乳香中三萜类化合物和药理活性的研究进展

乳香为橄榄科植物乳香树或同属植物的胶状树脂，主要活性成分为五环三萜、四环三萜等三萜类化合物。现代药理研究表明乳香有抗炎、抗肿瘤、诱导分化凋亡、抗溃疡、降糖、改善学习记忆等药理活性，在抗炎、抗肿瘤方面药理研究较为深入，不良反应少，有潜在的药用价值。通过查阅文献，对近五年来乳香三萜类成分及其药理作用研究进展进行综述，为乳香的进一步研究提供参考。

炮制温度和时间对醋乳香外观颜色及6种乳香酸含量的影响

目的:确定引起南北方醋乳香颜色差异的炮制因素,并分析对乳香主要6种乳香酸含量的影响.方法:收集不同地区市售醋乳香,分别采用文火和中火两种温度醋炙不同时间,得到不同醋乳香样品.直观观察醋乳香颜色,应用色差仪测定色度参数值,并采用高效液相色谱法测定6种主要乳香酸成分含量.采用Zorbax Extend-C18(4.6 mm×50 mm,1.8 μm)色谱柱,以乙腈-0.1％磷酸为流动相,梯度洗脱,流速1 mL· min.,检测波长210 nm、250 nm,柱温30℃.结果:直观观察表面颜色,北方醋乳香呈现黄色或棕黄色,南方则为棕褐色或黑褐色,显示炮制程度不同.色度参数值显示,市售北方和南方醋乳香的亮度L*值和红绿色度a*值差异显著,L*值分别为75.327-80.746和44.321-49.527,a*值分别为5.378-6.502和9.423-9.978,蓝黄色度b*值没有明显差异.直观观察同样表面颜色的醋乳香,L*值和a*值也有一定差异.自制醋乳香色度参数结果显示,随着炮制温度和时间变化,醋乳香外观颜色和色度参数值L*值和a*值发生改变.但乳香在文火条件下即使炒制30 min,也达不到南方醋乳香的色度参数值,而中火炒制11 min即可达到.含量测定结果显示,α-乳香酸、β-乳香酸、3-乙酰-α-乳香酸和3-乙酰-β-乳香酸4种成分含量升高,而11-羰基乳香酸、3-乙酰-11-羰基乳香酸在炮制后含量降低.中火升高或降低的幅度比文火大,而同一温度随炮制时间延长,含量也呈现逐渐升高或降低的趋势.结论:炮制温度是造成南北方醋乳香颜色差异的主要因素,并引起乳香中6种乳香酸含量升高或降低的幅度不同.色差仪色度参数值可客观表征醋乳香外观颜色.

不同提取方式对醋乳香中主要乳香酸类成分含量及其抗炎活性的影响

目的:确定醋乳香挥发油及水提液中是否含有乳香酸类成分,并通过比较乳香酸类成分含量和抗炎活性来确定醋乳香佳提取方法.方法:采用水提法、乙醇提取法及水蒸气蒸馏-乙醇连续提取法提取,比较6种主要乳香酸类成分α-乳香酸,β-乳香酸,3-乙酰-α-乳香酸,3-乙酰-β-乳香酸,11-羰基-β-乳香酸和11-羰基-3-乙酰-β-乳香酸的含量,以及对脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞RAW264.7炎症模型产生白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,探讨醋乳香的佳提取方法.采用HPLC测定6种乳香酸类成分的含量,流动相0.1％磷酸水溶液-乙腈梯度洗脱,检测波长210 nm和250 nm.结果:在醋乳香挥发油中检测到4种乳香酸类成分,但提取率较低(1.73％ ～ 13.02％),水提液中含有上述6种乳香酸类成分.相同提取条件下,乙醇提取法的效率高,6种成分的提取率81.09％ ～ 88.38％.水提法、乙醇提取法及水蒸气蒸馏-乙醇连续提取法细胞液中TNF-α质量浓度分别为(2.248 5±0.332 2),(1.9332±0.4229),(2.148 3±0.5343) μg·L-1,IL-1β质量浓度分别为(25.53 ±3.23),(23.22±3.24),(24.32±4.32) ng·L-1.佳乙醇提取工艺为加8倍量95％乙醇回流提取2次,每次30 min,各成分的提取率均＞90％.结论:醋乳香挥发油中含有少量乳香酸类成分,水提液中也含有乳香酸类成分;采用乙醇提取法时,乳香酸类成分的提取率和抗炎活性强.

