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抗瘤丸对神经胶质瘤细胞抑制作用的实验研究
目的 考察中药抗瘤丸对神经胶质瘤细胞的抑制作用.方法 采用MTT法在不同时间(24、48、72 h)检测系列浓度(0.5、1.O、1.5、2.0、2.5 mg·mL-1)抗瘤丸对人神经胶质瘤细胞U87-MG和大鼠神经胶质瘤细胞C6的抑制作用,同时分别进行空白对照比较.结果 抗瘤丸与空白相比能降低两种胶质瘤细胞的增殖率,且对细胞增值的影响与给药浓度及时间成正相关.在72h药物浓度2.5 mg·mL-1时,人胶质瘤细胞U87-MG和大鼠胶质瘤细胞C6的细胞增值率均低,分别为66%、60%.结论 中药抗瘤丸对大鼠胶质瘤细胞C6和人胶质瘤细胞U87-MG的增殖有抑制作用,其机理与抑制瘤细胞的增值有关.
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中药复方抗瘤丸治疗神经胶质瘤作用机制的实验研究
目的 探讨中药复方抗瘤丸(KLW)治疗神经胶质瘤的作用机制.方法 制备入神经胶质瘤U87细胞BALB/c裸鼠移植瘤模型,按瘤块体积和体重分层随机法分为:模型组,替莫唑胺(TMZ)组,KLW高、中、低剂量组,每组12只,连续给药20天.检测各组裸鼠体重、瘤块体积、瘤块重量、微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF).结果 与模型组比较,KLW高、中剂量组及TMZ组瘤重量显著减少(P＜0.05);KLW中、低剂量组及TMZ组移植瘤的MVD明显降低(P＜0.05);KLW高、中、低剂量组及TMZ组移植瘤VEGF表达水平明显降低(P＜0.05).结论 KLW治疗胶质瘤的作用机制可能与降低MVD、抑制VEGF表达相关.
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中药复方抗瘤丸优化方对U87裸鼠移植瘤动物模型作用机制研究
目的 探讨中药复方抗瘤丸优化方(KLW-4)治疗神经胶质瘤的作用机制.方法 建立BALB/c裸小鼠U87移植瘤动物模型,并将造模后的动物随机分为五组:模型对照组、替莫唑胺组(阳性药对照组)、抗瘤丸优化方高剂量组、中剂量组、低剂量,每组12只.连续给药20天后,通过观察给药后裸鼠一般情况,以及药物对裸鼠胶质瘤体积变化的影响等药效学指标,并运用Western Blot法检测与凋亡相关的Bax、Bcl-2蛋白的表达,进而评价抗瘤丸优化方治疗神经胶质瘤的作用机制.结果 与模型对照组比较,给药4天后,所有给药组肿瘤体积均显著降低;给药8天后,中剂量组和阳性药对照组肿瘤体积显著降低,差异有统计学意义(P<0. 05);给药12天后,所有给药组肿瘤体积显著减小;给药16天后,高、中剂量组,阳性药对照组肿瘤体积显著降低;给药20天后,高、中剂量组,阳性药对照组肿瘤体积显著降低.与模型对照组比较,所有给药组均都能明显下调Bcl-2的表达,阳性药对照组能显著上调Bax的表达,各给药组Bcl-2/Bax的比例减小,差异有统计学意义(P<0. 05).结论 抗瘤丸优化方对U87裸鼠移植瘤动物模型有良好的治疗作用,可减少肿瘤体积.同时,抗瘤丸优化方治疗胶质瘤的可能与促进细胞凋亡有关.
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抗瘤丸的质量标准研究
目的 建立抗瘤丸系统的质量标准,以提高其质量. 方法 分别采用薄层色谱法对院内制剂抗瘤丸中三七、土茯苓、沉香、制何首乌及显微鉴别法对炒山楂进行定性鉴别;并用高效液相色谱法对制剂中的三七、土茯苓进行含量测定. 结果 薄层色谱斑点清晰,阴性对照无干扰;三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、落新妇苷分别在0.3331~5.3302 μg(r=0.9999)、0.7857~12.5709 μg(r=0.9999)、0.1478~2.3654 μg(r=1.0000)范围内呈良好的线性关系,平均回收率分别为98.70%、99.08%、98.76%. 结论 该法灵敏、简便、准确和重复性好,可作为抗瘤丸的质量控制标准.
