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原花青素对髓母细胞瘤Daoy细胞增殖和凋亡的影响
目的 探讨原花青素对髓母细胞瘤Daoy细胞增殖和凋亡的影响及初步机制.方法 不同浓度原花青素处理Daoy细胞24、48和72 h,CCK-8检测细胞增殖,Hoechst33258荧光染色法及流式细胞仪分析细胞凋亡,Western blot检测细胞Akt、p-Akt和NF-κB的表达.结果 原花青素对肿瘤细胞的增殖抑制效应呈浓度时间依赖性,72 h的半数抑制浓度IC50为0.25 mmol/L.0.2 mmol/L原花青素处理细胞24、48和72 h后,可见较多的凋亡细胞,明显的核固缩;细胞凋亡率分别为21.16％±2.49％、36.02％±0.71％、63.79％±1.47％.细胞总Akt水平无明显变化,但p-Akt和NF-κB蛋白表达水平明显降低.结论 原花青素可能通过降低p-Akt和NF-κB的表达,在体外抑制Daoy细胞增殖,并促进其凋亡.
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原花青素交联牛心包材料的研究
本研究针对天然交联剂原花青素处理牛心包材料的性能进行研究.采用原花青素交联牛心包组织,制备人工生物心脏瓣膜材料,并对其交联特性、力学特性、抗酶降解性能、亲疏水性能、细胞毒性试验以及溶血试验等进行分析.结果显示:原花青素或戊二醛处理的牛心包组织变性温度、力学特性、表面亲水性能和抗酶降解能力都明显提高;与传统交联剂戊二醛相比组织稳定性、亲水性能和抗酶降解能力未见显著性差异,但是大断裂强度显著提高(原花青素交联组织大断裂强度(13.863 0 MPa)明显高于戊二醛交联组织(10.784 2 MPa);溶血试验结果表明原花青素处理固定组织的溶血率(2.61%)远低于戊二醛处理的组织(12.54%);细胞毒性试验结果表明原花青素交联组织在1、3、5 d的细胞增殖率分别为76.19%、88.96%、100.12%,而戊二醛在相同的时间点的细胞增殖率分别为63.15%、57.28%、48.74%.原花青素交联的瓣膜材料组织结构稳定、亲水性好、毒性小且能维持较好的力学性能,作为人工生物瓣膜材料具有很好的研究前景.
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原花青素诱导HL-60细胞分化及其机制的研究
本研究旨在探讨原花青素(proanthocyanidin,PAC)诱导人急性早幼粒细胞白血病细胞株HL-60细胞分化的可能机制.用PAC 20 mg/L处理HL-60细胞24h,CCK-8法检测细胞生长状况,分析PAC对HL-60细胞的增殖影响;应用光学显微镜观察细胞形态变化,流式细胞术分析细胞周期变化和测定细胞分化抗原CD14、CD11b表达;Western blot检测P21、Cyclin D1和CDK4表达变化.结果表明,PAC 20 mg/L作用HL-60细胞24h,细胞抑制率明显增高(73.2±1.5)％(P＜0.01),髓系细胞分化抗原CD14表达明显增高(P＜0.01),CD11b表达稍增高,细胞周期中G0/G1期细胞百分率明显增高(P＜0.05),S期细胞明显减少(P ＜0.01);PAC 20 mg/L与HL-60细胞共培养4h,部分细胞向成熟阶段细胞分化;PAC 20 mg/L处理HL-60细胞12、24和48 h,P21蛋白表达增加,Cyclin D1和CDK4蛋白表达降低.结论:PAC能抑制HL-60细胞增殖并诱导其分化,细胞周期阻滞于G0/G1,其机制可能与P21蛋白表达上调和Cyclin D1及CDK4蛋白表达下调有关.
