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复方三七脊复康胶囊提取精制工艺的研究
目的:本文采用药效筛选试验,确定复方三七脊复康胶囊佳的提取精制工艺路线为稀乙醇回流提取,水返溶后大孔树脂精制.方法:工艺优选中,均以人参皂苷Rg1含量为指标,采用正交试验确定了提取工艺中的乙醇浓度、提取次数、乙醇用量,确定了大孔树脂精制的工艺参数包括树脂型号、树脂用量、洗脱剂的浓度、洗脱剂用量等.结果:过树脂流出母液及水洗液未检出人参皂苷Rg1、Rb1、Re及三七皂苷R1、川芎、芍药苷、银杏叶、钩藤,表明本复方药液通过大孔树脂床流出液未造成有效成分的泄漏.而吸附树脂乙醇洗脱液中均可检出以上成分,且人参皂苷Rg1过树脂前后含量保留90%以上.结论:本方用大孔树脂分离精制工艺是合理的.
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比格犬口服益智亲水凝胶骨架片后栀子苷、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的药动学研究
目的:研究比格犬口服益智亲水凝胶骨架片后栀子苷、三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1的体内药动学,与益智普通片比较生物利用度.方法:采用质谱分析方法(HPLC-MS/MS)测定栀子苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1在血浆中的药物浓度,用Kinetica 4.4软件对血药浓度数据进行处理.结果:益智亲水凝胶骨架片与益智普通片的药动学参数相比,栀子苷、三七皂苷R1和人参皂苷Rb1的Cmax,AUC,MRT明显增加(P＜0.05),人参皂苷Rg1的AUC和MRT明显增加(P＜0.05).结论:药动学参数的增加表明骨架材料可以用于中药复方缓控释制剂.利用HPMC制备的益智亲水凝胶骨架片可以增加栀子苷和三七总皂苷的生物利用度,因此提高了其治疗效果以及临床应用范围.
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蜗牛酶转化人参皂苷Rb1制备人参稀有皂苷Compound K的研究
目的:确定蜗牛酶转化人参皂苷Rb1制备人参稀有皂苷Compound K(CK)的主要因素,并优选出转化效率高、稳定、适合工业化生产的工艺条件.方法:采用蜗牛酶水解人参皂苷Rb1制备人参稀有皂苷CK,以转化率为指标,通过单因素考察pH值、温度、底物浓度、酶用量、反应时间对转化率的影响,并通过响应面法试验优化制备工艺;采用MS,1H-NMR,13C-NMR鉴定酶解产物.结果:酶解反应的优条件为温度55℃、pH值5.5醋酸-醋酸钠缓冲液,底物浓度1.0mg/mL,酶与底物质量比1:1,反应时间36h,在此条件下的转化率为86.91％;经核磁图谱证实产物为人参稀有皂苷CK.结论:蜗牛酶水解人参皂苷Rb1制备人参稀有皂苷CK反应条件温和,工艺简单可靠,适合工业化生产.
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人参皂苷Rb1对大鼠成骨细胞增殖、分化及OPG/RANKL mRNA表达的影响
目的:研究人参皂苷Rb1对大鼠成骨细胞增殖、分化及护骨素/核因子κB受体活化因子配体(OPG/RANKL)mRNA表达的影响.方法:不同浓度的人参皂苷Rb1作用于体外培养的大鼠成骨细胞不同时间,采用MTT法检测药物对成骨细胞增殖功能的影响,PNPP法检测成骨细胞中ALP活性分析药物对成骨细胞分化的影响,半定量RT-PCR法检测成骨细胞中OPG/RANKL mRNA,分析药物对破骨细胞分化的影响.结果:人参皂苷Rb1(1.12×10-9-1.12×10-5mol/L)作用于体外培养的大鼠成骨细胞3d时,1.12×10-8-1.12×10-6mol/L人参皂苷Rb1可显著促进成骨细胞的增殖(P<0.05或P<0.01);1.12×10-7-1.12×10-6mol/L人参皂苷Rb1可显著促进成骨细胞的分化(P<0.01);1.12×10-9-1.12×10-8mol/L人参皂苷Rb1可显著上调成骨细胞中OPG/RANKL mRNA的比值,抑制破骨细胞的分化(P<0.01);1.12×10-7-1.12 x 10-5mol/L人参皂苷Rb1可显著下调成骨细胞中OPG/RANKL mRNA的比值,促进破骨细胞的分化(P<0.01).结论:人参皂苷Rb1对体外培养的大鼠成骨细胞的增殖、分化及破骨细胞的分化有显著影响.