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优化治疗神经胶质瘤复方抗瘤丸的实验研究
目的：通过实验研究，优化治疗神经胶质瘤中药复方抗瘤丸（KLW）的组成，得出佳处方配伍。方法：采用大鼠神经胶质瘤 C6细胞 BALB／c 裸鼠移植瘤模型，将模型裸鼠按瘤块体积随机分为10组（模型组，阳性药对照组（替莫唑胺TMZ 组），KLW-1、KLW-2、KLW-3、KLW-4高、低剂量组，每组7只裸鼠。）连续给药15 d，检测各组裸鼠体重、瘤块体积、瘤块重量、微血管密度（MVD）、血管内皮生长因子（VEGF）、凋亡细胞、Bcl-2，Bax 蛋白表达水平。结果：与模型组比较，KLW-1高、低剂量组，KLW-2、KLW-4高剂量组，TMZ 组瘤体积显著减小（P ＜0.05）；KLW-4高剂量组，TMZ 组移植瘤的 MVD 值明显降低（P ＜0.05）；KLW-2、KLW-4高剂量组，TMZ 组移植瘤 VEGF 灰度值明显增高（P ＜0.05）；KLW-1、KLW-2、KLW-4高剂量组，TMZ 组细胞凋亡率显著增高（P ＜0.05）；各给药组 Bcl-2／Bax 的比例增加。结论：处方 KLW-1高、低剂量组， KLW-2、KLW-4高剂量组对 C6移植瘤的生长具有较好的抑制作用。
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中药医院制剂活血益气方对裸鼠抑瘤作用及小鼠急性毒性的实验研究
目的:测试首都医科大学宣武医院药剂科制剂活血益气方抗瘤丸的抑瘤作用及对小鼠的急性毒性.方法:将足够量的大鼠神经胶质瘤C6细胞注射至裸鼠右侧腋窝,建立裸鼠荷瘤模型,按瘤块体积随机分组,分别灌胃给予KLW的高、低剂量组,以替莫唑胺为阳性对照,以溶媒为阴性对照,期间测量裸鼠体重、瘤体积并观察给药前后动物症状;连续给药15d后,处死全部小鼠,称量裸鼠瘤重量;剥离瘤块,采用Western Blot法检测肿瘤组织Bcl-2,Bax蛋白.选用ICR(Institute of Cancer Research,ICR)小鼠1d内2次灌胃给药KLW,肉眼观察给药前、每次给药后连续4h及14 d内小鼠的一般情况,中毒反应及死亡情况,结束观察后解剖,肉眼观察各组织脏器的变化.结果:裸鼠给药期间全部存活,体重正常增长,一般行为学观察未见明显异常.给药15 d后,KLW低、高剂量组,瘤体积、瘤重量较模型对照组显著减小;Bcl-2/Bax的比例较模型对照组显著增加.急性毒性试验中所有给药组小鼠在观察期内全部存活,一般行为学观察未见明显异常.供试品组2个性别的小鼠体重与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).剖检各组小鼠,肉眼观察各组织脏器未见病理改变.结论:KLW低、高剂量组对C6细胞移植瘤的生长具有明显的抑制作用,该作用与诱导胶质瘤细胞凋亡相关,与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P＞0.05).KLW小鼠灌胃40 mL/kg BW,大给药浓度(0.50 g/mL),相当于临床人用剂量的107倍,未见明显毒性反应,使用安全性高.
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医疗机构制剂活血益气方抗瘤丸基于裸鼠荷瘤模型的工艺筛选
目的:筛选医疗机构制剂活血益气方抗瘤丸(简称KLW)的制备工艺.方法:将足够量的大鼠神经胶质瘤C6细胞注射至裸鼠右侧腋窝,建立裸鼠荷瘤模型,按瘤块体积随机分组,分别灌胃给予等量的不同工艺KLW1～4,以替莫唑胺为阳性对照,以溶媒(去离子水)为模型对照,测量裸鼠体重、瘤体积,并观察给药前后小鼠症状;连续给药15 d后,处死,称量裸鼠瘤重量.结果:KLW-1中、高剂量组裸鼠瘤块重量,KLW-1高剂量组瘤体积,均低于模型对照组,差异有统计学意义(P<0.05),阳性对照组瘤块重量及瘤体积均低于模型对照组,差异有统计学意义(P<0.01).其他处方组裸鼠瘤块重量、体积与模型对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).各待测组(KLW-1～4高、中、低剂量组)裸鼠体重与模型对照组比较,差异均无统计学意义(均P>0.05),阳性对照组给药后裸鼠体重明显低于模型对照组,差异有统计学意义(P<0.01).各组有少量裸鼠死亡.结论:抗瘤丸在荷瘤裸鼠模型中具有一定抑瘤效果,与待测工艺比较,原制剂工艺抑瘤效果较好,成本低廉,适用于大规模现代化生产.
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HPLC法测定抗瘤丸中三七皂苷R1及人参皂苷Rg1、Rb1的含量
目的 建立以高效液相色谱法测定抗瘤九中三七皂苷R1.人参皂苷Rg11、人参皂苷Rb1含量的方法.方法 色谱柱为Kromasil C18柱(4.6mm×150mm,5μm),使用梯度洗脱系统,流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液;流速为1.0 mL/min;检测波长为203 nm;进样量为10μL;柱温为30℃.结果 三七皂苷R1的线性范围为82.8～621 μg(r=0.9999),平均回收率为100.057%(RSD=0.399 6%):人参皂苷Rg1的线性范围为109.8～823.5μg(r=0.999 6),平均回收率为99.248%(RSD=1.004 6%);人参皂苷Rb1的线性范围为112.6-844.5μg(r=0.999 9),平均回收率为99.812%(RSD=1.474 4%).结论 本方法操作简便、准确,重复性好,可用于抗瘤丸中三七皂苷R1及人参皂苷Rg1、Rb1的含量测定.