乳香酸治疗口腔溃疡的动物实验研究

目的 研究乳香酸对口腔溃疡局部治疗的效果及作用机制,为其临床应用提供依据.方法 采用NaOH晶体化学烧灼法建立大鼠口腔溃疡动物模型,分为乳香酸治疗组、溃疡散阳性对照组和空白阴性对照组,每组30只.观察乳香酸对实验性口腔溃疡的治疗效果,并检测溃疡组织TNF-α、IL-6、SOD、MDA表达的变化.结果 乳香酸组的溃疡平均愈合速度明显高于空白阴性对照组,且乳香酸在降低溃疡组织MDA含量、提高SOD活性方面优于溃疡散,同时乳香酸也能抑制溃疡组织中TNF-α和IL-6的表达水平.结论 乳香酸对实验性口腔溃疡有明显的促进愈合作用,还能明显减轻溃疡的充血和水肿,其作用机制可能与抗氧化应激和抑制炎症因子水平有关.

乳香酸与姜黄素对二甲基苯并蒽诱导地鼠口腔癌的化学预防作用

目的 观察乳香酸和姜黄素对二甲基苯并蒽(7,12-dimethyl benzanthracene,DMBA)诱导的叙利亚金黄地鼠口腔癌的化学预防作用、两者单独和联合应用是否可以抑制口腔癌的发生及发展,并对其抗肿瘤机制进行初步探讨.方法 实验对象为160只6～8周龄、体质量80～130 g的雄性叙利亚金黄地鼠,取10只为阴性对照组,不作任何处理；其余150只金黄地鼠用0.5％ DMBA涂抹左侧颊囊6周,第7周时采用随机数字表法将地鼠分为5个用药组和1个阳性对照组(每组25只),低浓度乳香酸组、高浓度乳香酸组、低浓度姜黄素组、高浓度姜黄素组及联合用药组分别给予5、10 mg/L乳香酸溶液,5、10 μmol/L姜黄素溶液及5 mg/L乳香酸+5μmol/L姜黄素溶液涂抹地鼠左侧颊囊18周,阳性对照组不做任何处理.第25周处死全部动物,记录肉眼肿瘤发生率、肿瘤数目及体积,行HE、5-溴脱氧尿苷(5-bromodeoxyuridine,BrdU)、免疫组化染色及花生四烯酸代谢物检测.结果 肉眼可见肿瘤发生率阳性对照组为93.8％,低浓度乳香酸组80.0％,高浓度乳香酸组81.3％,低浓度姜黄素组78.3％,高浓度姜黄素组75.0％,联合用药组73.9％；各用药组平均肿瘤数目均较阳性对照组[(2.19±0.98)个]有所降低,其中高浓度姜黄素组[(1.45±0.92)个]和联合用药组[(1.13±0.81)个]显著下降(P＜0.05,P＜0.01)；各用药组组织病理学观察鳞状细胞癌病变数目均较阳性对照显著降低(P＜0.05).各用药组与阳性对照组相比均能降低BrdU增殖指数,尤以低、高浓度姜黄素组和联合用药组效果更佳(P＜0.05)；高、低浓度乳香酸组、高浓度姜黄素组及联合用药组白三烯B4含量与阳性对照组相比均显著下降(P＜0.05).结论 各用药组均可明显抑制DMBA诱导的金黄地鼠口腔癌,其中联合用药组抑癌作用效果好,乳香酸和姜黄素可以通过降低细胞增殖活性抑制DMBA诱导的金黄地鼠口腔癌的发生、发展.

四级杆飞行时间串联质谱(QTofMS)辅助高效薄层色谱(HPTLC)鉴别乳香中乳香酸

目的 建立薄层色谱法鉴别乳香中乳香酸类成分.方法 样品经甲醉超声提取,C18固相萃取柱净化后,点样于硅胶GF254,高效预制薄层板上,以甲苯-乙酸乙酣-庚烷-无水甲酸(8:2:1:0.3)为展开剂展开,先置紫外灯(254 nm)下检视,再喷以10%硫酸乙醉溶液,并于105℃加热至条斑清晰,置紫外灯(365 nm)下检视.条斑借助QTofMS进行成分识别.结果 紫外灯(254 nm)下,埃塞俄比亚乳香和索马里乳香的色谱均可见2个明显的暗条斑,紫外灯(365 nm)下,均可见8个荧光条斑,其特征图谱与其他常见树脂类药材(洋乳香、天然没药、胶质没药、安息香、松香和达玛树脂)区别明显.结论 该法简便、专属、准确,适用于乳香的快速鉴别和质量控制.

