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NF-κB的诱骗性寡核苷酸对内粘附分子VCAM-1表达的影响
目的探讨在人脐静脉内皮细胞中,NF-κB的诱骗性寡核苷酸对肿瘤坏死因子TNF-α诱导的粘附分子VCAM-1表达的影响.方法采用培养的人脐静脉内皮细胞株ECV-304,脂质体介导法转染寡核苷酸,流式细胞仪检测转染效率,电泳迁移率转换试验检测诱骗性寡核苷酸与NF-κB转录因子的亲和力及特异性,并用逆转录-聚合酶链反应和流式细胞仪测定其对TNF-α诱导的粘附分子VCAM-1表达的影响.结果诱骗性寡核苷酸能与NF-κB特异结合,并可显著下调TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞粘附分子VCAM-1的表达.结论 NF-κB的诱骗性寡核苷酸可显著下调NF-κB调控的与动脉粥样硬化相关的粘附分子的表达,为核酸药物防治动脉粥样硬化的临床应用提供了一些前期资料.
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冠心病患者核因子κB的变化及其临床意义
目的 探讨冠心病(CHD)患者外周血核因子κB(NF-κB)的变化及其临床意义.方法 入选163例患者,CHD组103例,其中ACS组71例,SAP组32例,对照组60例.检测外周血浆NF-κB浓度.同时经选择性冠状动脉造影检查.比较不同冠状动脉病变支数、冠状动脉病变程度、冠状动脉病变类型的血浆NF-κB水平;并进行冠心病患者 Gensini积分与NF-κB等危险因素的多因素logistic回归分析.结果 ①ACS组、SAP组与对照组相比NF-κB浓度明显升高,且ACS组较SAP组升高更明显,差异有统计学意义(P＜0.01);②单支、双支、三支病变组、对照组各组间NF-κB浓度比较差异有统计学意义(P＜0.01),但单支病变组与对照组比较差异无统计学意义;③轻度、中度、重度病变组、对照组各组间NF-κB浓度比较差异有统计学意义(P＜0.01),但轻度病变组与对照组比较差异无统计学意义;④A型、B型、C型病变组、对照组各组间NF-κB浓度比较差异有统计学意义(P＜0.01),但A型病变组与对照组比较差异无统计学意义;⑤Gensini积分与CHD危险因子logistic回归分析显示高水平核因子κB、高血压、高脂血症、年龄＞60岁、男性均为严重冠状动脉病变的相关危险因素.结论 CHD患者NF-κB活性增高,是严重冠脉病变的相关危险因素,在CHD发生、发展中可能起着重要作用.
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抗组胺药物的抗炎特性
组胺通过与组胺受体结合发挥其生物学效应,其中H1受体在介导过敏性炎症的发生中起着重要作用,它在有无介质存在条件下均可触发下游级联反应.H1抗组胺药物是H1受体的反向激动剂,除具有拮抗组胺作用外,还有抗炎效应,在过敏性炎症性疾病治疗中有重要意义.H1抗组胺药物可以从抑制钙离子通道或下调核因子kappa B(nuclear factor kappa B,NF-κB)的表达等方面发挥其抗炎作用,本文主要从其干扰免疫级联反应的不同环节角度出发综述H1抗组胺药的抗炎效应机制.
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核因子KappaB途径在烟草提取物促食管鳞状细胞癌细胞增生中的作用
目的 观察烟草乙醇提取物(ethanol extraction,EE)的促增生作用和核因子KappaB(nuclear factor of kappa B,NF-κB)抑制剂二硫氨基甲酸肽吡咯烷(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)的抑制作用对NF-κB活性的影响,从而探讨NF-κB在烟草相关食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)发病机制中的作用.方法 EE分别与PDTC预处理的2株ESCC细胞共同孵育24 h后,用噻唑蓝法检测细胞增生情况;AnnexinV+PI双染检测细胞凋亡情况;凝胶迁移率、Western blotting方法检测干预前后EE对NF-κB活性的影响.采用免疫组织化学的方法测定ESCC组织标本中NF-κB的表达,并比较吸烟与非吸烟组阳性率的差异.结果 PDTC在25～200 mg/L浓度区间可抑制2株细胞的增生,呈剂量依赖性.EE作用24 h后,对2株细胞均呈现剂量依赖的促增生和抑制凋亡作用.EE 能促进2株细胞中NF-κB的活性.PDTC预处理后,EE的上述作用均减弱.ESCC组织中NF-κB的阳性率为79.59 %;吸烟组NF-κB的阳性率高于非吸烟组.结论 EE可促进ESCC细胞株中NF-κB的活性,这种作用可被NF-κB抑制剂所阻断;ESCC组织中NF-κB呈高表达,吸烟可能增加ESCC组织中NF-κB的活性.
