首页 > 文献资料
-
甘草对小肠隐窝干细胞增殖中p53mRNA稳定性及其表达的影响
目的 研究甘草对小肠隐窝干细胞IEC-6细胞增殖及p53表达的影响.方法 采用二氟甲基鸟氨酸(DFMO)耗竭细胞内多胺的方法诱导IEC-6细胞生长抑制模型,实验分4组,即对照组、DFMO组、甘草低剂量组和甘草高剂量组.对照组为正常细胞,其他3组均加入5 mmol/L DFMO,同时甘草低剂量组与甘草高剂量组分别添加40、80 μg/mL甘草配方颗粒,均连续培养6天.利用流式细胞术检测各组细胞数量及存活率,Western blot检测p53蛋白水平,荧光定量RT-PCR检测p53 mRNA水平及mRNA稳定性.结果 与对照组比较,第4天DFMO组IEC-6细胞生长明显受到抑制(P＜0.05)；第6天甘草低剂量组及甘草高剂量组细胞数量较DFMO组明显增加(P＜0.05),且2个剂量的甘草组间具有量效依赖性.处理IEC-6细胞6天后,DFMO组p53蛋白及mRNA表达水平较对照组显著升高(P＜0.05)；与DFMO组比较,2个剂量的甘草组能够明显下调p53蛋白及mRNA的表达水平(P＜0.05).对照组细胞的p53 mRNA降解快,DFMO组细胞的降解速度慢.结论 甘草通过下调p53 mRNA的稳定性来降低p53表达,从而促进小肠隐窝干细胞的增殖,可能是甘草的肠黏膜保护和修复作用的机制之一.
-
续断皂苷抗白血病作用的机制探讨
目的 探讨续断皂苷(akebia saponin D,ASD)抗白血病细胞及其作用机制.方法 用不同剂量(10、30、50、100 μg/mL)皂苷处理人急性白血病细胞株U937细胞和人早幼粒白血病细胞株HL-60细胞,采用MTT比色法观察ASD对白血病细胞的作用.以Annexin-(Ⅴ)染色法检测细胞凋亡并以PCR法检测凋亡相关基因的表达.采用Westem blot法检测P53蛋白的变化.采用Griess分光光度法检测样品中一氧化氮(NO)的代谢产物亚硝酸盐的含量.结果 与未处理组相比,50 μg/mL ASD能明显抑制U937细胞和HL-60细胞的生长并呈剂量依赖性,同时伴随bcl-2 mRNA表达的明显下调.Western blot检测结果显示,P53蛋白的表达水平随ASD作用而升高.另外,ASD可以促使U937细胞和HL-60细胞中NO的含量显著提高(P＜0.05).结论 ASD对U937细胞和HL-60细胞具有增殖抑制和诱导凋亡的作用,其机制与bcl-2基因的下调,p53蛋白上调,以及促进白血病细胞内NO含量提高相关.
-
通心络对大脑中动脉闭塞模型大鼠脑缺血后神经细胞凋亡的影响
目的 探讨通心络胶囊在缺血脑保护方面的作用机制.方法 SD大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、MK-801组、通心络大剂量组(简称TXLL)、通心络小剂量组(简称TXLS).制备大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型后,MK-801组腹腔注射MK-801 0.5 mg/(kg·d),1次/天;TXLL、TXLS组分别给予1.0 g/(kg·d)和0.5 g/(kg·d)通心络原粉灌胃,2次/天.采用流式细胞、Western blot及RT-PCR技术,观察通心络对大鼠脑缺血后神经细胞凋亡、Caspase-3、p53和HSP70蛋白及mRNA表达的影响.结果 通心络与MK-801均可明显降低模型大鼠缺血后各时间点脑部神经细胞凋亡百分率(P＜0.05,P＜0.01),以TXLL组效果显著;模型组Caspase-3、p53蛋白及mRNA表达较假手术组明显增高,通心络和MK-801均可使其表达减低,TXLL组显著(P＜0.01);与模型组比较,各治疗组HSP70蛋白及mRNA表达明显增高(P＜0.05,P＜0.01).结论 通心络通过减少MCAO模型大鼠神经细胞凋亡率进而发挥脑保护作用,其机制可能与抑制细胞凋亡相关因子Caspase-3、p53表达、促进应激保护性HSP70表达有关.
