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魟鱼软骨多糖对Lewis肺癌MMP-9表达的影响
目的:魟鱼软骨多糖(RCG)对Lewis肺癌基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响.方法:建立小鼠Lewis肺癌模型,将动物分为生理盐水组、不同剂量魟鱼软骨多糖组、环磷酰胺组,观察肿瘤生长情况,绘制肿瘤生长曲线,计算原发瘤抑制率;采用RT-PCR和Western blot检测瘤组织MMP-9基因和蛋白表达.结果:该多糖各剂量组小鼠的肿瘤生长曲线平缓,小鼠原发瘤抑制率、肺转移数与生理盐水组比较差异有显著性(P＜0.05;P＜0.01);与生理盐水比较,魟鱼软骨多糖各剂量组,MMP-9 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P＜0.01).结论:魟鱼软骨多糖明显抑制小鼠Lewis肺癌原发瘤的生长和转移,可能与其抑制肿瘤MMP-9基因和蛋白表达有关.
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猫眼草水提物对小鼠Lewis肺癌的抑制作用及机制探讨
目的:探讨中药猫眼草对小鼠Lewis肺癌的生长抑制、免疫调节、血液系统、细胞周期的影响,并对其抗癌作用机制进行探讨.方法:选择C57BL/6小鼠移植性Lewis肺癌为实验模型进行试验,观察猫眼草对肺癌的抑制、免疫调节以及对小鼠血细胞的影响,同时采用流式细胞仪检测瘤组织的细胞周期、凋亡率,应用TUNEL法观察猫眼草对肺癌细胞凋亡的影响.结果:①猫眼草7.5,15,30,60g·kg-1组抑瘤率分别为0.61%,16.93%,32.81%和58.26%,与模型组相比30,60g·kg-1组有显著性差异(P＜0.05).②猫眼草各组对荷瘤小鼠胸腺指数无明显影响,60g·kg-1组可显著降低荷瘤小鼠脾指数(P＜0.05).③猫眼草各组对荷瘤小鼠血液系统无影响.④流式细胞仪检测猫眼草30,60g·kg-1组可使Lewis肺癌组织肿瘤细胞S期细胞比例增高,凋亡率分别为(16.43±18.69)%,(24.37±15.48)%,与模型组相比有显著性差异(P＜0.05).⑤TUNEL法测定猫眼草30,60g·kg-1组的凋亡指数(AI)分别为(4.00±7.15)%,(5.93±5.96)%;60 g·kg-1与模型组相比有显著性差异,有明显诱导细胞凋亡的作用(P＜0.01).结论:猫眼草可抑制Lewis肺癌生长,对小鼠血液系统无明显毒副作用,其抗肿瘤作用与诱导细胞凋亡有关.
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扶正散结方调控Lewis肺癌小鼠TAMs免疫重塑作用的相关研究
目的:探讨扶正散结方对Lewis肺癌小鼠肿瘤相关巨噬细胞有关细胞因子的调控作用.方法:建立Lewis肺癌小鼠模型,称瘤重,算抑瘤率;应用免疫组化法检测各组肿瘤组织中CD68+浸润程度;采用ELISA法测定小鼠血清中IFN-γ,TGF-β,IL-4,IL-13,IL-6,IL-10,IL-12,TNF-α的含量.结果:与荷瘤模型组相比,其他各组均较高,分别为DDP组(50.28％)、中药预防组(34.37％)、中西结合组(66.76％),差异具有统计学意义(P＜0.05).CD68+浸润程度差异不具统计学意义.各组荷瘤小鼠血清中IFN-γ,IL-6,IL-12含量均较空白对照组低,而IL-4,IL-13,TGF-β含量均较空白对照组高,且在不同药物干预下,部分相关细胞因子含量具有显著性差异(P＜0.05),中药预防组、中西医结合组与荷瘤对照组差异亦具有统计学意义(P＜0.05),而TNF-α,IL-10含量,与荷瘤对照组比较,不具统计学意义.结论:扶正散结方可以通过下调肺癌免疫微环境中IL-4,IL-13,TGF-β等,上调IFN-γ等细胞因子,从而逆转TAMs的免疫重塑作用,控制肿瘤生长.
