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联合低温保护剂对脐血造血干细胞长期低温保存的作用
目的观察联合低温保护剂对脐血造血干细胞长期低温保存的作用.方法 60份由联合低温保护剂(5%DMSO+6%HES+5%人体白蛋白)保存在岭南脐血库的脐血,按时间分为1,2,3,4年等4组,复温后观察其细胞活力、总有核细胞数(TNC)、CD34+、 CD34+CD38-、CFU-GM及BFU-E的回收率.结果 60例脐血冻存后的细胞活力为96.39%,TNC,CD34+, CD34+CD38-,CFU-GM及BFU-E的回收率分别是95.89%,94.45%,88.88%,87.77%及83.18%,不同时间组的上述指标之间差异无显著性(P＞0.05).结论联合低温保护剂具有效果可靠、操作简单等优点,适用于脐血造血干细胞的长期低温保存.
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血小板低温保存技术的应用
目的:观察低温保存血小板在临床应用的有效性.方法:输注对象分为血液病组、非血液病组,观察指标:①输注冷冻血小板24 h,临床出血是否得到明显控制;②输注冷冻血小板24 h,校正血小板增高指数CCI值.结果:91.2%病人临床出血症状得到控制,41.9%的病人CCI值≥10 000/μl.结论:输注低温血小板有明显的止血和一定的升血小板效果.
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应用新鲜和冻融睾丸精子对无精症患者行卵胞浆内单精子注射的比较
目的：比较采用新鲜和冻融睾丸精子进行单精子胞浆内注射（ICSI）的临床结局。方法：选择2012年1月至2013年10月在云南省第一人民医院生殖医学中心接受睾丸组织活检并证实有存活精子的无精症患者的308个移植周期。按患者意愿分为新鲜组148例和冻融组160例，比较两组患者的ICSI治疗结局。结果：新鲜组和冻融组患者的每周期获卵数、正常受精率、优质胚胎率、移植胚胎形态学评分和每周期移植胚胎数的差异均无统计学意义（P ＞0．05）。冻融组的临床妊娠率（54．4％）和胚胎种植率（34．7％）均高于新鲜组（44．6％、30．9％），流产率（11．5％）略低于新鲜组（12．1％），但差异无统计学意义（P ＝0．087、0．206、0．224）。结论：在睾丸活检日冷冻保存睾丸组织精子并用于后续的ICSI治疗值得在临床上推广。
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冻存后脐血DC介导的食管癌疫苗体内致瘤性研究
目的:探讨低温冻存后脐血树突状细胞(DC)与EC109食管癌细胞融合疫苗体内致瘤性.方法:免疫磁珠标记法分选人脐血CD34+干细胞,细胞因子扩增培养为成熟DC,聚二乙醇(PEG)融合法制备EC109-DC融合疫苗,流式细胞术双阳性标记鉴定融合疫苗,-80℃低温冰箱冻存,3周后融冻,流式细胞术再次鉴定融合疫苗,行体内致瘤性研究.结果:(1)融冻后疫苗体外半悬浮生长;同时高表达FR和CD80;(2)融冻后疫苗接种于SCID小鼠体内未见肿瘤形成,脾、肺和肝等器官未出现肿瘤病变.结论:冻存未破坏融合疫苗的完整性,融冻瘤苗无体内致瘤性,其亲本EC109细胞的恶性生长特征已丧失,安全可靠.
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苦参碱对于人肝细胞冻存保护效应的实验性研究
目的:了解苦参碱对人肝细胞液氮冻存复苏后功能的影响,探索一种改善人肝细胞冻存的新方法.方法:将胎肝细胞及常规培养的L-02人肝细胞系分别以5种不同冻存保护体系[10%二甲亚砜(DMSO)、5%DMSO+0.2 mg/L苦参碱、5%DMSO+2 mg/L苦参碱、5%DMSO+6 mg/L苦参碱、5%DMSO+10mg/L苦参碱]在液氮中冷冻保存1个月.1个月后快速复苏,进行存活率、形态学及功能检测.结果:不同冻存保护体系保存的人肝细胞存活率、形态学及功能表现均有所不同.其中5%DMSO+6 mg/L苦参碱组效果好,复苏后细胞存活率、24h贴壁率及细胞功能检测优于其他冻存液组.结论:(1)苦参碱对人肝细胞液氮冻存有保护作用,6 mg/L苦参碱是好的浓度;(2)苦参碱与DMSO联合使用降低了冻存保护剂DMSO的浓度,表明两者有协同作用.