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原花青素对大鼠实验性血栓形成的影响
本研究旨在探讨原花青素(PC)抗血栓形成的作用及其机制.麻醉动物,然后给颈动脉局部施以20%三氯化铁溶液20分钟,以造成大鼠颈动脉血栓模型.实验分6组:假血栓(对照)组、血栓模型组、阿斯匹林[10 mg/(kg·d)]组、PC 100 mg,/(kg·d)组、PC 200 mg,/(kg·d)组及PC 400 mg/(kg·d)组.假血栓(对照)组和血栓模型组用生理盐水灌胃,其它各组分别用阿司匹林和PC低、中、高3个不同剂量悬液灌胃,每日2次,连续4周.观察各组药物对实验性血栓形成的大鼠血浆中的血栓烷(TXB2)和6-酮-前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)及血小板P-选择蛋白(GMP-140)含量的影响.结果发现:①与假血栓对照组比较,血栓模型组血浆TXB2和血小板P-选择蛋白(GMP-140)含量明显升高,血浆6-Keto-PGF1α含量明显降低,差异非常显著(P＜0.01);②与血栓模型组比较,3个PC组和阿司匹林组大鼠血浆TXB2和血小板P-选择蛋白(GMP-140)含量明显降低,差异非常显著(P＜0.01),血浆6-Keto-PGF1α含量明显升高(P＜0.01);③与阿司匹林组比较,3个PC组血浆TXB2和血小板P-选择蛋白(GMP-140)含量均不同程度降低,而血浆6-Keto-PGF1α含量升高,其中尤以PC 400 mg/(kg·d)组为显著(P＜0.01).结论:PC具有明显的抗血栓形成作用,其抗血栓形成的机制与抑制血小板活化、聚集及保护血管内皮细胞密切相关.PC抗血栓形成作用有明显的剂量依赖性.PC 400 mg/(kg·d)组的抗血栓作用优于阿司匹林[10 mg/(kg·d)]组.
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原花青素对脑缺血再灌注损伤后肠道功能的保护作用
目的：探讨原花青素预处理对脑缺血再灌注损伤后肠道功能的保护作用。方法将24只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(A组，n=8)、缺血再灌注组(B组，n=8)和原花青素预处理组(C组，n=8)。参照Longa线栓法制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型。C组腹腔注射原花青素10 mg/(kg?d)，A组和B组注射等量生理盐水，连续5 d。分别于术后1 d、3 d，测定大鼠回肠肌电慢波和平滑肌收缩、血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和血清丙二醛(MDA)含量；ELISA试剂盒测定血清TNF-α含量；取回肠组织进行苏木精-伊红(HE)染色和含水量测定。结果脑缺血再灌注1 d、3 d后，C组肠黏膜损伤较B组减轻，肠黏膜损伤评分降低(P<0.05)，黏膜炎性细胞浸润数目减少；C组慢波和收缩频率有升高趋势(P>0.05)，振幅较B组均增加(P<0.05)；C组血清SOD活力增加(P<0.05)，MDA含量和TNF-α含量明显下降(P<0.01)，肠含水量明显降低(P<0.01)。结论原花青素预处理对脑缺血损伤后的肠道功能有保护作用。
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原花青素对大鼠脊髓损伤后神经胶质酸性蛋白和脑源性神经营养因子表达的影响
目的：观察原花青素对脊髓损伤后大鼠胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、脑源性神经营养因子(BDNF)表达变化的影响。方法48只健康成年Sprague-Dawley大鼠分为原花青素组(A组)和对照组(B组)。采用Allen法复制大鼠T9急性脊髓损伤模型，于术后1 d、3 d和7 d对各组大鼠行后肢运动功能BBB评分和斜板试验；测定血清丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)；以及免疫组织化学染色检测脊髓GFAP和BDNP的表达。结果术后3 d、7 d，A组大鼠BBB评分和斜板试验成绩均优于B组(P<0.05)。术后1 d、3 d及7 d，A组大鼠血清SOD活性和MDA含量优于B组(P<0.05)。术后各时间点，A组GFAP表达均明显低于B组(P<0.01)；A组BDNF表达均显著高于B组(P<0.001)。结论原花青素可有效抑制脂质过氧化反应，抑制脊髓损伤后大鼠脊髓组织GFAP的表达，促进内源性BDNF的合成，从而促进脊髓损伤大鼠功能恢复。