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人参皂苷Rg1及Rb1对Aβ25-35诱导CHO细胞毒性影响
目的:观察人参皂苷Rg1及Rb1对β-淀粉样蛋白25-35片段(Aβ25-35)诱导中国仓鼠卵巢瘤(CHO)细胞损伤的保护作用.方法:利用MTT法和Annexin V-FITC染色流式细胞仪检测法,依次观察人参皂苷Rg1及Rb1对40μM的Aβ25-35多肽诱导CHO细胞24h后细胞活性和细胞凋亡的干预作用.结果:加入Aβ25-35多肽模型组细胞较未加用对照组细胞活性低(P<0.05),加入Aβ25-35多肽模型组细胞凋亡数高于未加用对照组(P<0.05),模型组细胞加用人参皂苷Rg1及Rb1组细胞损伤和凋亡数均较未加用组细胞有不同程度减少(P<0.05).结论:天然药单体人参皂苷Rg1及Rb1在一定剂量范围内均能抑制Aβ25-35诱导的神经细胞损伤.
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三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1提取工艺研究
目的:优选颈痛舒贴膏中三七的佳提取工艺.方法:以三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1三者的得率为考察指标,在单因素试验的基础上,采用正交试验分别对乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、提取次数等因素进行研究.结果:佳提取工艺为三七粉碎过10目筛,以10倍量70％的乙醇浸泡1h,回流提取3次,每次1.5h.三七皂苷总得率平均值为(83.03±1.52) mg/g.结论:该提取工艺方法简单易行,重复性好,可用于三七中三七皂苷类成分的提取.
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三七不同炮制品中皂苷类成分的含量比较
目的:建立一种RP.HPLC同时测定三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1、Re含量的分析方法,并比较不同炮制品中这4种成分含量的异同.方法:采用高效液相色谱法.色谱条件:色谱柱:Ultimate XBC18(250mm×4.6 mm,5μm);柱温:25℃;流动相:乙腈-水梯度洗脱;检测波长:203nm.结果:蒸三七中三七皂苷R1的平均含量为0.806%、Rg1为3:18%、Re为1.00%、Rb1为0.998%,高于相应生三七和油炸三七中相应的成分;其中,生三七中上述成分的含量分别为O.747%、3.24%、0.961%、0.977%,油炸三七中分别为0.765%、2.84%、0.860%、0.847%.结论:三七不同炮制品中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、Rb1、Re的含量存在差异;炮制对三七皂苷类成分的含量有影响.
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三七益肾颗粒质量标准研究
目的:建立三七益肾颗粒的质量标准,为控制该制剂质量提供检验依据.方法:采用TLC法对三七益肾颗粒中的金银花、马鞭草、紫花地丁、甘草4味药材进行定性鉴别,采用HPLC法对三七益肾颗粒中的人参皂苷Rb1、羟基红花黄色素A和丹酚酸B进行定量测定.结果:TLC方法色谱斑点清晰,分离度好,结果明显,并且不同成分的阴性样品没有干扰;人参皂苷Rb1、羟基红花黄色素A和丹酚酸B进样量分别在0.175-16.484μg、0.03007-7.5180μg、0.09264-15.44μ g范围内与峰面积线性关系良好,r＞0.9999,平均加样回收率分别为100.80％、98.27％、100.63％(n=9).结论:该方法操作过程简便,结果准确、可靠,重现性好,可有效控制三七益肾颗粒的质量.
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人参皂苷Rg1、Rb1对淀粉样前体蛋白分泌酶代谢途径的影响
目的 观察人参皂苷Rg1、Rb1对淀粉样前体蛋白代谢途径中α分泌酶活性和基因表达的影响.方法 用转染突变型PSI(ML46L)和野生型PSl的CHO细胞,通过荧光酶标技术检测α分泌酶活性,Western blot免疫印迹、RT-PCR技术检测α分泌酶基因ADAM9、ADAMl0的蛋白和RNA表达.结果 转染突变型PSl ML46L组α分泌酶活性较转染野生型PSI(wT组)低(P<0.05),加用人参皂苷Rg1、Rb1后转染突变型PSlML46L组α分泌酶活性较未加用组不同程度增高(P<0.05),同时ADAM9、ADAM10的蛋白及RNA表达较未加用组有不同程度增多(P
关键词： 人参皂苷Rg1 人参皂苷Rb1 淀粉样前体蛋白分泌酶 阿尔茨海默病 -
人参皂苷Rb1和Re对乌头碱所致心肌细胞损伤的保护作用
目的 观察人参皂苷Rb1和Re对乌头碱导致的心肌细胞损伤的影响.方法 选用乳鼠心肌细胞,观察人参皂苷Rb1和Re分别与乌头碱配伍使用后,乳鼠心肌细胞上清心肌酶谱的改变,采用RT-PCR的方法,观察人参皂苷Rb1和Re与乌头碱配伍对心肌细胞钙离子通道基因Cav1.2 mRNA的影响.结果 人参皂苷Rb1和Re可以有效对抗由乌头碱导致的心肌酶谱改变.同时,可以对抗乌头碱所致的钙离子通道基因Cav1.2 mRNA表达上调.结论 人参皂苷Rb1和Re与乌头碱配伍具有减毒增效的作用,这可能与人参皂苷减轻了乌头碱所致的心肌细胞损伤和改善钙离子通道异常表达有关.
