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河北习用望江南子炮制规范研究
目的 综合考察研究河北习用望江南子的基原;建立其炮制规范.方法 采用生药学鉴别方法确定植物基原;建立薄层色谱鉴别、紫外-可见分光光度法测定总蒽醌的含量及高效液相色谱法测定总蒽醌中的大黄素甲醚含量的检测方法.结果 确定河北习用望江南子基原应为豆科植物茳芒决明Cassia sophera L.的干燥成熟种子;建立了望江南子、大黄素甲醚双对照的薄层色谱鉴别法;在510mm测定总葸醌:1,8-二羟基葸醌线性范围为0.04016～0.2008mg/L(r=0.9998),平均加样回收率为98.5%,RSD=2.1%(n=6).测定大黄素甲醚:Agihnt ZORBAX Extend-C 18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),甲醇-0.1%磷酸溶液(85:15)为流动相,体积流量1.00mL/min,检测波长为440 nm,室温操作,平均加样回收率为99.5%,RSD为1.O%(n=6).结论 方法准确、可靠,可用于控制望江南子及其炮制品的质量.
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基于显微-DNA 条形码-产地分析联用的巴西柑橘属植物药 FARINHA DE LARANJA（枳壳）基原鉴定研究
目的：利用显微-DNA 条形码-产地分析联用的方法对巴西柑橘属植物药 FARINHA DE LARANJA 粉末进行基原鉴定研究。方法应用显微鉴定的方法对药材粉末的基原进行初步判定；再提取样品 DNA,扩增 ITS 序列,利用 NCBI 数据库中的 BLAST 功能分析相似度,对样品品种进行DNA 条形码鉴定；后结合产地信息对数据库中的序列进行筛选。结果显微-DNA 条形码-产地综合分析结果表明,该样品为芸香科柑橘属 Citrus L.植物酸橙 Citrus aurantium 的干燥未成熟果实粉末。结论巴西植物药 FARINHA DE LARANJA 的鉴定可为扩大枳实、枳壳等中药材的药用资源提供依据。
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基于 DNA 条形码-产地-形态分析联用的巴西马钱属植物药 QUINA 基原鉴定研究
目的：通过 DNA 条形码—产地—形态分析联用的方法对巴西马钱属植物药 QUINA进行基原鉴定研究,为这种药材的开发利用提供依据。方法通过提取样品 DNA、PCR 扩增及双向测序,获得样品的内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)序列,利用 NCBI 数据库中的 BLAST功能计算相似度,对其基原进行 DNA 条形码鉴定；根据其产地信息对 DNA 条形码鉴定结果进行筛选和分析；依据其形态特征验证鉴定结果。结果本次收集的植物类药材 QUINA 来源于马钱科马钱属植物 Strychnos pseudo quina A. St.-Hil.的根皮。结论 DNA 条形码—产地—形态三者联用的方法可弥补单一鉴定方法的不足,能够快速、准确的对未知样品进行基原鉴定。
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基于性状-显微-DNA 条形码联用的巴西牛至属植物药 HORTELA 基原鉴定研究
目的：利用性状—显微—DNA 条形码联用的方法对巴西牛至属植物药 HORTELA 进行基原鉴定研究。方法应用性状鉴定的方法初步对药材进行真伪鉴别；再应用显微鉴定的方法验证性状鉴定结果；后提取样品 DNA,扩增 ITS 序列,利用 NCBI 数据库中的 BLAST 功能分析相似度,对样品品种进行 DNA 条形码鉴定。结果性状—显微—DNA 条形码综合分析结果表明,该样品为牛至属植物 Origanum elongatum(Bonnet) Emb.& Maire.的干燥地上部分。结论 HORTELA 可能为多基原植物类药材,其来源为牛至属 Origanum elongatum (Bonnet) Emb.& Maire.和薄荷属Mentha rotundifolia (Linn.) Huds.干燥地上部分。
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基于ND2基因序列的燕窝DNA条形码鉴别
目的:利用DNA条形码鉴定技术,快速、准确地鉴别不同种类及产地的燕窝,为该药材的质量评价提供参考.方法:提取不同产地及品种燕窝的DNA,对烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氧酶亚单位2(ND2)部分序列进行扩增和测序,利用软件MEGA6.0进行序列比对,分析变异位点,计算Kimura-2参数遗传距离,构建邻接(neighbor-joining,NJ)系统发育树.结果:NJ系统发育树显示31个官燕窝样品均与爪哇金丝燕Aerodramus fuciphagus聚为1支;1个毛燕窝样品与大金丝燕A.maxim us聚为1支.但官燕窝中经细胞色素b(Cytb)鉴定生物基原为爪哇金丝燕亚种(淡腰金丝燕A.fuciphagus germani)的8个样品单独聚为1支,支持率82％,并在该段ND2序列表现为2个位点的差异,表明该段ND2序列可鉴别爪哇金丝燕的亚种.结论:ND2条形码可用于快速、准确地鉴别燕窝的生物基原.
