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乌司他丁对小鼠急性肺损伤保护作用及机制的研究
目的 研究乌司他丁(ulinastatin,UTI)对急性肺损伤(acute lung injury,ALI)小鼠的保护作用,并探讨其机制.方法 雄性SPF级C57/BL小鼠64只,按随机数字表均分为:健康对照组(Sham组)、Sham+UTI组、脂多糖组(LPS组)、LPS+UTI组.气管内滴注LPS建立ALI模型,Sham+UTI组和LPS+UTI组建模前30 min皮下注射UTI 10000 U/kg.监测各组小鼠72 h生存率.建模后24 h取支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织,检测BALF中炎性细胞、中性粒细胞和巨噬细胞数;测定肺组织湿/干质量比(W/D);观察肺组织病理学变化并计算肺损伤评分;测定肺组织中髓过氧化物酶(MPO)活性及丙二醛(MDA)含量;测定肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、IL-6、IL-2 mRNA水平,检测肺组织中TLR4/NF-κB表达情况.结果 LPS+UTI组小鼠生存率较LPS组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);LPS+UTI组肺组织W/D、肺组织病理评分及肺组织中MPO活性和MDA含量较LPS组明显降低,TNF-α、IL-1、IL-6、IL-2 mRNA水平较LPS组明显降低,且TLR4/NF-κB mRNA表达水平较LPS组显著降低,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 UTI可减轻LPS诱导的ALI小鼠肺组织的炎性反应,提高ALI小鼠生存率,这可能与UTI影响TLR4/NF-κB信号通路有关.
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钙敏感受体对人单核巨噬细胞株THP-1细胞因子分泌功能的影响
目的 探讨钙敏感受体(Calcium sensing receptor,CaSR)对THP-1源性巨噬细胞分泌细胞因子能力的影响.方法 首先将人单核细胞株THP-1用佛波脂(PMA,100nmol/L)诱导,使之转化为具有贴壁能力的巨噬细胞株THP-1(以下简称THP-1).用CaSR特异激动剂氯化钆(GdCl3,1mmol/L)处理细胞后,用ELISA法检测CaSR的激活对THP-1分泌细胞因子IL-1β、TNFα的影响,并利用Western Blotting方法检测NF-κB信号通路中p65、p50和IκBα蛋白的表达变化.结果 (1)用GdCl3处理后,THP-1细胞上清液中IL-1β、TNF-α的含量明显升高,但该作用可被CaSR特异抑制剂NPS2390(10μmol/L)抑制;(2)在Gd3+作用组,THP-1细胞中NF-κB-p65表达明显上调,同时伴有IκBα的减少;在NPS2390预处理组,Gd3+所引起的NF-κB-p65和IκBα变化被抑制;各组NF-κB-p50变化不明显.结论 CaSR的激活可能通过激活NF-κB信号通路促进THP-1源性巨噬细胞株分泌细胞因子IL-1β、TNF-α,提示CaSR可能参与涉及单核巨噬细胞激活的各种疾病.
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金丝桃苷对卵巢癌细胞增殖、凋亡、迁移以及侵袭的影响
目的 探讨金丝桃苷(hyperin)对卵巢癌细胞SKOV3的增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响及其作用机制.方法 将SKOV3细胞分为:正常对照组、金丝桃苷组和阳性对照顺铂组.MTT检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western Blot检测cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-9、Bcl-2、p65和p-IκB-α的蛋白表达;划痕和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭.结果 与正常对照组相比,金丝桃苷处理显著抑制SKOV3的细胞增殖(P＜0.05),促进细胞凋亡(P＜0.05),上调cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-9而下调Bcl-2的蛋白水平(P＜0.05),降低细胞的迁移和侵袭能力(P＜0.05),减少p65和p-IκB-α的蛋白水平(P＜0.05),抑制NF-κB信号通路的激活,且以上作用均随金丝桃苷处理浓度的增大而增强.结论 金丝桃苷抑制SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭能力,促进细胞凋亡,这可能与抑制NF-κB信号通路有关.
