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内聚能密度结合响应面法优化酿后葡萄皮渣中原花青素的提取工艺
目的 探索酿后葡萄皮渣中原花青素的佳提取条件.方法 基于内聚能密度确定提取溶剂,采用UV法测定原花青素的含量,并以其为考察指标,在单因素实验的基础上,利用响应面法优化原花青素的提取条件.结果 优化的提取工艺以无水乙醇:10 mL·L-1盐酸(95:5)为提取溶剂,提取温度为60℃,提取时间为100 min,料液比为1:20,提取2次,原花青素平均含量为49.39 mg·g-1(n=3,RSD值为1.7％).结论 基于内聚能密度确定提取溶剂,结合响应面法优化原花青素的提取工艺合理可行,为高效提取原花青素提供了理论依据.
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葡萄籽原花青素的提取技术研究概况
原花青素是植物界广泛存在的一类多酚类化合物，葡萄籽被认为是提取原花青素的佳原料。随着科技的发展和进步，提取技术不断被突破，本文分析和整理近年来国内外期刊有关的文献，对葡萄籽原花青素的提取技术进行综述，为葡萄籽原花青素的工业生产研究提供参考。
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原花青素对高糖诱导下兔晶状体氧化损伤抑制作用的实验研究
目的:探讨原花青素(procyanidins,PC)抑制白内障形成的机制.方法:取发育正常的兔眼晶状体50只进行体外培养,其中48只随机分为空白对照组(A)、高糖处理组(B)、VC对照组(C)、原花青素给药组(D),每组12只.测定各组晶状体48、72、96 h的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)的含量.结果:各组SOD值和CAT值逐渐降低,C组、D组下降程度明显低于B组.各组MDA值逐渐升高,C组、D组升高程度低于B组(P＜0.01).结论:高糖条件可以导致晶状体的氧化损伤,PC能够通过上调SOD和CAT、下调MDA起到抗脂质过氧化和清除自由基作用.
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沙枣中原花青素提取工艺的研究
目的:对沙枣中原花青素提取工艺及含量测定进行研究.方法:采用四种不同型号大孔树脂( HPD700、HPD400A、HPD450、HPD100)对沙枣提取物中原花青素进行柱层析分离及纯化,并用紫外分光光度计进行检测.结果:大孔树脂HPD400A对沙枣中原花青素的吸附量为49.1367 mg/g,解吸率为.97.3％.香草醛-硫酸法测得沙枣中原花青素含量为1.26％.结论:大孔树脂HPD400A可较好的纯化沙枣中的原花青素.香草醛-硫酸法可作为沙枣中原花青素含量测定方法,且简便、易行.
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葡萄籽中原花青素灌胃及注射给药的抗炎作用和刺激性
目的 研究葡萄籽中原花青素(proanthocyanidins,PA)灌胃给药的抗炎作用及注射给药的刺激性.方法 用巴豆油诱导的小鼠耳肿和角叉菜胶诱导的大鼠足肿模型,观察原花青素灌胃给药的抗炎作用,并观察原花青素肌肉和腹腔注射的刺激性.结果 PA 40 mg/kg单次腹腔注射能明显抑制角叉菜胶诱导的大鼠足肿和巴豆油诱导的小鼠耳肿,而PA 200～400 mg/kg单次或多次灌胃给药对角叉菜胶诱导的大鼠足肿和巴豆油诱导的小鼠耳肿均无明显影响,但给药期间小鼠和大鼠均未见明显异常反应;PA 40 mg/kg腹腔注射后小鼠活动减少、蜷缩,部分小鼠出现扭体反应,肌肉注射24 h后给药部位有渗出液、充血、组织坏死等反应,说明PA腹腔和肌肉注射有刺激性.结论 葡萄籽中原花青素灌胃给药无明显的抗炎作用,而注射给药有一定的刺激性.
