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液态生物芯片技术及其应用
目前,在核酸和蛋白质研究领域出现了一种全新的、称之为悬浮式点阵(suspension array)的检测手段和技术,该技术在很大程度上依赖近在光电转换和数字信号处理的进步,通过一束激光识别高分子(如聚苯乙烯)微球所产生的特异性荧光,另一束激光识别微球表面发生生物学反应后所产生的荧光信号,荧光编码不同的微球来实现检测指标的分类,进而实现高通量生物样品的分析;而通过生物学反应所产生的荧光信号可以实现分析的特异性.目前,这种基于荧光编码微球的高通量分析技术可提供快速、敏感、对一个样品进行至多可达100个分析指标的检测.分析荧光微球的速度高可达5000个/秒.应用时,把对应不同检测物的乳胶颗粒混合后再加入微量样品,在悬液中与微球进行特异性结合.结合的结果可以在瞬间经激光判定后由电脑数据信息的形式记录下来.因为分子杂交是在悬浮溶液中进行,检测速度快,所以又有"液态生物芯片"之称.
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碳粉琼脂固溶体伏安法测定饮料中抗坏血酸
测定抗坏血酸的方法有碘量法[1]、荧光法[2]、伏安法[3]、化学发光法[4~8],但是由于伏安法灵敏度较低,对于微量组分难以准确测定;同时抗坏血酸具有较低的氧化电位,因而十分方便地用于研究各种电极的电化学性质,各种电极一般都是在溶液中进行的测定,常规分析需要大量的样品才能满足分析.由于溶液与电极接触的面积小,电流响应低,因而灵敏度不高.本文用碳粉掺入琼脂固溶体电解质中,大大地提高了分析灵敏度.由于样品只需0.05 ml,滴于表面,可以适用于微量样品的测定.
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一种检测弓形虫抗体的快速ELIB技术
酶联免疫印迹技术(ELIB)作为一项新的免疫学技术,因其高分辨率、高灵敏度及高特异性等优点,广泛应用于寄生虫抗原的分析、纯化和鉴定等.但由于ELIB技术是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白转印以及固相免疫标记等3项技术结合而成,操作时间较长,因而未能成为常规的免疫诊断方法.我们在检测弓形虫抗体时,引进PhastSystem全自动水平电泳系统,该系统电泳凝胶厚度薄(<0.5mm),易冷却,且电场强度高,具有快速和高分辨率等特点,再加上半干式电转移配置,使得SDS-PAGE及电转印的时间均大为减少,仅需30min,全过程也不到5h;只需微量样品,可检出弓形虫IgG和IgM两种抗体.在诊断弓形病中具有应用价值.现介绍如下.
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半微量样品恒温消解催化波法测定乳粉中微量铬
铬是人体必需的微量元素,具有促进蛋白质代谢和生长发育、预防动脉粥样硬化以及加强胰岛素的作用[1].研究表明,糖尿病人铬明显减低,且与病情加重伴并发症呈负相关,铬水平与血糖呈负相关[2].糖尿病患者增加铬营养可降低对胰岛素或口服降糖药物的需要量,也可改善血脂水平,包括总胆固醇、甘油三脂和高密度脂蛋白水平[3].
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氟离子选择电极的影响因素及对策
氟离子选择电极法具有简便、快速、测定范围广(0.02~2000)PPm),不需分离溶液中大量干扰离子,广泛用于各类样品的测定.氟离子选择电极是成熟的离子选择电极之一,它是用氟化镧单晶膜制成的一种膜电极,自1996年问世以来,经过不断改进,相继研制成的一种膜电极、全固态离子电极、倒置平板式氟电极、复合电极等,对测定微量样品氟含量可获得满意效果.[1,2]为了减少测定误差,提高测量精确度,使分析结果更加准确可靠,本文就氟离子选择电极法测试的主要影响因素及对策进行归纳和总结.