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参地颗粒对慢性肾炎脾肾亏虚证患者NF-κB信号通路的干预作用
目的 探讨氧化应激介导的NF-κB信号通路对慢性肾炎脾肾亏虚证患者的影响及参地颗粒(茯苓、熟地、五味子、桑螵蛸、川芎)对其的干预作用.方法 50例慢性肾炎脾肾亏虚证患者随机分为贝那普利片组(对照组)和参地颗粒组(治疗组),实际完成对照组24例,治疗组22例,并选取20名健康体检者作为正常组,疗程12周.检测两组临床疗效、治疗前后24 h尿蛋白定量及血清活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平和核因子-κB p65 (NF-κB p65)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、纤维连接蛋白(FN)的变化情况.结果 治疗组临床疾病总有效率和中医证候疗效总有效率分别为81.82％和77.27％,优于对照组的66.67％和37.50％(P＜0.05或P＜0.01).治疗组和对照组治疗后,24 h尿蛋白定量较治疗前降低,且治疗组的下降幅度大于对照组(P＜0.05).两组患者治疗前血清ROS、MDA水平和NF-κB p65、MCP-1水平高于正常组,血清SOD水平和FN水平低于正常组(P＜0.05);治疗后两组血清ROS、MDA水平和NF-κB p65、MCP-1水平均较治疗前降低,血清SOD水平和FN水平较治疗前升高,治疗组优于对照组(P＜0.05).结论 参地颗粒能改善患者临床症状,降低24 h尿蛋白定量,其机理与通过抑制CGN脾肾亏虚证患者的氧化应激,增强机体的抗氧化能力,抑制NF-κB信号活化,下调MCP-1表达有关.
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异鼠李素对大鼠缺血再灌注急性肾损伤的免疫保护作用
探讨异鼠李素对大鼠缺血再灌注(ischemia reperfusion,IR)急性肾损伤的保护作用及可能的作用机制.将40只雄性SD大鼠随机分为对照组、IR组、低剂量异鼠李素组(ISO-50)和高剂量异鼠李素组(ISO-150),ISO-50和ISO-150组分别在造模前给予口服不同剂量的异鼠李素[50mg/(kg·d)和150mg/(kg·d)]14 d,IR损伤造模24 h后测定各组大鼠血肌酐、胱抑素C及尿KIM-1水平;测定肾组织NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65的蛋白及基因表达的同时检测NF-κB p65 DNA的活性以评估NF-κB信号通路的活性;测定肾组织中NF-κB通路的下游炎性因子TGF-β1、TNF-α、IL-6及ICAM-1的蛋白和基因表达,同时测定肾组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;肾组织按常规方法制作石蜡切片,HE染色后光镜下观察肾小管损伤程度.研究发现异鼠李索能降低血肌酐、胱抑素C及尿KIM-1水平,降低肾小管Paller评分,抑制NF-κB信号通路的活化及炎性因子的表达,并减轻肾组织的氧化应激;ISO-150组的肾保护作用较ISO-50组更加明显.结果提示异鼠李素预处理对大鼠IR损伤导致的急性肾损伤(acute kidneyinjury,AKI)有保护作用,且呈剂量依赖性,其作用机制可能是抑制了NF-κB信号转导系统的过度活化及氧化应激.
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TGF-β/Smad、MAPK/ERK、NF-κB信号通路对肝纤维化的影响
肝纤维化是肝脏对各种慢性肝损伤的自身病理修复过程,是发展为肝硬化的必经阶段.本文介绍了TGF-β/Smad信号通路、MAPK信号通路、NF-κB信号通路在肝纤维化发生发展过程中的重要作用.