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HPLC测定田七痛经胶囊中人参皂苷Rg1、Rb1及三七皂苷R1含量
目的：建立田七痛经胶囊的含量测定方法。方法采用安捷伦ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相A为乙腈,流动相B为水,梯度洗脱(0～20 min,19%→21%A；20～50 min,21%A→36%A),检测波长203 nm,流速1.0 mg/mL,柱温25℃,测定田七痛经胶囊中人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1的含量。结果人参皂苷Rg1、Rb1和三七皂苷R1的线性范围分别为0.4424～3.9816μg(r2＝1.0000)、0.5248～3.6736μg(r2＝0.9994)和0.2032～1.016μg (r2＝0.9992),平均回收率分别为99.49%(RSD＝2.44%)、99.02%(RSD＝2.45%)和99.98%(RSD＝2.14%)。结论本研究所建立的方法分离效果好、简便、快捷,重复性好,可有效控制田七痛经胶囊的质量。
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LC-MS/MS同时定量测定大鼠血浆中复方血栓通胶囊的8种入血成分
目的：建立复方血栓通胶囊中8种有效成分(三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re、人参皂苷Rd、丹参酮Ⅰ、哈巴俄苷、黄芪甲苷)在大鼠血浆中的液相色谱-质谱/质谱定量测定方法。方法色谱柱：Thermo Hypersil GOLD(2.1 mm×100 mm,5μm)；柱温：30℃；流动相：A为1%甲酸,B为乙腈；梯度洗脱：0～10 min 25%～55%B,10～20 min 55%～70%B；流速：0.2 mL/min；进样量：10μL。离子源：ESI源,正离子模式,SRM扫描。结果以盐酸巴马汀为内标,三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd、哈巴俄苷、黄芪甲苷、丹参酮Ⅰ的检测范围分别为1.00～800 ng/mL、0.950～760 ng/mL、1.44～1440 ng/mL、1.33～1330 ng/mL、9.90～990 ng/mL、1.01～1010 ng/mL、1.16～928 ng/mL、10.0～800 ng/mL。准确度分别在85%～115%之间,绝对回收率达到50%～70%,日内精密度与日间精密度RSD≤15%。结论该方法快速、灵敏、重复性好,可用于复方血栓通胶囊8种有效成分在大鼠体内的相关药代动力学研究。
关键词： 复方血栓通 三七皂苷R1 人参皂苷Rg1 人参皂苷Rb1 液相色谱-质谱/质谱 -
益胃消瘀颗粒质量标准研究
目的 建立益胃消瘀颗粒的质量标准.方法 采用薄层色谱法(TLC)定性鉴别白术、当归和石斛,采用HPLC同时测定三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1及人参皂苷Re的含量.结果 TLC斑点清晰,阴性对照无干扰.三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re分别在0.0672~0.672 μg(r=0.9996)、0.5012~5.012 μg(r=0.9996)、0.3265~3.265 μg(r=0.9996)、0.0983~0.983 μg(r=0.9997)范围内线性关系良好,平均回收率分别为96.32%、96.45%、101.23%、97.89%,RSD分别为1.3%、1.5%、1.7%、1.7%.结论 该方法准确可靠,重复性好,可用于益胃消瘀颗粒的质量控制.
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三七及其主要皂苷组分在心血管疾病中的作用研究进展
血瘀是心血管疾病发生的主要病理因素.三七为活血化瘀代表药之一,其活性部位三七总皂苷的有效成分人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd及三七皂苷R1等对心血管疾病均有较好干预作用,为近年研究热点.本文综述三七及其主要皂苷组分在心血管疾病领域的研究进展,为临床防治、药物研发提供思路.
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RP-HPLC法测定复方产舒颗粒中人参皂苷Rb1的含量
目的 建立RP-HPLC测定复方产舒颗粒中人参皂苷Rb1含量的方法.方法 采用高效液相色谱仪,以Diamonsil 0DS-C18为色谱柱,乙腈-水(29∶71)为流动相,流速1.0 mL/min,检测波长203 nm,柱温25℃.结果 人参皂苷Rb1在0.7 76～7.760μg/mL的范围内呈良好线性关系,r=0.999 99,平均回收率为99.69%,RSD=2.04%(n=6).结论 本方法简便、准确、重复性好,可控制复方产舒颗粒的质量.
