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昆明山海棠预防小鼠急性移植物抗宿主病的实验研究
目的 观察昆明山海棠(THH)对急性移植物抗宿主病(aGVHD)小鼠血浆IFN-γ、IL-4、IL-10浓度的影响,探讨THH预防aGVHD的可能机制.方法 BALB/c受鼠清髓性预处理后输注C57BL/6供鼠的骨髓细胞和脾细胞混合液,建立aGVHD模型.实验分为4组:对照组(A组)、环孢素(CsA)预防组(B组)、THH预防组(C组)、TH和CsA联合预防组(D组).观察aGVHD发生情况和受鼠嵌合体植入情况,ELISA法检测各组受鼠血浆IFNγ、IL-4、IL-10浓度.结果 ①B、C、D组受鼠血浆IFN-γ的浓度明显低于A组(P＜0.05),D组下降明显;IL-4浓度无明显变化;IL-10浓度均高于A组(P＜0.05),D组上升明显;②A组受鼠移植后中位生存时间为9 d,B、C、D组移植后中位生存时间均＞30 d,较A组明显延长(P＜0.05);③A组受鼠均有典型翘毛、弓背、腹泻、体重减轻表现,20 d内全部死于GVHD;B、C、D组仅有翘毛、弓背表现,腹泻、体重减轻不明显;B、C组病理改变皮肤无异常,仅肝脏或小肠有少量淋巴细胞浸润;D组存活小鼠病理检查未见明显异常,均比A组轻;④B、C、D组受鼠+30天骨髓细胞表面H-2b分子百分率分别为(99.18±0.58)%、(97.68±0.59)%、(99.15±0.11)%.结论 THH可以调节aGVHD小鼠细胞因子分泌,可用于aGVHD的预防,小剂量THH与CsA联合应用有协同作用,能减少CsA的用量.
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紫荆皮、紫金皮、昆明山海棠镇痛作用比较研究
[目的]观察紫荆皮、紫金皮、昆明山海棠外用的镇痛作用,为指导临床合理用药和开发新药提供科学依据.[方法]采用小鼠醋酸扭体法、小鼠热板法和大鼠热辐射法比较3种药物外用的镇痛效果.[结果]紫荆皮、紫金皮、昆明山海棠均能延长热板法小鼠舔足时间.显著减少醋酸所致的小鼠扭体次数,镇痛率可达30％以上,显著提高大鼠痛阈值.[结论]紫荆皮、紫金皮、昆明山海棠均具有明显的镇痛作用,其中以昆明山海棠效果佳.
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昆明山海棠为主辨证治疗寻常型银屑病体会
寻常型银屑病是世界范围内重点研究的疑难疾病.近年笔者以云南独特中草药昆明山海棠(掉毛草)为主药,辨证治疗寻常型银屑病取得良好疗效,总结如下.
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雷公藤内酯醇治疗类风湿关节炎分子机制的研究进展
雷公藤内酯醇(triptolide),又称雷公藤内酯、雷公藤甲素,是从卫矛科雷公藤属雷公藤(tripterygium wilfordii Hook.F)、昆明山海棠[T.Hypoglaucum(Levl)Hukeda,名黑麦]等物质中提取得到的二萜内酯化合物.
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火把花根对实验性肾炎大鼠肾脏病理改变的影响
目的:观察中药火把花根对肾炎大鼠模型肾脏病理改变的影响,评价火把花根对肾炎的治疗作用.方法:用兔抗大鼠胸腺细胞免疫血清(ATS),复制大鼠系膜增生性肾炎模型即抗-Thy1肾炎,将实验动物分为3组:对照组、模型组及火把花根治疗组.于治疗第1、2及4周末,各组动物留尿测定尿蛋白,并取肾组织进行常规肾脏病理检查,免疫组织化学方法测定肾小球系膜区纤维连接蛋白(FN)表达,透视电镜观察肾脏超微病理变化,尤其是足细胞变化.结果:实验第1周末模型组尿蛋白明显增多,第4周末仍显著高于对照组(P＜0.01).治疗组在各时间点尿蛋白量均较模型组显著下降(P＜0.01).肾脏病理学检查见模型组肾小球系膜细胞增生,基质增多,治疗组系膜增生明显减轻;免疫组织化学染色表明见模型组肾小球系膜基质成分FN蛋白表达明显增高,治疗组FN蛋白表达较模型组显著下降(P＜0.01).超微病理检查见模型组肾小球足细胞肿胀,大部分节段足突弥漫性融合,系膜基质轻-中度增生,治疗组足细胞无明显肿胀,大部分节段足突排列整齐,少数节段足突部分融合,系膜基质无明显增生.结论:抗-Thy1肾炎模型肾小球存在足细胞病变,主要表现为足细胞肿胀及足突融合,足细胞病变可能是引起蛋白尿的原因之一;火把花根可能部分通过改善足细胞病变而减少蛋白尿;火把花根可以改善其肾脏病理变化,延缓肾硬化的发展.