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葡萄皮、籽提取物对高脂血症大鼠模型血脂水平的影响
目的:探讨以齐墩果酸(OA)、原花青素(PC)为主要成分的葡萄皮、籽提取物及其混合物对高脂血症大鼠模型血脂水平的影响.方法:雄性Wistar大鼠42只随机分为6组,正常对照组、高脂模型对照组和OA、PC及(OA+PC)混合物低剂量、高剂量4个实验组.正常对照组喂饲基础饲料并给予0.2%吐温-80,高脂模型对照组喂饲高脂饲料并给予0.2%吐温-80,4个实验组在喂饲高脂饲料的同时分别给予20 mg/kg OA、500 mg/kg PC、20mg/kg OA+100mg/kg PC和20 mg/kg OA+500 mg/kg PC,测定各组血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)水平.结果:与正常对照组相比,高脂模型对照组血清TC、LDL水平明显升高(P均＜0.01),说明高胆固醇血症动物模型复制成功;(OA+PC)混合物高剂量组、OA组和PC组血清TC水平明显低于高脂模型对照组(P均＜0.01);(OA+PC)混合物高剂量组LDL水平明显低于高脂模型对照组(P＜0.01).结论:OA、PC及其混合物可能具有一定的降血脂作用.
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葡萄籽中原花青素提取工艺的研究
目的:探讨葡萄籽原花青素的佳提取工艺条件.方法:将乙醇溶液作为提取液,用正交实验优选佳提取工艺.结果:佳提取条件为:将样品粉碎成粗粉,脱脂后用60%的乙醇溶液作为提取液,对样品回流提取2次,每次30 min.所得产品的原花青素含量为33.8%,收率为19.7%.结论:本研究初步建立了葡萄籽原花青素提取工艺.
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新疆葡萄籽化学成分的研究
目的:研究新疆葡萄籽的化学成分.方法:对新疆葡萄酒厂废渣中葡萄籽用石油醚脱脂,脱脂后的葡萄籽用乙醇提取,醇提取物分别用乙酸乙脂和正丁醇萃取得脂溶性和水溶性部分,然后再用硅胶和葡萄聚糖凝胶LH-20层析分离得单体.结果:分离得到6种化合物:二十七烷酸乙酯(Ⅰ)、齐墩果酸(Ⅱ)、白藜芦醇(Ⅲ)、齐墩果酸-芸香糖苷(Ⅳ)、β-谷甾醇-β-D-葡萄糖苷(Ⅴ)和原花青素(Ⅵ).结论:从葡萄籽中提取分离得到6种化合物,用光谱法鉴定了结构,结论可靠.
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葡萄多酚对心肌保护作用研究进展
心血管疾病是目前威胁人类健康的世界头号杀手.近年来,葡萄中多酚类物质在心肌保护作用的研究取得了重要进展.就葡萄中的主要多酚类成分白藜芦醇、花青素、原花青素在心肌保护方面的研究进展进行综述,并讨论这些研究成果在临床上的潜在应用以及仍需进行的动物实验研究.
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液相色谱-质谱联用法分析葡萄籽提取物中的5种多酚类成分
目的:应用液相色谱-质谱联用法对葡萄籽提取物中的组成成分进行测定.方法:采用Zobax SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-水(1％甲醇+0.1％甲酸)(B),梯度洗脱,流速为1.0 mL· min-1,柱温为40 |℃,进样体积10 μL;电喷雾电离(ESI),毛细管温度300℃,碎裂能量30％,离子源电压4.5 kV,毛细管电压12.7 V,对葡萄籽提取物中的组分定性分析.结果:应用LC-MS法明确了葡萄籽提取物的组分主要为单体和原花青素低聚体,并分析二级质谱碎片推测出了原花青素的裂解规律.结论:应用液相色谱-质谱联用技术可以较好地对葡萄籽提取物中没食子酸、儿茶素、表儿茶素等组分进行测定.
