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迷迭香酸对大鼠心肌缺血损伤保护作用机制的探讨
目的 通过对迷迭香酸作用于结扎大鼠左冠状动脉前降支所致心肌缺血模型相关指标的影响,初步探讨迷迭香酸对心肌缺血保护作用的可能机制.方法 取120只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、缺血模型组、硝酸异山梨酯组、迷迭香酸小剂量组、迷迭香酸中剂量组、迷迭香酸高剂量组.结扎冠状动脉前降支造成大鼠急性心肌缺血模型,检测细胞内SOD、MDA量,免疫组织化学法检测心肌细胞bcl-2和bax基因的蛋白表达.结果 与假手术组比较,缺血模型组细胞MDA值升高,SOD值减小；与迷迭香酸组比较,缺血模型组MDA值增加,SOD值降低,bcl-2,bax蛋白表达量增加,bax 表达尤其明显.迷迭香酸各给药组bcl-2,bax蛋白的表达量比假手术组有所增加,但b积明显较缺血模型组低(P＜0.05或P＜0.01).结论 迷迭香酸对大鼠冠脉结扎后引起的心肌缺血损伤的保护作用机制可能与提高氧化酶活性、增强清除自由基能力以及抑制心肌缺血后心肌细胞凋亡的发生有关.
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UPLC-Q/TOF-MS/MS法同时测定丹参川芎嗪注射液中5种酚酸
目的 建立UPLC-Q-TOF-MS/MS法同时测定丹参川芎嗪注射液(丹参、盐酸川芎嗪)中5种酚酸的含有量.方法 该药物甲醇提取液的分析采用ZORBAX Eclipse Plus-C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8 μm);流动相乙腈-0.5％甲酸,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温35℃.结果 丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸、丹酚酸B在各自范围内线性关系良好(R2＞0.999 1),平均加样回收率90.0％～ 101.3％,RSD 1.2％～5.0％.结论 该方法简便可行,灵敏度高,专属性好,可用于丹参川芎嗪注射液的质量控制.
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HPLC法同时测定薄荷配方颗粒中3种成分
目的 建立HPLC法同时测定薄荷配方颗粒中咖啡酸、橙皮苷和迷迭香酸的含有量.方法 该药物50％乙醇提取液的分析采用Wondasil C18色谱柱(4.6 mm × 250 mm,5μm);以0.1％磷酸-乙腈为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;检测波长分别为咖啡酸325 nm、橙皮苷285 nm、迷迭香酸330 nm;柱温30℃.结果 咖啡酸、橙皮苷、迷迭香酸分别在0.012 ～0.119 μg(r=0.999 9)、0.023 ～0.229 μg(r=0.999 9)、0.048～0.483 μg (r=0.999 8)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为98.40％、97.97％、97.64％,RSD分别为1.46％、1.10％、1.63％.结论 7个厂家薄荷配方颗粒中3种成分的含有量差异明显,应加以关注.
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HPLC波长切换法同时测定安神解虑颗粒中4种成分
目的 建立HPLC法同时测定安神解虑颗粒中紫丁香苷、栀子苷、刺五加苷E、迷迭香酸4种有效成分.方法 安神解虑颗粒75％甲醇提取液的分析采用Welch XtimateTM C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm);以乙腈-0.1％磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长分别为265 nm (0～ 25 min),238 nm(25～35 min),220 nm (35～58 min)和330nm (58～88min).结果 紫丁香苷、栀子苷、刺五加苷E、迷迭香酸的进样量分别在0.022 8 ～0.285 μg(r=0.999 5)、0.564～7.050μg(r=0.999 7)、0.074 ～0.925 μg(r=0.999 1)、0.053 ～0.663 μg(r=0.999 2)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为97.6％、97.4％、97.9％、97.3％,RSD分别为0.7％、0.8％、0.9％、1.1％.结论 本方法简便、准确、重复性好,可为安神解虑颗粒的质量标准研究提供参考.