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STH-2液pH值对低温保存离体兔心功能恢复的影响
目的:探讨STH-2液pH值对低温保存离体兔心功能恢复的影响.方法:96只成年新西兰兔随机分为8组,每组12只.所有兔心在不同pH值STH.2液中4℃保存4 h.STH-2液pH值分别为6.4、6.8、7.0、7.2、7.4、7.8、7.9和8.4,其中标准sTH-2液4℃时pH值为7.9,设为对照组.应用Langendorff灌注模式,观测保存前后离体兔心功能恢复,自动生化仪检测冠脉流出液中肌酸激酶(CK)含量,高效液相色谱法检测保存末心肌组织中高能磷酸化合物水平.结果:各组心功能恢复、冠脉流出液中CK含量和保存末心肌组织中总腺苷酸(TAN)、能荷比(ECR)差异存在显著性.pH 7.0、pH 7.2组心功能恢复佳,pH 7.2组冠脉流出液中CK含量低,pH 7.2组心肌组织中TAN、ECR高.结论:标准STH-2液对低温离体免心的保存效果并非佳,适度偏酸的STH-2液能够改善低温离体兔心的保存效果.
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X-J心脏保存液对离体心脏不同保存时限ATP及超微结构的影响
目的:探讨XIJING(X-J)超极化保存液对离体兔心低温下不同保存时间再灌注30 min后心肌细胞ATP含量及心肌超微结构的影响.方法:健康大白兔32只,随机分成4组,每组8只,Ⅰ组:低温保存4 h;Ⅱ组:低温保存6 h;Ⅲ组:低温保存8 h;Ⅳ组:低温保存10 h.每组供心均用X-J超极化心肌保存液进行低温保存.测定再灌注30 min心肌细胞ATP含量及心室肌超微结构,比较不同保存时间再灌注后心肌细胞ATP及心肌超微结构的变化.结果:随着低温保存时间的延长再灌注30 min后心肌细胞内ATP的含量无明显的差异(P＞0.05).从电镜观察来看,兔心保存4～6 h时心肌纤维排列尚整齐,线粒体轻度肿胀;在保存8 h后心肌纤维排列紊乱,线粒体嵴肿胀,个别线粒体出现空泡化;10 h时心肌组织出现部分心肌细胞坏死,细胞器散在于细胞间.结论:X-J超极化心脏保存液在低温保存供心4～6 h心肌超微结构变化不明显,心脏保存10 h后心肌超微结构改变较8 h明显.
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一起因饮用纯净水引起的家庭感染性胃肠炎调查
2012年10月西林县县城发生一起家庭感染性胃肠炎事件，发病6人。现将调查结果报告如下。
1现场调查
事发地为陆某家，该家庭环境清洁、厨房干净卫生，生、熟食品分类低温保存,餐饮具经常消毒处理。饮水机上放置有半桶某某牌纯净水，生产日期为2012年10月16日,10月23日由本县某公司送货上门。饮水机自2010年使用后从未清洗消毒。 -
室温和低温下保存动脉血的临床应用观察和血气分析对比
目的:比较室温和低温下保存动脉血液的临床应用和血气分析差异.方法:将40例患者的血液分为A、B两组分别于室温和低温下保存3 h,观察临床应用差异;同时每例血液抽取2份血样分别置于室温和低温下保存3 h,比较血气分析结果的差异.结果:两组间临床运用和血气分析比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:动脉血液在室温和低温下短时间保存,在临床应用及血气分析上无差异,手术期间行自体输血的动脉血液可置于室温下保存.
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二甲基亚砜低温保存血小板临床应用效果研究
目的:研究-80 ℃低温保存血小板临床应用的有效性与安全性.方法:对需要输注血小板的患者127例随机分成常温组63例,低温组64例,分别输注常温或低温保存的血小板,每人每次1个治疗剂量(1人份),观察输注后1～24 h的有效率、输注后24 h血小板计数比输注前提升之中位数和不良反应.结果:常温及低温保存血小板各输注63例123人次和64例105人次,输注后有效者人数百分率和有效人次的百分率、血小板升高的人次百分率、输后血小板增加值中位数分别为93.65%、86.89%、82.64%、15.5与92.13%、90.48%、83.81%、9.5,两组比较差异无统计学意义(P>0.05).血液病患者输注42例83人次和45例81人次,结果依次为97.62%、85.54%、80.25%、11和93.33%、91.36%、81.48%、7,两组比较差异亦无统计学意义(P>0.05).血液病及非血液病患者输注低温保存血小板,结果依次为93.33%、91.36%、81.48%、7和89.47%、87.50%、87.50%、16, 两组比较差异无统计学意义(P>0.05).输常温保存血小板发生发热反应2人份,低温保存的血小板发生过敏反应2人份,分别占1.63%和1.90%,两者反应率比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:低温保存血小板适用于需要输注血小板的各类患者,其临床疗效安全可靠.
