198 葡萄中的原花青素抑制活化中性粒细胞呼吸爆发和溶酶体酶释放

葡萄籽原花青素对血小板聚集与实验性血栓形成的影响

目的 观察葡萄籽原花青素对血小板聚集和实验性血栓形成的影响.方法 ①大鼠血栓形成实验按随机数字表法分为5组:生理盐水(对照)组、阿司匹林(ASP)组(60 mg/kg)及原花青素100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg组,每组各10只.②小鼠血栓形成实验按随机数字表法分为5组,生理盐水(对照)组、阿司匹林组(84mg/kg)及原花青素140mg/kg、280mg/kg、560mg/kg组,各10只.实验动物采用二磷酸腺苷(ADP)、胶原(COL)、花生四烯酸(AA)灌胃,诱导大鼠血小板聚集;采用大鼠动-静脉旁路丝线上血检形成和胶原蛋白-肾上腺素诱发小鼠体内血栓形成,两种方法均以阿司匹林为阳性对照.结果 ①原花肯素高、中、低剂量组均可抑制大鼠颈总动脉-颈外静脉血流旁路血栓的湿重:高、中剂量对血栓干重有明显作用,但不及阿司匹林.②原花青素高剂量组可对抗胶原蛋白-肾上腺素混合诱导剂引起的血栓形成,减少动物死亡数.⑨原花青素中、高剂量组均可抑制ADP、COL、AA诱导的大鼠血小板聚集及两种方法引起的实验性血栓形成.结论 原花青素具有抑制实验性血栓形成和抗血小板聚集作用.

心脉通复方提取工艺优化及颗粒成型性考察

目的:心脉通颗粒的水提工艺优化与颗粒剂制备工艺的筛选.方法:采用正交试验,以干膏得率、原花青素和总生物碱的含量为指标,对心脉通颗粒的水提工艺进行优化;以颗粒的成品率与外观为指标对颗粒的成型工艺进行筛选.结果:确定处方水提工艺为取处方量药材,加8倍量水,浸泡90 min,煎煮提取1.5 h,共2次.过滤,合并水提液,离心,于80℃真空减压浓缩,60℃真空干燥,粉碎,过100目筛,得干浸膏粉.以糊精为稀释剂,干浸膏粉与辅料比例1∶1,加入0.2mL·g-1的5％ PVP乙醇溶液作为粘合剂制软材,过12目筛制粒,60℃干燥,整粒.制得的心脉通颗粒在外观、粒度、水分、溶解性等方面均符合要求.结论:本心脉通复方水提工艺以及颗粒制备工艺稳定可行.

原花青素柔性纳米脂质体小鼠皮肤局部药代动力学

目的:制备原花青素柔性纳米脂质体,考察原花青素在小鼠腹部皮肤的滞留量与时间的关系及其局部经皮给药的药动学,探讨柔性纳米脂质体促进药物的经皮吸收的作用.方法:采用薄膜分散法制备原花青素柔性纳米脂质体,紫外-可见分光光度法测定不同时间给药皮肤中原花青素生物滞留量,DAS软件拟合药物动力学参数.结果:原花青素柔性纳米脂质体包封率为(72.52±8.63)%,平均粒径167.5 nm,Zeta电位-60.3,多分散指数0.309;在小鼠皮肤中滞留量的动力学过程符合二室模型.结论:原花青素柔性纳米脂质体中有效成分能较快渗透进入皮肤,并在皮肤局部较长时间蓄积.

葡萄籽提取物原花青素一般药理学研究

目的：观察葡萄籽提取物原花青素对实验动物心血管系统、中枢神经系统和呼吸系统的影响，为其进一步开发和使用提供一般药理学研究安全性评价实验数据。方法采用十二指肠给药方式观察原花青素对麻醉犬呼吸频率和潮气量、收缩压、舒张压、平均动脉压、心率、心电图的影响；采用灌胃给药方式观察原花青素对小鼠自主活动行为和协调运动的影响，并观察原花青素对小鼠戊巴比妥钠阈剂量和阈下剂量睡眠的影响。结果原花青素(857.00、214.29、42.86 mg/kg)对麻醉犬的潮气量和频率、血压、心率、心电图均无明显影响(P＞0.05)；原花青素(428.57、214.29、42.86 mg/kg)对小鼠的自主活动行为和协调运动无明显影响(P＞0.05)，对戊巴比妥钠阈下剂量睡眠动物数和阈剂量睡眠潜伏期和睡眠时间无明显影响(P＞0.05)。结论原花青素对心血管系统、中枢神经系统和呼吸系统无明显不良影响。