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RP-HPLC法同时测定柴归消癥胶囊中6种成分
目的 建立同时测定柴归消癥胶囊中芍药苷、阿魏酸、甘草苷、橙皮苷、迷迭香酸、甘草酸6种成分的的分析方法.方法 采用Phenomenex Luna 5u C18(2)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.1％磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长237 nm (0～25 min),322 nm (25 ～30.2 min),237 nm(30.2 ～40 min), 284 nm (40 ～48 min),329 nm (48 ～ 65 min),237 nm (65 ～ 85 min).结果 芍药苷、阿魏酸、甘草苷、橙皮苷、迷迭香酸、甘草酸的进样量分别在0.396 8～3.968 μg (r=0.999 3)、0.025 2～0.252 μg (r=0.999 6)、0.1112～1.112 μg(r=0.999 4)、0.566 ～5.66 μg (r=0.999 7)、0.018 6～0.186 μg(r=0.999 5)、0.174～1.74 μg (r=0.999 2)范围内线性关系良好,平均加样回收率分别为97.1％、96.6％、97.6％、97.0％、96.5％、97.0％,RSD分别为0.95％、0.87％、0.88％、0.90％、1.0％、1.2％.结论 本方法简便、准确、重复性好,可有效地控制柴归消瘕胶囊的质量.
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NMR法同时测定注射用丹参多酚酸中的迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B和甘露醇
目的 建立核磁共振(NMR)法同时测定注射用丹参多酚酸中迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B和甘露醇的含有量.方法 采用BRUKER AVANCEⅢ600超导核磁共振波谱仪采集谱图;质子频率为600.23 MHz;3-(三甲基硅烷)丙酸-d4钠盐为内标.结果 迷迭香酸在1.685 ～0.105 mg/mL(r2=0.999 3)、紫草酸在1.235 ～0.077 mg/mL(r2=0.999 4)、丹酚酸B在16.21 ～1.013 mg/mL (r2 =0.999 7)、甘露醇在12.54 ～0.784 mg/mL (r2 =0.999 5)范围内均呈良好的线性关系,加样回收率分别为104.4％、105.6％、104.1％和102.5％,RSD值分别为1.5％、1.7％、2.3％和2.2％.结论 该方法可同时测定注射用丹参多酚酸中的主要化学成分和辅料.
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HPLC法测定复方香薷水中麝香草酚、香荆芥酚、木香烃内酯、去氢木香内酯和迷迭香酸
目的 采用HPLC法测定复方香薷水(皱叶香薷、木香、紫苏叶、歪叶蓝、广藿香、厚朴、豆蔻、生姜、甘草)中麝香草酚、香荆芥酚、木香烃内酯、去氢木香内酯和迷迭香酸的含有量.方法 Hypersil C18色谱柱(4.6mm ×250 mm,5μm);体积流量1.0 mL/min.测定麝香草酚和香荆芥酚的流动相为乙腈-2％冰醋酸溶液(65∶35),检测波长275 nm.测定木香烃内酯和去氢木香内酯的流动相A为乙腈,流动相B为0.4％磷酸溶液,检测波长227 nm.测定迷迭香酸的流动相为甲醇-0.5％磷酸水溶液(35∶65),检测波长330 nm.结果 麝香草酚和香荆芥酚分别在0.035 8～0.7160 μg (r=0.9994)、0.071 2 ～1.424 0μg(r=0.999 2)范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为97.86％、97.41％,RSD (n=6)分别为1.19％、0.95％.木香烃内酯和去氢木香内酯分别在0.032 2 ～0.644 0 μg (r=0.9995)、0.075 2 ～1.504 0μg (r=0.9993)范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为97.47％、98.34％,RSD (n=6)分别为1.28％、1.07％.迷迭香酸在0.048 6 ～0.9720 μg (r=0.999 4)范围内进样量与峰面积线性关系良好,平均加样回收率为97.42％,RSD (n=6)为1.04％.结论 该方法测定结果准确、灵敏、重复性好,可用于复方香薷水质量控制.
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复方桂苓灌肠剂质量控制研究
目的 建立复方桂苓灌肠剂质量控制方法.方法 根据处方组成,采用薄层色谱法对方中红藤、茯苓、赤芍、夏枯草、柴胡进行定性鉴别,高效液相法定量测定夏枯草中迷迭香酸、丹皮中丹皮酚和赤芍中芍药苷.结果 红藤、茯苓、赤芍、夏枯草、柴胡定性鉴别分离度好,专属性强.迷迭香酸平均加样回收率为92.72％,RSD为3.65％.丹皮酚平均加样回收率为90.46％,RSD为2.9％(n=6),芍药苷平均加样回收率为93.69％,RSD为3.23％(n=6).结论 该方法简便,准确,可靠.可用于复方桂苓灌肠剂的质量控制.