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高氧与核因子Kappa B
高氧可引起体内活性氧的增加,导致多种细胞和组织的损伤.NF-κB是一种氧化应激敏感性转录调控因子,高氧可以通过对NF-κB的调控,从而调控不同的下游基因和蛋白.本文从高氧介导的活性氧产生、上下游通路对NF-κB的调控及细胞成熟分化对NF-κB的研究进展做一综述.
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清脑止痛胶囊对硝酸甘油致偏头痛大鼠体内炎性细胞因子表达水平的影响及其意义
目的:皮下注射硝酸甘油(NTG)制备大鼠偏头痛模型,探讨清脑止痛胶囊对大鼠脑组织和血浆中炎性细胞因子表达的影响及其意义.方法:90只健康成年雄性Wistar大鼠随机分为空白组,模型组,低(0.35g·kg-1)、中(0.70 g·kg-1)、高(1.40 g·kg-1)剂量清脑止痛胶囊组和阳性药(正天丸1.8g·kg-1)组,每组15只.连续给药7d后,皮下注射NTG复制偏头痛大鼠模型,观察注射NTG 180 min内大鼠的挠头次数,4 h后取血浆和中脑组织.免疫组织化学法和Western blotting法检测大鼠中脑组织中核因子kappa B (NF-κB)和环氧合酶2(COX-2)表达水平,酶联免疫吸附法检测大鼠血浆和中脑组织中前列环素E2 (PGE2)、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平.结果:与空白组比较,模型组大鼠挠头次数明显增加(P＜0.01),中脑组织中NF-κB和COX-2表达水平明显升高(P＜0.01),血浆和中脑组织中PGE2、IL-1β 和TNF-α水平明显升高(P＜0.05或P＜0.01);与模型组比较,中、高剂量清脑止痛胶囊组和阳性药组大鼠挠头次数明显减少(P＜0.05或P＜0.01),中脑组织中NF-κB和COX-2表达水平明显降低(P＜0.05或P＜0.01),血浆中PGE2、IL-1β和TNF-α水平明显降低(P＜0.05或P＜0.01).结论:清脑止痛胶囊可以缓解大鼠偏头痛症状,对偏头痛有一定的预防作用,其机制可能与调节神经源性炎症有关联.
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核因子kappaB的反义核酸对人内皮细胞间粘附分子-1表达的影响
目的采用反义核酸技术观察核因子kappaB(NF-κB)的合成及其对所调控的粘附分子表达的影响,阐明其作用机制并证明其有效性.方法设立正义、反义核酸组和对照组(单用肿瘤坏死因子-α刺激).观察FITC标记的寡核苷酸在内皮细胞内的摄取情况及采用流式细胞仪检测反义核酸对NF-κB表达的影响;采用RT-PCR、免疫组织化学法和流式细胞仪检测转染后细胞间粘附分子(ICAM)-1的表达情况.结果反义核酸组NF-κB的表达较对照组下降35.94%,较正义核酸组下降47.14%(P＜0.05);反义核酸组人血管内皮细胞I-CAM-1的mRNA表达及其在细胞表面的表达水平较对照组分别降低12.23%和71.37%,较正义核酸组分别降低18.16%和71.82%(P＜0.05).结论 NF-κB的反义核酸能有效降低NF-кB的复制及合成,从而显著下调人血管内皮细胞ICAM-1的表达,其正义核酸无此效应.
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核因子kappaB的诱骗性寡核苷酸对肿瘤坏死因子-α诱导的细胞间粘附分子-1表达的影响
目的探讨人脐静脉内皮细胞中,核因子kappaB(NF-κB)的诱骗性寡核苷酸对肿瘤坏死因子(TNF)-α诱导的细胞间粘附分子(ICAM)-1表达的影响.方法采用培养的人脐静脉内皮细胞株ECV304,脂质体介导法转染寡核苷酸,以流式细胞仪检测转染效率,电泳迁移率转换试验检测诱骗性寡核苷酸与NF-κB转录因子的亲和力及特异性,并以RT-PCR和流式细胞仪测定其对TNF-α诱导的粘附分子ICAM-1表达的影响.结果诱骗性寡核苷酸能与NF-κB特异结合,并可显著下调TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞ICAM-1的表达.结论NF-κB的诱骗性寡核苷酸可显著下调NF-κB调控的与动脉粥样硬化相关的粘附分子的表达,为核酸药物防治动脉粥样硬化的临床应用提供一些前期资料.