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HPLC法同时测定金荞麦片中6个多酚类成分
目的:建立金荞麦片中6个多酚类成分(原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素及原花青素B1、B2、C1)含量的同时测定方法.方法:采用反相高效液相色谱法,使用Shim-pack VP-ODS C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈与磷酸水溶液(用磷酸调pH =3.0),梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长220 nm.样品采用10％乙腈回流提取.结果:6个多酚类成分分离良好,阴性无干扰,其平均加样回收率(n=6)为95.4％ ～ 104.8％(RSD为1.3％ ～4.6％);重复性RSD(n =5)为1.3％～3.5％;原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素及原花青素B1、B2、C1的线性范围分别为0.013 ～0.065、0.024 ～0.121、0.058 ～0.288、0.033 ～0.164、0.080 ～0.402、0.035 ～0.177 μg,r2分别为1.000 0、0.999 9、0.999 9、0.999 8、0.999 8、0.9990;供试品溶液中各成分在24 h内稳定.3批样品中原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素及原花青素B1、B2、C16个成分的总含量分别为2 451.85、1 965.32、2 570.28 μg·片-1.结论:新建立的方法经方法验证,可有效控制金荞麦片的质量,也可作为提高标准中新的含量测定方法.
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RP-HPLC法同时测定葡萄籽提取物中没食子酸、儿茶素和表儿茶素的含量
目的:建立RP-HPLC法同时测定葡萄籽提取物中没食子酸、儿茶素、表儿茶素3种单体的含量.方法:采用Agilent zobax SB-C18色谱柱(4.6 mm ×250 mm,5μm),以乙腈(A)-水(1％甲醇+0.15％三氟乙酸)(B)为流动相梯度洗脱(0～10min,0％A→7％A;10～30 min,7％ A→16％A;30～40 min,16％A→90％A;40～50 min,90％A;50～55 min,90％A→0％A;55～65 min,0％A),流速1.0 mL· min-,检测波长280 nm,柱温40℃,进样体积20 μL.结果:没食子酸、儿茶素和表儿茶素3种单体质量浓度分别在1.0～54.0 μg· mL-1(r =0.999 8)、2.7 ～136.0 μg·mL-1(r =0.999 8)、2.7 ～136.0 μg ·mL-1(r =0.999 9)范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率(n=6)分别为100.3％、99.15％和100.3％.3批GSE样品中没食子酸的含量分别为0.69％、0.69％、0.68％,儿茶素的含量分别为3.15％、3.12％、3.16％,表儿茶素的含量分别为2.48％、2.44％、2.42％.结论:建立的HPLC法经方法学验证,可用于葡萄籽提取物中没食子酸、儿茶素、表儿茶素含量的同时测定.
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葡萄籽中原花青素的抗炎作用和机制
目的:研究葡萄籽中原花青素(PA)的抗炎作用及机制.方法:用巴豆油诱导的小鼠耳肿和角叉菜胶诱导的大鼠足肿模型,研究PA对炎症的影响.NOS活性用NADPH黄递酶染色法,NO含量用Griess重氮化反应法,β-NAG用对硝基酚比色法,MDA用TBA荧光法测定,IL-1β、TNFα和PGE2含量用放免法测定.结果:PA 10-40mg/kg ip剂量依赖性地抑制角叉菜胶诱导的大鼠足肿和巴豆油诱导的小鼠耳肿.PA 10 mg/kg减少大鼠致炎足MDA生成,抑制炎症渗出液中NOS和β-NAG活性,降低IL-1β、TNF和PGE2含量.其作用强于地塞米松2 mg/kg.结论:PA对大鼠和小鼠实验性炎症有明显的抗炎作用.其抗炎机理和清除氧自由基、抗脂质过氧化和减少细胞因子的生成有关.