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原花青素对急性脊髓损伤大鼠核因子-кB和白细胞介素-6表达的影响
目的：观察原花青素对脊髓损伤后大鼠核因子-кB (NF-кB)、白细胞介素-6(IL-6)表达变化的影响。方法36只健康成年Sprague-Dawley大鼠均分为3组：原花青素治疗组(A组)、甲基泼尼松龙治疗组(B组)和对照组(C组)。采用Allen法复制大鼠T9急性脊髓损伤模型，于术后1 d、3 d和7 d对各组大鼠行后肢运动功能BBB评分和斜板试验；免疫组织化学染色检测脊髓NF-кB和IL-6的表达。结果术后3 d、7 d，A组、B组大鼠BBB评分和斜板试验成绩均优于C组(P<0.05)。A组术后各时间点NF-кB表达均明显低于C组(P<0.01)，B组术后3 d、7 d的NF-кB表达强度明显低于C组(P<0.01)。术后各时间点，A、B两组IL-6表达均低于C组(P<0.05)。结论原花青素可抑制脊髓损伤后大鼠脊髓组织NF-кB、IL-6的表达，有效抑制炎症反应，从而促进大鼠后肢运动功能的恢复。
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原花青素对高糖诱导下兔晶状体上皮细胞Bcl-2与Bax表达的影响
目的 观察原花青素(Procyanidins,PC)对高糖诱导下晶状体上皮细胞中Bcl-2与Bax表达的影响,探讨原花青素影响晶状体上皮细胞凋亡的机制.方法 取发育正常的兔眼晶状体进行体外培养,随机分为空白对照组(A)、高糖处理组(B)、原花青素给药组(C).通过HE染色观察晶状体形态的变化,应用免疫组化技术检测培养48 h,72 h,96 h晶状体上皮细胞中Bcl-2与Bax的表达情况并进行定量分析.结果 高糖使晶状体纤维断裂,上皮细胞结构不完整,原花青素能够减轻病变.随着培养时间的延长,各组Bcl-2的表达逐渐减弱,其中以B组为明显,C组减弱程度轻于B组.各组Bax表达逐渐增强,以B组为明显,C组Bax表达增强程度轻于B组.结论 原花青素能够下调高糖条件下兔晶状体上皮细胞中Bax的表达,上调Bcl-2的表达,可能通过调控Bcl-2与Bax影响细胞凋亡.
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原花青素在肝损伤中的作用
目的 建立大鼠肝损伤动物模型,用原花青素对各组大鼠进行干预,观察原花青素在肝损伤中的作用并初步探讨其机制.方法 将60只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、急性化学性肝损伤模型组、联苯双酯阳性对照组(150 mg/kg)以及原花青素低、中、高剂量组(50、250、500 mg/kg)共6组.采用黄嘌呤氧化酶法测定肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性,采用硫代巴比妥酸法(TBA)测定肝组织中丙二醛(MDA)含量,采用赖氏法测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性,并对各组进行比较.结果 原花青素各剂量组均能升高急性化学性肝损伤小鼠血清ALT和AST活性(P＜0.01),升高肝组织SOD活性(P＜0.01),降低MDA含量(P＜0.01),并能不同程度地改善肝脏病理组织损伤.结论 原花青素对CC14所致急性化学性肝损伤具有保护作用.
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原花青素对心肌缺血再灌注损伤大鼠血管内皮细胞活性因子的研究
目的 探讨原花青素(procyanidin,PC)对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠血管内皮细胞活性因子的作用,为进一步研发此药对缺血性心血管疾病的防治提供依据.方法 用48只雄性SD大鼠随机分成4组,即假手术组、缺血再灌注组、低剂量组(60mg/Kg )和高剂量组(120mg/Kg).将麻醉大鼠冠脉结扎30min后,再灌注120min造成心肌损伤模型.均于结扎LAD前20min给予药物和生理盐水.结果 PC可降低再灌后血清内皮素(ET-1)浓度,升高前列环素(PGI2)含量,并升高一氧化氮(NO)的水平,使心肌细胞酶肌酸磷酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)漏出减少,抑制丙二醛(MDA)含量升高,提高超氧化物歧化酶(SOD)活性.结论 PC对心肌缺血再灌注损伤大鼠血管内皮细胞活性因子具有保护作用.