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核因子kappa B与体外循环相关性的研究进展
核因子kappa B(NF-κB)是许多促炎因子高表达所必需的转录因子.近年来,随着分子生物学技术的发展,NF-κB对免疫、应激和炎症反应以及淋巴细胞分化和生长的调控作用成为研究的热点.作者就NF-κB在缺血-再灌注及体外循环损伤机制中的作用作一综述,并简要介绍阻断NF-κB激活干预治疗的研究进展.
关键词： 核因子kappaB 全身性炎症反应综合征 缺血-再灌注 体外循环 -
脑缺血再灌注后实验大鼠核因子kappaB的变化
目的 研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后核因子kappaB(NF-κB)在时间上表达的变化过程.方法 线栓法建立右侧大脑中动脉闭塞大鼠模型,分别于缺血90min后再灌注2h,6h,12h,24h,72h,大鼠在各时间点断头取脑,测算脑梗死体积,用免疫印迹法检测脑组织胞核内NF-κB的表达.结果 脑缺血再灌注后NF-κB的表达在6h出现明显升高(P＜0.01),在24h达到高峰,72h略有下降,其脑梗死体积随着再灌注时间延长而增加,脑梗死体积与NF- κB表达水平之间有显著的相关性.结论 脑缺血再灌注后,脑梗死区域出现胞核内NF-κB表达增加,NF-κB在再灌注损伤中起重要作用.
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NF-κB在肿瘤化疗耐受和肿瘤治疗中的应用
核因子κB(nuclear factor-kappaB,NF-κB)是一种细菌脂多糖诱导的核转录因子,1986年由Ranjan Sen和David Baltimore发现[1],因其能与B淋巴细胞免疫球蛋白的κ轻链增强子结合而得名[2].研究表明,NF-κB在机体多种细胞广泛表达,为一极其重要的核转录因子,参与包括免疫、炎症、细胞凋亡及增殖等多种细胞生物过程.
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NF-KB激活对缺血再灌注心肌TNF-α和IL-1β表达的影响
目的 探讨心肌缺血再灌注损伤时NF-κB激活对TNF-α和IL-1β表达的影响.方法 65只SD大鼠随机分为3组:假手术组(n=5);对照组(心肌缺血30 min后再分别灌注0、15、30、60、120、240 min,每个时间点n=5);PDTC干预组,术前给予PDTC 15 mg/kg,其它与对照组相同.RT-PCR检测TNF-a和IL-1β mRNA表达,电泳迁移率实验(EMSA)检测NF_KB活性,硫代巴比妥酸法测定心肌MDA含量.结果 TNF-α和IL-1β表达在再灌注开始之前即有升高,分别在再灌注30和60 min达到高峰,再灌注120 min仍维持较高水平;NF-KB在再灌注15 min开始激活,至再灌注60 min达到高峰.PDTC干预组的NF-KB激活被阻断,与对照组各时间点相比,TNF-a和IL-1β mRNA表达均不同程度下降,MDA含量减少.结论 NF-KB激活对缺血再灌注心肌细胞因子表达具有重要作用,抑制NF-KB信号通路可能对于再灌注损伤具有潜在的治疗价值.
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NF-κ B、PAI-1对大鼠湿热模型致动脉粥样硬化的作用研究
目的 检测NF-κB、PAI-1在大鼠湿热模型形成过程中的表达,及与血脂、主动脉弓粥样硬化程度的关系,以探讨NF-κB、PAI-1对大鼠湿热模型致动脉粥样硬化的作用.方法 80只大鼠随机分为4组,第1组为空白对照,其余3组均以肥甘饮食+内毒素方法建立湿热模型,第2组造模2周,第3组4周,第4组6周.用Western blotting的方法半定量检测各组大鼠NF-κB、PAI-1在蛋白水平上的表达,并检测血脂、主动脉弓病理切片以评价动脉粥样硬化水平.结果 ①正常大鼠均无NF-κB、PAI-1表达;②NF-κB在造模过程中逐渐升高,PAI-1无明显变化;③造模组大鼠NF-κB与血脂、主动脉弓粥样硬化积分均呈正相关,PAI-1则与血脂、主动脉弓粥样硬化积分无关.结论 NF-κB在大鼠湿热模型致动脉粥样硬化的过程中可能起到作用,PAI-1则与动脉粥样硬化无关.