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血浆低温保存对检测HBsAg和抗-HCV的影响
"中国输血技术操作规程"规定全血标本保存时间为输血后3个月,血浆标本保存6个月[1],一旦出现输血后肝炎,标本早已过时而消毁,患者、医院、血站为此纠缠不休.为此,本研究用ELISA法在同等试验条件下检测低温保存(-20℃以下)3、6、9、12个月的血浆标本,并对检测结果进行比较,现报道如下.
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DMSO冷冻保存血小板及其临床应用
随着临床对血小板制品的需求量越来越大,临时分离血小板已不能满足需要.由于血小板结构脆弱、离体后极易破裂,因而不能经受较长时间的保存,这给临床应用带来很大困难.目前,以二甲基亚砜(Dimethyl Sulfoxide,DMSO)作保护剂在低温条件下保存血小板的技术已有了很大的发展,并在临床上获得良好效果.笔者就DMSO保存血小板技术及临床应用作简要综述.
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低温冷藏时间对医用级丝光绿蝇幼虫存活率及发育的影响
目的 探讨低温冷藏时间对医用级丝光绿蝇幼虫存活率及发育的影响.方法 采集室内传代培养的丝光绿蝇蝇卵,经消毒后孵化出1日龄、2日龄、3日龄幼虫,再次消毒后于6℃保存,计算冷藏保存第1 ~7 天各日龄幼虫的存活率,存活率>50%时取存活的蛆虫于常温下继续培养2 d,记录蛆虫的存活率及体重.结果 1日龄蛆虫冷藏第1~2天的存活率均>50% ,且高于冷藏第3~7天的蛆虫(均P<0. 05);2日龄蛆虫冷藏第1~3天的存活率均>50% ,且高于冷藏第4~7天的存活率(均P<0. 05);3日龄的蛆虫第1~7天的存活率均>50% ,且冷藏第6~7天存活率均低于冷藏第1~4天的存活率(均P<0. 05). 1日龄蝇蛆冷藏1 d后再培养,2日龄蝇蛆冷藏1~2 d后再培养,3日龄蝇蛆冷藏1~5 d后再培养,其存活率均达80%以上,且生长发育情况良好.结论 1日龄、2日龄、3日龄医用级蛆虫相应的适宜冷藏保存时间分别为1 d、2 d和5 d.
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分离胶原始管冻存血清用于酶联免疫吸附试验的可行性探讨
目的 探讨用含分离胶的原始样本管冻存血清作为酶联免疫吸附试验(ELISA)的标本的可行性.方法 采用ELISA法对分离胶管采集的61例血清样本测定乙肝两对半、丙肝抗体、梅毒抗体、艾滋病抗体等指标,检测完后分别用样本原始管冻存血清及用聚苯烯管分离血清冻存,两者冻存6个月后,再检测上述指标,比较两者的结果.结果 用分离胶原始管冻存血清与用聚苯烯管分离血清冻存的定性结果及S/CO值比较差异均无统计学意义.结论 用离心后的分离胶原始样本管冻存血清进行ELISA检测是可行的.
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评价冻融精子生育力指标的进展
传统的精液分析主要是在体外对精子的数目、形态及运动性等指标进行评价,但没有一个指标能快速、准确地确定其生育力.只有同时具备多种特性、功能完整的精子才能受精,因而只有同时客观地检测多个指标,才能更好地评价精子的生育力.现对影响精子生育力的因素,包括精子本身的复杂性、生育力指标的有效性和精液分析过程中影响其质量的因素进行探讨,同时对精卵融合所必须具备的一些基本特性进行了描述.虽然单因素分析结果并不能完全反映精子的生育力,但可以检测出精子的各种异常,对于指导人工授精和男性不育的病因学诊断仍有着十分重要的意义.
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血清样本的保存条件对ELISA法检测封闭抗体结果的影响
目的 分析不同条件下保存血清样本对酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测封闭抗体结果的影响.方法 收集2016年3月至2017年3月就诊于该院妇科的264例正常早孕和初孕妇女为研究对象,采集其血清样本,依据不同保存时间和温度分为4℃ 保存1周(1周组)、-20℃ 保存1个月(1月组)、-20℃ 保存3个月(3月组)、-20℃ 保存6个月(6月组)共4组,应用ELISA法检测封闭抗体.结果 各组BA阳性检出率分别为48.9％(129例)、51.1％(135例)、51.8％(137例)、53.4％(141例),其总体差异无统计学意义(χ2=1.137,P=0.768>0.05).1月组 、3月组和6月组分别与对照组定性结果一致性比较,其Kappa系数分别为0.955、0.909、0.864,一致性程度均为极强(K值>0.8).各组BA定量结果的秩均值分别为1.77、2.37、2.51、2.84,其总体差异有统计学意义(χ2=217.129,P<0.001);1月组 、3月组 、6月组各组分别与1周组比较,其差异均有统计学意义(Z=-5.946、-4.996、-4.903,P<0.001);3月组和6月组分别与1月组定量结果比较,其差异有统计学意义(Z=-7.892、-8.456,P<0.001);3月组与6月组定量结果比较,差异无统计学意义(Z=-1.075,P=0.282>0.008).结论 在实际工作中,应用ELISA法定量检测BA时应尽可能在1周内完成,如不能及时检测,应在1个月内检测完毕;对于定性检测,于-20℃ 保存6个月可保持结果的稳定.