葡萄籽提取物原花青素抗氧化作用量效关系研究

目的：观察葡萄籽提取物原花青素抗氧化作用的量效关系。方法实验小鼠随机分为空白组、模型组和原花青素5 mg/kg组、15 mg/kg组、45 mg/kg组、135 mg/kg组、405 mg/kg组。模型组和各给药组小鼠腹腔注射D-半乳糖120 mg/kg 制备氧化损伤模型，空白组注射等体积生理盐水溶液，造模期间各组动物给予相应药物，连续造模7周。给药结束后，测定血清中丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性，观察受试物的量效关系。结果原花青素45、135、405 mg/kg剂量组可显著降低模型小鼠血清MDA水平，原花青素15、45、135、405 mg/kg剂量组血清SOD活性提高。结论原花青素在＞15 mg/kg剂量时对小鼠D-半乳糖氧化损伤模型显示出较好的抗氧化活性，提示临床应保证一定的服用剂量以发挥较好的抗氧化功效。

山楂叶原花青素对肿瘤坏死因子-α诱导人脐静脉内皮细胞细胞间黏附分子-1和E-选择素过表达的影响

目的 观察山楂叶原花青素对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人脐静脉内皮细胞细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和E-选择素过表达的影响,探讨其抗炎作用的机制.方法 体外培养人脐静脉内皮细胞.MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测ICAM-1和E-选择素的表达.结果 山楂叶原花青素浓度≤200 mg/L时,对细胞活力无明显影响;模型组人脐静脉内皮细胞ICAM-1和E-选择素表达较正常组显著升高,10、20、30、40、50 mg/L山楂叶原花青素浓度依赖地抑制ICAM-1和E-选择素的表达升高,其中40、50 mg/L组较模型组差异有统计学意义.结论 山楂叶原花青素能够抑制TNF-α 诱导的血管内皮细胞ICAM-1和E-选择素的过表达,这可能与其抗炎作用相关.

山楂叶原花青素对乳鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用

目的:研究山楂叶原花青素对缺血再灌注损伤心肌细胞的直接作用,阐明山楂叶原花青素治疗缺血性心脏病的机理.方法:体外培养大鼠乳鼠原代心肌细胞,模拟在体心肌缺血再灌注损伤,即复制缺氧.复氧损伤模型;使用山楂叶原花青素提取物进行干预;酶反应动力学法测定细胞LDH漏出率,MTT法测定细胞活力,以观察药物疗效;硫代巴比妥酸法测定细胞匀浆MDA含量,羟胺法测定细胞匀浆SOD活性,对药物的治疗机制做进一步探讨.结果:24～60 mg·L~(-1)的山楂叶原花青素浓度依赖性地抑制缺氧复氧导致的心肌细胞LDH漏出(与模型组比较均P<0.01),提高受损心肌细胞活力(与模型组比较,24～48 mg·L~(-1)各剂量组均P<0.05,60 mg·L~(-1)组P<0.01),降低心肌细胞MDA含量(与模型组比较,均P<0.01),提高SOD活性(与模型组比较24 mg·L~(-1)组P<0.05,其余均P<0.01).结论:山楂叶原花青素对体外培养的乳鼠心肌细胞的缺血再灌注样损伤具有显著的治疗作用,这一作用可能与它提高细胞抗氧化能力,抑制脂质过氧化损伤有关.山楂叶原花青素对缺血再灌注损伤心肌细胞的直接保护作用可能是其治疗缺血性心脏病的机制之一.