关键词： 核因子kappaB 纤溶酶原激活物抑制物-1 湿热病 动脉粥样硬化 -
IL-1β/p38MAPK/NF-κB信号转导通路体外调节鼻黏膜上皮细胞中糖皮质激素受体的表达
目的:拟通过体外研究初步探讨慢性鼻-鼻窦炎黏膜中GRα/GRβ降低的可能上游信号转导机制.方法:以IL-1β体外诱导人鼻黏膜上皮细胞(HNE)构建GRα/GRβ降低的模型.以Western 印记及荧光定量PCR 技术检测 IL-1β 诱导前后及 p38MAPK 和 NF-κB 信号通路特异性阻断剂干预前后 GRα、GRβ 和p38MAPK、NF-κB信号通路关键酶在蛋白质及核酸水平的表达变化. 结果:IL-1β呈浓度和时间依赖性诱导HNE中GRα/GRβ降低,成功建立GRα/GRβ降低的细胞模型. 相同梯度的IL-1β可呈相同规律诱导HNE中p38MAPK和NF-κB通路激活. p38MAPK和NF-κB通路的特异性阻断剂SB203580和吡咯烷二硫代氨基甲酸(PDTC)均可明显抑制各自通路,且同时出现GRα/GRβ增高. SB203580可明显降低NF-κBp50和NF-κBp65的表达,PDTC对p38MAPK的表达未见明显影响. 结论:IL-1β通过先后激活p38MAPK和NF-κB信号通路诱导体外培养的HNE中GRα/GRβ降低.
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异丙酚对细菌脂多糖刺激的脐静脉内皮细胞NF-kB活性的影响
目的 研究异丙酚对细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激之后的脐静脉内皮细胞(Human umbil-ical vein endothelial cells,HUVECs)的核因子kappa B(NF-kB)活性的影响,探讨异丙酚可能的抗炎机制.方法 选择3-4代HUVECs进行转板后都加入LPSlug/ml刺激.按刺激的时间和有无加入药物随机分为4组,A1、B1分别为LPS刺激2h对照组和异丙酚25umol/L组,A2和B2组分别为刺激8h的对照组和异丙酚25umol/L组.提取健康志愿者血液中的多形核中性粒细胞(polymorphonuclear neutrophil,PMN),测定PMN与HUVECs的粘附率:免疫细胞化学测定NF-kB65亚基的核阳性表达细胞百分率.结果 B2组的PMN粘附率(39.36±1.76)%与对照组A2(57.93±4.08)%比较都显著降低(P<0.05);NF-kB核阳性细胞率B2组(71.64±2.32)%比对照组A1(80.28±6.24)%,B2组(75.92±4.45)%比对照组A2(81.58±4.68)%显著降低(P<0.05).结论 异丙酚能有效抑制LPS刺激HUVECs后NF-kB活性的增加.抑制PMN与HUVECs的粘附,减轻机体的炎症反应.
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载脂蛋白E基因多态性影响星形胶质细胞损伤后早期NF-κB表达的实验研究
目的 探讨载脂蛋白E(apolipoprotein E, APOE)基因多态性与星形胶质细胞损伤后NF-κB表达的相关性.方法 通过RT-PCR及定点突变技术扩增人源性APOEε2、ε3、ε4 3种等位基因的CDS区,并构建pEGFP-N1-APOE重组质粒;APOE基因敲除鼠星形胶质细胞的原代培养、鉴定,脂质体法将重组质粒转染入星形胶质细胞,并筛选稳定表达APOE信息的细胞株;利用划痕致伤构建细胞损伤模型,于伤后12、24、48 h,通过RT-PCR测定NF-κB mRNA的转录,通过Western blot测定其蛋白的表达.结果 伤后12 h,APOEε2、ε3、ε4 3组细胞可检测到NF-κB的表达,但各组间比较差异无统计学意义(P>0.05);伤后24 h, 3组细胞NF-κB的表达较伤前增高,且APOEε4组的表达明显高于APOEε2和APOEε3组(P<0.05);伤后48 h, 表达进一步增强,APOEε4组的表达依然明显高于APOEε2和APOEε3组(P<0.05).结论 损伤后早期,携带APOEε4等位基因的星形胶质细胞NF-κB的表达水平高于APOEε2和APOEε3型,提示APOEε4携带体可能通过早期创伤性炎症反应导致急性期伤情加重及不良预后.