关键词： 燕窝 DNA条形码 NADH脱氧酶亚单位2 基原鉴定 -
中药鉴定学的研究展望
中药鉴定学是研究中药品种、质量,制定中药标准,寻找和扩大药源的前提和基础.中药的品种即真伪直接关系到用药的安全、有效以及中药研究成果的正确性.因此,中药鉴定学的首要任务是确定中药材、中药饮片以及中成药原料药来源物种的正确性,这也是中药标准化和中药研究的基础.然而,由于历代本草记载、地区用药习惯等方面存在差异,同名异物、同物异名现象普遍存在.同时,由于中药资源的稀缺性以及鉴定的难度,导致商品市场中药品种混乱,甚至存在有意作假现象,例如假川贝母、伪制龙齿、假沉香、假巴戟天、伪制蕲蛇等.据新华网报道某省食品药品监督管理局2011年一季度在抽验的中药材33个品种48批样品中,检出不合格品种28个41批,不合格率为85.42％.其中,巴戟天和沉香抽验3批以上均不合格.综上所述,中药材及其饮片的基原鉴定仍存在许多问题,亟待进一步研究解决.
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苦苣菜的生药鉴别
目的：对苦苣菜进行生药学鉴定。方法：采用药材基原鉴定、性状鉴定、显微及理化鉴别方法。结果：苦苣菜主要鉴别特征：药材茎黄绿色，具纵棱，基部略带淡紫色，断面中空。叶互生，皱缩破碎，羽状深至全裂，裂片边缘有小尖刺；叶表皮以不等式气孔为主；叶柄中为外韧型维管束，韧皮部周围细胞含棕色颗粒物；粉末中非腺毛、方晶、乳汁管、具缘纹孔等特征明显。主要含有黄酮类成分，乙醇提取液在206、232和333 nm处有明显的紫外吸收。结论：性状和显微鉴别及理化鉴别方法能有效鉴别苦苣菜，为制定苦苣菜的质量标准和有效利用提供鉴别依据。
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直观易行的传统中药鉴定方法
现代中药的常用鉴定方法包括基原鉴定、性状鉴定、显微鉴定、理化鉴定和生物鉴定等,这些方法中很多动辄就要用到电子显微镜、各种化学试剂和高精尖的仪器设备.但是对于一些名贵的中药材,往往上述各种鉴定方法都用上也不一定能完全反映其真伪优劣.而传统的鉴定方法则主要是对药材外观性状进行鉴定,包括形状、大小、颜色、质地、折断面、气味等等.经验丰富的中药商品工作者练就出一套过硬的传统中药鉴别本领,常常用一碗清水、一根细针就能将价值连城的名贵药材辨出真伪.
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甘草代谢组学的研究进展
甘草Glycyrrhizae Radix et Rhizoma作为临床常用大宗药材之一,不仅具有很好的药用价值,而且在食品、化妆品等行业也有广泛的应用,因此,与甘草有关的科学研究被大量开展.代谢组学方法在中医药研究中的应用越来越广泛,通过总结代谢组学在甘草的基原鉴定、炮制、药理作用及生态因子等方面的应用,将有助于更加深入系统地研究甘草,并揭示其药理作用机制.