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淫羊藿苷提高SIRT6酶活性及抑制小鼠NF-κB炎症信号通路的实验研究
目的 观察淫羊藿苷(Icrrin,ICA)对组蛋白去乙酰化酶SIRT6的激活作用及对老年小鼠体内NF-κB(p65)、SIRT6蛋白表达及NF-κB信号通路下游炎症细胞因子表达的影响.方法 以体外酶学实验观察ICA对SIRT6的激活作用并绘制不同剂量浓度激活效率曲线.选取24月龄老年组(n=11)、24月龄+ICA干预组(n=12)和3月龄青年组小鼠(n=10)的心、肝、肌肉组织,用Western blot检测NF-κB(p65)和SIRT6蛋白表达水平；采用ELISA法检测小鼠血清中肿瘤坏死因子α (TNF-α)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-6(IL-6)的含量.结果 体外酶学实验显示ICA随着药物浓度的下降,对SIRT6逐渐呈现激活效应,在10-8 mol/L浓度时达到大激活效应为142％.小鼠实验显示ICA干预后,心脏、肝脏与肌肉组织中NF-κB (p65)蛋白表达与老年小鼠比较呈现下调趋势,而SIRT6蛋白表达较老年小鼠则呈现上调趋势；与青年小鼠比较,老年小鼠血清中炎症细胞TNF-α、ICAM-1、IL-2、IL-6的含量均明显上调(P＜0.05、P＜0.01)；与老年小鼠比较,ICA干预后小鼠血清中炎症因子TNF-α、ICAM-1、IL-2、IL-6的含量均明显下降(P＜0.05、P＜0.01).结论 ICA对SIRT6的酶活性具有显著的激活效应,且在极低的药物浓度下仍对SIRT6有激活作用；ICA能上调老年小鼠组织中SIRT6蛋白表达,抑制NF-κB(p65)蛋白表达及下调下游炎症细胞因子的产生,提示ICA延缓炎性衰老的作用机制及干预新靶点与NF-κB信号通路和组蛋白去乙酰化酶SIRT6密切相关.
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固有免疫在微小隐孢子虫感染中的作用
微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)是引起人类尤其是2岁以下婴幼儿腹泻的重要病原体.由于该病原体具有“微创”的特性,上皮细胞作为固有免疫的第一道屏障,在抵抗微小隐孢子虫感染中发挥着重要的作用.本文从上皮细胞分泌的效应分子、模式识别受体的激活、miRNA的调节、外泌体的释放以及补体系统等几个方面进行综述,以阐明固有免疫在抵抗微小隐孢子虫感染中的作用机制.
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氧化型DHA抑制NF-κB信号通路达到化疗增敏作用
目的:比较氧化型DHA和非氧化型DHA对于NF-κB通路的不同作用,并比较对于NF-κB信号通路下游基因MMP-2、COX-2、CyclinD1的影响,探索DHA达到化疗增敏作用的机制研究.方法:细胞水平培养胃癌肿瘤细胞系MGC-803,设立多组对照试验,共分4组:对照组(不加药空白组)、5-FU化疗组、氧化型DHA联合化疗组(5-FU+氧化型DHA)、非氧化型DHA联合化疗组(5-FU+非氧化型DHA).使用敏感可靠的信号通路报告基因的检测方法,比较各组间肿瘤细胞NF-κB信号通路的激活情况,并检测NF-κB信号通路下游调控基因MMP-2、COX-2、CyclinD1的mRNA表达的差异.结果:化疗组(5-FU)较空白组NF-κB信号通路激活明显,氧化型DHA联合化疗组可抑制化疗引起的NF-κB信号通路激活.同样,氧化型DHA在抑制NF-κB信号通路激活的同时,也抑制了NF-κB下游调控基因MMP-2、COX-2、CyclinD1的mRNA的表达.非氧化型DHA的作用则相反,会进一步激活NF-κB信号通路.结论:氧化型DHA可通过抑制NF-κB通路来达到化疗增敏的作用,这为临床联合化疗用药提供了新的思路.