-
扶正抑瘤颗粒对小鼠H22肿瘤细胞凋亡及p53和Caspase-3基因表达的影响
目的研究扶正抑瘤颗粒(FYK)对小鼠H22肿瘤细胞生长的抑制作用,及其对细胞凋亡和p53、Caspase-3基因表达的影响.方法用体内实验观察FYK对H22瘤株的抑瘤率,流式细胞术测定细胞凋亡率和细胞周期,反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定野生型p53(Wtp53)和Caspase-3的mRNA表达情况.结果 12 g/kg、24 g/kg FYK均能显著抑制小鼠H22肿瘤细胞的生长,高抑瘤率为51.24%(P＜0.01).流式细胞术检测表明,FYK显著提高H22肿瘤细胞的凋亡率,高为15.84%(P＜0.01);肿瘤细胞阻滞在G0/G1期,S期细胞比率降低;RT-PCR实验表明,FYK可显著上调p53和Caspase-3 mRNA的表达水平.结论 FYK能显著抑制小鼠H22肿瘤细胞生长,其抗肿瘤机制与诱导细胞凋亡,调控细胞周期,促进Wt p53与Caspase-3基因的表达有关.
-
癌基因和抑癌基因中的阴阳
癌症发生是癌基因(阳)和抑癌基因(阴)逐渐不平衡表达的结果,二者在调控细胞生长和增殖过程中发挥相反作用.以癌基因myc和抑癌基因p53为例,说明在癌基因和抑癌基因中同样存在阴阳.阴基因p53的阴中之阴是抑制细胞生长促进细胞凋亡;阴中之阳是修复受损DNA,使细胞继续存活.阳基因myc的阳中之阳是促进细胞生长和增殖;阳中之阴是诱导细胞凋亡.阐明癌基因和抑癌基因中的阴阳作用,对于癌症全面深入研究具有重要意义.
-
化浊解毒法治疗胃癌前病变患者61例
慢性萎缩性胃炎(CAG)伴肠上皮化生(IM)和不典型增生(ATP)是胃癌的癌前病变.胃癌前病变(PLGC)是胃黏膜从正常向胃癌转化过程中的一个重要阶段.阻断和逆转PLGC的发展,是降低胃癌发生率的有效措施之一,中医药在该领域具有良好的疗效和前景.我们从"浊毒"入手,治疗胃癌前病变患者,疗效确切.现将报告如下.
-
当归红芪超滤物对TM40D人乳腺癌荷瘤小鼠的放射增敏作用
目的 探讨当归红芪超滤物是否对TM40D人乳腺癌荷瘤小鼠具有放射增敏效应,并探讨其效应的可能机制.方法 40只TM40D人乳腺癌荷瘤小鼠随机分为对照组、药物组、放射组和联合组,每组10只.各组小鼠待肿瘤体积为120 mm3时,对照组给予0.9％ NaC1溶液0.3 ml/d灌胃;药物组给予当归红芪超滤物1.44 g/kg灌胃;放射组给予一次性6Gy射线照射;联合组给予当归红芪超滤物1.44 g/kg灌胃和一次性6Gy射线照射.各组连续灌胃30d后,观察小鼠移植瘤重量和抑瘤率、肿瘤生长延迟时间(TGD)、肿瘤体积生长至放射治疗前3倍所需时间(TGT3)及联合组的增敏系数(EF),检测各组小鼠肿瘤组织中p53mRNA及其蛋白的表达.结果 联合组小鼠移植瘤重量显著低于对照组、药物组、放射组(P＜0.05或P＜0.01);联合组的抑瘤率显著高于药物组和放射组(P＜0.01).联合组小鼠TGT3、TGD较药物组和放射组明显增加(P＜0.05或P＜0.01),EF为1.95.联合组p53 mRNA及蛋白表达亦明显高于药物组、放射组(P＜0.05).结论 当归红芪超滤物可以增强TM40D人乳腺癌荷瘤小鼠的放射敏感性,其机制可能是通过上调p53蛋白及其mRNA表达而发挥作用.