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水试方法鉴别中药40例
常用中药鉴别方法有基原鉴定、性状鉴定、显微鉴定和理化鉴定等.其中性状鉴定主要是鉴别药材的外观性状,是中药鉴定工作者必备的基本功之一.性状鉴定通过眼看、手摸、鼻闻和口尝等简便易行的方法外,水试法也是一种行之有效的简易方法.以下介绍采用水试法鉴别中药39例.
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市售柴胡药材的质量评价
目的:鉴别市售柴胡药材基原,分析评价药材质量,为柴胡药材质量调控奠定基础.方法:从河北安国、安徽亳州、广西玉林3个中药材专业市场收集柴胡药材或饮片共24份,参考《中华人民共和国药典》及相关文献,采用性状鉴定法鉴别样品基原,HPLC法测定柴胡皂苷a和d的含量,综合外观性状和皂苷含量测定结果,评价样品质量.结果:市售柴胡来源混杂,正品以北柴胡多见,其余以马尔泰柴胡、锥叶柴胡为多,同时存在不同程度的掺伪现象;市售柴胡中柴胡皂苷a、d含量参差不齐,其中马尔泰柴胡皂苷a+d含量高,部分掺伪品柴胡皂苷含量不符合药典标准.结论:现今市场流通的柴胡复杂的来源造成了柴胡药材质量的不稳定.人工种植柴胡作为市售柴胡药材的主要来源,其种植来源问题亟需解决,种植药材质量也需要进一步提升,才能确保柴胡的临床用药安全和疗效.
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传统中药鉴定方法的研究发展概况
中药鉴定是中药应用研究的基本工作,研究方法不断进步,尤以传统中药鉴定方法意义重大.主要包括基原鉴定、性状鉴定、显微鉴定和理化鉴定,本文对这四种方法的内容和应用做简要综述.
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海浮石基原与性效辨析
为澄清和限定海浮石基原,考证了有关本草文献,并进行了实地工作考查.结果发现,海浮石基原有:A胞孔科动物脊突苔虫Castazia aculeata Canu et Basslen和瘤苔虫Castazia costazii Audouin.的干燥骨骼;B海水中溶解的碳酸钙盐围绕贝壳及碎片等质点沉积而成;C系火山喷发岩浆凝固形成的多孔状石块.提出中医药海浮石主流品种应为基原A,基原C应别作它药,定名为浮石.
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电镜扫描叶片鉴定川渝商品金银花的植物来源
目的 探索一种准确、实用的鉴定川渝商品金银花基原的方法.方法 扫描电镜下比较观察川渝商品金银花原植物叶背特征.结果 在扫描电镜下川渝6种商品金银花原植物叶背特征存在显著差异,并据此列出了其叶背特征分种检索表.结论 为川渝商品金银花基原鉴定提供了科学的参考.
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试析中药鉴定中的基原鉴定问题
综述近年来中药基原鉴定的范围、历史、现状和意义等方面的研究工作和存在的问题,阐述中药鉴定工作中加强中药基原鉴定的必要性,并提出解决问题的建议和方法.
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维吾尔药材资源存在的问题及其整治对策
目的:整理维吾尔药材资源存在的问题,提出整治对策.方法:通过史记名实沿革、实地调查、名实考证、询证行业专家等方式进行本草考证,阐述成因及其表现形式以及相关整治思索.结果:由于维吾尔药材名实异域不一、各语释译不一,基原鉴定和质控方法的欠缺,致使市场出现名实不符、掺伪掺劣、代用误用、同名异物、同物异名等混乱现象.同时指出及其误用代用品,拨乱反正、正本清源.结论:该文可为维吾尔药材资源的研究、扩大、开发和利用提供依据.