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RP-HPLC法同时测定夏桑菊颗粒中绿原酸、异迷迭香酸苷、迷迭香酸和蒙花苷
目的 建立RP-HPLC法同时测定夏桑菊颗粒(夏枯草、桑叶、野菊花)中绿原酸、异迷迭香酸苷、迷迭香酸和蒙花苷4种活性成分的方法.方法 采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-1.0％醋酸水溶液,采用梯度洗脱,检测波长为320 nm,体积流量1.0 mL/min,柱温30℃,进样体积10 μL.结果 绿原酸、异迷迭香酸苷、迷迭香酸和蒙花苷的线性范围分别为0.038 9～0.777 1 μg、0.006 7～4.200 μg、0.048 0～0.960 0 μg和0.038 6 ～0.771 4μg (0.999 2＜r＜0.999 9),平均回收率在98.35％和98.62％之间.结论 该法检测效率高,专属性强,重复性好,可用于夏桑菊颗粒中绿原酸、异迷迭香酸苷、迷迭香酸和蒙花苷的定量测定,可作为该制剂的质量控制方法之一.
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夏桑菊颗粒质量标准研究
目的 建立夏桑菊颗粒(夏枯草、桑叶、野菊花)的质量标准.方法 采用薄层色谱法(TLC)对夏桑菊颗粒中的迷迭香酸和蒙花苷进行定性鉴别；采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)对迷迭香酸和蒙花苷分别进行定量测定,色谱柱Agilent Eclipse XDB-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm),体积流量1.0 mL/min,柱温30℃,进样体积10μL,检测波长329 nm,流动相分别为20％乙腈-80％水(含1.0％醋酸)和25％乙腈-75％水(0.5％磷酸)等度洗脱.结果 薄层鉴别均斑点清晰,阴性对照元干扰；定量测定中迷选香酸进样在0.22 ～8.80 μg范围内,与峰面积线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为101.08％,RSD为1.75％.蒙花苷在0.101～2.02μg范围内,与峰面积线性关系良好(r=0.9996),平均回收率为102.01％,RSD为0.48％.结论 所建立方法操作简单、专属性和重复性良好,可作为该制剂的质量控制方法之一.
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UFLC法同时测定参芎葡萄糖注射液中6种主要成分
目的 建立超快速液相色谱(UFLC)同时测定参芎葡萄糖注射液(丹参、盐酸川芎嗪)中丹参素、盐酸川芎嗪、原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A的方法.方法 采用Diamonsil C1s色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈-0.05％磷酸为流动相进行梯度洗脱,体积流量为1mL/min,检测波长220nm,柱温40℃.结果 6种被测成分的线性关系良好(r＞0.999),精密度、重复性、稳定性的RSD都低于3％,平均加样回收率在95.19％～101.02％,RSD在0.92％～2.70％(n=6).结论 本方法简便、快速、准确,能有效控制参芎葡萄糖注射液的质量.
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HPLC波长切换法同时测定消炎灵片中异嗪皮啶、迷迭香酸和苦玄参苷ⅠA
目的 建立同时测定消炎灵片(苦玄参、肿节风、千里光、毛冬青、甘草)中异嗪皮啶、迷迭香酸和苦玄参苷ⅠA含有量的液相色谱法.方法 采用高效液相色谱波长切换法同时测定消炎灵片中异秦皮啶、迷迭香酸和苦玄参苷ⅠA.色谱条件为Agilent ZORBAX SB C18(250 mm×4.6 mm,5μm)柱；以乙腈(A)-0.1％磷酸溶液(B)为流动相进行梯度洗脱；体积流量为1.0 mL／min;检测波长前25 min为330 nn,25 min后为264 nm.结果 异嗪皮啶在0.018 ～0.163μg范围内线性关系良好(r=0.9999,n=6),平均加样回收率为99.8％,RSD为1.8％(n=6)；迷迭香酸在0.027 ～0.244μg范围内线性关系良好(r=0.999 8,n=6),平均加样回收率为99.6％,RSD为L.1％(n=6)；苦玄参苷ⅠA在0.271 -2.435 μg范围内线性关系良好(r=0.999 9,n=6),平均加样回收率为99.6％,RSD为1.4％(n=6).结论 本方法可同时测定消炎灵片中异嗪皮啶、迷迭香酸和苦玄参苷ⅠA,具有快速、简便的特点.