-
消岩汤对肺癌恶病质小鼠肿瘤生长的影响
目的 研究消岩汤对肺癌恶病质小鼠肿瘤生长的影响,并探讨其可能作用机制.方法 将40只小鼠分为健康小鼠组(健康组)、Lewis肺癌小鼠组(肺癌组)、Lewis肺癌小鼠消岩汤组(消岩汤组)、Lewis肺癌小鼠醋酸甲地孕酮组(孕酮组),每组10只.连续给药12d后,测定血清瘦素水平及瘤组织中p53分子表达及C-myc蛋白表达.结果 除健康组外,消岩汤组、孕酮组小鼠反应性及体毛较肺癌组明显改善,进食量明显增加(P＜0.01),其中消岩汤组进食量多于孕酮组(P＜0.05).肺癌组小鼠反应性及体毛情况恶化明显.3组进食量均低于健康组(P＜0.01).给药后处死各组小鼠,肺癌组、消岩汤组、孕酮组小鼠体重均比健康组小鼠体重减轻(P＜0.05或P＜0.01).至给药第12天,消岩汤组、孕酮组瘤重明显较肺癌组轻(P＜0.01),消岩汤组瘤重低于孕酮组(P＜0.01).肺癌组、消岩汤组、孕酮组血清瘦素水平均低于健康组,其中肺癌组、孕酮组与健康组比较下降明显(P＜0.05)；而孕酮组低于消岩汤组(P＜0.05).消岩汤组、孕酮组的p53及C-myc蛋白表达水平与肺癌组比较差异均有统计学意义(P＜0.01),消岩汤组与孕酮组比较差异亦有统计学意义(P＜0.01).结论 中药消岩汤具有增加恶病质小鼠食量和体重、改善机体机能、升高血清中瘦素受体水平、促进p53的表达并抑制C-myc表达的作用,达到抑制肿瘤生长的作用.
-
益气清热方对Ⅰ型幽门螺杆菌感染裸鼠胃黏膜p53、bcl-2表达的影响
目的 观察益气清热方对Ⅰ型幽门螺杆菌(Hp)感染的干预作用及机制.方法 将100只雄性裸鼠随机分为正常组、模型组、黄芪组、黄芩组、益气清热方组,每组20只.正常组及模型组予生理盐水,其余分别给予黄芪、黄芩及益气清热方药液,每日0.2ml/10g.第14天,除正常组外,其余各组予浓度108cfu/ml的Hp菌液灌胃,每天1.3ml,两周后处死,观察胃黏膜p53、bcl-2的表达情况. 结果 与正常组比较,模型组胃黏膜p53、bcl-2表达明显增加(P＜0.01)；与模型组比较,3个药物组均能显著降低p53、bcl-2表达(P＜0.05或P＜0.01),而3个药物组间比较,益气清热方组明显为优(P＜0.05或P＜0.01).结论 益气清热方对Ⅰ型Hp感染裸鼠胃黏膜p53、bcl-2表达有一定的抑制作用,可能是通过对凋亡基因的调控,降低过高的细胞凋亡率,减轻Hp对胃上皮细胞的损害.
-
肿瘤抑制因子p53功能及其抗病毒作用研究进展
肿瘤抑制因子p53作为基因组的守护者,能通过细胞周期调控和促进细胞凋亡而阻止癌细胞及机体肿瘤的发生,p53还能参与DNA损伤修复、调节机体代谢及调节繁殖生育等功能.除此而外,近年来研究发现,p53能通过促进病毒感染的细胞凋亡而起到抗病毒作用以及p53受IFN的调控和p53作为转录调控因子还能直接转录激活IRF9、IRF5、ISG15和TLR3等抗病毒基因,从而确定了p53在抗病毒反应中起到重要作用.p53可能参与先天性免疫、获得性免疫及炎症反应而起到抗病毒的作用.