关键词： 原花青素 缺血再灌注损伤 血管内皮细胞一氧化氮 内皮素 前列环素 -
原花青素对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关基因蛋白表达的影响
目的：观察原花青素对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡相关基因半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）、B 型白细胞/2型淋巴细胞样蛋白（Bcl-2）和凋亡相关基因 Bcl-2相关 X 蛋白（Bax）蛋白表达的影响，探讨原花青素在大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡中发挥的作用及可能的调控机制。方法：40只雄性 SD 大鼠随机等分为4组，即正常组，模型组，原花青素低剂量组[原花青素50 mg/（kg·d）]，原花青素高剂量组[原花青素100 mg/（kg·d）]，灌胃给药，每天1次，连续2周。末次给药后结扎冠状动脉左前降支（LAD）30 min 再灌注120 min，建立大鼠心肌缺血再灌注模型。测定肌酸激酶同工酶（CK-MB）活性、心肌梗死面积；用 Western blot 检测各组细胞凋亡相关基因 Caspase-3、Bcl-2、Bax 蛋白表达；原位末端转移酶标记（TUNEL）法检测心肌细胞凋亡。结果：与正常组比较，模型组大鼠 CK-MB 活性显著增强、心肌梗死面积增大，心肌细胞凋亡指数升高， Caspase-3、Bax 蛋白表达增强，Bcl-2蛋白表达、Bcl-2/Bax 降低（P<0.05）；与模型组比较，原花青素高、低剂量组大鼠 CK-MB 活性显著减弱、心肌梗死面积减小，细胞凋亡指数显著降低，Caspase-3、Bax 蛋白表达显著减弱， Bcl-2蛋白表达、Bcl-2/Bax 增加（P<0.05）。结论：原花青素可拮抗缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡，其机制可能与 Caspase-3、Bax 蛋白表达降低，Bcl-2表达升高，Bcl-2/Bax 比例增加有关。
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葡萄籽原花青素对哇巴因高血压大鼠血管重构的保护作用
目的 观察葡萄籽原花青素(GSPE)对哇巴因高血压大鼠血管重构的作用. 方法 30只雄性SD大鼠,随机分为3组(每组10只):(1)对照组:每日清晨给予0.9％生理盐水1 ml腹腔注射,同时0.9％生理盐水1 ml灌胃；(2)哇巴因组:每日清晨给予腹腔注射畦巴因2mg/kg,并给予1ml 0.9％生理盐水灌胃；(3)GSPE组:每日清晨给予腹腔注射哇巴因2mg/kg,并给予250 mg· kg-1·d-1 GSPE灌胃.实验前、实验5周后测定大鼠血压,5周后处死大鼠,留取主动脉,通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫印迹分析(Westen blot)进行形态学观察和分子生物学检查. 结果 5周末,GSPE治疗组大鼠血压较哇巴因组下降,分别为(133.6±6.0)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)与(146.5±7.9)mm Hg(P＜0.01).形态学观察结果显示,哇巴因组大鼠主动脉内膜增厚,结构紊乱,而GSPE组与对照组血管内膜结构完整.核因子κB p65 (NF-κB p65)和转化生长因子(TGF)-β1的mRNA表达及其与内参蛋白的对比中,GSPE可降低哇巴因组大鼠主动脉核因子κB(NF-κB) p65和TGF-β1的表达3.14±0.64与2.77±0.58、6.09±0.95与5.80±0.67、0.93±0.21与0.73±0.20)、0.69±0.16与0.42±0.14,均P＜0.05. 结论 GSPE具有拮抗内源性哇巴因的作用,可以通过抑制NF-κB和(或)TGF-β1途径,延缓了血压的升高和血管重构的过程.