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用DNA条形码技术对市售花胶进行基原鉴定
目的:运用DNA条形码技术确定广州市售花胶的物种来源.方法:用自行设计的CO Ⅰ引物对11份市售花胶样品进行PCR扩增、测序,将所得序列构建UPGMA系统发育树,进行聚类分析;用BOLD (The Barcode of Life Data Systems)系统的物种鉴定引擎,与数据库中已有鱼类序列进行比对,鉴定出各样品的基原.结果:11份市售花胶样品用白行设计的引物均可实现扩增,条带清晰、稳定,扩增和测序成功率均为100％;BOLD鉴定结果显示,11份样品来源于3科5种鱼类,UPGMA聚类分析对结果进行了确证.结论:DNA条形码技术与BOLD鉴定系统相结合,可对市售花胶进行准确的基原鉴定.
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广地龙特异性PCR分子鉴定
【目的】筛选出对广地龙具有特异性鉴别意义的PCR引物，建立一种快速、准确鉴别广地龙基原真实性的方法。【方法】收集药典收载的4种地龙原动物以及市场常见地龙混淆品6种，从GenBank数据库中下载有关蚯蚓的12SrRNA基因序列，采用通用引物对10种样本PCR扩增后进行测序，依其序列间差异设计3对非保守区特异性引物，筛选对广地龙具有特异性扩增的引物。【结果】引物12St/12Sf对广地龙产生特异性扩增，当退火温度提升至64℃时，其反应表现出高度特异性，仅广地龙具有良好的单一扩增带，而其他样品在同样的条件下无扩增带。所得特异性引物在15种市售广地龙药材中验证结果良好，与传统形态学鉴定结果基本一致。【结论】引物12St/12Sf可作为广地龙物种鉴定的特异性标记物，可以实现广地龙近缘多个物种快速而又准确的鉴定，且不受实验材料的完整性、加工干燥等因素的影响。
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蒙药材草乌叶DNA条形码研究
目的:建立草乌叶与其易混品的分子鉴定方法.方法:通过聚合酶链式反应(PCR)对草乌叶及9种混伪品的候选序列(ITS、ITS2、marK、rbcL、psbA-trnH)进行扩增,比较各序列的扩增效率和测序成功率,并进行种内、种间遗传变异分析和barcoding gap分析.结果:ITS和ITS2序列GC含量较高,种间变异明显大于种内变异,根据barcoding gap图显示种内、种间遗传距离重叠较小,适合物种的区分,基于K2P距离进行聚类分析,ITS序列呈现较好的单系性.结论:ITS序列可应用于蒙药材草乌叶与其混伪品的鉴定,为民族药鉴定提供新方法.
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铁皮石斛的ITS2条形码分子鉴定及5种重金属及有害元素的测定
目的:应用DNA条形码技术,从分子水平快速、准确地鉴定我国12个省区铁皮石斛栽培基地铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)及其同属常见植物的基原,采用微波消解ICP-MS技术测定各地铁皮石斛中铅(Pb)、镉(Cd)、砷(As)、汞(Hg)、铜(Cu)5种重金属及有害元素的含量,评价栽培铁皮石斛的用药安全.方法:提取各样本总DNA,对rDNA的第二内转录间隔区(ITS2区)进行扩增,计算种内、种间Kimura 2-parameter (K2P)遗传距离,通过与中药材DNA条形码鉴定系统比对和构建N-J (Neighbor-Joining)系统树进行基原鉴定.建立微波消解方法进行样品前处理,ICP-MS法对铁皮石斛中5种重金属及有害元素进行测定,比对国内外现行标准,对铁皮石斛的安全性进行评价.结果:铁皮石斛的ITS2序列长度在246～340bp范围,种内变异较小,种内大K2P遗传距离为0.009,铁皮石斛及其混伪品的种间平均K2P遗传距离为0.206,种间小K2P遗传距离明显大于种内的大K2P遗传距离.经与中药材DNA条形码鉴定系统比对及构建N-J树进行基原鉴定.结果表明ITS2序列可区分铁皮石斛及其近缘种.5种重金属及有害元素的测定结果表明各地的含量差异较显著,但在安全的范围内.结论:ITS2片段DNA条形码可有效鉴定中药铁皮石斛及其常见同属植物的基原,建立的ICP-MS法测定铁皮石斛中5种重金属与有害元素的方法准确、可行,各元素的含量在现行相关标准的安全范围内.