-
单纯疱疹病毒1型立即早期蛋白ICP22研究进展
单纯疱疹病毒l型(Herpes simplex virus 1,HSV-1)感染细胞蛋白22(Infected Cell Protein 22,ICP22)是Us1基因编码的一种翻译后修饰多功能蛋白,为HSV-1的五种立即早期蛋白之一.HSV-1 ICP22能与不同的细胞和病毒成分相互作用来执行不同的功能,包括改变RNA聚合酶Ⅱ(RNA polymerase Ⅱ,RNAPⅡ/PolⅡ)的磷酸化状态、参与抵抗细胞对病毒复制的消极作用、引起细胞周期蛋白A和B水平降低、介导修饰拓扑异构酶Ⅱα、参与胞核内病毒诱导的分子伴侣富集(Virus-induced chaperone-enriched,VICE)区域的形成及促进病毒新生核衣壳的初次包装.这些作用大多与调节病毒在胞核中有效复制相关.此外,HSV-1 ICP22还在限制细胞中的病毒复制、病毒致病力和潜伏感染建立过程中发挥重要作用,但ICP22发挥这些作用的机制尚未知.本文就上述目前国内外对HSV ICP22的研究进展作一综述,以期为后续研究提供参考.
-
直肠癌远端移行粘膜p53、k-ras基因突变的检测及其临床意义
运用聚合酶链式反应一单链构象多态性分析(PCR-SSCP)方法,通过对直肠癌切除标本远端移行粘膜p53、k-ras基因突变的检测,界定远端移行粘膜存在的范围.直肠癌根治术标本54例,于自然张力下取肿瘤下缘1.0cm(A组)、2.0cm(B组)、3.0cm(C组)粘膜标本,对照组(D组)40名正常直肠粘膜取自痔上粘膜环切吻合术(PPH)标本,采用PCR-SSCP法分别检测各标本的p53、k-ras基因突变情况.结果显示,A、B组基因突变率无显著性差异(P=0.321),与对照组有显著性差异(P=0.012),C组基因突变率与A、B组有显著性差异(P=0.002),与对照组无显著性差异(P=0.072).按病例分析,54例p53突变者占35.2%(19/54);k-ras突变者占20.4%(11/54);44.4%(24/54)发生至少一种基因突变,6例(11.1%)出现p53和k-ras基因同时突变.突变的发生与患者年龄、性别、癌肿大小、病理类型、TMN分期等因素均无关.直肠癌远端移行粘膜p53、k-ras突变多位于2cm内,3.0cm处与正常粘膜无显著性差异,可以界定为分子遗传学上的远端小安全切缘.
关键词： 直肠癌 移行枯膜 P53 k-rasPCR-SSCP最小手术切缘 -
结肠癌P53、 nm23免疫组化表达特征及与临床病理的关联分析
目的 探讨结肠癌患者P53、nm23的表达及其与相关临床病理特征的关联.方法 选取2013年至2017年间于本院就诊并经病理确诊为结肠癌的患者121例,分析其P53、nm23的表达及与临床病理特征的相关性.结果 p53在肿瘤组织中的阳性率(76.03％)显著高于癌旁组织(4.96％)(P＜0.05),而nm23的表达在肿瘤组织(80.17％)和癌旁组织(86.12％)中无明显差异(P＞0.05).p53的阳性率随着肿瘤分化程度的减低逐渐增高,高达92.50％,组间差异具有统计学意义(P＞0.05);nm23则相反,高分化组织的nm23表达阳性率高,为86.84％.在有转移的患者的肿瘤组织中,p53的表达明显上升,nm23的表达明显下降(P＜0.05).结果 肿瘤组织中p53蛋白过量表达提示肿瘤恶性程度高,转移可能大,nm23蛋白在组织分化程度高的组中和未发生淋巴结转移组中高表达,与抑制肿瘤生长相关,两者均可以作为判断结直肠癌预后效果的重要参考指标之一.
-
IL-1β、IL-6、p53与胃癌组织幽门螺杆菌感染的相关性分析
目的 探讨IL-1β、IL-6、p53与胃癌组织幽门螺杆菌(Hp)感染的相关性.方法 选取2016年6月至2017年10月期间我院收治的100例胃癌患者,根据检查结果Hp阳性有89例,Hp阴性有11例.选取同期体检健康者50例作为对照组.比较各组间血清IL-1β、IL-6、p53水平以及相关性.结果 胃癌组血清IL-1β、IL-6、p53水平显著高于对照组(P＜0.05).胃癌组Hp阳性率(89.0％)显著高于对照组(22.0％)(P＜0.05).Hp(+)胃癌组血清IL-1β、IL-6、p53水平显著高于Hp(-)胃癌组(P＜0.05).胃癌Hp感染密度3级患者血清IL-1β、IL-6、p53水平显著高于1级和2级(P＜0.05).经过Spearson相关性分析,IL-1β、IL-6、p53水平与胃癌Hp感染密度均呈正相关关系.结论 胃癌组织Hp感染可引起血清IL-1β、IL-6水平等炎性因子提高和抑癌基因p53的激活,并通过联合作用机制共同促进胃癌的发生、发展.
