差速贴壁法培养大鼠骨髓内皮祖细胞的实验研究
摘要： 目的:探索一种经济、可靠、稳定、高纯度的内皮祖细胞培养方法.方法:采用密度梯度离心法分离培养大鼠骨髓血管内皮祖细胞,于包被人纤连蛋白的25 mL培养瓶中贴壁培养,收集48 h后的未贴壁细胞培养至第7天,通过细胞摄取DiL-acLDL、结合FITC-UEA-1的荧光双染阳性率从功能角度鉴定细胞,并通过流式细胞术动态测定细胞表面抗原CD133、flk-1、VE-cadherin(CD144)及CD31进一步鉴定.结果:48h未贴壁细胞培养,细胞呈短梭形、多角形,胞体小;可见到大量典型的内皮祖细胞克隆;细胞摄取DiL-acLDL,结合FITC-UEA-1荧光双染阳性率为(87.0±6.0)%.细胞表面抗原CD133、flk-1、CD144和CD31阳性率分别为61.01%、8.55%、6.18%和8.20%.结论:差速贴壁法是一种经济、可靠、稳定、高纯度的内皮祖细胞培养方法.
-
天津地区人群中LOX-1基因3'-UTR多态性与冠心病的关系
目的:研究天津地区人群中凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1 (LOX-1)3’-非编码区(3'-UTR)188位点基因多态性情况,探讨LOX-1基因多态性与冠心病(CAD)及血脂水平的关系.方法:冠心病组170例,均经冠脉造影(CAG)确诊；对照组140例,均经CAG排查.应用聚合酶链反应-限制片段长度多态性(PCR-RFLP)法对研究对象的LOX-1基因3'-UTR 188位点多态性进行分析,并用自动生化分析仪检测血浆血脂水平.结果:冠心病组和对照组比较,LOX-1基因3'-UTR 188位点基因型频率和等位基因频率差异均无统计学意义(均P＞0.05)；在总研究对象中T等位基因携带者(CT+TT)与CC基因型者血三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、脂蛋白(a)[Lp(a)]水平差异均无统计学意义(均P＞0.05),冠心病组与对照组中的CT+TT基因型者以上血脂水平差异亦无统计学意义(P＞0.05).结论:天津地区人群中LOX -1基因3'-UTR 188位点多态性与冠心病的发病及血脂水平均无明显关系,其不能作为冠心病的预测因素.
-
育龄女性子宫弓状动脉多普勒频谱正常波形及参考值研究
目的:通过对正常育龄女性子宫弓状动脉经腹脉冲多普勒频谱(PW)检测,建立PW正常波形及参考值范围.方法:育龄女性260例,对能清楚显示弓状动脉的252例患者,共504支进行观察.根据舒张期有、无血流显像将PW波型分为双峰形和单峰形.并测量收缩期大流速(Vs)、舒张期低流速(Vd),计算阻力指数(RI)和脉动指数(PI).结果:(1)子宫弓状动脉95.2％(480/504 )舒张期有血流,PW波呈双峰形,4.8％( 24/504)舒张期无血流显像,PW呈单峰形.(2)子宫弓状动脉PW参考值范围:Vs 3.5～44.0 cm/s,Vd 0.0～11.8 cm/s,PI 0.7～2.2,RI 0.6～1.0.结论:波形分析及RI可靠、应用方便,可作临床诊断及治疗的重要参考指标.
-
异位性皮炎患者血清牛磺酸水平的测定
目的:探讨血清牛磺酸水平与异位性皮炎发生的关系.方法:采用高效液相方法,对门诊收集的30例异位性皮炎患者(患者组)和30例正常对照者(对照组)行血清牛磺酸水平的测定.结果:患者组血清牛磺酸水平为(6.25±0.79)mg/L,对照组水平为(10.32±0.65)mg/L,2组牛磺酸水平差别有统计学意义(P＜0.01).结论:异位性皮炎的发生可能与患者血清中牛磺酸水平降低有关.