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原花青素对宫颈癌HeLa细胞Caspase-3和Survivin基因表达的影响
目的 探讨原花青素对官颈癌HeLa细胞Caspase-3和Survivin基因表达的影响.方法 将按照不同终浓度原花青素(0,37.5μmol/L,75.0 μmol/L,150.0μmol/L,300.0μmo/L和600.0 μmol/L)处理宫颈癌HeLa细胞,分别纳入对照组(空白对照),37.5μmol/L PC组,75.0μmol/L PC组,150.0μmol/L PC组,300.0 μmol/L PC组和600.0 μmol/L PC组.继续培养24 h,收集细胞进行实验.采用RT-PCR检测Caspase-3 mRNA和Survivin mRNA表达变化.采取Western blot检测caspase-3和survivin蛋白表达的变化.采用比色法检测caspase-3相对活性.结果 随着原花青索浓度增加,Caspase-3 mRNA和caspase-3蛋白表达水平逐渐增加,而Survivin mRNA和survivin蛋白表达水平逐渐减少;随着处理官颈癌HeLa细胞原花青素浓度升高,caspase-3相对活性逐渐增加,且差异有显著意义(P＜0.05),在原花青素为600.0/μmol/L 时,活性大.结论 原花青素可剂量依赖性地增加Caspase-3 mRNA和caspase-3蛋白表达水平及caspase-3活性,并且可剂量依赖性减少Survivin mRNA和survivin蛋白表达水平.
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原花青素介导的自噬流对喉癌细胞增殖影响及其机制探讨
目的 原花青素(procyanidins,OPC)通过抑制细胞周期、促进凋亡等机制发挥抗肿瘤作用.本研究旨在探讨OPC介导的自噬流对喉癌TU686细胞增殖活力的影响,并进一步探究OPC促进喉癌TU686细胞自噬流可能的分子机制.方法 单丹磺酰尸胺(dansylcadaverine,MDC)染色法及流式细胞术检测不同浓度OPC对TU686细胞自噬的诱导作用;蛋白质印迹法检测TU686细胞LC3-Ⅱ和p62蛋白表达变化;并从翻译水平检测相关Atg蛋白表达,使用SiRNA干扰Atg5基因,并采用q-PCR和蛋白质印迹法检测干扰后Atg5转录和翻译水平变化,进一步检测干扰Atg5对LC3Ⅱ和p62影响;检测PI3K/AKT途径中活化PI3K p85α和磷酸化P-AKT1蛋白表达情况,采取PI3K/AKT途径激动剂胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factors-1,IGF-1)与OPC共培养细胞的方式以阐明PI3K/AKT途径在OPC诱导的自噬流中具体作用.CCK-8法和台盼蓝染色法检测OPC诱导的自噬流对TU686细胞增殖活力影响.结果 OPC处理组(20～40 μg/mL) LC3-Ⅱ相对蛋白表达量高于0加药组,F=1 688.710,P＜0.001;p62相对蛋白表达量低于0加药组,F=73.875,P＜0.001.40 μg/mL OPC作用后Atg5和Atg12蛋白相对表达量分别为3.20±0.08和7.52±0.13,高于0加药组,F值均为-3.079,P值均为0.012;40μg/mL OPC作用后PI3K p85α和P-AKT1蛋白相对表达量分别为0.18±0.01和0.48±0.06,低于0加药组,F值均为3.079,P值均为0.012.IGF 1可以逆转OPC引起的LC3-Ⅱ升高和p62降低,与CON组相比,OPC组、IGF-1组和OPC+ IGF-1组LC3-Ⅱ相对表达量分别为10.32±0.31、1.02±0.20和5.73±0.11,均P＜0.001;p62相对表达量分别为0.64±0.02、1.03±0.02和0.87±0.01,均P＜0.001.3-MA预处理后可以逆转OPC引起的LC3-Ⅱ和p62变化,与CON组相比,OPC组、3-MA组和OPC+ 3-MA组LC3-Ⅱ蛋白相对表达量分别为4.74±0.10、1.05±0.13和1.81±0.05,均P＜0.001;p62蛋白相对表达量分别为0.59±0.02、0.94±0.03和0.78±0.03,P值分别为＜0.001、0.002和＜0.001.SiRNA干扰Atg5后,抑制OPC引起的LC3-Ⅱ和p62变化,与NC相比,NC+OPC组、Si-Atg5组和Si-Atg5+OPC组中LC3-Ⅱ相对表达量分别为9.43±0.36、1.14±0.11和6.08±0.22,均P＜0.001;p62相对表达量分别为0.28士0.02、1.03±0.02和0.68±0.02,均P＜0.001.CCK-8结果显示与CON组相比,OPC组、3-MA组和OPC+ 3-MA组细胞活力分别为(49.53±4.29)％、(95.29±1.80)％和(67.19±0.31)％,P值分别为＜0.001、0.001和＜0.001.与CON组相比,NC+ OPC组、Si-Atg5组和Si-Atg5+ OPC组细胞活力分别为(49.53±4.29)％、(100.44±0.50)％和(73.01±1.23)％,均P＜0.001.结论 OPC可能通过抑制PI3K/AKT途径促进喉癌TU686细胞自噬流的通畅,并抑制TU686细胞增殖活力.