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改进铁盐催化比色法测定保健食品中原花青素
对《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中保健食品中原花青素的测定方法进行了改进,建立了快速检测保健品中原花青素的方法。保健品中的原花青素用甲醇提取后，将试样溶液和正丁醇：盐酸（95：5,v/v）以及硫酸铁铵溶液混合置于20mL顶空瓶中，100℃烘箱中反应40min后，在546nm比色测定原花青素的含量。结果表明：原花青素在0-200μg/mL内线性良好，相关系数（r）为0.997。在1、2、5 g/kg 3个添加水平下进行了回收率和精密度试验,加标回收率为83.5%-97.5%,相对标准偏差（RSD，n=10)为3.12%-4.67%，满足检测标准要求。同时比较了两种方法的检测结果，发现没有明显差异，但改进后方法操作简便、快速，可用于保健品中原花青素的测定，能满足日常检测要求。
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原花青素对Aβ25-35介导的tau蛋白过度磷酸化及p38 MAPK信号通路的影响
目的:研究原花青素对β-淀粉样蛋白25-35片段(Aβ25-35)介导SH-SY5Y细胞tau蛋白过度磷酸化及p38 MAPK信号通路的抑制作用.方法:采用1.0μmol/L的Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞建立体外阿尔茨海默病(AD)模型,并分别设立对照组(只含细胞和培养基)、Aβ25-35染毒组、Aβ25-35+不同浓度(0.1、1.0、2.5、5.0μg/mL)的原花青素处理组以及p38通路阻断剂SB203580组、Aβ25-35+SB203580组、Aβ25-35+5.0μg/mL原花青素干预组.四甲基噻唑蓝(MTT)法检测SH-SY5Y细胞存活率,TBA法检测细胞内MDA含量,WST-1法检测细胞内总SOD水平,Western blot法检测p-tau、tau蛋白的表达及应用p38通路阻断剂后p-tau、tau、p38、p-p38相应的蛋白表达.结果:原花青素对SH-SY5Y细胞无明显毒性作用,不同浓度Aβ25-35均使SH-SY5Y细胞存活率降低,与对照组比较,1.0μmol/L Aβ25-35组SOD水平降低,MDA含量升高(P<0.05),p-tau(Ser396)和p-p38蛋白表达亦增加(P<0.05);给予不同浓度原花青素干预及p38通路阻断剂后,与1.0μmol/L Aβ25-35组比较,原花青素提高SH-SY5Y细胞生存率及细胞内总SOD水平,降低细胞内MDA含量(P均<0.05),抑制Aβ25-35介导的p-tau(Ser396)和p-p38蛋白过度表达(P均<0.05),且Aβ+阻断剂组同样抑制相关蛋白的表达水平(P均<0.05).结论:原花青素能够抑制Aβ25-35介导的tau蛋白过度磷酸化,提高细胞生存率,降低氧化应激水平.此外,原花青素可通过抑制p38 MAPK信号传导途径来实现其抑制tau蛋白过度磷酸化的神经保护作用.
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原花青素抑制脂多糖激活神经小胶质细胞的机制
目的:研究原花青素抑制脂多糖(LPS)激活神经小胶质细胞的机制.方法:采用1.0 μg/mL LPS刺激神经小胶质细胞建立体外炎症模型,再用不同浓度(0.1、0.5、2.5、10.0μg/mL)原花青素进行干预,四甲基噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度原花青素对神经小胶质细胞的毒性,ELISA法检测炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的表达,Western blot法检测TLR4、p38、p-p38蛋白的表达.结果:与对照组比较,1.0 μg/mL LPS组TNF-α、IL-1β、IL-6水平均显著升高(P＜0.05),TLR4和p-p38蛋白表达亦显著增加(P＜0.05);给予不同浓度原花青素干预后,与1.0μg/mL LPS组比较,炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6分泌水平均下降(P均＜0.05),TLR4和p-p38蛋白表达水平均显著下调(P均＜0.05).结论:原花青素可能通过TLR4/p38 MAPK信号通路抑制脂多糖激活神经小胶质细胞.
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原花青素对淀粉样蛋白Aβ 25-35诱导的 SH-SY5Y细胞 毒性的影响
目的:探讨原花青素对淀粉样蛋白片段Aβ25-35染毒的SH-SY5Y细胞存活、氧化应激及其分泌淀粉样蛋白Aβ1-42和可溶性淀粉样蛋白sAPPα水平的影响.方法:分别以不同浓度(0.1、0.5、1.0、5.0μg/mL)原花青素和不同浓度(0.1、1.0、10.0、20.0μmol/L)的Aβ25-35作用SH-SY5Y细胞24 h后用MTT法检测细胞活力,进一步以1.0μmol/L Aβ25-35染毒细胞,建立细胞损伤模型,不同浓度(0.1、0.5、1.0、5.0μg/mL)原花青素干预24 h,用MTT法检测细胞活力,ELISA法检测细胞分泌Aβ1-42水平及sAPPα水平,TBA法测定细胞内丙二醛(MDA)含量,WST-8法测定细胞内总超氧化物歧化酶(SOD)活力.结果:与对照组相比,不同浓度原花青素作用24 h后,细胞存活率差异均无统计学意义(P均>0.05),而不同浓度Aβ25-35均使SH-SY5Y细胞活力降低(P<0.01),其中1.0μmol/L Aβ25-35对细胞活力的抑制作用强(P<0.01).以1.0μmol/L Aβ25-35染毒细胞,Aβ1-42分泌水平升高(P<0.01),sAPPα水平降低(P<0.01),细胞内MDA含量升高(P<0.01),总SOD活力降低(P<0.01).与1.0μmol/L Aβ25-35染毒组比较,0.1、0.5、1.0、5.0μg/mL原花青素干预可提高各组细胞活力(P<0.05),降低Aβ1-42分泌水平(P<0.01);0.5、1.0、5.0μg/mL原花青素干预可提高细胞分泌sAPPα水平(P<0.05),降低细胞内MDA含量(P<0.05),增强总SOD活力(P<0.05).结论:原花青素可减轻Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞Aβ负荷,并减轻细胞氧化损伤.
