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基于NF-κB（p65）/CyclinE通路芪竹二术二草汤干预慢性萎缩性胃炎癌前期病变的研究＊
目的：观察芪竹二术二草方对萎缩性胃炎癌前病变的干预效果。方法：清洁级健康Wistar大鼠56只，随机分为阴性对照组（NC）、模型组、胃复春组（WFC）和仁术健胃颗粒组（RZ），每组10只，芪竹二术二草汤高剂量组（QZ-H）和低剂量（QZ-L）组，每组8只。模型组、WFC、RZ、QZ-H和QZ-L组采用化学诱癌物N-甲基-N’-硝基-N’-亚硝基胍（MNNG）诱发大鼠胃粘膜癌变，制备胃癌前期病变模型。WFC、RZ、QZ-H和QZ-L组大鼠分别按照0.39、3.2、54.4、13.6 g·kg-1剂量给予相应药物灌胃（ig），每天一次，连续28天；NC组和模型组大鼠给予等体积生理盐水。观察各组大鼠胃粘膜组织形态的改变，检测核转录因子（NF-κB，p65）和细胞周期蛋白E（CyclinE）的表达水平。结果：与阴性对照组相比，模型组大鼠炎细胞浸润、细胞异型增生程度及NF-κB/p65、CyclinE的表达明显增加，差异有统计学意义（P<0.01）。与模型组相比，WFC组大鼠NF-κB/p65及CyclinE表达减少，差异有统计学意义（P<0.05）；RZ和QZ-L组大鼠NF-κB/p65及CyclinE表达明显减少，差异有统计学意义（P<0.01）。WFC、RZ、QZ-H及QZ-L组的复方总体有效率分别为50%、63.3%、43.3%及73.3%。结论：芪竹二术二草汤具有逆转萎缩性胃炎癌前期病变的作用，其作用机制可能是通过抑制原癌基因的转录和细胞周期调控蛋白的表达，从而防止肿瘤的发生发展。
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人参皂苷Rh2对食管癌细胞Eca-109细胞周期的影响
目的:探讨人参皂苷Rh2(ginenoside-Rh2,GS-Rh2)对人食管癌细胞Eca-109生长抑制及细胞周期的影响.方法:应用MTT法测定GS-Rh2对细胞的生长抑制作用,HE染色后光镜观察细胞形态变化,应用免疫细胞化学和Western blot检测细胞周期调控因子cyclinE,CDK2(cyclin-dependent kinase 2),p21WAF1基因蛋白表达,采用半定量RT-PCR检测基因mRNA表达.结果:GS-Rh2对Eca-109细胞生长有抑制作用,并呈剂量、时间依赖性.20μg·mL-1GS-Rh2作用1 d后细胞达到半数抑制,作用3 d的Eca-109细胞较对照细胞数目明显减少,细胞形态向正常细胞方向逆转.细胞周期分析显示,随着GS-Rh2药物剂量的增加,G0/G1期细胞数逐渐增加,S和G2/M期细胞数逐渐减少,10μg·mL-1和20μg·mL-1 GS-Rh2处理组和对照组比较有显著性差异.20μg·mL-1SS-Rh2处理细胞后,随着作用时间延长,cyclinE和CDK2蛋白及其mRNA表达水平逐渐增高,而p21WAF1蛋白及其mRNA表达水平逐渐降低.结论:GS-Rh2可以将人食管癌细胞Eca-109阻滞于G0/G1期,诱导肿瘤细胞分化,并且通过影响细胞周期调控因子cy-clinE,CDK2,p21WAF1基因的表达抑制食管癌细胞的增殖.
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丹参酮ⅡA磺酸钠抑制人肾间质成纤维细胞体外增殖过程中PCNA和Cyclin E的表达
丹参酮ⅡA磺酸钠(DS-201)是丹参脂溶成分丹参酮ⅡA经磺化而成的水溶性钠盐,药理作用与丹参酮ⅡA相同,因其水溶性提高、疗效强于丹参酮ⅡA而在临床心血管疾病的治疗和预防中广泛应用.在肾脏间质纤维化的治疗方面,其具体作用机制尚不清楚.本实验拟采用DS-201体外干预人肾间质成纤维细胞(hRIF),观察药物对细胞PCNA和CyclinE表达的影响,揭示DS-201治疗肾间质纤维化的分子机制.