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高效液相二极管阵列检测法同时测定丹参粉针剂中4种水溶性成分的含量
目的:建立高效液相二极管阵列检测法同时测定丹参粉针剂中丹参素、原儿茶酸、原儿茶醛和迷迭香酸4种水溶性成分的含量.方法:采用Diamonsil TM C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以5%冰醋酸和甲醇为流动相进行梯度洗脱,柱温:30℃,流速为1.0 mL/min,检测波长为298nm.结果:在此色谱条件下4种水溶性成分可完全分离.丹参素、原儿茶酸、原儿茶醛和迷迭香酸的线性范围分别为0.164 4～2.630μg(r=0.999 9),0.007 420～0.118 7 μg(r=1.000 0),0.008 770～0.140 3μg(r=1.000 0),0.019 44～0.31l 0μg(r=1.000 0).平均回收率丹参素为101.6%(RSD为1.1%),原儿茶酸为102.2%(RSD为1.8%),原儿茶醛为101.3%(RSD为2.0%),迷迭香酸为100.9%(RSD为1.6%).结论:本方法快速简便,4组分分离良好,可用于丹参粉针剂的质量控制.
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RP-HPLC法测定橘红丸中甘草苷、柚皮苷、橙皮苷和迷迭香酸
目的 建立同时检测橘红丸(化橘红、陈皮、甘草、炒紫苏子等)中甘草苷、柚皮苷、橙皮苷和迷迭香酸的测定方法.方法 采用RP-HPLC法.C18色谱柱；甲醇-0.3％磷酸水溶液为流动相；体积流量1.0 mL/min；检测波长284 nm.结果 根据回归方程,4种成分线性范围分别为甘草苷2.16～64.8 μg/mL,R2=0.999 6；柚皮苷7.59 ～ 227.7 μg/mL,R2=0.999 2；橙皮苷7.54～226.62 μg/mL,R2 =0.999 5；迷迭香酸1.704 ～51.12 μg/mL,R2=0.998 9.平均回收率分别为甘草苷102.1％,RSD 1.43％ (n =6),柚皮苷100.8％,RSD 0.71％ (n =6),橙皮苷98.7％,RSD 1.44％(n=6),迷迭香酸99.6％,RSD 0.82％(n=6).结论 该方法经济适用,操作简便、准确,重复性好,可用于橘红丸的质量控制.
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HPLC切换波长法同时测定冬凌草片中迷迭香酸和冬凌草甲素含量
目的:建立冬凌草片中迷迭香酸和冬凌草甲素的含量测定方法,为冬凌草片质量标准的研究提供科学依据.方法:采用高效液相色谱切换波长法同时测定冬凌草片中迷迭香酸和冬凌草甲素的含量.色谱条件为phenomsil C18(150 mm×4.6 mm,5 μm)柱,流动相:甲醇-0.3%磷酸水溶液(40:60);检测波长:前21 min为329 nm,21 min后为238 nm.结果:此方法线性良好,迷迭香酸和冬凌草甲素的平均加样回收率分别为97.8%,96.7%;RSD分别为1.9%.2.3%.结论:本方法精密度高,分离度良好,可用于测定冬凌草片中迷迭香酸和冬凌草甲素的含量.