色谱指纹图谱结合化学计量学用于3种乳香的鉴别和质量评价

目的 提出一种中药鉴别和质量评价的整体策略,并遵循该策略建立乳香的HPLC指纹图谱分析方法.方法 该策略包括5个步骤,步骤1为多品种收集,步骤2建立统一条件的色谱指纹图谱鉴别和含量测定分析法,步骤3借助对照品和液质联用法进行成分鉴别,步骤4使用多元统计分析法对中药进行真伪(或不同种)鉴别,步骤5采用相似度阈值评价结合含量测定区间值评价中药质量的优劣.结果 HPLC指纹图谱包含26个色谱峰,其中14个色谱峰进行了鉴别,数据进行了聚类热图分析、主成分分析、偏小二乘判别分析和自组织映射人工神经网络等多元统计分析,并选择了支持向量机分类器用于模式识别,分别建立了3种药用乳香的共有模式,得出了11-羰基-β-乳香酸(KBA)和11-羰基-β-乙酰乳香酸(AKBA)的含量区间.结论 本方法专属、准确,可用于精确区分和系统评价3种药用乳香.

西黄丸和活血止痛散中乳香及非法添加松香的薄层色谱鉴别

目的 建立薄层色谱鉴别方法检测西黄丸和活血止痛散中的乳香药材及非法添加的松香.方法 样品经甲醇超声提取,点样于硅胶GF254薄层板上,以甲苯-乙酸乙酯-庚烷-无水甲酸(8∶2∶1∶0.3)为展开剂展开,先置紫外灯(254 nm和366 nm)下检视,再喷以茴香醛试液,并于105℃加热至条斑清晰,日光下再次检视.结果 紫外光灯(254 nm)及日光下,西黄丸和活血止痛散与乳香对照药材的薄层指纹图谱一致,使用对照品识别了11-羰基-β-乙酰乳香酸(AKBA)、11-羰基-β-乳香酸(KBA)、β-乳香酸(β-BA)和β-乙酰乳香酸(β-ABA)；紫外光灯(366 nm)下,活血止痛散可见与当归对照药材一致的条斑.紫外光灯(254 nm)下,某些西黄丸色谱中可见松香中松香酸的暗条斑.结论 该法简便、专属,适用于西黄丸和活血止痛散薄层色谱鉴别和质量控制.

HPLC-ELSD法同时测定西黄丸中6种乳香酸类成分

目的 建立HPLC-ELSD法同时测定10个批次西黄丸中11-羰基-β-乳香酸、11-羰基-β-乙酰乳香酸、α-乳香酸、β-乳香酸、3-乙酰基-α-乳香酸、3-乙酰基-β-乳香酸6种乳香酸类成分的定量.方法 方法采用HPLC-ELSD法,Waters SymmetryC18色谱柱(250 mm× 4.6 mm,5μm),甲醇-0.5％醋酸水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量为0.8 mL/min,柱温为30℃,漂移管温度45℃,载气为高纯N2,载气体积流量为1.5 L/min.结果11-羰基-β-乳香酸、11-羰基-β-乙酰乳香酸、α-乳香酸、β-乳香酸、3-乙酰基-α-乳香酸、3-乙酰基-β-乳香酸分别在0.10～3.00 μg (r=0.999 5)、1.23～36.9 μg (r=0.999 5)、0.16～4.80 μg (r=0.999 7)、0.25～7.58 μg (r=0.999 7)、0.21～6.18 μg (r=0.999 5)、0.30～9.00 μg (r=0.999 6)线性关系良好;6种成分的平均回收率(RSD)分别为99.6％(3.70％)、99.1％(3.62％)、99.2％(1.66％)、98.2％(1.89％)、99.1％(3.42％)和99.5％(2.32％),10批西黄丸中6种乳香酸的总量分别为35.1 mg/g (2.08％)、127.8 mg/g (2.10％)、31.3 mg/g (1.74％)、56.2 mg/g (1.64％)、56.5 mg/g (1.61％)、87.8 mg/g (1.73％).结论 本方法简便、准确、分离效果好,为西黄丸的物质基础研究提供依据.