原花青素对实验性脑出血大鼠的保护作用

目的:探讨原花青素对脑出血大鼠的脑保护作用及其可能机制.方法:采用Ⅶ型胶原酶诱导大鼠脑出血,建立脑出血模型.54只健康SD大鼠随机分为假手术组、脑出血模型组、原花青素低剂量组(50 mg·kg~(-1))、中剂量组(100 mg·kg~(-1))、高剂量组(200 mg·kg~(-1))及尼莫地平组(10 mg·kg~(-1)).术后4,8,12,24 h观察神经缺损症状并根据Bederson方法评分;出血后24 h取血与脑组织,检测血清磷酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)的水平,丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;干湿比重法测定脑组织含水量;HE染色观察脑组织病理学改变.结果:与模型组比较,原花青素低、中、高剂量组的神经行为学评分显著降低(P＜0.05或P＜0.01),血清CK,LDH的水平明显降低(P＜0.05或P＜0.01),脑组织SOD活性显著升高(P＜0.05),MDA含量明显降低(P＜0.05或P＜0.01),脑组织含水量显著下降(P＜0.05或P＜0.01).HE结果显示,与模型组相比,原花青素各个剂量组的组织与神经细胞损伤程度有所减轻,病理学变化有所改善.结论:原花青素能够保护脑出血大鼠,其机制可能与改善脂质过氧化、减少自由基生成有关.

原花青素舒张家兔离体肺动脉的研究

目的:研究葡萄籽提取物原花青素(PC)对家兔离体肺动脉血管的舒张作用及机制.方法:采用家兔离体肺动脉平滑肌标本,以去甲肾上腺素(NA)预收缩后,给予PC(0.625,1.25,2.5 mg·L~(-1)),观察其舒张血管的量效关系;并分为对照组、PC组、Pc+吲哚美辛(1×10~(-5)mol.L~(-1)、PC+普萘洛尔(1×10~(-5)mol·L~(-1))、PC+左旋硝基精氨酸(1×10~(-4)mol·L~(-1))、Pc+甲烯蓝(1×10-5 mol.L~(-1))和PC+去内皮细胞7组,探讨PC舒张血管的机制;用PC(20 mg·L~(-1))温育标本后,观察Pc对NA(1 × 10~(-8)～1×10~(-5)mol·L~(-1)),KCI(6.3～100 mmol·L~(-1))和cacl:(1×10~(-5)～1×10~(-2)mol·L~(-1))量效曲线的影响.结果:PC能明显舒张肺动脉血管,并有量效关系(r=0.69,P＜0.01);去除血管内皮、L-NNA或MB可抑制PC的舒张作用,但吲哚美辛和普萘洛尔无影响;PC能压低NA,KCI和CaCl_2的量效收缩曲线,三者的pD2分别由对照的(7.57±2.41),(1.74±1.19),(3.72±1.88)降低为(6.47±1.42),(1.07±1.12),(3.17±1.55);PC也能抑制NA引起的第Ⅰ时相收缩,对CaCl_2引起的第Ⅱ时相收缩无影响.结论:PC舒张肺动脉的作用是内皮依赖性,且与NO/cGMP介导有关;也可能是拮抗ROC和PDC通道,降低胞浆Ca~(2+)而舒张血管.

原花青素舒张家兔主动脉和降低动脉血压的研究

目的:研究葡萄籽提取物原花青素(procyanidins,PC)舒张家兔离体主动脉和降低其动脉血压的作用及机制.方法:采用家兔离体胸主动脉环灌流模型,将标本分6组:去内皮、内皮完整、吲哚美辛(1×10-1 mol·L-1)、普萘洛尔(1×10-5 mol·L-1)、左旋硝基精氨酸N?-nitro-L-arginine(L-NNA 1×10-4 mol·L-1)或甲烯蓝(MB1×10-5 mol·L-1),分别累积加入1.25,2.5,5.O mg·L-1 PC观察血管张力变化;并观察40 mg·L-1 PC对去甲肾上腺素(NA)(1×10-8～1×10-5 mol·L-1)、KCl(6.3～100 mmol·L-1)和CaCl2(1×10-5～1×10-2mol·L-1)诱导血管环收缩曲线的影响.另用家兔颈总动脉插管法,经静脉累积注射4.0,8.0,16,32,64,84 mg·kg-1 PC后观察血压变化.结果:PC能舒张主动脉血管,并有量效依赖性(r=0.63,P<0.001),去内皮、L-NNA或MB可减弱PC的舒张作用.PC能抑制NA,KCl和CaCl2的量效收缩反应.PC能降低家兔正常动脉血压并有量效依赖性(r=0.92,P<0.001).结论:PC舒张血管的作用是通过抑制细胞内Ca2+释放和电压依赖性Ca2+通道而减少Ca2+内流;也与内皮释放的NO有关;PC可降低家兔正常的动脉血压.