-
青蒿素调控p53蛋白诱导肝癌细胞凋亡的机制研究
目的 通过探讨青蒿素调控p53表达进而诱导肝癌细胞凋亡的情况研究青蒿素抗肿瘤的机理.方法 20只C57小鼠随机分为空白组、PBS组、青蒿素组及青蒿素+Pifithrin-α组,每组5只.以PBS组、青蒿素组及青蒿素+Pifithrin-α组小鼠联合应用DEN/CCM/乙醇构建肝癌模型.空白组小鼠正常饲养3周,PBS组腹腔注射PBS 3周,青蒿素组腹腔注射青蒿素(100mg/kg)3周,青蒿素+Pifithrin-α组应用Pifithrin-α (50 mg/kg)隔日作用1周后,再与青蒿素作用3周.处死各组小鼠,分离小鼠肿瘤组织,Western blot检测肿瘤组织中Caspase3及p53的表达.结果 成功构建小鼠肝癌模型,青蒿素组荷瘤小鼠经作用后肿瘤组织Caspase3及p53蛋白表达显著增加,青蒿素+Pifithrin-α组荷瘤小鼠经Pifithrin-α预处理后,青蒿素诱导的细胞凋亡蛋白Caspase3显著降低.结论 青蒿素通过调控p53的表达诱导肝癌细胞凋亡,进而发挥抗肿瘤作用.
-
M2型肿瘤相关巨噬细胞通过p53途径下调肝癌化疗敏感性的机制研究
目的 通过研究M2肿瘤相关巨噬细胞调控p53表达来下调肝癌化疗敏感性的机制,以此拓宽建立抗肿瘤耐药的措施.方法 构建小鼠肝癌模型及分离肝癌组织,研磨组织提取巨噬细胞,通过RT-PCR方法检测巨噬细胞表面CD206及CD163分子表达情况.培养人单核巨噬细胞(THP-1),PMA (100ng/mL)和IL-4 (100ng/mL)作用诱导分化成肿瘤相关巨噬细胞后,与肝癌细胞(HepG2、SMMC7721,Hep 3B)共培养,加入奥沙利铂(20μ g/mL)作用24小时,通过Western blot方法检测凋亡相关蛋白Caspase 3、抗凋亡蛋白Bcl-2及p53的表达,通过MTT方法检测化疗对肝癌细胞增殖情况.结果 成功构建了肝癌模型,分离出了肝癌组织巨噬细胞,RT-PCR检测CD206和CD163的表达显著升高;人单核细胞(THP-1)经加入PMA(100ng/mL)和IL-4 (100ng/mL)分化诱导48h后其细胞的表面CD206和CD163的表达明显高于THP1分化诱导的细胞表面表达量;肝癌细胞SMMC7721和HepG2与M2型肿瘤相关巨噬细胞共培养24h,经奥沙利铂作用后,肿瘤细胞Bcl-2表达明显升高,Caspase 3和p53的表达显著降低;肿瘤细胞的增殖抑制率明显降低,而Hep 3B细胞的凋亡则明显降低.结论 M2型肿瘤相关巨噬细胞调控肝癌细胞中p53的表达,进而抑制了肝癌化疗的敏感性.