关键词： 原花青素 PI3K/Akt通路 喉癌 自噬流 -
原花青素对大鼠局灶性脑缺血的保护作用
目的探讨原花青素对大鼠局灶性脑缺血的保护作用及其机制.方法选用健康SD大鼠30只,随机分为假手术组、缺血对照组和原花青素100 mg/kg组、200mg/kg组及400mg/kg组,共5组,每组6只大鼠.进行神经功能评分,并断头取脑,制备脑组织匀浆,检测超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛含量.结果原花青素100mg/kg组和200mg/kg组的SOD活性分别为(54.0±2.8)NU/mg和(52.7±2.2)NU/mg,与缺血对照组(46.2±1.8)NU/mg比较差异有显著性(P＜0.01);原花青素100mg/kg组和200mg/kg组丙二醛含量分别为(1.15±0.17)μmol/g和(1.17±0.14)μmol/g,与缺血对照组(1.54±0.18)μmol/g比较,差异有显著性(P＜0.01).结论原花青素对局灶缺血性脑损伤具有保护作用,其机制可能与其抗氧化活性和自由基作用有关.
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原花青素对缺血-再灌注损伤后大鼠视网膜Bcl-2和Bax表达的影响
目的 探讨原花青素(proanthocyanidins,PC)对大鼠视网膜缺血-再灌注(retinal ischemiareperfusion,RIR)损伤抑凋亡基因蛋白Bcl-2和促凋亡基因蛋白Bax表达的影响.方法 所有大鼠随机分为正常组、模型组、丹参对照组、PC低、高剂量组,每组5只.于造模前2周PC低、高剂量组分别给予100、300 mg/kg剂量灌胃PC混悬液,丹参对照组予丹参颗粒溶液0.09 g/kg剂量灌胃,正常组及模型组给予等量生理盐水灌胃,均1次/d.造模后各组仍继续按原方案给药.除正常组外,其余每组按再灌注时间的不同分为缺血再灌注6、24、48及72 h组.以免疫组化法检测RIR后大鼠视网膜不同时间点Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果 各组视网膜神经节细胞层及内丛状层均可见一定的Bcl-2和Bax蛋白表达,其中模型组Bcl-2蛋白表达在6h开始表达,48 h达到高峰,72 h明显下降.Bax蛋白表达变化与Bcl-2相近,但高峰时间在24 h.与其他组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).在各个时间点,丹参组和PC低、高剂量组与模型组比较,Bcl-2蛋白表达上升(P＜0.05),Bax蛋白表达下降(P＜0.05),尤以PC高剂量组与模型组之间的差异明显(P＜0.01).结论 大鼠RIR损伤后Bcl-2和Bax蛋白表达均升高,PC可上调Bcl-2蛋白的表达,下调Bax蛋白的表达,从而对视网膜起到保护作用.