乳香醋酸乙酯部位的化学成分研究

目的 研究乳香中醋酸乙酯部位的化学成分.方法 采用正反相硅胶柱色谱和重结晶等技术对其醋酸乙酯部位中的化学成分进行分离和纯化,并根据波谱数据鉴定化合物的结构.结果 分离得到9个化合物,分别鉴定为3α-乙酰氧基-甘遂-7,24-二烯-21-酸(1)、3α-乙酰氧基-羊毛甾-8,24-二烯-21-酸(2)、3-羰基-甘遂-8,24-二烯-21-酸(3)、3β-羟基-羊毛甾-8,24-二烯-21-酸(4)、3-乙酰基-11-羰基-β-乳香酸(5)、3-乙酰基-α-乳香酸(6)、3-乙酰基-β-乳香酸(7)、incencole oxide acetate (8)、棕榈酸(9).结论 化合物1是首次从天然资源中分离得到,化合物9为首次从乳香中分离得到.

277乙酰基-11-酮基-β-乳香酸对脑膜瘤细胞的细胞毒活性

乳香的化学成分和药理活性研究进展

乳香为橄榄科植物乳香树或同属植物的胶状树脂,主要含有五环三萜、四环三萜、大环二萜等萜类和多种挥发油类成分.研究表明药用乳香具有抗炎、抗肿瘤、抗哮喘、抗氧化等药理活性,有潜在的药用价值.综述了乳香化学成分和药理作用研究进展,为乳香的进一步研究提供参考.

RP-HPLC双波长法同时测定活络效灵丹加减方中9种有效成分的含量

目的 建立RP-HPLC双波长法同时测定活络效灵丹中3种丹参酮和6种乳香酸的含量.方法 采用RP-HPLC法,色谱柱为Waters xBridgeTm C18柱(150 mm×4.6 mm,3.5μm),流动相为体积分数为0.01％的磷酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为210 nm和254 nm,柱温为30℃.结果 隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、11-羰基-β-乳香酸(KBA)、11-羰基-β-乙酰乳香酸(AKBA)、α-乳香酸(α-BA)、β-乳香酸(β-BA)、乙酰基-α-孚乳香酸(A-α-BA)和乙酰基-β-乳香酸(A-β-BA)的质量浓度分别在0.252 0 ～8.064、0.157 2 ～5.030、0.937 5～30.00、3.156 ～101.0、25.10～803.2、6.250～200.0、6.813～218.0、13.50 ～432.0、12.50 ～400.0 mg·L-1内与峰面积呈良好的线性关系(r≥0.999 3,n=6),提取回收率均在97.2％～ 101.2％内.结论 该方法可做为活络效灵丹中丹参酮类和乳香酸类化学成分的含量测定方法,为其质量控制提供参考依据.

3-乳香脂酸治疗鸭慢性乙型重型肝炎的效果

乳香中的主要成分为树脂(约占60％～70％),树脂中的成分主要是游离的α,β-乳香脂酸等[1].目前已有研究表明,乳香的提取物具有抗炎和抗氧化的作用[2],且β乳香酸可能会对免疫系统起到一定的抑制性作用.本研究采用鸭作为动物模型,探讨β乳香酸对于慢性乙型重型肝炎的治疗效果.

姜黄素和乳香酸对人口腔表皮样癌KB细胞中花生四烯酸代谢通路COX-2和5-LOX的作用

目的:观察姜黄素和乳香酸对人口腔表皮样癌细胞系KB中花生四烯酸代谢通路环氧化物酶(cyclooxygenase,COX)-2和5-脂氧化物酶(lipoxygenase,LOX)的作用.方法:培养人口腔表皮样癌KB细胞,采用不同浓度的姜黄素和乳香酸及二者联合处理KB细胞24、48、72 h,光镜下观察不同浓度药物作用时,细胞形态的变化及贴壁生长的情况,MTT方法检测其对细胞增殖的影响;Annexin V-FITC/PI染色法检测对KB细胞凋亡的影响;RT-PCR及Western-blotting法检测花生四烯酸代谢通路中COX-2、5-LOX表达.结果:光镜下观察发现,姜黄素和乳香酸能一定程度上抑制KB细胞的贴壁生长.MTT结果显示,姜黄素和乳香酸均能抑制KB细胞增殖,呈现一定的浓度和时间依赖关系.流式细胞检测结果表明,姜黄素和乳香酸均能促进KB细胞凋亡,呈现一定的浓度依赖关系.两种药物联合应用抑制细胞增殖和促进凋亡的作用明显强于单独作用.RT-PCR及Western-blotting结果提示,姜黄素能抑制花生四烯酸代谢通路中限速酶COX-2和5-LOX的表达,乳香酸可以抑制5-LOX表达,且成一定的剂量相关性,两者联合应用时对COX-2和5-LOX的表达均有抑制作用,尤其是对5-LOX通路的抑制,联合应用较任何一种药物单独应用作用显著增强.结论:姜黄素能抑制人口腔表皮样癌细胞KB的增殖,促进凋亡,并能抑制炎症代谢通路中COX-2和5-LOX的表达,乳香酸能抑制人口腔表皮样癌细胞KB的增殖,促进凋亡,且能抑制5-LOX表达,提示天然植物药姜黄素和乳香酸可能通过抑制花生四烯酸代谢通路中COX-2、5-LOX的表达而发挥一定的口腔癌化学预防作用.