关键词： M2型肿瘤相关巨噬细胞 肝癌 P53 化疗敏感性 -
结肠癌细胞HCT116中p53的R213突变对靶基因p21表达的影响
目的 确定在结肠癌细胞系中, p53的213位精氨酸突变后对其下游靶基因p21表达的影响.方法 在p53缺失的结肠癌细胞系HCT116-/-中转染p53的R213位突变的质粒;荧光素酶双报告基因系统检测p53 靶基因启动子活性;EMSA检测p53与其靶基因p21的结合能力;real-time PCR和Western blot检测p53下游靶基因p21的表达.结果 p53蛋白213位精氨酸突变为赖氨酸后,明显降低了p53靶基因的启动子活性(P<0.05);与靶基因p21启动子的结合能力明显降低(P<0.05);并抑制了p21基因的表达(P<0.05).而213位突变为谷氨酰胺后,迁移率比突变前明显变快.结论 在人的结肠癌细胞中,p53蛋白R213位的不同突变对下游靶基因p21有不同的影响,提示存在着不同的调控机制.
-
原癌基因Wip1在室管膜瘤中表达增加并与P53相关
目的 探讨野生型P53-诱导的蛋白磷酸酶1(Wip1)在室管膜瘤中的表达及其与P53相关性.方法 用免疫组织化学、反转录聚合酶链反应(RT-PCa)和Western blot 方法检测31例室管膜瘤及10例正常脑组织中Wip1mRNA、蛋白表达.并用免疫组化检测P53.同时,回顾性分析临床病理因素与Wipl表达之间的相关性.结果 室管膜瘤中Wipl阳性表达率为19/31(60%),显著高于正常脑组织中的1/10(10%)(P＜0.05).31例室管膜瘤组织中P53阳性2例.Wip1 mRNA在室管膜瘤中表达相对量为0.34±0.07,显著高于正常脑组织的0.05±0.01(P＜0.05).室管膜瘤中Wipl蛋白表达相对量为0.83 4-0.16,显著高于正常脑组织的0.14±0.03(P＜0.05).Wip1表达与肿瘤大小、年龄、性别无关.结论 Wip1在室管膜瘤高表达,对P53表达可能起负反馈抑制作用,Wip1有望成为室管膜瘤预后及治疗的新靶点.
-
慢性低氧性肺动脉高压大鼠肺组织P53表达增高
目的 观察P53在低氧性肺动脉高压大鼠肺组织中的表达.方法 采用减压低氧方法复制大鼠慢性低氧性肺动脉高压模型;取肺组织,常规SABC免疫组化法染色和Hoechst染色,观察P53表达的变化及细胞凋亡变化.结果 P53在慢性肺动脉高压大鼠肺小动脉壁中有少量表达,其中低氧3周组＞低氧2周组＞正常组.Hoechst染色显示肺组织凋亡细胞增加,其变化趋势与P53的表达变化趋势相同.结论 在慢性低氧性肺动脉高压形成过程中,肺小动脉壁发生了增殖和凋亡,程度随低氧时间的延长而增加,同时P53表达增多,提示P53参与了慢性低氧性肺动脉高压肺小血管重建的调控.
-
MCUR1在多发性骨髓瘤中的作用
目的 探讨线粒体钙单向转运体调节分子1(MCUR1)在多发性骨髓瘤(MM)患者中的表达变化,观察其对MM细胞周期、凋亡的作用,初步分析其内在分子机制.方法 设瞬时转染MCUR1干涉片段1和2的人MM细胞系RPMI 8226细胞作为实验组(命名为siMCUR1-1和siMCUR1-2细胞),阴性干涉片段转染的RPMI 8226细胞(命名为siCtrl细胞)作为对照组;实时定量PCR测定MCUR1在MM患者及正常对照者骨髓单个核细胞中的表达水平;实时定量PCR和Western blot检测MCUR1沉默效果;用CCK-8法和流式细胞计量术分别测定沉默MCUR1后细胞增殖、细胞周期和凋亡,Western blot检测MCUR1沉默后p53及其下游分子表达变化.结果 与对照者相比,MCUR1在MM患者中的表达显著升高(P<0.05);MM细胞系RPMI 8226中干扰MCUR1后,与对照组相比,细胞增殖显著减慢(P<0.05),G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少,细胞凋亡比例增加;与对照组相比,干扰MCUR1组细胞内p53、BAX蛋白表达增加,BCL2、cyclin D1和cyclin E蛋白表达减少.结论 MCUR1在MM患者中表达上调,MCUR1通过抑制p53通路进而促进MM细胞增殖.
关键词： 线粒体钙单向转运体调节分子1 细胞周期 细胞凋亡 P53 多发性骨髓瘤
