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基于显微-DNA 条形码-产地分析联用的巴西柑橘属植物药 FARINHA DE LARANJA（枳壳）基原鉴定研究
目的：利用显微-DNA 条形码-产地分析联用的方法对巴西柑橘属植物药 FARINHA DE LARANJA 粉末进行基原鉴定研究。方法应用显微鉴定的方法对药材粉末的基原进行初步判定；再提取样品 DNA,扩增 ITS 序列,利用 NCBI 数据库中的 BLAST 功能分析相似度,对样品品种进行DNA 条形码鉴定；后结合产地信息对数据库中的序列进行筛选。结果显微-DNA 条形码-产地综合分析结果表明,该样品为芸香科柑橘属 Citrus L.植物酸橙 Citrus aurantium 的干燥未成熟果实粉末。结论巴西植物药 FARINHA DE LARANJA 的鉴定可为扩大枳实、枳壳等中药材的药用资源提供依据。
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基于 DNA 条形码-产地-形态分析联用的巴西草药 DENTEDE LE?O（蒲公英）的混伪品鉴定及生药学研究
目的：对巴西市场上销售的药用蒲公英的混伪品进行鉴定及生药学研究。方法通过提取样品 DNA、PCR 扩增及双向测序，获得样品的 ITS 序列。采用相似度分析法进行分子鉴定；根据植物产地分布特征和形态特征验证结果，三种方法联用获得鉴定结果；分析混伪品的性状和显微特征。结果 DNA 条形码研究表明巴西药用蒲公英的混伪品来源于菊科植物假蒲公英猫儿菊Hypochaeris radicata 的全草，产地分析和形态分析验证了 DNA 条形码鉴定结果。结论巴西药用蒲公英的混伪品来源于菊科蒲公英属植物假蒲公英猫儿菊 Hypochaeris radicata 的全草。混伪品的生药学特征能够为巴西草药 DENTE DE LE?O 的真伪鉴别提供依据。
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基于 DNA 条形码-高效液相色谱联用的巴西草药 SENE（番泻叶）的品种鉴定
目的：对巴西草药番泻叶 SENE 进行品种鉴别，进而研究其中番泻苷 A 和番泻苷 B的含量并与中国番泻叶番泻苷 A、B 的比较，为其品种整理、临床使用及资源开发提供参考。方法利用 DNA 条形码—产地—形态分析联用技术鉴定巴西草药番泻叶 SENE 的基原，高效液相色谱技术测定番泻苷 A 和番泻苷 B 的含量。结果品种鉴定结果为番泻叶，其中番泻苷 A 和番泻苷 B 两者的平均总含量为巴西番泻叶(1.56%)>中国番泻叶(1.52%)>2010年版《中华人民共和国药典》(一部)的含量要求(1.10%)。结论巴西草药番泻叶来源于番泻叶 Senna alexandrina Mill.，其番泻苷 A 和番泻苷 B 的含量与中国番泻叶差异不显著，且能达到药典要求。
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基于 DNA 条形码-产地-形态分析联用的巴西草药 CENTELHA ASIáTICA（积雪草）的生药学研究
目的：对巴西草药 CENTELHA ASIáTICA 进行生药学研究。方法采用 DNA 条形码技术对巴西草药的叶片提取 DNA、扩增 ITS 序列、双向测序，采用相似度法进行物种鉴定，再结合产地信息和性状特征核对 DNA 条形码鉴定结果进行验证。结果巴西草药 CENTELHA ASIáTICA 与NCBI 核酸数据库积雪草 ITS 序列达到高相似度，相似度为99%，鉴定其为伞形科植物积雪草Centella asiatica(L.) Urban。在地理分布上，巴西草药 CENTELHA ASIáTICA 符合积雪草的分布特征；从形态分析上，样品与积雪草特征相符合。结论基于 DNA 条形码-产地-形态分析的鉴定方法能够对巴西草药 CENTELHA ASIáTICA 进行鉴定，鉴定该物种来源于伞形科植物积雪草 Centella asiatica(L.) Urban 的干燥全草。生药学研究能够为 CENTELHA ASIáTICA 品种鉴定及质量标准研究提供依据。
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基于 DNA 条形码-产地-形态分析联用的巴西草药 PIC?O（鬼针草）的鉴定及生药学研究
目的：对巴西鬼针草药材进行基原鉴定及生药学研究,为药材质量控制和开发应用提供依据。方法提取样品总 DNA,扩增 ITS 基因序列,利用相似度搜索法进行分子鉴定。利用通过 DNA 条形码—产地—形态分析方法鉴定巴西鬼针草。按照2010版《中华人民共和国药典》(一部)中方法分析样品性状、显微特征。结果 DNA 条形码—产地—形态分析联用的鉴定方法鉴定巴西鬼针草药材来源于菊科植物鬼针草 Bidens pilosa。结论巴西鬼针草药材来源于菊科植物鬼针草Bidens pilosa,生药学特征可以作为药材鉴定的依据。