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牵牛子酒提取物对Lewis肺癌的抗肿瘤和抗转移机制研究
目的:观察牵牛子酒提取物对Lewis肺癌生长和转移的影响,研究其抗肿瘤机制.方法:体外采用MTT法和划痕实验检测牵牛子酒提取物对Lewis肺癌细胞生长和迁移的影响,吖啶橙染色检测细胞自噬,荧光黄传输检测细胞间连接通讯,Western blotting检测细胞中水通道蛋白1(AQP1)的表达.体内建立小鼠Lewis肺癌皮下移植模型和实验性肺转移模型评价牵牛子酒提取物的抗肿瘤和抗转移作用,电化学发光法检测荷瘤小鼠血清癌胚抗原(CEA)和β2微球蛋白(β2-MG),免疫组化法检测肺转移小鼠肺脏AQP1和缝隙连接蛋白Cx43表达.结果:牵牛子酒提取物对体外培养的Lewis肺癌细胞呈剂量依赖性生长抑制,明显阻止细胞迁移,降低细胞AQP1蛋白,促进细胞间连接通讯,减少癌细胞无血清自噬.体内实验,与未治疗的模型小鼠比较,牵牛子酒提取物呈剂量依赖性减缓肿瘤生长、阻止肿瘤转移、延长荷瘤小鼠存活时间,同时,牵牛子酒提取物也降低荷瘤小鼠血清CEA和β2-MG水平,能增强荷瘤肺组织间隙连接蛋白Cx43的免疫组化染色深度,减弱水通道蛋白AQP1的阳性染色密度.结论:牵牛子酒提取物能够阻止Lewis肺癌生长和转移,其机制可能与增强细胞间连接通讯和下调细胞水通道AQP1有关.
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肺岩宁方组分对小鼠肿瘤血管生成与MMP-2、 MMP-9关系的研究
目的 观察中药肺岩宁方组分对C57BL/6小鼠Lewis肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD)与基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、MMP-9 mRNA及蛋白表达的影响.方法 建立C57BL/6小鼠Lewis肺癌模型,随机分为模型组、肺岩宁组、益气组、补肾组和抗癌组.灌胃21天,第22天处死,取肿瘤组织,链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法（SP法）检测C57BL/6小鼠Lewis肿瘤MVD,逆转录聚合酶链反应（reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR）法和SP法检测MMP-2、MMP-9 mRNA及蛋白表达水平.结果 肺岩宁组、补肾组、抗癌组小鼠肿瘤MVD均较模型组和益气组显著降低(P＜0.01,P＜0.05),而益气组与模型组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).肺岩宁及其拆方的各组MMP-2 mRNA和蛋白（除益气组外）表达显著低于模型组(P ＜0.05,P＜0.01),补肾组、抗癌组肿瘤MMP-2 mRNA表达也显著低于益气组(P＜0.05)；肺岩宁组、补肾组、抗癌组的小鼠肿瘤MMP-9 mRNA和蛋白表达均显著低于模型组和益气组(P＜0.05,P＜0.01).结论 补肾、抗癌中药抑制肿瘤血管生成的靶点可能与抑制MMP-2、MMP-9表达、保护肿瘤微环境有关.
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蝎毒多肽提取物促进环磷酰胺抑制Lewis肺癌的作用机制研究
目的 探讨蝎毒多肽提取物增强环磷酰胺抗肿瘤的机制.方法 建立小鼠Lewis肺癌皮下荷瘤模型,随机分为荷瘤对照组(模型组)、环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)组、蝎毒多肽提取物(polypeptide extract from scorpion venom,PESV)组和联合组(CTX+ PESV组),每组10只.记录肿瘤生长曲线,并采用逆转录PCR法和免疫组织化学法检测肿瘤微环境中免疫抑制因子血管内皮生长因子-A(VEGF-A)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达变化,采用免疫荧光化学法检测肿瘤组织中树突细胞( dendritic cells,DCs)表型CD80、CD86的表达变化.结果 连续治疗21天后,联合组Lewis肺癌移植瘤的生长明显抑制(P＜0.05)；与模型组相比较,PESV组中CD80、CD86的表达有所增强,而CTX组中CD80、CD86的表达有所下降,联合组与CTX组相比强度和表达量均有所增加；与模型组比较PESV组和CTX组TGF-β1和VEGF-A mRNA表达量均降低(均P ＜0.05)；与PESV组和CTX组比较,联合组TGF-β1和VEGF-A的mRNA表达量均降低(P＜0.05).结论 PESV可抑制Lewis肺癌中VEGF-A和TGF-β1的表达,促进DC的成熟,恢复其抗原摄取提呈功能,逆转CTX对机体的免疫损伤,从而起到诱导肿瘤细胞凋亡的作用.
