吸附试验(ELISA) 化为学发光试验 -
三种方法检测梅毒螺旋体抗体的结果比较
目的：化学发光法(clia)、酶联免疫吸附试验（elisa）及免疫层析法（ica）检测梅毒螺旋体抗体的结果符合率。方法对广西临床检验中心提供的梅毒螺旋体低值（6miU/ml）和对低值用生理盐水稀释1倍（3 miU/ml）的质控品以及已确认本院住院患者的51例阴性血清和11例阳性血清标本进行复检，clia 和 elisa 用测定值/临界值（s/co）判断， s/co ≥1为阳性，s/co<1为阴性；ica 以质控线（c）和检测线（t）2条红色线带同时出现为阳性，只出现 c 红色条带为阴性，不出现 c 红色条带为重做。结果 clia 法阳性检出率100%，elisa 法阳性检出率100%，假阳性率2%， ica 法阳性检出率分别为54%和81.8%。结论 clia 与 elisa 阳性符合率较高，结果较为准确可靠，适合大样本筛查，以防止漏检。
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两种方法检测乙肝病毒五项指标的比较
目的：比较分析乙五项指标两种检测方法（elisa 和乳胶层析法）的符合率。方法将135例检测者血清分别用酶联免疫法和乳胶层析法检测乙肝五项指标，并对检测结果进行对比分析。结果每一项指标用两种方法检测，经统计学处理，P ＞0.05，结果无统计学差异。结论使用 elisa 法和乳胶层析法的反应结果一致，而使用乳胶层析法的效率更高。
关键词： 乙肝五项 酶联免疫吸附试验(ELISA) 乳胶层析法 定性分析 -
浅谈禽病ELISA操作技术
在疾病监控方面,酶联免疫吸附试验(ELISA)技术是应用为广泛的血清学检测技术,禽病ELISA抗体检测试剂已经大量应用到SPF鸡微生物学监测中.ELISA不仅操作技术上有一定的要求,而且影响因素也较多,如不注意有可能导致试验结果不准确.因此,将禽病检测过程中,ELISA操作各环节需注意的问题归纳总结,与各位同仁一起交流学习.
关键词： 酶联免疫吸附试验(ELISA) 禽病 操作技术 -
抗-HCV ELISA法检测结果在临界值附近的风险探讨
目的 应用化学发光免疫分析(CLIA)法,检测抗-HCV ELISA法结果在临界值附近(0.4≤S/CO＜1)的血清标本,探讨HCV感染的风险性.方法 笔者对19份抗-HCV ELISA法检测结果在临界值附近,胶体金法均阴性的血液标本,分别经抗-HCV ELISA法试剂①、试剂②、胶体金法和CLIA法试剂进行了检测.结果 HCV-CLIA法阳性16份、ELISA法试剂①和试剂②分别阳性5份9份,胶体金法阳性0份.CLIA法与ELISA法和胶体金法比较检出率灵敏度显著高于ELISA法(P＜0.05或P＜0.01)和胶体金法(P＜0.01).结论 抗-HCV ELISA法检测结果在临界值附近的血液标本存在HCV感染的可能,尤其是献血者标本存在感染受血者的风险.对可疑标本应更进一步的应用丙型病毒性肝炎核心抗原检测法、CLIA法、核酸扩增和微流芯片法或RNA RT-PCR荧光定量法进行检测,以保证结果的准确性.
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化学发光免疫分析法检测献血者HCV抗体的应用评价
目的 应用化学发光免疫法(CLIA)检测无偿献血者丙型肝炎病毒(HCV)抗体.并与常规抗-HCV ELISA法和HCV RNA-RT-PCR荧光定量检测法进行比较.方法 对2009年1月-2010年8月的5985例献血者血清标本,先应用HCV-CLIA法和试剂①、试剂②两种抗-HCV ELISA试剂进行常规初检、复检检测.对HCV-CLIA法和试剂①、试剂②检出的阳性标本,再进行HCV RNA-RT-PCR荧光定量检测.结果 在被检测的5985份标本中,HCV-CLIA法HCV阳性14份:抗-HCV ELISA法初检阳性15份和复检阳性为16份(其中初检、复检均阳性的14份);HCV RNA-RT-PCR荧光定量检测阳性的13份.结论 本组HCV-CLIA法与HCV ELISA法初检、复检结果比较符合率分别为93.33%和87.50%;与HCV RNA-RT-PCR荧光定量检测比较符合率为92.86%.HCV-CLIA法具有操作简便、快速、重复性好等优点,适合献血者抗-HCV的筛查.
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核酸扩增及微流芯片法检测HCV-Ab临界值附近标本的结果探讨
目的 对于用ELISA法检测HCV-Ab结果在临界值周围的可疑标本,用核酸扩增及微流芯片法进一步检测,以探讨不同方法丙型肝炎病毒(HCV)的检出率及其感染的危险性.方法 收集住院患者中经2种不同的HCV-Ab ELISA法试剂①或试剂②检测结果S/CO≥0.4至＜1.0的血清标本24份,其金标试纸条法检测均为阴性,分别用核酸扩增及微流芯片法和化学发光免疫分析(CHA)测HCV-Ab法进行检测.结果 24份用ELISA法检测S/CO值处于临界值的标本,经核酸扩增及微流芯片法检测阳性16份(阳性率66.67％),CLIA测HCV-Ab法检测阳性16份(阳性率66.67％),HCV-Ab ELISA法试剂①阳性6份(阳性率25.00％),试剂②阳性10份(阳性率41.67％).核酸扩增及微流芯片分析法与ELISA法试剂①检测结果进行比较,阳性率差异有统计学意义(P＜0.01),与ELISA法试剂②检测结果进行比较,阳性率差异有统计学意义(P＜0.05).结论 核酸扩增及微流芯片分析法对HCV的检出率高于ELISA法和金标试纸条法,因此,对ELISA法检测HCV-Ab结果在临界值周围的可疑标本,可能存在感染性,应对这些可疑标本做进一步的检测,可选择性的应用核酸扩增及微流芯片分析法和化学发光免疫分析(CHA)法等方法联合进行检测,以提高检测结果的准确性,以防误检和漏检.