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异甘草酸镁对成纤维细胞NF-κB信号通路活性的影响
目的:研究异甘草酸镁(magnesium isoglycyrrhizinate,MgIG)对成纤维细胞核因子-kappa B(nuclear factor kappa B,NF-κB)信号通路活性的影响.方法:实验分6组,为空白对照组、TNF-α模型组、地塞米松(dexamethasone,DEX)阳性对照组和0.1、1、10 mg/ml的MgIG组.DEX组和MgIG组分别给予DEX(1 μg/ml)和MgIG(0.1、1、10 mg/ml)预处理4h后,除对照组外,其余5组加入TNF-α(20 ng/ml)作用1.5h.提取细胞核蛋白,以免疫印迹法检测NF-κB p65蛋白质表达.提取总RNA,用实时PCR技术检测细胞内IκBα mRNA表达.成纤维细胞经DEX和MgIG预处理4h后加入TNF-α作用24 h(浓度同上),用报告基因技术检测NF-κB基因表达.结果:成纤维细胞经TNF-α作用1.5h后,细胞核内NF-κB p65蛋白质表达量明显增加,IκBα mRNA表达上调;TNF-α作用24 h后,NF-κB基因上调.DEX预处理4h,可以明显减少TNF-α引起的核内NF-κB p65蛋白质表达和细胞内IκBα mRNA表达,明显降低与TNF-α共作用24 h后NF-κB基因表达.MgIG处理成纤维细胞4h后,能够明显降低TNF-α作用1.5h后核内NF-κB p65蛋白质表达量,但对IκBα mRNA表达水平无明显影响.1、10 mg/ml的MgIG能够明显降低与TNF-α共作用24 h后NF-κB基因表达水平.结论:MgIG的抗炎作用与抑制NF-κB p65转位入核和NF-κB基因表达,从而抑制NF-κB信号通路活性相关,但与DEX不同的是MgIG不能改变IκBα mRNA表达水平.
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辛伐他汀诱导裸鼠体内K562细胞凋亡过程中NF-κB通路的分子变化
目的:探讨辛伐他汀在裸鼠体内引起的K562细胞NF-κB信号通路的分子变化,以说明辛伐他汀是否依赖NF-κB信号通路参与K562细胞凋亡发生.方法:体外培养慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞,接种于18只BALB/c-nu/nu裸小鼠皮下,构建移植瘤模型.随机分为3组,每组6只.对照组腹腔注射生理盐水0.2 ml,两个处理组分别注射0.2 g/L的辛伐他汀0.25 ml(0.05 mg)和0.4 ml(0.08 mg).均隔日注射,连续6次.采用TUNEL法检测K562细胞早期凋亡的变化,RT-PCR检测K562细胞中NF-κB信号通路IKK-β、IκB-α、NF-κB1 mRNA的差异表达.结果:不同剂量的辛伐他汀能够诱导裸鼠体内K562细胞发生明显的凋亡,且高剂量组凋亡率高于低剂量组(P＜0.01);不同剂量的辛伐他汀能够引起 IKK-β、IκB-α、NF-κB1 mRNA的表达下调(P＜0.01).结论:辛伐他汀可诱导K562细胞凋亡,可能与NF-κB通路基因的表达下调有关.
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腺花素对多发性骨髓瘤细胞的生物学效应及其机制研究
目的·探讨腺花素(Aden)对多发性骨髓瘤(MM)细胞的生物学效应与作用机制.方法·不同浓度Aden处理MM细胞H929、U266不同时间后,采用锥虫蓝排斥测试法检测细胞密度与活率;不同浓度Aden处理H929、U266细胞24 h后,采用CCK8检测细胞增殖变化,AnnexinV-APC/PI双染后流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting检测凋亡相关蛋白的表达、NF-κB信号通路相关蛋白以及NF-κB调控的下游蛋白变化;采用CETSA方法检测Aden对IKKβ 蛋白热力学稳定性的影响.结果·锥虫蓝排斥测试法结果显示:Aden呈时间和剂量依赖性降低H929、U266细胞的活率及抑制细胞的增殖;在同样浓度的Aden处理下,U266较H929细胞更敏感.CCK8结果显示Aden呈剂量依赖性抑制H929、U266细胞的增殖.流式细胞术表明Aden可引起MM细胞轻微凋亡.Western blotting结果显示:H929细胞经Aden处理后未检测到PARP、caspase3的剪切;U266细胞经Aden处理后总蛋白PARP和caspase3下调,同时也可检测到PARP、caspase3的剪切;2株MM细胞经Aden处理后NF-κB信号通路蛋白p-p65、p-IκBα 的表达均减少.CETSA结果显示Aden能使IKKβ 蛋白热力学稳定性下降.结论 ·Aden能明显抑制MM细胞H929、U266增殖,但不能显著诱导其凋亡;Aden对MM细胞增殖抑制效应可能与其结合IKKβ 进而抑制NF-κB信号通路的活化有关.