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益肺清化颗粒对Lewis肺癌小鼠VEGF、bFGF、Angiostatin、Endostatin影响的研究
目的 观察中药益肺清化颗粒对Lewis肺癌小鼠瘤组织中的血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、血管抑素(Angiostatin)、内皮抑素(Endostatin)的影响,探讨益肺清化颗粒的抑瘤机制.方法 70只小鼠随机分为模型组,中药低、中、高剂量组,吉非替尼组,吉非替尼加中药中剂量组,以及环磷酰胺(CTX)组,每组10只.所有小鼠右腋皮下接种Lewis瘤细胞进行造模.模型组给予纯净水0.4 mL灌胃,每天1次;中药低、中剂量组分别给予益肺清化颗粒5、10 g/kg灌胃,每天1次;中药高剂量组给予益肺清化颗粒10 g/kg灌胃,每天2次;吉非替尼组给予吉非替尼100 mg/kg灌胃,每天1次;吉非替尼加中药中剂量组上午给予吉非替尼100 mg/kg灌胃,下午给予益肺清化颗粒10 g/kg灌胃.上述各组均从小鼠接种肿瘤细胞的第2天开始给药,连续14天.CTX组在实验第3、7天给予CTX 60 mg/kg腹腔注射.第15天处死小鼠,取瘤,免疫组化法检测肿瘤组织中VEGF、bFGF、Angiostatin、Endostatin的表达.结果 与模型组比较,各给药组VEGF表达均显著降低(P <0.01),Angiostatin、Endostatin表达显著增加(P <0.01),且吉非替尼组bFGF表达明显降低(P <0.05).各给药组间VEGF比较,差异无统计学意义(P >0.05).CTX组 Angiostatin表达显著高于中药低剂量组(P <0.01).中药高剂量组、吉非替尼加中药中剂量组Endostatin表达明显高于中药低、中剂量组(P <0.01);吉非替尼加中药中剂量组Endostatin表达明显高于吉非替尼组(P <0.05).结论 益肺清化颗粒可能通过降低血管生成促进因子VEGF的表达,升高血管生成抑制因子Angiostatin、Endostatin的表达,进而发挥抑瘤作用.
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肺岩宁颗粒干预细胞周期G_1/S检测点调控信号抗Lewis肺癌细胞增殖的研究
目的 观察肺岩宁颗粒对Lewis肺癌小鼠肿瘤生长、肿瘤细胞周期分布,以及G_1/S检测点调控信号RB-E2F1生物轴的影响.方法 采用C57BL/6小鼠,造模并随机分为6组:模型组、顺铂组、肺岩宁煎剂组(煎剂组)、肺岩宁颗粒低剂量组(低剂量组,0.3 g)、肺岩宁颗粒中剂量组(中剂量组,0.6 g)、肺岩宁颗粒高剂量组(高剂量组,1.2 g).造模后顺铂组1、3、5天腹腔注射顺铂0.1 mg,其他各组分别灌胃给药14天,观察各组治疗后抑瘤率、瘤重、体重,流式细胞术检测细胞周期时相分布,RT-PCR测定肿瘤组织视网膜母细胞瘤蛋白(RB)-腺病毒E2启动子结合转录因子(E2F1)的mRNA表达,Western blot检测RB、E2F1蛋白表达.结果 各用药组瘤重低于模型组(P<0.05,P<0.01),中剂量组体重明显高于模型组和顺铂组(P<0.05,P<0.01).流式细胞术发现中剂量组的G_0/G_1比例较模型组、顺铂组和煎剂组显著增多(P<0.01),癌细胞增殖指数明显降低(P<0.01,P<0.05).RT-PCR显示中剂量组E2F1 mRNA水平明显低于模型组、顺铂组和煎剂组(P<0.01);中剂量组RB mRNA表达明显高于模型组、顺铂组和煎剂组 (P<0.01).Western blot分析显示中剂量组较模型组和顺铂组明显抑制E2F1蛋白表达(P<0.05),并较模型组、顺铂组和煎剂组明显增加RB蛋白表达(P<0.05).结论 肺岩宁颗粒抑制Lewis肺癌肿瘤生长与干预细胞周期时相分布有关,能使癌细胞较多的阻滞在细胞周期G_0/G_1期,通过抑制E2F1,增强RB表达,从而干预细胞周期G_1/S检测点信号通路中RB-E2F1生物轴实现抗肺癌增殖.