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人脐带间充质干细胞不同冻存方法探讨
目的 观察不同冻存条件对人脐带间充质干细胞(HUC-MSC)冻存效果的影响.方法 将HUC-MSC传代培养增殖后,设立4个因素和3个水平,分为9个实验组,分别观察不同冻存条件下对各组HUC-MSC的存活率、回收率、免疫抗原CD34和CD44的影响.结果 第9组HUC-MSC解冻复苏后,其存活率、回收率以及免疫抗原CD44积分值均高于其他组(P<0.01),冻存前后其细胞形态无明显差别,细胞免疫抗原CD34均为阴性.结论以90%血清+10%二甲基亚砜(DMSO)作为冻存液,取106/mL以下浓度的HUC-MSC放入厚壁聚乙烯泡沫盒中,立即封存置-80 ℃冻存24 h,再投入液氮中冻存,为佳冻存方法.
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低温保存的血清标本自然沉降对检验结果的影响
目的 了解血清标本的低温保存条件下因自然沉降对临床化学检验结果的影响,以便引起检验操作人员的重视.方法 血清标本在4℃冷藏和-18℃下冷冻保存2 d后取出,室温静置30 min以上使温度平衡至室温,吸取上层和下层的液体标本,检测蛋白、血清酶、糖、血脂等常规生化项目.结果 4℃低温保存的血清标本上层与下层的常规生化测定结果差异有统计学意义(P<0.05);-18℃冷冻保存的标本上层与下层检验结果差异有统计学意义(P<0.001).结论 低温保存的标本因为自然沉降现象导致上层与下层的检验结果差异有统计学意义.因此,低温保存的标本在检验前必需要充分地混匀,以防止上下层标本的结果差异.
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贮存温度波动与冰冻血小板不可逆聚集发生的相关性研究
目的 探讨冰冻血小板保存温度波动与冰冻血小板不可逆聚集情况发生的相关性.方法 对2006～2008年共1 842袋冰冻血小板在保存期间不同温度波动范围与融化后发生血小板不可逆聚集的情况进行统计分析.结果 冰冻血小板保存温度分别在-80～-60 ℃和-80～-50 ℃范围波动,冰冻血小板融化复苏后血小板不可逆聚集发生率分别为6.39%和31.21%,保存温度在-80～-70 ℃范围波动的对照组血小板不可逆聚集发生率为2.25%,前两种保存温度与对照组比较,组间差异均有统计学意义(P＜0.01);保存温度在-80～-50 ℃范围波动,手采和单采两种冰冻血小板融化复苏后,单采冰冻血小板不可逆聚集的发生率为72.97%,手采冰冻血小板不可逆聚集为18.33%,二者的发生率差异有统计学意义 (χ2=39.33,P＜0.01);保存温度在-80～-60 ℃范围波动,单采与手采两种冰冻血小板比较,差异无统计学意义(χ2=0.89,P＞0.05).结论 当冰冻血小板保存温度分别在-80～-60 ℃和-80～-50 ℃波动时,融化复苏后血小板不可逆聚集有较高的发生率,在-80～-70 ℃范围波动时,血小板不可逆聚集发生率较低.-80～-70 ℃的温度范围可以作为目前采供血机构保存冰冻血小板选择温度条件的参考.
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三氧消毒机与甲醛熏蒸用于血库冰箱消毒效果比较
目的 比较甲醛熏蒸、三氧消毒机两种消毒方法对血库冰箱空气的消毒效果.方法 甲醛熏蒸法是按40 mL/m3用量,紧闭冰箱门,熏蒸2 h;三氧消毒机消毒法是紧闭冰箱门开机2 h,停机40 min后使用.消毒前、后进行2次空气采样,培养48 h,进行细菌菌落计数.结果 两种消毒方法消毒前、后普通细菌数量及真菌生长情况比较,差异有统计学意义(P<0.01).两种方法消毒后,细菌总数均在200 cfu/m3以下,但甲醛熏蒸存在毒性残留问题,而三氧消毒机消毒法对人体损害较小.结论 三氧消毒机消毒法消毒效果较好,且安装方便,在消毒过程中可开冰箱取血、发血.