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TNF-α单克隆抗体对小鼠变应性鼻炎的治疗作用及机制研究
目的 探讨TNF-α抗体干预对小鼠变应性鼻炎(AR)的治疗作用及潜在分子机制.方法 18只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、AR模型组和TNF-α抗体干预组;采用卵清蛋白诱导致敏建立AR模型,于鼻腔刺激前滴加TNF-α单克隆抗体进行治疗;对各组小鼠进行行为学评分,H-E染色观察鼻黏膜组织病理学变化,TUNEL法检测细胞凋亡,ELISA检测鼻黏膜液中TNF-α、IL-1β、IgE表达水平,Western blotting检测NF-κB p65、IκB及凋亡相关蛋白表达变化.结果 TNF-α抗体干预组变应性鼻炎症状减轻,炎症反应程度降低,鼻黏膜液中TNF-α、IL-1β、IgE含量及鼻黏膜组织中NF-κB p65、cleaved caspase-3、Bax表达水平较AR模型组显著降低,I-κB及Bcl-2表达增加.结论 TNF-α单克隆抗体干预对小鼠变应性鼻炎具有一定的治疗作用,可能通过抑制NF-κB信号通路激活、调节Th1/Th2平衡、降低炎性因子水平、抑制细胞凋亡发挥作用.
关键词： TNF-α单克隆抗体 变应性鼻炎 NF-κB信号通路 -
胆仙咳喘宁胶囊对慢性支气管炎大鼠NF-κB、TNF-α的影响
目的:探讨胆仙咳喘宁胶囊治疗慢性支气管炎(慢支)的作用机制.方法:48只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、阳性对照(DXM)组及胆仙咳喘宁高、中、低剂量组.除空白对照组外,均采用改良烟熏法复制慢支模型.各组大鼠分别用DXM、胆仙咳喘宁及0.9％ NaCl溶液灌胃干预,连续干预21 d.采用免疫组化染色方法(PV二步法)测定各组大鼠肺组织中NF-KB(p65)表达;采用固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)测定各组大鼠的血清及肺组织中的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.结果:模型组大鼠肺组织中NF-KB(p65)表达较空白对照组明显升高(P＜0.01);胆仙咳喘宁高、中、低剂量组及DXM组大鼠肺组织中NF-KB的表达显著低于模型组(P＜0.01,P＜0.05).模型组大鼠血清和肺组织中TNF-α水平较空白对照组均明显增加,胆仙咳喘宁高、中、低剂量组及DXM组大鼠血清及肺组织中TNF-α含量均明显低于模型组(P＜0.05,P＜0.01).结论:胆仙咳喘宁胶囊可能通过抑制NF-KB的活化抑制炎症因子TNF-α的表达.
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肺岩宁颗粒对Lewis肺癌小鼠肿瘤相关巨噬细胞及肿瘤转移的影响
目的:观察肺岩宁颗粒对Lewis肺癌小鼠肿瘤相关巨噬细胞的影响及肿瘤肺转移的抑制作用.方法:取Lewis肺癌细胞接种在C57BL/6小鼠右腋皮下,制备Lewis肺癌荷瘤鼠模型.C57 BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、顺铂组、肺岩宁方组、肺岩宁颗粒组、肺岩宁颗粒联合顺铂组,除正常组外均造模.予相应干预(中药或生理盐水灌胃,顺铂腹腔注射),14 d后观察小鼠生存质量、肺转移灶及计算肺转移抑制率;ELISA法检测血清中细胞因子IL-10、IL-12、转化生长因子(TGF)-β1含量;免疫组织化学染色检测肿瘤组织中肿瘤相关巨噬细胞CD206的表达;Western blot法检测肿瘤组织中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、核转录因子(NF)-κBp65的表达.结果:模型组、顺铂组小鼠生存质量差,肺岩宁方组、肺岩宁颗粒组、肺岩宁颗粒联合顺铂组小鼠生存质量较好.