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基因表达谱芯片对乌三颗粒抗Lewis肺癌相关靶基因的分析研究
目的:在基因组水平上探讨乌三颗粒抗肿瘤的分子生物学机制.方法:抽提经乌三颗粒治疗的Lewis肺癌组织和未经治疗的对照组瘤组织总RNA并纯化mRNA,分别逆转录并进行荧光标记,制作成cDNA探针,与小鼠MGEC-20S型基因芯片杂交,筛选出两组间差异表达基因.结果:两组间存在差异性表达基因45条,与对照组比较,中药组与恶性肿瘤浸润、转移相关的基因表达下调,与促进细胞凋亡的相关基因表达上调.结论:基因芯片技术能高通量分析中药乌三颗粒防治Lewis肺癌的相关靶基因,为进一步揭示中药抗肿瘤机制提供了新的思路和前沿性生物技术手段.
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黄芪多糖联合顺铂对小鼠Lewis肺癌移植瘤Caspase-3、Smac/Diablo表达的影响
目的 观察黄芪多糖(APS)及联合顺铂(DDP)对小鼠Lewis肺癌(LLC)移植瘤凋亡蛋白Caspase-3、Smac/Diablo表达的影响,探讨黄芪多糖抗肿瘤的机制.方法 90只C57BL/6 J小鼠,随机分为9组,正常组、模型组、APS低、中、高剂量组、DDP组、联合低、中、高剂量组,每组10只.除正常组外,其余80只均接种肺癌移植瘤细胞(1×1010/L)于右前肢腋窝皮下,制造模型为荷瘤小鼠.制造模型次日起,治疗组的小鼠给予腹腔注射0.3 ml药物.顺铂每周注射1次,其余药物每日1次,正常组和模型组注射等体积生理盐水,连续20 d,于第21天处死.肿瘤组织进行HE染色并行病理学观察;免疫组织化学染色和图像分析方法检测移植瘤细胞中的Caspase-3及Smac/Diablo的表达.结果 荷瘤小鼠在APS(高)、联合(中)、联合(高)组的体质量变化,具有统计学意义.与模型组小鼠比较,肿瘤组织的病理组织学HE显示,APS(高)联合顺铂组的肿瘤细胞坏死为明显;免疫组织化学法表明,治疗组的肿瘤组织中Caspase-3、Smac/Diablo蛋白表达水平均升高,联合(高)组升高明显.结论 APS及联合化疗药物DDP能抑制小鼠Lewis肺癌细胞的生长,其机制可能与升高Caspase-3、Smac/Diablo的表达有关.
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重组人血管内皮抑制素联合顺铂对Lewis肺癌小鼠肿瘤微环境的影响
目的 观察重组人血管内皮抑制素(恩度)联合顺铂治疗Lewis肺癌C57BL/6小鼠皮下移植瘤模型的治疗效应,进一步探讨恩度改善肿瘤微环境进而提高治疗效果的作用机制.方法 将Lewis肺癌荷瘤鼠分为4组,分别为生理盐水组(A组)、恩度组(B组)、顺铂组(C组)及联合组(恩度+顺铂D组),连续给药15 d.给药期间每日观察小鼠一般状态,测量肿瘤长短径,绘制肿瘤体积曲线,开始给药后第21天处死全部小鼠取出肿瘤组织,计算抑瘤率.常规固定,免疫组化检测缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、CD105的表达.结果 随给药时间延长,以A组小鼠的精神、饮食、活动、毛色等基本状况为标准,以C组差,D组好,B组介于A组与D组之间.各组小鼠肿瘤体积均呈增大趋势,以A组增大明显,A组>B组>C组>D组,抑瘤率差异均有统计学意义(P<0.05),以A组为0,D组高,B组高于C组.免疫组化结果显示HIF-1α、CD105呈正相关,差异有统计学意义(r=0.52,P<0.05).结论 恩度联合顺铂能有效控制小鼠肿瘤生长,恩度可改善肿瘤微环境,进而增敏顺铂的化疗作用.