-
新标准下正常人眼对比敏感度的研究
目的:探讨新标准下不同年龄正常人眼对比敏感度(CSF)的变化.方法:使用新标准设计下的OPEC 6500视力测量仪对100例受试者,共200眼行单眼昼、昼眩光、夜和夜眩光4种状态下及空间频率为1.5、3、6、12和18 cpd的CSF进行测定.受试者分为青、中和老年3个年龄组,比较不同年龄组、不同状态下、不同空间频率的CSF.结果:单眼昼状态下的1.5和3 cpd,单眼夜状态下的12和18 cpd,单眼夜眩光下的6、12和18 cpd刺激时,各年龄组CSF值之间的差异无统计学意义(P＞0.05);其他空间频率刺激下,3个年龄组的CSF值两两比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:应用新测试标准,正常人单眼在昼、昼眩光、夜和夜眩光4种状态下,多数空间频率CSF均随年龄增加而下降.
-
尼卡地平在等容血液稀释与控制性降压合用于巨大骶骨肿瘤手术中的作用
目的:观察尼卡地平在等容血液稀释与控制性降压联合应用于巨大骶骨肿瘤手术中的作用.方法:将择期手术的巨大骶骨肿瘤病人50例随机分为两组.A组麻醉平稳后行等容血液稀释联合尼卡地平控制性降压,B组为对照组,单行尼卡地平控制性降压.A、B组均于手术开始后10 min输注尼卡地平8 μg/(kg@min)行控制性降压,达到目标血压后调整剂量.结果:A组达到目标血压所需时间[(160±30)s]及单位时间尼卡地平用药量[(10.8±3.4)mg/h]明显低于B组[分别为(280±35)s及(15.2±4.5)mg/h](P＜0.01),两组病例降压前后心率和尿量的变化及停降压后血压恢复的时间无明显差异(P＞0.05).结论:尼卡地平在等容血液稀释联合控制性降压的应用中,降压作用明显增强,而对降压期间心率、尿量的变化及停药后血压的恢复无明显影响.
-
大剂量甲氨蝶呤结合放疗治疗原发性中枢神经系统淋巴瘤
目的:探讨化疗、放疗综合治疗原发性中枢神经系统淋巴瘤(PCNSL)的效果.方法:无免疫功能缺陷PCNSL患者39例.CT及MRI检查示单一病灶24例,病灶≧2个15例;41个病灶位于脑深部结构,18个病灶位于表浅部位.手术标本病理诊断为非霍奇金弥漫大B细胞淋巴瘤.其中20例行全脑放疗(A组);19例行化疗及放疗(B组),先给予2个周期甲氨蝶呤(MTX,按体表面积3g/m2静脉滴注),化疗结束2周后行全脑放疗.治疗结束时判定疗效.结果:A组完全缓解13例,部分缓解3例,稳定2例,进展2例;患者无进展生存期中位数为10.5个月,中位生存期为12.5个月.B组完全缓解16例,部分缓解3例;患者无进展生存期中位数为28个月,中位生存期为37个月,2例出现晚期神经系统损伤.B组治疗效果优于A组(Zc=2.629,P<0.05).B组生存期长于A组(Zc=1.815,P<0.05),2组生存曲线差别有统计学意义(Log=rank x2=14.627,P<0.05).A组和B组分别有15例和7例复发,差别有统计学意义(x2=5.77,P<0.05).结论:大剂量MTX与放疗结合是治疗PCNSL的一种有效的方法.
-
2型糖尿病合并冠心病危险因素的临床研究
目的:探讨2型糖尿病(T2DM)患者导致冠心病(CHD)的危险因素.方法:将已确证为T2DM的85例患者,根据其是否并发CHD分为2组,其中单纯T2DM组44例,T2DM并发CHD组41例.了解并检测2组患者性别、年龄、体质量、病程、体质量指数(BMI)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、血糖(FBG、P2BG)、胰岛素(FINS、PINS)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胆固醇(TC、HDL-C、LDL-C、VLDL-C)、甘油三酯(TG)、血尿酸(UA)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和24 h微量白蛋白排泄率(UAE)、纤维蛋白原(FIB)、C-反应蛋白(S-CRP)及下肢动脉狭窄程度.结果:(1)2组在HbA1c、FBG、TG、TC、HDL-C、FINS、UMA、PINS、FIB、S-CRP方面差异无统计学意义(P＞0.05).(2)2组在病程、BMI、SBP、DBP、P2BG、LDL-C、UA、HOMA-IR、P2BG/FBG方面差异有统计学差异(P＜0.05).结论:病程、BMI、DBP、P2BG、LDL-C、HOMA-IR是T2DM并发CHD的高危临床因素,必须予以早期防治.