肺岩宁方组、肺岩宁颗粒组、肺岩宁颗粒联合顺铂组3组的肺转移抑制率均明显高于顺铂组.模型组IL-10含量明显高于正常组,各治疗组IL-10含量均显著低于模型组(P＜0.05);与顺铂组比较,肺岩宁方组、肺岩宁颗粒组IL-10含量均明显升高(P＜0.05).肺岩宁方组、肺岩宁颗粒组、肺岩宁颗粒联合顺铂组IL-12含量均显著高于模型组及顺铂组(P＜0.05).与顺铂组比较,肺岩宁方组、肺岩宁颗粒组、肺岩宁颗粒联合顺铂组TGF-β1均显著降低(P＜0.05).肺岩宁方组、肺岩宁颗粒组、肺岩宁颗粒联合顺铂组均可抑制CD206的表达(M2型),但顺铂组和肺岩宁颗粒联合顺铂组抑制更为明显.肺岩宁方组、肺岩宁颗粒组、肺岩宁颗粒联合顺铂组肿瘤组织中MMP-2、MMP-9、NF-κBp65的表达明显低于顺铂组(P＜0.05).结论:肺岩宁颗粒能明显改善小鼠生存质量及抑制肿瘤转移,其机制可能是干预NF-κB信号通路并进一步调节肿瘤相关巨噬细胞.
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熊果酸对皮肤鳞状细胞癌细胞增殖与凋亡的影响及其机制
目的:探讨熊果酸是否能够通过核因子(NF)-κB信号通路对皮肤鳞状细胞癌(以下简称鳞癌)细胞增殖、凋亡产生影响.方法:以人皮肤鳞癌细胞株A431细胞为研究对象,人永生化角质形成细胞系HaCaT细胞为正常对照,氟尿嘧啶(5-FU)为药物阳性对照,传代培养皮肤鳞癌细胞株A431细胞,不同浓度熊果酸作用于细胞后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察熊果酸对细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率,hoechst染色检测细胞凋亡形态,Western blot检测IκBαt、pIκBα、bc1-2、c-IAP2等NF-κB信号通路相关蛋白的表达.结果:与对照组比较,不同浓度熊果酸组均出现细胞皱缩及细胞破碎现象,细胞凋亡率增加,并呈剂量依赖性,pIκBα、bc1-2、c-IAP2蛋白表达下降,IκBα蛋白表达升高.结论:熊果酸能通过阻断NF-κB通路诱导A431细胞凋亡.
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NF-κB信号通路与血管间粘附分子间作用及其在疾病治疗中的应用
动脉粥样硬化、心房颤动等疾病危害着人类的健康,研究表明NF-κB信号通路及血管间粘附分子等在这些疾病中发挥着重要的作用,因此对NF-κB信号通路及血管间粘附分子等的研究可以为这些疾病的预防与治疗提供重要的理论依据.TNF-α等多种细胞因子可以激活NF-κB信号通路,进而显著增加血管间粘附因子等的表达,从而影响动脉粥样硬化、心房颤动等疾病的产生与发展.麝香乌龙丸、来氟米特、丹皮酚与利拉鲁肽等药物可通过抑制NF-κB信号通路来降低血管间粘附分子等的浓度,进而预防与治疗相关的疾病.该文综述了NF-κB信号通路与血管间粘附分子在疾病的产生、发展中的作用以及以它们为靶点治疗疾病的简要机制,旨在为相关疾病的预防、治疗提供有价值的参考.
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NF-κB信号通路在肿瘤发生和炎症反应中的作用
核因子κB(NF-κB)普遍存在于真核生物的细胞中,是重要的诱导性转录因子,在细胞的生长、增殖、分化、凋亡,以及癌变过程中均发挥重要作用.当细胞受到各种内外界的刺激,NF-κB信号通路被激活,核因子与相应基因结合从而调节靶基因的表达.研究发现NF-κB信号通路激活主要有经典途径和旁路途径两种.同时还发现,NF-κB信号通路的激活和抑制会相应的调节细胞各种生理生化反应.在机体中,NF-κB信号通路的激活往往伴有肿瘤或炎症的发生.文章主要综述了NF-κB信号通路相关蛋白的结构和功能,以及NF-κB信号通路的激活和抑制在治疗肿瘤和炎症等疾病方面的的新研究进展.对NF-κB信号通路相关靶点的研究,为新的消炎和抗肿瘤药设计以及疾病的治疗等提供有益的思路.