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老年小鼠对Lewis肺癌敏感性及T细胞亚群差异观察
目的 探讨青年和老年小鼠对Lewis肺癌成瘤敏感性及其免疫微环境T细胞亚群的差异. 方法 青年(2月龄)与老年(12月龄)小鼠各6只,分别在左腋下注射1×106个Lewis细胞,观察青年与老年小鼠体重及肿瘤生长情况;24 d后取血进行血常规检测,用流式检测脾脏CD4+、CD8+T细胞比例以及肿瘤微环境中浸润CD4+、CD8+T细胞及相关效应T细胞比例. 结果 老年组体重明显高于青年组(P＜0.001),老年和青年小鼠的瘤重分别为(5.084±0.528)g和(2.963±0.378),差异具有统计学意义(t=3.349,P=0.012);血常规指标检测显示,老年组白细胞及亚群(除单核外)数量明显低于青年组(P＜0.05);流式结果显示,老年组脾脏的效应和记忆效应CD4+T细胞比例均明显高于青年组(P＜0.001);且肿瘤微环境的效应和记忆效应CD8+T细胞表达也均明显高于青年组(P＜0.05);CBA检测结果显示,老年组和青年组肿瘤微环境中IL-6、IL-10的相对平均荧光程度值分别(25 090±3 820,10 670±1 793)、(6 252±864,3 061±451),且老年组的表达明显低于青年组(f =3.925,P=0.01;t=3.552,P=0.02). 结论 青年小鼠Lewis肺癌的生长比老年小鼠更快,原因之一可能由于炎症与免疫系统的差异导致.
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芒果苷脂质体的制备及其在Lewis肺癌移植瘤中的抗肿瘤作用及临床意义
目的 探讨水溶性芒果苷脂质体对Lewis肺癌的治疗作用.方法 采用薄膜法制备芒果苷脂质体,并对其形态粒径进行表征.MTT法测定其对Lewis肺癌细胞的抗增殖作用;流式细胞术测定其对Lewis肺癌细胞凋亡作用的影响;建立小鼠Lewis肺癌移植瘤模型,检测芒果苷脂质体体内抗肿瘤效果并采用.TUNEL法原位测定其对凋亡的影响.结果 芒果苷脂质体为均匀的球状或近球状,平均粒径为(207.2±2)nm.MTT实验结果显示,芒果苷脂质体对Lewis肺癌细胞抑制作用显著高于游离芒果苷(P<0.05),与Lewis肺癌细胞作用12 h后芒果苷IC50为(45.2±5.1)μg/ml,芒果苷脂质体IC50为(32.7±4.6)μg/ml.作用24 h后,芒果苷IC50为(22.0±3.9)μg/ml,芒果苷脂质体IC50为14.8±2.7μg/ml.而芒果苷脂质体在体内动物实验中同样表现出抗肿瘤活力,结果显示通过小鼠尾静脉给药后,可显著抑制Lewis移植瘤在小鼠体内的生长并且与对照组相比可延长生存期超过3 d.同时,流式细胞术分析Lewis细胞凋亡实验及TUNEL法原位检测肿瘤组织细胞凋亡结果均显示芒果苷脂质体可以诱导Lewis肺癌细胞凋亡.结论 芒果苷脂质体可用于静脉注射改善芒果苷水溶性问题,同时提高其抗肿瘤效应.
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中药有效成分治疗Lewis肺癌的研究进展
肺癌是造成我国居民恶性肿瘤死亡的首要原因,寻找安全、有效的药物治疗肺癌是肿瘤治疗工作中的重要课题.采用中药治疗恶性肿瘤是我国治疗肿瘤的特色方式,具有安全、有效、多靶点、不良反应少等特点.成分明确的中药有效成分越来越受到人们关注,本文将对目前实验研究发现能够有效治疗Lewis肺癌的中药有效成分加以综述,旨在为基础研究及临床治疗工作提供参考.
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磁流体热疗对小鼠Lewis肺癌治疗作用的实验研究
目的 探讨磁流体热疗对小鼠Lewis肺癌的治疗作用.方法 将Lewis肺癌的细胞悬液接种于C57/BL6小鼠的皮下,当肿瘤长至直径(0.8±0.1)cm时,将20 mg磁流体直接注射到肿瘤内部,24 h后在交变磁场下加温(46.0℃,30min),观察磁流体热疗后肿瘤体积的变化、瘤体的病理变化,对肿瘤生长及小鼠生存期的影响.结果 加温治疗后14天,实验组肿瘤体积抑制率达81.6%,与对照组比较,瘤体的增长受到明显的抑制(P＜0.05),其中有4只小鼠的瘤体完全消失;肿瘤没有消失小鼠存活(37.1±8.6)d,瘤体消失的小鼠存活超过90 d,与对照组比较生存期明显延长(P＜0.01);组织学检查肿瘤细胞呈凋亡、坏死样改变.结论 磁流体热疗能有效抑制小鼠Lewis肺癌的生长,延长生存期,为磁流体热疗进一步研究提供实验依据.