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HPLC法测定抗瘤丸中三七皂苷R1及人参皂苷Rg1、Rb1的含量
目的 建立以高效液相色谱法测定抗瘤九中三七皂苷R1.人参皂苷Rg11、人参皂苷Rb1含量的方法.方法 色谱柱为Kromasil C18柱(4.6mm×150mm,5μm),使用梯度洗脱系统,流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液;流速为1.0 mL/min;检测波长为203 nm;进样量为10μL;柱温为30℃.结果 三七皂苷R1的线性范围为82.8～621 μg(r=0.9999),平均回收率为100.057%(RSD=0.399 6%):人参皂苷Rg1的线性范围为109.8～823.5μg(r=0.999 6),平均回收率为99.248%(RSD=1.004 6%);人参皂苷Rb1的线性范围为112.6-844.5μg(r=0.999 9),平均回收率为99.812%(RSD=1.474 4%).结论 本方法操作简便、准确,重复性好,可用于抗瘤丸中三七皂苷R1及人参皂苷Rg1、Rb1的含量测定.
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生脉拆方系列注射液的制备及质量标准研究
目的 对生脉注射液不同拆方配伍制备的注射液进行制备工艺及质量标准研究,为生脉注射液在体药物配伍关系研究提供物质基础及质量保证.方法 参照生脉注射液制备方法 ,规范了7种注射液的制备工艺,并采用HPLC及TLC法分别对系列注射液人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、五味子醇甲及麦冬药材进行定量或定性分析.结果 人参皂苷Rg1、人参皂苷Re在0.942 4～9.424 μg与0.624～6.24μg范围内,进样量与峰面积呈良好的线性关系(r1=0.999 5、r2=0.999 7),平均回收率为97.0%～100.4%,RSD为0.45%～3.44%.TLC检出人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、五味子醇甲成分及麦冬对照药材主斑点.结论 本试验确定的制备工艺稳定,质量控制方法 便捷,结果准确可靠、重现性好,可为生脉注射液在体药物配伍关系研究提供试验基础与保证.
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RP-HPLC法测定脑脉通颗粒中人参皂苷的含量
目的 建立脑脉通颗粒中人参皂苷的含量测定方法 .方法 采用Hypersil ODS C18色谱柱(200 mm×4.6 mm, 5 μm),流动相为乙腈-水梯度洗脱,流速:1.0 mL/min,检测波长:203 nm.结果 人参皂苷Rg1平均回收率为 100.71%,RSD=2.27%;Re为100.14%,RSD=1.88%;Rb1为100.94%,RSD=1.95%.结论 所建立的方法 简便、准确,可作为脑脉通颗粒的质量控制方法 .
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高效液相色谱法测定脑得生胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1及人参皂苷Rb1的含量
目的建立高效液相色谱梯度洗脱法测定脑得生胶囊中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1及人参皂苷Rb1含量的方法.方法采用色谱柱Kromasil C18;以流动相A(乙腈)与流动相B(水)进行梯度洗脱;柱温:25℃.结果三七皂苷R1在0.495～1.782 μg(r=0.9999)、人参皂苷Rg1在2.65～9.54μg(r=0.9995)、人参皂苷Rb1在1.85～6.66μg(r=0.9999)范围内呈良好线性关系.加样回收率三七皂苷R1为100.60%(RSD=1.99%),人参皂苷Rg1为100.86%(RSD=2.19%),人参皂苷Rb1为98.8 3%(RSD=1.95%).结论本法简便、准确、灵敏度高、重现性好,可用于该制剂的含量测定.
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丹龙抗痴胶囊提取工艺研究
目的 研究丹龙抗痴胶囊提取工艺,以控制其质量,充分提取有效成分,以确保在临床上有效地发挥其治疗作用,保证临床疗效.方法 以丹参酮ⅡA、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1,以及淫羊藿苷的提取量及浸膏得率为评价指标,采用单因素试验及正交试验对丹龙抗痴胶囊的醇提取及水提取的工艺参数进行优选.结果 丹参、远志、三七药材,以75%乙醇为溶媒,回流提取2次,加醇量分别为8、6倍,提取时间分别为1.5、1.0 h;醇提后药渣再与淫羊藿等药材浸泡0.5 h,提取2次,加水量分别为12、10倍量,提取时间分别为2.0、1.5 h.结论 对提取工艺进行验证,工艺稳定可行.