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缺血预处理对大鼠肝移植缺血再灌住损伤后CyclinD1和CyclinE表达的影响
目的探讨缺血预处理(IP)对大鼠肝移植缺血再灌(IR)注损伤后肝CyclinD1和CyclinE表达的影响,来了解移植肝再生能力和功能不良的影响因素.方法将SD大鼠90只随机分为缺血预处理组(IP).对照组(OLT)和假手术组(SO)三组;用全自动生化分析仪来检测肝功能;通过免疫组化S-P法来测定移植肝CyclinD1和CyclinE的变化.结果对照组中大鼠移植肝缺血再灌注损伤后血清中谷丙转氨酶(ALT)谷草转氨酶(AST)明显升高,CyclinD1和CyclinE的百分含量较低,提示移植肝细胞再生不良;实验组经缺血预处理后血清中谷丙转氨酶(ALT)谷草氨酶(AST)稍升高,幅度小于对照组,CyclinD1和CyclinE的百分含量很高,提示移植肝细胞再生活跃.结论缺血预处理能够启动内源性保护移植肝的相应机制,可促进肝CyclinD1和CyclinE的合成,激发肝细胞的增殖和再生.
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PTEN和CyclinE蛋白在子宫内膜癌组织中的表达
目的探讨子宫内膜良性、癌前病变和恶性病变中PTEN、CyclinE蛋白的表达及其意义.方法采用免疫组化S-P法检测正常子宫内膜、子宫内膜增生、非典型性增生和子宫内膜癌组织中PTEN和CyclinE蛋白.结果非典型性增生组和子宫内膜样癌组中PTEN和CyclinE蛋白阳性表达率分别为60.0%,50.0%和42.0%,62.2%.非典型性增生组中PTEN的阳性表达显著低于正常组和增生组(P<0.02),而CyclinE的阳性表达则显著高于正常组和增生组(P<0.03).PTEN和CyclinE蛋白在子宫内膜样癌组中的表达呈负相关(r=-0.4475,P<0.01).宫内膜样癌中PTEN蛋白阳性表达的缺失与组织学分级(P<0.02)及肌层浸润深度或伴有转移有关(P<0.04),与临床分期无关(P>0.05).CyclinE的阳性表达率则与组织学分级有关(P<0.05),与肌层浸润(P>0.05)和临床分期无关(P>0.05).结论 PTEN表达缺失和CyclinE的过度表达与子宫内膜样癌的发生发展密切相关,二者的联合检测可作为子宫内膜样癌早期诊断的生物学指标.
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关键词：
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复方苦参注射液对PC-3细胞凋亡及cyclinE蛋白表达的影响
目的:研究复方苦参注射液对人前列腺癌PC-3细胞凋亡及cyclinE蛋白表达的影响.方法:用复方苦参注射液对体外培养的人前列腺癌PC-3细胞进行药物处理,采用MTT比色分析法测定复方苦参注射液不同剂量组对PC-3细胞生长的调控作用;采用流式细胞仪分析复方苦参注射液对PC-3细胞周期分布的影响,免疫细胞化学方法观察复方苦参注射液对PC-3细胞周期调控蛋白cyclinE的影响.结果:复方苦参注射液可抑制PC-3细胞的增殖,诱导其凋亡,改变细胞周期分布,使G0/G1期PC-3细胞比例增高,同时还可使cyclinE蛋白表达下降.上述作用具有时间和刺量的依赖性.结论:复方苦参注射液可诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡,改变细胞周期分布,影响细胞周期调控蛋白cyclinE的表达,从而抑制细胞增殖.