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Wnt1诱导分泌蛋白-1通过NF-κB通路促进管鳞癌细胞的增殖和侵袭转移
目的:探讨Wnt1诱导分泌蛋白-1(Wnt1 induced secreted protein-1,WISP-1)在食管鳞癌细胞侵袭转移的作用机制.方法:体外培养人食管鳞癌细胞株Eca109、TE-8和正常食管上皮细胞Het-1 a,荧光定量PCR和蛋白质印迹检测WISP-1表达.将食管鳞癌细胞株Eca109和TE-8分为空白对照组、阴性对照组和WISP-1 siRNA组,利用CCK8法检测各组细胞增殖改变;流式细胞术分析不同处理组细胞凋亡率;Transwell实验检测细胞侵袭能力变化;蛋白质印迹法检测细胞中VEGF-A,VEGF-C,MMP2,MMP9以及NF-κB通路相关蛋白的表达量;酶联免疫吸附法测定培养上清液中VEGF-C和MMP9分泌量.结果:荧光定量PCR和蛋白质印迹结果显示,食管鳞癌细胞中WISP-1表达量高于正常食管上皮细胞(P＜0.01);CCK8和流式细胞术结果显示,下调WISP-1后,食管鳞癌细胞株增殖明显抑制(P＜0.05),凋亡率无明显影响;蛋白质印迹结果显示,下调WISP-1对VEGF-A和MMP2表达无明显影响,而VEGF-C和MMP9表达明显得到抑制;酶联免疫吸附结果显示,VEGF-C和MMP9分泌量随WISP-1下调也出现明显下降(P＜0.05);下调WISP-1后,食管鳞癌细胞株侵袭能力明显降低(P＜0.01);下调WISP-1表达显著抑制NF-κB磷酸化并促进IκBα的磷酸化,抑制NF-κB信号活化水平.结论:WISP-1可通过NF-κB通路,增加MMP9,VEGF-C的表达和分泌,促进食管鳞癌细胞增殖及侵袭转移的能力.
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二氨基庚二酸激活NOD1信号通路对心肌缺血再灌注损伤的影响
目的:探讨二氨基庚二酸(DAP)激活核苷酸结合寡聚化结构域蛋白1(NOD1)信号通路对心肌缺血再灌注(I/R)损伤的影响.方法:将40只C57/BL6雄性小鼠随机分为4组,即假手术组、I/R组、DAP组和I/R+DAP组,每组10只.对I/R组和I/R+DAP组小鼠进行心肌缺血再灌注模型制备,假手术组进行相同的手术操作,但只穿线不结扎,DAP组和I/R+DAP组小鼠在冠状动脉结扎前30 min腹腔注射DAP,假手术组和I/R组小鼠注射等剂量的生理盐水;观察各组小鼠心肌梗死、心肌细胞凋亡、炎症反应及NF-κB p65磷酸化情况.结果:I/R组NOD1 mRNA和NOD1蛋白表达水平均显著高于假手术组(P<0.05);I/R组梗死面积比值明显高于假手术组,且I/R+DAP组小鼠梗死面积高(P<0.05),而DAP组与假手术组差异无统计学意义;I/R组和I/R+DAP组TUNEL阳性细胞数显着高于假手术组,I/R+DAP组阳性细胞数多(P<0.05),而DAP组与假手术组差异无统计学意义;I/R组和I/R+DAP组炎症细胞浸润数明显多于假手术组,I/R+DAP组小鼠高(P<0.05);I/R组和I/R+DAP组磷酸化的NF-κB p65蛋白水平显著高于假手术组,且I/R+DAP组高(P<0.05).结论:DAP激活NOD1可加重缺血再灌注损伤后小鼠心脏心肌细胞的梗死面积,增加心肌细胞的凋亡和炎症反应,该机制与NF-κB信号通路的激活有关.