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rh-Endostatin与肿瘤血管正常化时相的关系初探
目的 肿瘤血管生成和抗肿瘤血管药物均存在一定的时间窗,在该时间窗内,肿瘤新生血管形态结构趋于正常,抗肿瘤效果佳.因此本研究评估重组人血管内皮抑素(rh-Endostatin,rh-ES)对小鼠Lewis肺癌(Lewis lung carcinoma,LLC)皮下移植瘤模型肿瘤微血管正常化的佳时间及其分子机制.方法 将40只LLC移植瘤模型小鼠随机分成NS组和rh-ES组,每组各20只.NS组小鼠腹腔注射生理盐水(0.2 mL/d);rh-ES组小鼠腹腔注射rh-ES[5mg/(kg·d)].每组分别于治疗后的第2、4、6、9天处死5只小鼠留取标本.测量小鼠肿瘤体积变化,绘制肿瘤生长曲线.同时,ELISA方法检测肿瘤血管重构相关指标,G蛋白调节信号5(regulator of G-protein signaling 5,RGS5)、免疫组化检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和微血管密度(microvessel density,MVD).结果 成功建立C57/BL6小鼠移植瘤模型,成瘤率为100％.rh-ES组第4和6天的肿瘤体积分别是(0.81±0.1)cm3和(1.54±0.4) cm3,NS组第4和6天的肿瘤体积分别是(1.71±0.2)cm3和(2.86±0.4) cm3,差异有统计学意义,P值分别是0.04和0.03.ELISA结果显示,rh-ES组肿瘤组织中RGS5的表达在治疗第4和6天分别是(4.02±0.68) ng/mL和(2.98±0.46)ng/mL,与NS组比较明显降低,P值分别是0.01和0.02.免疫组化结果表明,NS组第4和6天VEGF在肿瘤组织表达率分别为(44.10±4.14)％和(45.13±4.28)％,rh-ES组分别为(27.16±3.68)％和(25.08±3.08)％(n=5),rh-ES组VEGF表达率明显减少,P值分别是0.03和0.02.NS组第4和6天MVD分别为25.10±5.28和25.68±5.64,rh-ES组MVD分别为15.50±3.12和8.36±2.04,rh-ES组明显减少,P值分别是0.04和0.03.结论 rh-ES作用于Lewis肺癌后第4和6天可作为血管正常化时间窗,可能与VEGF和MVD相关.
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人参皂苷Rg3联合苏拉明对小鼠肺癌生长影响及其机制的探讨
目的:探讨人参皂苷Rg3联合苏拉明对小鼠Lewis肺癌移植瘤的抑瘤作用及机制.方法:建立Lewis肺癌小鼠模型后,分为对照组、顺铂组、人参皂苷Rg3组、苏拉明组、人参皂苷Rg3+苏拉明联合组,药物干预16 d后,剥离移植瘤,称瘤质量,计算抑瘤率；免疫组化法测定各组移植瘤CD34的表达即肿瘤微血管密度(MVD)测定；逆转录PCR法测移植瘤MEK1/2和ERK1/2的mRNA;蛋白质印迹法测MEK1/2、ERK1/2及p-ERK1/2(磷酸化ERK1/2)蛋白的表达.结果:顺铂组、人参皂苷Rg3组、苏拉明组和人参皂苷Rg3+苏拉明联合组抑瘤率分别为19.7％、35.4％、35.9％和49.4％；对照组和药物干预组MVD计数分别为24.06±2.40、19.41±1.98、13.06±1.92、12.09士1.49和6.16±1.17,各药物干预组MVD较对照组低,差异有统计学意义,P＜0.01.备组ERK1/2mRNA相对量分别为(71.93±13.47)％、(56.43±11.01)％、(45.27±8.82)％、(43.29±7.48)％和(28.75±5.41)％,ERK1/2蛋白相对量分别为(104.18±9.78)％、(84.61±7.66)％、(76.71±7.25)％、(74.01±7.41)％和(51.69±5.29)％,p-ERK1/2蛋白相对量分别为(112.96±9.49)％、(87.86士6.77)％、(61.26±8.48)％、(38.60±10.66)％和(9.57±3.42)％,ERK1/2、p-ERK1/2在各药物干预组的mRNA及蛋白的表达均低于对照组,且联合组降低明显,差异有统计学意义,P＜0.01.结论:人参皂苷Rg3、苏拉明具有抑制小鼠Lewis肺癌生长的作用,且两药联用作用更明显,其机制可能与抑制细胞外信号激酶通路及血管生成有关.