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cyclin E在肠型胃癌中的表达及意义
目的:探讨cyclin E蛋白表达与肠型胃癌的临床病理特征及预后的关系.方法:以免疫组化法分析59例肠型胃癌的cyclin E蛋白表达情况.结果:正常胃粘膜上皮细胞呈阴性反应,而30例(30/59)肠型胃癌组织被免疫染色.cyclin E的异常表达与肿瘤的浸润深度显著相关,强阳性者5年生存率低.结论:cyclin E的异常表达与肠型胃癌的发展有关,并可作为一项预后指标.
关键词： 细胞周期蛋白类/生物合成 胃肿瘤/化学 CyclinE E -
CyclinE和p27在乳腺癌中的表达及临床意义
目的 探讨CyclinE和p27在乳腺癌中表达情况及意义.方法 采用免疫组织化学S-P法检测49例乳腺浸润性导管癌(invasive ductal carcinoma,IDC)、18例乳腺导管内癌(ductal carcinoma in situ,DCIS)、18例正常乳腺组织中CyclinE和p27蛋白的表达情况.结果 (1)在IDC、DOIS和正常乳腺组织中CyclinE的阳性率分别是71.4%、44.4%、11.1%,p27的阳性率分别是30.6%、61.1%、88.9%.(2)CyclinE和p27的阳性表达率在IDC、DCIS和正常乳腺组织之间、腋窝淋巴结有无转移之间差异均有显著性(P＜0.05,P＜0.01).二者的阳性表达率与IDC组织学分级关系不密切(P＞0.05).(3)CyclinE和p27之间阳性表达率呈负相关(P＜0.01).结论 CyclinE和p27表达异常可能在乳腺癌的发生,发展中具有重要的作用.联合检测CyclinE和p27蛋白对预测乳腺癌淋巴结转移有重要意义.
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C-myc和CyclinE蛋白在前列腺腺癌中的表达及临床意义
目的：分析前列腺腺癌组织中C-myc和CyclinE的表达情况并探讨其临床意义。方法应用免疫组织化学及HE染色法检测80例前列腺腺癌组织和80例良性前列腺增生组织中C-myc和CyclinE的表达水平，并分析二者表达水平和前列腺腺癌临床病理参数的关系。结果前列腺腺癌中C-myc和CyclinE阳性率为67．5%和71．25%，良性前列腺增生组织中C-myc和CyclinE阳性率为22．50%和20%，差异均有统计学意义（P<0．05）；C-myc在前列腺腺癌的肿瘤分化程度和临床分期差异均具有统计学意义（P<0．05）， Cyclin E在前列腺腺癌的肿瘤分化程度（P<0．05），但Cyclin E在前列腺腺癌的临床分期差异无统计学意义（P>0．05）。结论C-myc和CyclinE在前列腺腺癌与良性前列腺增生中的表达差异可能是前列腺腺癌发生发展的分子基础，二者的联合检测对前列腺腺癌预后的判断有指导作用。
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PTEN、cyclinE在绝经前妇女子宫内膜息肉中表达情况及相关性分析
目的：探讨PTEN、cyclinE在绝经前妇女子宫内膜息肉中表达情况并分析其相关性。方法：入选2009年12月~2012年7月在我就诊的子宫内膜息肉患者72例作为观察组,并入选同期在我院进行体检的绝经前妇女73例作为对照组,比较两组人群子宫内膜PTEN、cyclinE表达情况,并分析二者之间的相关性。结果：对照组患者PTEN、cyclinE阳性表达率分别为50.7%、19.2%与观察组患者26.4%、65.3%相比,差异均具有显著的统计学意义(R＜0.05)。分析显示,子宫内膜息肉患者中PTEN、cyclinE表达存在明显的负相关,r=-0.423(R＜0.05)。结论：绝经前妇女子宫内膜息肉患者中cyclinE表达明显增加,PTEN表达显著减少,二者存在显著的负相关。
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p27与cyclin E在垂体肿瘤研究中的现状
细胞周期及细胞周期的调控是当前肿瘤研究中的热点.就细胞周期的调控而言,在细胞周期的各个间期中以G1期为重要,许多细胞内外的增殖调控物质主要作用于此.参与细胞周期调控的主要分子包括:细胞周期蛋白(cyclin)、细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白(CDKI).