-
多模式MRI在急性脑梗死rt-PA静脉溶栓治疗中的评估作用
目的:评价多模式磁共振成像(MIU)在急性脑梗死重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)静脉溶栓中的作用.方法:选择我院神经内科卒中单元筛选的35例符合溶栓标准CT阴性的脑梗死患者进行多模式MRI检查,进一步评估其溶栓风险和获益.结果:9例患者不符合多模式MRI筛选标准,不适合进行溶栓治疗.另4例患者拒绝溶栓,7例患者在溶栓前肌力好转未予溶栓,15例患者接受了rt-PA静脉溶栓.3个月随访改良Rankin评分(mRS)O～2分者11例,3分者4例,无4～5分患者,无颅内出血病例,无死亡病例.结论:对于发病3h之内的超早期脑梗死患者,溶栓前多模式MRI评估有助于选择可能从rt-PA溶栓中获益的患者;对于发病3.0～4.5 h的患者,能扩大rt-PA溶栓时间窗.
-
CK34βE12和HSP27在甲状腺癌中的表达及其意义
目的:探讨CK34βE12和HSP27在甲状腺乳头状癌中的表达及其意义.方法:应用免疫组化SP法观察38例甲状腺乳头状癌、10例甲状腺腺瘤及10例甲状腺腺瘤旁正常组织中CK34βE12和HSP27的表达水平,比较其阳性表达率,分析CK34βE12和HSP27表达的关系.结果:CK34βE12在正常甲状腺组织和甲状腺腺瘤中未见表达,在甲状腺乳头状癌阳性表达率为42.10%,差异有统计学意义(P=0.004),CK34βE12在淋巴结转移组和无淋巴结转移组的阳性表达率差异无统计学意义(P=0.861);HSP27在正常甲状腺组织阳性表达率为30.00%,在甲状腺腺瘤中阳性表达率为40.00%,在甲状腺乳头状癌阳性表达率为76.30%,差异有统计学意义(P=0.017),HSP27在淋巴结转移组阳性表达率高于无转移组(P=0.031).CK34βE12和HSP27在甲状腺乳头状癌组织中的表达呈正相关(rs=0.494,P<0.05).结论:HSP27和CK34βE12可能通过调控细胞增殖影响甲状腺乳头状癌的发生发展,两者可作为甲状腺良恶性病变鉴别诊断及评估甲状腺乳头状癌预后的参考指标.
-
面部激素依赖性皮炎皮损中糖皮质激素受体α和β的表达及意义
目的:探讨糖皮质激素受体(GR-α和GR-β)在面部激素依赖性皮炎发病机制中的作用.方法:应用免疫组织化学SP法检测25例临床和病理确诊的面部激素依赖性皮炎患者(A组)、10例面部亚急性湿疹患者(B组)、10例外科手术切取的面部外观正常皮肤(C组)GR-α、GR-β的分布特点和表达强度.结果:GR-α和GR-β主要在阳性细胞的胞浆着色.C组中GR-α阳性颗粒主要表达在表皮基底层.A组和B组中GR-α在表皮全层均有表达,染色较深.C组中GR-β表达主要位于基底层且阳性细胞数相对较少或者无表达,A组和B组与C组GR-β表达基本相似.GR-α、GR-β在皮脂腺、汗腺均有表达.A组患者皮损GR-α表达强度较C组明显增高(Uc=70.0,P=0.014).3组间GR-β的表达差异无统计学意义(Hc=0.856,P=0.652).结论:面部激素依赖性皮炎皮损中GR-α表达增高可能和激素依赖性皮炎的免疫病理过程有关.