乳香基原研究(Ⅱ).性状、显微、TLC和HPLC鉴别技术分析三种乳香

目的:进一步研究3种药用乳香的异同,为基原鉴别提供依据.方法:采用性状、显微、TLC指纹图谱和HPLC指纹图谱4种技术对3种药用乳香进行比较研究.结果:性状鉴别无法区分3种药用乳香;显微鉴别有一定的辨识度;TLC指纹图谱鉴别可区分3种药用乳香;HPLC指纹图谱鉴别可用于区分药用乳香和非药用乳香,并能在一定程度上区分3种药用乳香.结论:再次印证药用乳香的原植物至少包括乳香树、纸乳香树和齿叶乳香树这一结论;4种鉴别技术快速、全面、准确、互补,可用于乳香的基原鉴别.

11-羰基-β-乙酰乳香酸诱导HL-60细胞凋亡

目的:探讨11-羰基-β-乙酰乳香酸(AKBA)对人类髓系白血病细胞株HL-60细胞凋亡的影响.方法:不同质量浓度和时间的AKBA处理HL-60细胞后,采用琼脂糖凝胶电泳技术检测凋亡带;采用Hochost33342染色观察细胞的形态学变化;Annexin-V-FITC/PI双染法及流式细胞术检测细胞凋亡率.结果:一定质量浓度的AKBA作用于HL-60细胞即可观察到细胞出现凋亡的形态学改变,DNA凝胶电泳出现了凋亡特征性的DNA小分子降解片段带,流式细胞仪检测早期凋亡率高可达39.49%,总凋亡率可达99.9%,并呈时间和剂量依赖性.结论:AKBA能诱导HL-60细胞凋亡,其作用呈剂量和时间依赖性.

双标多测法Ⅲ-4种定性定量模式及紫外-可见光谱、质谱辅助定性

目的:以建立乳香中11-羰基-β-乙酰乳香酸(AKBA)和11-羰基-β-乳香酸(KBA)的含量测定法为例,探讨双标多测法的多种定性定量模式和色谱峰辅助定性方法.方法:使用HPLC-PDA色谱仪建立含量测定法,以AKBA为参照物考察不同检测波长、流动相比例和pH下KBA的相对斜率(相对校正因子的倒数)变异情况,考察在10根不同C18色谱柱上使用AKBA和乳香对照药材定性KBA的准确度.结果:含量测定方法的线性和回收率均良好.以AKBA为参照物,KBA的相对斜率平均值为0.920,且在不同条件下保持稳定.使用AKBA和乳香对照药材结合紫外光谱定性KBA色谱峰的准确度高.结论:建立的乳香双标多测法为乳香及含乳香制剂提供了一种有效且成本低廉的含量测定方法模式;4种不同的定性定量模式具有良好的实用性和可行性,扩展了双标多测法的适用范围.

乳香酸在消化系统疾病中的研究进展

乳香(frankinsence)是卡氏乳香树及齿叶乳香树皮部渗出的胶状树脂.乳香作为一种传统中药,含有丰富的乳香酸类化学成分.现代医学研究表明,乳香酸具有抗炎、抗肿瘤、抗溃疡、抗哮喘、抗氧化、镇痛、免疫调节和调控脂质代谢等药理作用.随着研究的不断深入,近年来乳香酸在治疗消化系统疾病的相关研究逐渐受到重视.本文就乳香酸在消化系统疾病中的研究进展做一综述,以推进其进一步研究和指导临床治疗.