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P27和细胞周期蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达及意义
目的 探讨细胞周期调节因子P27和细胞周期蛋白(cyclinE)在喉鳞状细胞癌中的表达及临床意义.方法 采用免疫组织化学(SP)法检测P27和cyclinE在72例喉癌和21例正常喉黏膜中的表达.结果 喉癌中P27和cyclinE阳性表达率分别为30.6%(22/72)、51.4%(37/72),与正常喉黏膜比较差异有统计学意义(P＜0.05);P27和cyclinE在喉癌中的表达与分化程度及淋巴结转移有统计学意义(P＜0.05),但与发病部位无关(P>0.05).结论 P27和cyclinE与喉癌的发生密切相关,检测P27和cyclinE对喉癌的早期诊断、治疗及预后有重要意义.
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食管上皮癌变过程中细胞周期蛋白E细胞周期蛋白依赖性激酶2表达及DNA含量的研究
本文探讨食管上皮癌变过程中DNA含量的变化,以及细胞周期蛋白E(cyclinE)和细胞周期蛋白依赖性激酶2(cy-clin-dependent kinase2,CDK2)表达的变化及其意义.
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靶向CDK2、cyclinE的siRNA对HepG2细胞周期及凋亡的影响
目的:探讨细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent-kinase 2,CDK2)活性对肝癌细胞株HepG2细胞周期和细胞凋亡的影响.方法:根据基因库中登录的人和鼠CDK2、cyclinE序列,设计并构建CDK2、cyclinE干扰RNA真核表达载体;脂质体法转染肝癌细胞株HepG2细胞,流式细胞术分析CDK2及cyclinE对HepG2细胞增殖的影响;蛋白质印迹法检测CDK2、cyclinE活性的变化caspase-3活性的影响.结果:1.成功构建CDK2及cyclinE干扰RNA真核表达载体psiCDK2、psiCyclinE,用脂质体法导入肝癌细胞株HepG2细胞中,有效表达.2.转染48h后与空载体组相比:psiCDK2、psiCyclinE组G1期细胞增多,G2/M和S期细胞减少;蛋白质印迹法分析表明psiCDK2、psiCyclinE组caspase-3酶原被激活.结论:靶向CDK2、cyclinE的siRNA能抑制HepG2细胞的增殖;靶向CDK2、cyclinE的siRNA能激活caspase-3,诱导肝癌细胞HepG2凋亡.
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SiRNA沉默CDK2和CyclinE对人肺腺A549细胞周期的影响
目的 探讨小干扰RNA沉默CDK2(cyclin-dependent-kinase2)、CyclinE基因表达对人肺癌细胞株A549细胞增殖、及细胞周期的影响.方法 以脂质体Lipofectamine2000将化学合成的CDK2、Cy-clinE siRNA转染人肺癌A549细胞,转染48 h后流式细胞术检测各组细胞凋亡及细胞周期的变化.结果 SiRNA基因沉默后CDK2、CyclinE蛋白表达明显下降,与对照组相比,G1期细胞增加,G2/M及S期细胞减少,A549细胞增殖明显受到抑制,凋亡细胞比例增加.结论 SiRNA沉默CDK2、CyclinE基因表达能抑制肺癌A549细胞的增殖;并激活细胞凋亡通路,诱导人肺腺癌细胞A549的凋亡.
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细胞周期G1期调节因子Cyclin E及pRb在CA研究中的进展
目的:论述了细胞周期素E(Cyclin E),视网膜母细胞瘤蛋白(pRb)的发现历史,分子结构,及近几年上述因子在尖锐湿疣(CA)中的研究进展.方法:查阅国内外大量有关文献.结果与结论:细胞周期素E(Cyclin E),视网膜母细胞瘤蛋白(pRb)为探索尖锐湿疣发病机制及有效治疗提供新思路.