关键词： 原花青素 细胞毒性Aβ1-42 sAPPα -
原花青素对脂多糖诱导BV2小胶质细胞炎症介质分泌的影响
目的:探讨原花青素对脂多糖(LPS)激活小鼠小胶质细胞(BV2)炎症介质分泌的影响.方法:以LPS激活BV2细胞构建神经炎症模型.分别采用0.1、0.5、1.0、5.0 μg/mL原花青素预处理后,1.0μg/mL的LPS刺激BV2细胞24 h.采用MTT法检测细胞存活率;Griess法检测BV2细胞培养液上清中一氧化氮(NO)水平;ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的分泌水平.结果:在实验剂量范围内,原花青素及LPS对BV2细胞活性均无显著影响(P＞0.05).但1.0 μg/mL LPS可引起BV2细胞各炎症因子NO、TNF-α、IL-1β和IL-6水平明显升高(P＜0.05).与LPS组相比,原花青素(0.1、0.5、1.0、5.0 μg/mL)预处理能使激活的BV2细胞培养液上清中NO释放量减少(P＜0.05),TNF-α、IL-1β和IL-6含量降低(P＜0.05),抑制作用呈剂量-效应关系.结论:在体外实验中,原花青素对LPS诱导小胶质细胞所致的炎症反应具有保护作用.
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莲房原花青素对黑色素瘤B16细胞的诱导分化作用
背景与目的:探讨莲房原花青素(LSPC)对荷瘤小鼠体内黑色素瘤B16细胞的诱导分化作用.材料与方法:以荷黑色素瘤B16小鼠为模型,随机分LSPC 3个剂量(60、120、240 mg/kg)组和阴性对照组,每组10只,实验组用LSPC、阴性对照组用等体积溶剂分别灌胃13 d后取材,检测黑色素瘤B16细胞中酪氨酸酶活力、黑色素含量、S-100蛋白表达,并用光学显微镜和透射电镜观察其细胞形态的变化.结果:60～120 mg/kg的LSPC能抑制黑色素瘤B16细胞在小鼠体内生长,且呈浓度依赖关系.其中,120 mg/kg LSPC组作用显著(P＜0.01),抑瘤率达55.3%,并使B16细胞内酪氨酸酶活力和黑色素含量分别提高28.5%和23.8%,与阴性对照比较,差异有统计学意义(P＜0.05),并使S-100蛋白表达下降.结论:LSPC显著抑制B16细胞在小鼠体内的生长,并从形态上和功能上诱导B16细胞分化.
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葡多酚对骨髓细胞Bcl-2和Bax表达的影响
背景与目的:研究葡多酚(GPC)对辐射损伤诱发的小鼠骨髓细胞Bcl-2和Bax异常表达的影响作用.材料与方法:将经口灌胃给予不同剂量GPC的小鼠用射线进行全身性亚急性照射,取骨髓细胞用免疫组织化学方法检测各组Bcl-2和Bax表达.结果:辐射对照组Bcl-2和Bax阳性表达率分别为10.02%和20.88%,高剂量GPC保护组则分别为18.28%和16.14%,两组间差别均具有统计学意义.结论:GPC可有效抑制辐射损伤引发的Bcl-2和Bax异常表达.
