首页 > 文献资料
-
柱前衍生化HPLC法测定注射用芪红脉通中氨基酸＊
目的：建立中药注射剂注射用芪红脉通中氨基酸含量测定方法。方法：采用OPA-FMOC柱前衍生化法，用HPLC方法同时检测注射用芪红脉通中17种氨基酸。结果：所测17种氨基酸线性关系良好。结论：本试验建立的HPLC检测氨基酸的分析方法，选择性强、重复性好，可用于注射用芪红脉通中氨基酸的检测及质量控制。
-
HPLC-ELSD测定平贝母中贝母素甲的含量
平贝母是百合科植物平贝母Fritillaria ussuriensis Maxim.的干燥鳞茎,具有清热润肺、化痰止咳的功能,其含有的贝母类生物碱是贝母止咳化痰作用的主要有效成分.贝母类生物碱传统的定量方法常采用比色法、两相滴定法、非水滴定法等3种方法均有一定的局限性;采用薄层色谱法、反相离子对高效液相色谱法、柱前衍生化法、气相色谱法对贝母素甲、贝母素乙进行定量,存在前处理步骤多,排除干扰困难等不足之处.ELSD是一种质量型检测器,对样品中贝母素甲进行含量测定,分离度好,样品制备简便,重复性好,适于贝母类药材的质量控制.
-
柱前衍生化RP-HPLC法测定盐酸二甲双胍原料中有关物质二甲胺
目的:建立测定盐酸二甲双胍原料中有关物质二甲胺的柱前衍生化反相高效液相色谱法.方法:样品经氯甲酸-9-芴甲酯(FMOC-Cl)试剂衍生化,RP-HPLC分析,采用WondaSil C18Superb(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相A为0.1％甲酸溶液,流动相B为乙腈,梯度洗脱:0 ～ 13 min,B 55％;13 ～13.1 min,B 55％ ～80％;13.1 ～20 min,B 80％;20 ～20.1 min,B 80％ ～55％;20.1 ～30 min,B 55％,流速为1.0 mL·min-1,进样量为20 μL,柱温为30℃,紫外检测波长为265 nm.结果:衍生化反应在短时间内完成,且衍生物稳定.二甲胺在0.126 ～3.789 μg·mL-1范围内线性关系良好(r =0.999 7).检测限为0.039 μg·mL-1.加样回收率为97.17％ ～ 102.0％.方法专属性、进样精密度与重复性良好.结论:本方法准确、方便、快速,可作为准确控制盐酸二甲双胍原料中有关物质二甲胺含量的有效分析手段.
-
血浆中比索洛尔对映体的拆分及含量测定方法
目的探索血浆中比索洛尔(BSP)两个对映体的拆分及含量测定方法.方法采用乙酰葡萄糖异硫氰酸酯(GITC)为柱前衍生化试剂,以RP-HPLC测定血浆中各对映体的含量.结果流动相为乙腈-水(3∶2),紫外检测波长为270 nm,两个对映体分离度好,各对映体血药浓度在25～500 ng*mL-1范围内呈良好线性关系,BSP低检测浓度为10 ng*mL-1(S/N＞3),低、中、高3种浓度的(S)-BSP或(R)-BSP的日内、日间RSD均小于10%,方法回收率＞95%,萃取回收率＞80%.结论本方法可用于分离测定血浆中比索洛尔对映体以及对映体药动学立体选择性差异的研究.
-
邻苯二甲醛-9-氯甲酸芴甲酯柱前衍生HPLC法测定血必净注射液中氨基酸
目的通过建立HPLC分析法测定血必净注射液中氨基酸,为提高中药注射液质量标准提供依据.方法通过OPA-FMOC柱前衍生化法,建立同时检测血必净注射液中18种常见氨基酸的液相色谱法.色谱柱为Agilent SB-C18柱(250mm×4.6 mm,5 μm);流动相A为0.02 mol/L醋酸钠溶液(含200μL/L三乙胺和3.5 mL/L四氢呋喃,2%醋酸溶液调pH7.2±0.05),流动相B为0.02 mol/L醋酸钠溶液-甲醇-乙腈(200:400:400)(pH 7.2±0.05),梯度洗脱:体积流量:0～38min为1.0 mL/min:柱温40℃;检测波长0～32.5 min为338 nm,32.5 min以后为262 nm.结果所测18种氨基酸在各自的高、低质量浓度范围内线性关系良好;3个批次血必净注射液中,游离氨基酸测定平均值为1.320 mg/mL,总氨基酸测定平均值为2.027 mg/mL.结论所建立的氨基酸定量方法结果准确可靠,重现性好,有助干血必净注射液的质量控制,对中药注射剂安全评价标准的提高具有指导意义.