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肿瘤坏死因子-α在心肌产生的胞内信号途径
肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)是一种具有多种生物学效应的细胞因子,参与介导人体多种疾病的发生、发展.
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人参皂苷Rg1通过NF-κB阻断缺氧诱导卵巢癌SKOV3细胞EMT
目的 探讨人参皂苷Rg1对卵巢癌SKOV3细胞上皮间质转化的影响及机制.方法 确定人参皂苷Rg1对SKOV3细胞生长的影响,构建缺氧诱导上皮间质转化(EMT)模型,观察细胞形态变化,检测E-cadherin,vimentin及核因子KappaB(NF-κB)蛋白的表达.结果 不同浓度的人参皂苷Rg1处理SKOV3细胞,超过40μg/mL的Rg1培养24h时对细胞生长稍有抑制,培养48h和72h时对细胞生长无明显抑制.缺氧诱导48h,SKOV3细胞呈现纺锤形、松散排列的形态,E-cadherin蛋白表达消失,vimentin蛋白表达增强.40μg/mL人参皂苷Rg1处理缺氧诱导的SKOV3细胞48h,细胞形态变化被部分逆转.E-cadherin蛋白表达恢复,vimentin蛋白表达被抑制,同时,NF-κB蛋白的表达与E-cadherin呈相反的趋势.结论 人参皂苷Rg1可能通过调控NF-κB抑制缺氧诱导卵巢癌SKOV3细胞的EMT.
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脂多糖通过核因子-κB途径影响腹膜间皮细胞生长及TNF的表达
目的:研究脂多糖(LPS)是否通过核因子κB, 即IκBα、 NF-κB p65途径引起腹膜间皮细胞(peritoneal mesothelial cells, PMC)凋亡、抑制细胞生长和诱导肿瘤坏死因子(TNF)的表达.方法:胰蛋白酶-EDTA消化法用于PMC的原代培养、传代, 经鉴定分组:①不同浓度LPS组(正常对照组、 0.1 mg/L、 1.0 mg/L、 10 mg/L、 50 mg/L、 100 mg/L);②不同时间组:LPS作用于PMC 0、 1、 3、 6、 12、 24 h.Hoechst33258染色法检测PMC的凋亡;MTT法检测PMC的生长增殖抑制情况;免疫荧光法检测p65的活性;Western blot检测IκBα的表达;用L929细胞株检测TNF的活性;RT-PCR检测TNFα mRNA的表达.结果:LPS抑制PMC生长并诱导凋亡、引起IκBα的降解、 p65的核移位;LPS诱导PMC表达TNF, 1 h TNF-α mRNA达大值、 3 h TNF-α活性达大值.结论:LPS可抑制PMC的生长及诱导凋亡;LPS诱导PMC表达TNF-α呈浓度依赖性, 在LPS作用早期TNF-α明显升高, 随后下降.这一过程中IκBα-NF-κB p65信号途径可能发挥了重要作用.
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表没食子儿茶酚没食子酸酯对紫外线辐射诱导角质形成细胞产生IL-6和NF-κB的影响
目的 研究绿茶中的主要活性成分表没食子儿茶酚没食子酸酯(EGCG)对中、长波紫外线辐射诱导角质形成细胞产生IL-6和NF-κB的影响.方法 用ELISA法测定角质形成细胞培养上清液中IL-6水平,免疫组化和Western Blot法检测细胞中NF-κB p65的变化.结果 UVB 20、30 mJ/cm2和UVA 10、20 J/cm2可以显著促进角质形成细胞分泌IL-6(P＜0.05),且细胞内NF-κB的产生明显增加(P＜0.05).0.15 mmol/L和0.3 mmol/L的EGCG对紫外线诱导的IL-6分泌起到了抑制作用(P＜0.05),其中0.3 mmol/L的EGCG作用更为明显,对紫外线辐射诱导的角质形成细胞NF-κB产生有着显著的抑制作用(P＜0.05).结论 中、长波紫外线辐射可以促进IL-6的分泌.EGCG能够抑制NF-κB易位入核,从而抑制IL-6的分泌.
关键词： 表没食子儿茶酚没食子酸酯 紫外线 角质形成细胞 白细胞介素6 核因子kappaB