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汽巴康宁560生化分析仪特殊故障的排除
康宁560全自动生化分析仪各种性能良好,结果重复性好;并且在仪器故障时,仪器自动给出确切的提示,所以操作起来方便、直观.但是,笔者在工作中遇到一例提示与实际情况不尽相符的情况,现报道如下.1 故障汽巴康宁560全自动生化分析仪总提示:"Waste pump failuer",按F2:"System Details"屏幕显示:"Excess water in wash station".2 本故障常规排除法的参考因素①废液瓶中废液已满;②液面传感器是否清洁;③传感器与采样针间距离适不适当(2.5 mm),有没有水珠或液泡悬挂;④探针安装是否正确(传感器在采样针之后2.5 mm);⑤废液管状况如何、安装是否正确、连接是否紧密.废液泵运转及泵管弹力情况.对上述5条因素逐一排查.如①~③条有误,处理后按Start键再试,如仍然不行,检查④~⑤所示,确定①~⑤所述一切良好后重新标定探针.3 进一步检查原因笔者对上述因素逐一排查,重新标定探针后,问题仍未解决.经过仔细思考,反复的观察,发现探针的竖直位置错位,探针在一插入冲洗台时,传感器和采样针就同时与冲洗台壁相擦,造成短路,传入与液面接触的错误信息,使仪器出现冲洗台水量过多的错误判断而无法正常运行.4 特殊的解决办法重新调校探针的竖直位置.在主菜单上按F8,屏幕上出现三条信息,光标移至第二条按Select键,输入密码(公司提供),按回车,屏幕显示F1-F6.按F1:Machine Calibrations,屏幕显示F1-F5.再按F:Probe/Transport calibibrate,屏幕显示调校前需要准备的工作.一切按提示准备完毕后盖好试剂盘盖和样品盘盖,按F2开始调校.仪器先调校冲洗台位置,用上下左右键把探针调到冲洗台中心位置,按Select键保存并自动进行试剂盘调校,同样先调探针在试剂盘上的上下左右位置,然后用F1:step right向右,F2:step left向左,F3:Reverse calid(反向调校)调整试剂瓶口与试剂盘孔对齐,调整好后用Select键保存并自动进行下一步标本盘的调校,步骤同上,然后是装微量样品管时探针位置的调校.后探针自动回到初始位置,屏幕上显示有F1:Accept,按此键仪器接受并储存所调校数据,打印机将打印新调校的数据单.5 结果经过上述第4步骤的调校后,故障得以排除,生化仪能够顺利的正常运行.
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基因芯片及其医学应用研究进展
基因芯片(Gene chip),又称DNA芯片、DNA微阵列(DNA microarray),是将大量的DNA片段按预先设计的排列方式固化在载体表面如硅片、玻片,并以此为探针,在一定的条件下,与样品中待测的靶基因片段杂交,通过检测杂交后的信号,实现对靶基因信息的快速检测.基因芯片可以分为很多种类,常见并广泛应用的有cDNA微点阵和寡核苷酸原位合成.基因芯片能对微量样品中的核酸序列进行检测和分析,其高通量、快速、并行化采集生物信息的特点更是优于其他传统的技术方法.基因芯片技术以一种系统、整体的方法进行研究,打破了"一种疾病、一种基因"的陈旧模式,整体宏观的研究生物体基因的表达及功能.目前,基因芯片技术的应用领域主要有:基因表达谱分析、新基因的发现、基因突变及多态性分析、基因组文库作图、疾病诊断和分型、药物筛选、基因测序等.
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应用微量样品测量血糖初探
常规急诊血糖测定的方法是采取静脉血样,待其凝固后,离心分离血清后检测,对于门诊病人,此法既耗时,又因静脉血样较多,更不便于污物处理.
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光纤传感微量样品抗羟自由基检测方法的建立及其应用
目的:建立微量样品羟自由基(·OH)的检测方法,并用于新疆葡萄树伤流液及金银花茶、罗布麻茶、茉莉茶、竹叶茶等样品的检测.方法:采用Mn2+-H2O2-EBT法,检测波长为560 nm,在2 mL的比色皿中,取缓冲溶液(NaB4O7-NaOH) 300μL,EBT 120 μL,Mn2+ 300 μL,H2O2150μL,将体系体积用水补充至2.0 mL. Mn2+-H2O2-EBT法可作为检测抗氧化物质抗氧化活性的有效可行方法之一,为验证该方法对微量样品抗羟自由基(·OH)活性实时检测的可行性,以抗坏血酸对照.结果:实验结果表明,新疆葡萄树伤流液、金银花茶、罗布麻茶、茉莉茶和竹叶茶均具有较强的清除羟自由基(·OH)的生物活性功能,是一种很好的天然抗氧化及自由基清除剂.结论:微量样品抗羟自由基检测方法可行,实现吸光度测定的同时,对少量样品进行实时、恒温及震荡在线检测,连续观察吸光度的变化.