-
柱前衍生化RP-HPLC法测定肌肽的含量
目的 建立简单、快速测定肌肽含量的方法.方法 采用2,4 -二硝基氯苯柱前衍生化RP-HPLC法.衍生化试剂:2,4 -二硝基氯苯;色谱柱:DiamonsilTM C18 柱(200 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:乙腈-0.15 mol · L-1乙酸钠缓冲溶液(体积比1: 5);流速:1.0 mL · min-1;检测波长:360 nm.结果 肌肽质量浓度在 2.0～20.0 mg · L-1(r=0.999 4)内与其衍生化物峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为 96.8%,RSD为 0.8%(n=9).结论 2,4 -二硝基氯苯柱前衍生化RP-HPLC法可用于测定肌肽含量.
-
DNFB柱前衍生化RP-HPLC法测定氨肽素的氨基酸含量
目的用二硝基氟苯(DNFB)柱前衍生化RP-HPLC法测定氨肽素中氨基酸的含量.方法采用二硝基氟苯为衍生试剂进行衍生,ODS(Kromasil C18, 4.6 mm× 250 mm, 5 μm)色谱柱分离,以乙腈- 0.05 mol*L-1乙酸钠水溶液为流动相,梯度洗脱, 360 nm检测,在 30 min内,测定氨肽素的氨基酸组成与含量.结果线性范围(总氨基酸14种)为0.15～ 0.75 g*L-1;回收率为94.8%～103.5%;RSD为0.26%～1.47%(n=5).结论 DNFB柱前衍生化RP-HPLC法可有效控制产品质量.
-
柱前衍生化HPLC法测定丹红注射液氨基酸
目的 通过建立HPLC分析方法,测定丹红注射液(丹参、红花)中氨基酸,为丹红注射液质量标准的提高提供科学依据.方法 通过OPA-FMOC柱前衍生化法,建立了同时检测丹红注射液中18种氨基酸的液相色谱方法.色谱柱为Agilent SB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)；流动相A为0.02 mol/L醋酸钠溶液(含200 μL/L三乙胺和3.5mL/L四氢呋喃,2％醋酸溶液调pH 7.2 ±0.05),流动相B为0.02 mol/L醋酸钠溶液-甲醇-乙腈(200:400:400)(pH 7.2±0.05),梯度洗脱；体积流量0～38 min为1.0 mL/min,38～49 min为1.5 mL/min；柱温40℃；检测波长:0～32.5 min为338 nm,32.5 min后为262 nm.结果 所测18种氨基酸线性关系良好；7批次丹红注射液水解氨基酸测定平均值为1.680 mg/mL.结论 所建立的氨基酸定量方法结果准确可靠,重复性好,有助于丹红注射液的质量控制.
-
柱前衍生化法测定五维牛磺酸口服液中牛磺酸的含量
五维牛磺酸口服液作为维生素补充药物,在临床已应用多年.现行的国家标准未制定活性成份牛磺酸的含量测定方法.牛磺酸结构中不含共轭体系,无法通过普通的UV检测器直接测定.此类物质可通过柱前衍生化引入发色基团后进行检测.我们采用柱前衍生化法,以2,4-二硝基氟苯作衍生化试剂测定牛磺酸的含量.