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紫苏提取物对D-半乳糖衰老小鼠学习记忆障碍的改善作用
目的 观察紫苏乙酸乙酯提取物对D-半乳糖衰老模型小鼠学习记忆障碍的改善作用.方法 90只小鼠颈背部皮下注射D-半乳糖(1 g/kg)连续6周,建立亚急性衰老模型.造模的同时,各给药组分别灌胃相应药物(紫苏提取物:150,300,600 mg/kg;迷迭香酸:55,110,220 mg/kg;脑复康阳性对照:500 mg/kg).42 d后采用跳台、Y迷宫、Morris水迷宫法测试小鼠学习记忆能力,检测小鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮(N0)、一氧化氮合酶(NOS)、乙酰胆碱酯酶(AChE),对海马CA1区神经细胞形态学观察.结果 紫苏提取物和迷迭香酸能明显改善D-半乳糖所致的衰老体征和自发活动减少,降低跳台错误次数,延长错误潜伏期(P＜0.05,P＜0.01),减少达到学会标准的训练次数(P＜0.05);缩短逃避潜伏期,延长小鼠在安全台所在象限的游泳时间和游程,增加安全台穿越次数(P ＜0.05,P＜0.01);并能有效地提高衰老小鼠脑SOD和GSH-Px(P ＜0.05,P＜0.01),降低MDA、NO、NOS、AchE(P＜0.05,P＜0.01),呈量效依赖趋势,还能改善海马CA1区神经细胞受损状态.结论 紫苏提取物和迷迭香酸能改善D-半乳糖衰老模型小鼠学习记忆障碍.其机制可能与清除自由基,抑制AchE活性,减少乙酰胆碱( Ach)水解,减轻NO对神经细胞的毒性有关.
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迷迭香酸对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用
目的:探讨迷迭香酸对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用及可能机制.方法:腹腔注射四氯化碳复制小鼠急性肝损伤模型,测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性、甘油三酯(TG)含量、肝脏指数和肝匀浆丙二醛(MDA)含量,并通过肝组织病理切片观察肝脏病理改变.结果:迷迭香酸能显著降低小鼠血清中ALT、AST活性、TG含量以及肝匀浆MDA含量,对肝重量增大有抑制作用,使肝组织变性明显减轻.结论:迷迭香酸对四氯化碳致小鼠急性肝损伤具有显著的保护作用,其机制可能与其抗氧化作用有关.
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基于调节解离状态的丹参酚酸纳滤分离机制
目的 通过调节成分解离状态,研究丹参酚酸的纳滤分离机制.方法 以原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B截留率为指标,酸碱滴定法计算三者pKa.改变溶液酸碱度,调节游离-解离比例和溶质浓度,考察成分解离状态、浓度与纳滤分离行为的相关性.结果 原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B的pKa分别为7.56、4.01、2.77,当溶液pH为1.8时,三者均以游离态分子存在,纳滤分离以分子筛分为主;随着pH升高,溶质逐步解离,呈现出以Donnan效应为主的纳滤分离机制.同时,受溶解-扩散效应影响,降低溶质浓度可提高其截留率.结论 丹参酚酸的纳滤分离机制是由分子筛分、Donnan效应等多种作用综合的结果,在明确溶质解离状态的前提下,将有助于提升纳滤技术在中药产业中的应用.
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HPLC法测定纤花线纹香茶菜中异夏佛塔苷、夏佛塔苷和迷迭香酸
目的 建立反相高效液相色谱法测定纤花线纹香茶菜中异夏佛塔苷、夏佛塔苷和迷迭香酸的量.方法 采用HPLC法分析,实验条件为Dikma-C18柱,甲醇-0.1％磷酸水梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长270 nm,柱温为室温.结果 异夏佛塔苷、夏佛塔苷和迷迭香酸的平均加样回收率分别为99.4％、99.9％、95.8％,RSD分别为3.46％、3.40％、2.55％.结论 该法稳定、可靠、简便,适于纤花线纹香茶菜的质量控制.
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HPLC波长切换法同时测定丹参酚酸提取物中5种成分
目的 建立高效液相色谱法测定丹参酚酸提取物中丹参素钠、原儿茶醛、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B.方法 采用Phenomsil-C18(250mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.5％磷酸水溶液,梯度洗脱,体积流量1.0mL/min,检测波长为280 nm(0～50 min)、330 nm(50 ～ 68 min)、286nm (68 ～90 min),柱温30℃.结果 丹参素钠、原儿茶醛、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B的进样量分别在0.033 96～0.339 6μg、0.016 60～0.166 0μg、0.092 4～0.924 μg、0.084 7 ～ 0.847μg、1.300～13.00μg范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系；加样回收率(n=6)均在99.2％～100.2％,RSD均小于2.3％.7个来源的丹参酚酸提取物中5种物质的含有量有一定差异.结论 本法快速、准确,重复性好,可更好地控制丹参酚酸提取物的质量.