山楂叶原花青素对血管内皮细胞钙活化作用的研究

山楂叶具有活血化瘀,理气通脉,化浊降脂的功效.原花青素是其主要活性成分之一,具有调节血管活性的重要作用.以往研究表明,原花青素的调节作用与其诱导血管内皮细胞分泌一氧化氮有关,且这一作用还依赖于细胞外钙的存在,提示血管内皮细胞内部钙离子的浓度变化可能在此过程中发挥关键作用.然而,迄今为止,对于这一问题还缺乏研究.该实验探讨山楂叶原花青素(hawthorn leaf procyanidins,HLP)对血管内皮细胞钙浓度的影响,从而推测HLP血管活性的可能机制.体外培养人脐静脉内皮细胞;使用Fura-2作为探针,HLP加入细胞孵育液,以活细胞工作站观察胞内钙离子浓度30 min.6.25 ～ 50 mg· L-1 HLP浓度依赖地升高细胞内钙离子浓度,其中25,50 mg·L-1HLP组较正常组,差异明显.使用无钙孵育液、在孵育液内加入钙螯合剂EGTA或使用钠钙交换体的抑制剂,均可以显著抑制HLP的作用;而抑制胞内钙库释放钙离子,也可显著抑制HLP的作用.综上,该实验首次观察了HLP对血管内皮细胞钙离子浓度的影响;结果提示,HLP具有血管内皮细胞钙活化的作用,这可能是其血管活性作用的机制之一;这一钙活化作用与HLP促进血管内皮细胞胞外钙内流和胞内钙释放有关,而前者又可能与激活胞膜上钠钙交换体的逆向转运有关.

植物药中原花青素的抗氧化作用

分别对原花青素的化学结构、植物资源、生化药理活性及其抗氧化作用进行了综述.

原花青素类成分在防治2型糖尿病作用机制方面的研究进展

糖尿病是一种以升高血糖为主要特点的慢性疾病,长期高血糖会引发多种并发症.原花青素是一类广泛存在于植物中的多酚化合物,在降血糖、改善胰岛素抵抗、保护胰岛β细胞方面具有良好的作用,对于2型糖尿病的预防及治疗显示出较好的效果.该文对原花青素类成分调控2型糖尿病在促进葡萄糖吸收、保护胰岛β细胞、改善肠道微环境、调节糖尿病并发症等方面的研究进展进行综述,为该类成分进一步研究提供参考.

原花青素的药理学研究现状

综述了近几年国内外对原花青素的抗氧化、保护心血管、防治癌症、抗炎、抗糖尿病、抗胃溃疡、保护肝脏、抗辐射、提高学习记忆、促进毛发生长等药理作用及其可能机制的研究进展.

光照对药食同源植物苦荞麦种子中原花青素积累关键酶FtANR,FtLAR基因表达的影响

苦荞麦Fagopyrum tataricum作为重要的药食两用植物,由于种子中含有丰富的黄酮类成分,因而具有良好的清除自由基、抗氧化、抗衰老等作用.现有的苦荞麦黄酮类化合物研究大多集中在黄酮醇类化合物如芦丁的合成、调控以及积累上,但针对苦荞麦中原花青素类成分的代谢途径研究鲜有报道.该研究以原花青素代谢途径中关键的合成基因花青素还原酶(ANR)和原花青素还原酶(LAR)入手,通过挖掘苦荞麦转录组信息克隆了FtANR(F.tataricum ANR),FtLAR1(F.tataricum LAR1),FtLAR3(F.tataricum LAR3).由于光在植物次生代谢物质形成与积累过程中发挥着重要作用,该研究试着探索不同光质(红光、蓝光、远红光、紫外光)对原花青素代谢途径中关键的合成基因ANR,LAR的表达影响.该研究发现红光对所克隆基因表达的影响呈现出与其他光相反的作用:FtANR,FtLAR1在红光处理后基因的表达量有所下降,而其在蓝光、远红光、紫外光处理后基因的表达量是有所上调的;FtLAR3在红光处理后基因的表达量有所上调,而其在蓝光、远红光、紫外光处理后基因的表达量是有所下降的.