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靶向HRP/IAA自杀基因系统联合IL-12基因治疗Lewis肺癌的研究
目的:观察人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子驱动辣根过氧化物酶(HRP)/吲哚乙酸(IAA)系统联合白细胞介素-12(IL-12)基因对小鼠Lewis肺癌的疗效.方法:建立Lewis肺癌移植瘤模型,随机分为对照组、HRP组、IL-12组和联合组,分别给予AdCMVGFP、AdhTERTHRP、AdCMVmIL-12单一或联合注射,然后腹腔注射IAA,观察肿瘤生长情况.蛋白质印迹法和EKISA检测瘤组织HRP和IL-12表达；免疫组化检测瘤组织内CD4+、CD8+淋巴细胞浸润情况.结果:与对照组、单一治疗组相比,联合组小鼠肿瘤生长受到显著抑制(联合组vs对照组:P=0.000,9 d；联合组vsHRP组:P=0.005,15 d；联合组vsIL-12组:P=0.046,12 d),生存期显著延长(联合组vs对照组:x2=9.529,P=0.002；联合组vsHRP组:x2=9.039,P=0.003；联合组vsIL-12组:x2=8.595,P=0.003),肿瘤组织广泛坏死,CD4+、CD8+淋巴细胞浸润显著增多.结论:IL-12基因治疗可诱导宿主产生抗肿瘤免疫应答,与靶向HRP/IAA自杀基因系统联合具有协同抗肿瘤作用.
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放射联合常山酮增强肺癌疗效及机制动物实验研究
目的 探讨放射联合常山酮对增强Lewis肺癌小鼠移植瘤疗效及对肿瘤侵袭转移的影响,并探索可能的分子机制. 方法 将Lewis肺癌移植瘤小鼠随机分为空白对照组、常山酮组、放射组及联合组( 9只/组) ,处理结束后第3天,每组随机处死4只小鼠行免疫组化及ELISA检查,剩余小鼠继续观察存活时间及肝、肺转移情况. 组间差异采用方差分析. 结果 处理第9天,对照组、常山酮组、放射组及联合组小鼠平均肿瘤体积分别为175. 2、118. 5、106. 6、85. 6 mm3( P=0. 000). 4个组中位存活时间分别为39、61. 5、78. 5、84. 5 d ( P=0. 002). 联合组肝肺转移数目显著少. 免疫组化及ELISA结果显示TGF-β1 水平放射组较对照组升高,联合组较对照组低;肿瘤平均血管密度计数联合组明显少于放射组. 对照组及放射组胶原蛋白表达较高,常山酮组及联合组胶原蛋白表达较低.结论 放射联合常山酮可能会增强肿瘤治疗疗效,其潜在的机制需要进一步研究.
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异鼠李素对肺癌的作用及其抗肿瘤机制的初步探讨
目的探讨异鼠李素体内外对肺癌增殖的影响及初步研究其抗肿瘤机制.方法将不同浓度异鼠李素加入体外培养的人A549细胞,用MTT法,3H-TdR掺入法等测定体外抗瘤活性,用流式细胞仪、彗星电泳、免疫组化等观察其对肿瘤细胞凋亡的诱导作用;采用Lewis细胞C57BL/6鼠移植瘤,观察药物对移植瘤的影响.结果异鼠李素处理A549细胞后,细胞形态出现典型凋亡特征,下调bcl-2基因, PCNA蛋白表达;上调抑癌基因P53、bax 及caspase-3基因.实验观察到,异鼠李素在体内也具有明显的抗肿瘤作用,可显著降低癌细胞增殖指数,诱导Lewis肺癌凋亡,其机理可能与下调PCNA和bcl-2的表达,上调caspase-3、bax表达有关.结论异鼠李素抑制肿瘤细胞的生长增殖,诱导细胞凋亡是其抗肿瘤作用主要机制之一,是一种有较好前景的抗肿瘤的新型中药单体.