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基于“二维特征鉴别法”的巴西草药TANCHAGEM 真伪鉴别
目的：综合巴西草药 TANCHAGEM 的化学与遗传学信息对其进行质量控制。方法利用“二维特征鉴别法”，即 DNA 条形码技术联用 HPLC 技术的方法，鉴定巴西草药 TANCHAGEM 的基原，并测定其大车前苷的含量。结果 DNA 条形码初步鉴定巴西草药 TANCHAGEM 为车前科车前属 Plantago L.植物，且与中药车前草相似度达99%以上；巴西车前草、中药车前草中均含有2010年版《中华人民共和国》(一部)规定指标成分大车前苷，含量分别为0.1025%和0.1030%。结论巴西草药 TANCHAGEM 为巴西车前草，其大车前苷含量与中药车前草含量相近。本实验为车前草品种的质量控制、资源普查、新品种选育提供一定的参考依据。
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基于性状-显微-DNA 条形码联用的巴西牛至属植物药 HORTELA 基原鉴定研究
目的：利用性状—显微—DNA 条形码联用的方法对巴西牛至属植物药 HORTELA 进行基原鉴定研究。方法应用性状鉴定的方法初步对药材进行真伪鉴别；再应用显微鉴定的方法验证性状鉴定结果；后提取样品 DNA,扩增 ITS 序列,利用 NCBI 数据库中的 BLAST 功能分析相似度,对样品品种进行 DNA 条形码鉴定。结果性状—显微—DNA 条形码综合分析结果表明,该样品为牛至属植物 Origanum elongatum(Bonnet) Emb.& Maire.的干燥地上部分。结论 HORTELA 可能为多基原植物类药材,其来源为牛至属 Origanum elongatum (Bonnet) Emb.& Maire.和薄荷属Mentha rotundifolia (Linn.) Huds.干燥地上部分。
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基于“二维特征鉴别法”的巴西草药GENGIBRE 真伪鉴别
目的：对巴西草药 GENGIBRE 进行真伪鉴别。方法利用“二维特征鉴别法”，即DNA 条形码技术联用 HPLC 技术的方法，鉴定巴西草药 GENGIBRE 的基原，并测定其6-姜辣素的含量，对样品进行遗传学与化学两方面的鉴别。结果通过 DNA 条形码初步鉴定巴西草药GENGIBRE 为芸香科植物，且与芸香科吴茱萸植物相似度高，相似度范围为97%~99%；巴西草药GENGIBRE 中6-姜辣素的含量远低于中国干姜，分别为1.12 mg/ g 和7.61 mg/ g。结论本试验应用“二维特征鉴别法”，在遗传学和化学两方面均证明所用巴西草药 GENGIBRE 相对于中国干姜是伪品。该方法在对未知样品进行某品种的定向真伪鉴别方面具有潜在的应用价值。
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黄精属药用植物 DNA 条形码鉴定研究
目的：评价 DNA 条形码候选序列对黄精属药用植物的鉴定能力。方法：对44份黄精属样品应用通用引物扩增其叶绿体 rbcL、matK、psbA-trnH 及核 ITS2和 ITS 序列，分析其种内种间变异和 barcoding gap，应用 BLAST 和 Nearest Distance方法计算物种鉴定效率。结果：ITS2和 ITS 序列通用引物扩增效率低，叶绿体 matK 序列获得率低，rbcL 高，三条序列种内与种间变异均较小，无明显的 barcoding gap。基于 BLAST 和 Nearest Distance 方法计算，三条叶绿体序列对黄精属药用植物的鉴定效率均较低。结论：DNA 条形码候选序列 psbA-trnH、matK 及 rbcL 不适用于黄精属药用植物的鉴定，叶绿体全序列或通过叶绿体全序列筛选合适的 DNA 片段可能是该属药用植物分子鉴定的方向。
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市售鹿茸饮片及鹿茸粉的 DNA 条形码鉴定
目的：利用 COI 序列对市售鹿茸饮片、鹿茸粉进行鉴定，并建立统一的分子鉴定方法。方法对不同产地的鹿茸饮片及鹿茸粉分别进行 DNA 提取、COI 序列扩增和序列测定，建立分子鉴定方法，并对市售鹿茸饮片、鹿茸粉进行调查分析。结果鹿茸饮片均可以使用 COI 通用引物进行 PCR 扩增和测序；物种之间相互区分明显；市售40份药材中14份为药典规定物种，26份为非药典规定物种；鹿茸粉未成功获得 COI 序列。结论 COI 序列的 DNA 条形码鉴定方法可准确、有效鉴定市售鹿茸饮片，此方法为市场监管鹿茸饮片提供科学手段。