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原花青素对牙源性明胶酶/胶原酶活性的抑制作用
目的 探讨原花青素(PA)对牙源性明胶酶/胶原酶活性的影响.方法 选取新鲜离体牙本质,液氮冷冻下磨粉.将富含PA 的葡萄籽提取物粉末加入乙醇溶剂中,制备不同浓度的PA预处理剂,用其预处理脱矿牙粉60、120 s,蒸馏水反复离心冲洗,干燥.采用EnzChek 试剂盒分析不同处理组牙粉内明胶酶/胶原酶活性.结果 随着与试剂盒中底物反应时间的延长,各组牙粉明胶酶/胶原酶活性均逐渐升高.而无论预处理脱矿牙本质60 s 或120 s,PA 预处理组的牙源性明胶酶/胶原酶活性均低于未处理组,差异有统计学意义(P ＜ 0.05).结论 PA 能抑制牙源性明胶酶/胶原酶活性.
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原花青素对人脐静脉内皮细胞功能及miR-221表达的影响
目的 探讨原花青素(PC)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移的影响,初步探讨PC作用机制.方法 体外培养HUVECs,采用不同浓度(5、25、50、75、100μg/ml)PC处理细胞24h后,用CCK-8法筛选出50μg/ml PC做后续实验,继续用细胞划痕实验法检测细胞迁移能力;利用实时荧光定量PCR检测HUVECs内miR-221的表达变化;miRWalk数据库预测miR-221靶基因并对靶基因行GO分析和KEGG Pathway分析.结果 PC处理HUVECs 24h后,与对照组相比,PC 5μg/ml组细胞增殖活性变化不明显(P＞0.05),而PC 25、50、75、100μg/ml组细胞增殖活性与PC呈浓度依赖性下降(P＜0.01);与对照组相比,PC 50μg/ml组迁移能力明显减弱(P＜0.01);与对照组相比,50μg/ml组miR-221的表达明显升高(P＜0.01).GO分析发现miR-221的靶基因主要与细胞的增殖、迁移、基因的翻译等相关,与细胞增殖、迁移有关的靶基因有ADAM17、KIT、PDGFD等.KEGG Pathway分析发现miR-221的靶基因富集FoxO、PI3K-Akt等5条信号通路.结论 低浓度PC对HUVECs增殖活性无明显影响,一定浓度PC可以抑制HUVECs的增殖和迁移,其机制可能涉及miR-221的上调及FoxO、PI3K-Akt等信号通路的参与.
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原花青素通过调节微小RNA-27a与微小RNA-451抑制多药耐药基因1 mRNA的表达
目的：研究原花青素对微小RNA-27a（miR-27a）与微小RNA-451（miR-451）在A2780/T细胞中表达的影响，及其与抑制多药耐药基因1（MDR1） mRNA表达的相关性。方法通过茎环法聚合酶链反应（stem-loop PCR），检测miR-27a与miR-451的表达水平，分别评价0~40μmol/L的原花青素刺激A2780/T细胞0~48 h后细胞内miR-27a与miR-451的表达水平。进一步通过转染miR-27a和miR-451的模拟或抑制片段，分别过表达或沉默相关的微小RNA，采用RT-PCR法评价原花青素对转染后细胞内MDR1 mRNA表达水平的影响。结果原花青素显著抑制了miR-27a与miR-451的表达水平，并且均具有浓度与时间依赖性。原花青素能够显著抑制过表达miR-27a与miR-451而上调的MDR1 mRNA水平，而对通过miR-27a与miR-451的沉默而下调的MDR1 mRNA水平无显著影响。结论原花青素能够通过抑制A2780/T细胞内miR-27a与miR-451的表达，从而抑制MDR1 mRNA的表达。
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红景天属植物及其原花青素成分对酪氨酸酶及Aβ42聚集的抑制活性
酪氨酸酶(tyrosinase)是与老年人皮肤色素异常沉积密切相关的关键酶,而β淀粉样肽Aβ42的自我聚集则被认为是导致阿尔茨海默病的关键病因.本研究对红景天属植物20个样品的酪氨酸酶及Aβ42聚集抑制活性进行了系统分析与活性成分的分离,结果证明了该属植物普遍含有的原花青素成分(oligomeric proanthocyanidins,OPCs)可能为抑制酪氨酸酶及Aβ42聚集的主要活性成分,而该属植物的代表性成分红景天苷则未表现出明显的抑制作用.