马尾松家系筛选与药材松针的相关性研究

通过马尾松栽培家系的变异、遗传参数及相关性等分析结果,筛选出代表药材松针的质量性状-莽草酸和原花青素含量(遗传力0.90,0.77)、产量性状-单枝干重(遗传力0.60)、束长(遗传力0.46)和采收性状-叶长.根据松针作为中成药原料药与植提物提取原料物的权重估算和指数方程的构建方法,复方中成药原料药的马尾松家系筛选,选用等权法加倍数调整估算权重,构建的综合选择指数法方程(准确度0.936 4和指数遗传力0.881 6)略好于等权法,两者筛选出的优良家系均为46,43,28,优于约束指数方程.作为植提物提取原料物的马尾松家系筛选,选用偏回归系数法估算权重,构建的综合选择指数方程,准确度(0.941 5),指数遗传力(0.889 9)以及莽草酸遗传增益在所有方程中高,筛选出的优良家系为46,27,47.表明药材性状经济效益优型为46号家系.研究认为:合理选用不同的权重估算和指数方程构建方法,可以提高药材松针的终产品经济效益增长为目标的优良家系筛选的准确度.

原花青素柔性纳米脂质体与普通脂质体体外释药评析

目的:制备原花青素柔性纳米脂质体,探索其与普通脂质体体外释药特性.方法:采用薄膜分散法制备脂质体混悬液,采用透射电镜观察其形态;以总酚的含量作为评价指标,采用动态透析法考察其在不同介质中的释药特性.结果:原花青素柔性纳米脂质体、普通脂质体体外释药特性均符合Weibull模型.结论:在没有压力条件下,原花青素柔性纳米脂质体与普通脂质体具有相似的体外释药特性.

超声强化亚临界水提取脱脂葡萄籽中原花青素的工艺及其抗氧化研究

目的:优化超声强化亚临界水提取脱脂葡葡籽中原花青素的佳工艺参数,研究其抗氧化活性,并与传统方法进行比较.方法:采用自行设计的2 L超声强化亚临界水提取设备,研究影响超声强化亚临界水提取原花青素的几个因素,包括提取温度、提取时间和提取压力,并通过响应曲面法优化出佳工艺参数;通过其对DPPH自由基和亚硝酸钠清除作用研究了抗氧化活性.结果:超声强化亚临界水提取原花青素的佳工艺参数为提取温度145℃,提取时间18 min和提取压力14MPa,此时得率为4.05%;此条件下得到的原花青素对DPPH自由基和亚硝酸钠都有较好的清除作用;与传统索氏提取和热回流提取相比,超声强化亚临界水提取具有提取时间短、得率高等优点.结论:采用超声强化亚临界水提取技术提取脱脂葡萄籽中原花青素是可行的.

原花青素对斑秃患者外周血单核细胞中IFN-γ、IL-12及转录因子T-bet基因表达的调节作用

目的 探讨原花青素对斑秃患者外周血单核细胞(PBMC)中Th1型细胞因子(IFN-γ、IL-12)及转录因子T-bet基因表达的调节作用.方法 用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法,分别检测8例轻型斑秃、12例重型斑秃患者及10例健康人外周血PBMC经原花青素(PC)刺激后IFN-γ、IL-12及T-bet mRNA的表达状况.结果 植物血凝素(phytoaemagglutinin,PHA)及PC+PHA共同刺激重型斑秃患者PBMC后,转录因子T-bet mRNA分别为0.581±0.148、0.419±0.113;IFN-γmRNA分别为0.689±0.219、0.430±0.162;IL-12 mRNA分别为0.198±0.056、0.136±0.035;与自身对照比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 PC可抑制重型斑秃患者PBMC中转录因子T-bet及Th1型细胞因子基因表达,逆转Th1型反应,含PC的中药松针治疗斑秃有效的机制可能部分与此相关.