-
HPLC法测定复方制剂中盐酸赖氨酸的含量
目的 完善复方制剂中盐酸赖氨酸含量的监测体系.方法 本实验采取高效液相色谱法(HPLC),并用异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生化.过程中选择合适色谱柱与柱温,尝试流动相的组成以及比例.以合适的流速进行梯度洗脱,后根据紫外图谱确定应选用的吸收波长.结果 赖氨酸在0.05mg·mL-1至1mg·mL-1浓度范围内线性关系良好(相关R系数大于0.999),所检测的三种样品的方法精密度RSD分别为0.706％、0.438％、0.343％,平均加样回收率为98.9％、92.5％、102.8％.含量测定结果在93％～107％范围以内.结论 该方法切实可行,弥补了原方法的缺陷,结果精确且重复性良好.因此该方式设计合理可考虑用作检定.
-
柱前衍生化HPLC测定盐酸阿比多尔颗粒中有关物质二甲胺
目的 利用2,4-二硝基氟苯为柱前衍生剂,建立了用高效液相色谱法测定盐酸阿比多尔颗粒中的有关物质二甲胺.方法 考察了反应温度、反应时间对衍生化反应的影响,确定佳衍生反应条件:在60℃水浴中反应30 min.采用Pinnacie DB C18色谱柱(150 mm×4.6mm,5um);流动相为乙腈-0.1％磷酸溶液,梯度洗脱;检测波长为380 nm;流速为1.0 ml/min;柱温为30℃.结果 二甲胺在0.03～0.6μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9999).定量限为0.30 ng,平均加样回收率为99.98％(n=9).结论 本法准确、方便、快速,可用于盐酸阿比多尔颗粒中有关物质二甲胺的质量控制.
-
柱前衍生化法测定葫芦巴中4-羟基异亮氨酸的含量
目的 建立葫芦巴中4-羟基异亮氨酸的含量测定方法.方法 采用反相高效液相色谱、柱前邻苯二甲醛衍生化法.Kromasil ODS (250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱为固定相,甲醇-0.05 mol·L-1醋酸钠水溶液(pH=7.2,其中加入0.5%四氢呋喃)梯度洗脱(0 min～20 min,30:70;30 min,40:60),检测波长为340 nm,柱温为30 ℃,流速为1 mL·min-1.结果 4-羟基异亮氨酸在0.184 8～3.696 μg与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999),平均回收率=99.12%,RSD=2.15%(n=6).结论 测定方法简便、准确,首次建立了葫芦巴药材的4-羟基异亮氨酸的邻苯二甲醛柱前衍生化含量测定方法,为葫芦巴质量控制及综合利用提供了依据.
-
AccQ-Tag法测定复方氨基酸注射液(18AA-Ⅴ)中17种氨基酸的含量
目的 建立测定复方氨基酸注射液(18AA-Ⅴ)中17种氨基酸含量的方法.方法 采用AccQ-Tag法,以6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基甲酸酯(AQC)为衍生试剂,与复方氨基酸注射液(18AA-Ⅴ)中17种氨基酸柱前衍生,用Waters 2695 HPLC仪器,AccQ-TagTM柱,以醋酸钠(pH4.95)缓冲液为流动相A,乙腈为流动相B,水为流动相C进行梯度洗脱,检测波长为248 nm,柱温为37 ℃,进样量为5 μL.结果 17种氨基酸的线性回归方程r值为0.999 6～0.999 9(n=5),平均回收率为93.3%～104.4%(RSD值为0.88%～3.05%,n＝6).结论 本法快速,简便,结果准确.
-
柱前衍生化HPLC法测定不同产地胡芦巴中4-羟基异亮氨酸的含量
目的：柱前衍生化法测定4‐羟基异亮氨酸含量。方法采用异硫氰酸苯酯作为衍生化试剂，色谱柱（Zorbax Eclipse XDB‐C18，150 mm ×4．6 mm ，5μm ，Agile）；流动相A ：乙腈，流动相B：1 mL · L －1磷酸水，梯度洗脱（A相∶B相）：（0～20 min ，20∶80；20 min，60∶40）；流速：1．5mL·min－1；进样体积：20μL；检测波长：254nm；柱温：30℃。结果4‐羟基异亮氨酸在质量浓度4．2～20．9μg · mL －1范围内线性关系良好（r＝0．9993），平均回收率为96．8％，RSD为1．7％。结论该方法简便、稳定，结果准确，可作为4‐羟基异亮氨酸的含量测定方法。