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幽门螺杆菌感染CAG脾胃湿热证与CyclinD1 CyclinE及DNA含量的相关性研究
目的:探讨幽门螺杆茵(H. pylori, Hp)感染慢性萎缩性胃炎(CAG)脾胃湿热证与细胞周期蛋白(CyclinD1、 CyelinE)及细胞核DNA含量表达的相关性.方法:将80例Hp感染CAG患者按中医辨证分型,其中脾胃湿热证44例.脾虚证36例,正常对照组18例,分别采用组织化学免疫法和流式细胞术检测CyelinD1、CyclinE和DNA含量,并分析比较它们间的相关性.结果:(1)Hp感染CAG脾胃湿热组的肠化程度明显高于脾虚组.(2)正常对照组胃黏膜内CyclinD1、 CyclinE主要呈阴性或弱阳性表达, Hp感染CAG脾胃湿热组及脾虚组患者胃黏膜CyclinD1、 CyclinE表达增强,较正常对照组有非常显著差异,但两组间无显著性差异.(3)Hp感染CAG脾胃湿热组与脾虚组胃黏膜细胞核DNA含量(DI值)比较无显著性差异(P>0.05).萎缩组、萎缩伴肠化组、萎缩伴不典型增生组各组间DI值比较元显著性差异(P>0.05).结论:(1)在一定的病情发展过程,脾胃湿热组病情进展较快,病情较重,原因可能是脾胃温热证与炎症关系密切所致.(2) CyclinD1、 CyclinE的表达增强可能与Hp感染及所继发炎症有关.脾胃湿热证和脾虚证之间细胞增殖可能呈递增的趋势,而这种递增可能提示了庆病发展的方向, CydlnE蛋白阳性表迭可能是胃炎发生发展过程中的重要分子事件.(3) Hp感染CAG尚未发展为胃癌的过程中黏膜细胞可能尚处于病变早期或DNA合成速度相同.
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胃癌细胞p27kip1、cyclinE的表达及与幽门螺杆菌感染关系
[目的]观察胃癌细胞p27kip1、cyclinE的表达情况,并分析幽门螺杆菌(Helicobacter pylori ,Hp)感染对二者表达的影响,以探讨Hp可能的致癌机制. [方法]用免疫组织化学SP法检测59例胃癌p27kip1、cyclinE表达情况,采用改良Giemsa快速尿素酶检验法检测Hp感染.[结果]p27kip1阳性率在正常胃黏膜为84.22%,显著高于胃癌的47.46%(P<0.05),胃癌中高中分化腺癌组为68.42%,显著高于低分化腺癌的37.5%和与胃黏液癌的31.25%(P<0.05),但后两者间无显著性差异(P>0.05). cyclinE阳性率在正常胃粘膜为11.11%,显著低于胃癌的55.93%(P<0.05),胃癌中高中分化腺癌组为31.58%显著低于低分化腺癌的66.67%和胃黏液癌的68.75%(P<0.05),后两者间无显著性差异(P>0.05).p27kip1及cyclinE的阳性率在Hp阳性和Hp阴性胃癌组间无显著差异性(P>0.05). [结论]胃癌组织p27kip1表达下调、cyclinE表达上调,提示二者的表达失衡可能会促进胃癌的发生.但二者表达与Hp感染无明显相关关系.
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肺活检材料p21waf1、CyclinE的表达与肺癌预后关系的研究
目的:探讨p21waf1,CyclinE在纤支镜肺鳞癌活检组织中表达及与临床病理学特征、患者预后之间关系.方法:采用免疫组化ABC方法.结果:在肺鳞癌组织中p21waf1呈低水平表达,其阳性表达率(11/54)仅为20.4%.在肺鳞癌组织中CyclinE阳性表达率(17/54)为31.5%.低分化及有淋巴结转移的病例,其CyclinE表达量明显高于高中分化及无淋巴结转移的病例.结论:p21waf1在肺鳞癌组织中呈低表达,CyclinE表达可作为判断肺鳞癌恶性程度的一个指标.