关键词： 系膜增生性肾小球肾炎 纤维连接蛋白 火把花根 昆明山海棠 足细胞 -
双藤汤醇提取物对寒痹型胶原诱导型关节炎大鼠凋亡调节作用
目的:观察双藤汤对寒痹型胶原诱导型关节炎大鼠抗凋亡作用.方法:随机选取雄性SD大鼠分为空白组、模型组、双藤汤60、40、20 g/kg组、青藤碱28 mg/kg组,每组10只.除空白组外,其余各组构建模型.连续给药4周后测量动物足跖厚度;HE染色分析脾脏病理变化;免疫组化法检测脾脏Bax和Bcl-2蛋白表达,Western-blotting检测脾脏Caspase-1,Caspase-3和CytC蛋白表达.结果:与模型组比较,空白组、双藤汤60g/kg和40 g/kg组和青藤碱28 mg/kg组足跖部肿胀程度下降;脾脏病理切片显示空白组、双藤汤60 g/kg和40 g/kg组和青藤碱28 mg/kg抑制脾小体萎缩减少并促进其发育;免疫组织法显示双藤汤60、40、20 g/kg组、青藤碱28mg/kg组Bax蛋白表达下降,Bcl-2蛋白表达上调;蛋白印迹显示双藤汤60、40、20 g/kg组、青藤碱28 mg/kg组Caspase-1、Caspase-3、CytC蛋白表达受到不同程度抑制.结论:双藤汤可能通过调节凋亡途径中Bax、Bcl-2、Caspase-1、Caspase-3、CytC蛋白表达起到对寒痹型胶原诱导关节炎大鼠炎症的抑制作用.
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大剂量昆明山海棠致大鼠睾丸毒性损害的可逆性研究
目的:探讨大剂量昆明山海棠对大鼠睾丸的毒性损害及其可逆性.方法:36只成熟雄性SD大鼠,随机分成2组,每组18只:对照组喂服生理盐水10 mL·kg-1·d-1,给药组喂服昆明山海棠22.5 g·kg-·d-1.连续60d后,随机处死半数大鼠,取材.余下大鼠恢复饲养72 d后,处死取材.检测睾丸系数、睾丸体积、精子密度、形态、活力等.光镜观察睾丸组织的病理变化.结果:给药60d,与对照组比较,给药组睾丸系数、精子密度显著下降(P＜0.01).给药组精子形态异常,活动力丧失,光镜下睾丸组织严重损伤.停药72 d后,睾丸毒性损害无恢复.结论:大剂量昆明山海棠具有明显的睾丸毒性,且毒性损害难以恢复.
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川续断拮抗昆明山海棠对大鼠生殖损伤作用的研究
目的:观察川续断对昆明山海棠致大鼠睾丸毒性损伤作用的影响.方法:54只成熟雄性SD大鼠,随机分成3组,每组18只:空白对照组喂服生理盐水10 mL· kg-1·d-1,中药组喂服川续断水煎剂2.5 g·kg-1·d-1加昆明山海棠水煎剂7.5 g·kg-1 ·d-1,模型组喂服昆明山海棠水煎剂7.5 g· kg-1·d-1.连续60d后,随机处死半数大鼠,取材.余下大鼠恢复饲养72 d后,处死取材.检测睾丸系数、睾丸体积、精子密度、形态、活力等.光镜观察睾丸组织的病理变化.结果:给药60 d,与模型组比较,中药组睾丸系数、精子密度均有显著提高(P＜O.01).停药72 d后,中药组精子活动力恢复,运动活跃,光镜下睾丸组织几乎无病理损伤；模型组精子形态异常、活力丧失,光镜下睾丸组织损伤,未见恢复迹象.结论:一定条件下,川续断能够拮抗昆明山海棠对雄性大鼠的生殖损伤作用.
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昆明山海棠与类风湿关节炎滑膜细胞体外增殖和凋亡
背景:昆明山海棠应用于类风湿关节炎治疗已被证实有确切疗效,但对于其作用机制目前尚不明确.目的:验证昆明山海棠对类风湿关节炎滑膜巨噬样细胞和成纤维样细胞体外增殖活性及对其凋亡影响,分析其剂量效应关系.设计、时间及地点:细胞学体外分组对照实验,于2003-08/2007-06在汕头大学医学院第一附属医院中心实验室和南方医科大学细胞生物实验室完成.材料:类风湿关节炎6例及正常滑膜组织3例,来源于汕头大学医学院第一附属医院骨科和南方医院脊柱骨病科患者术中获得的标本.昆明山海棠制备水提取液,含生药0.667 g/mL..方法:收集获得的滑膜组织,通过消化法获得原代类风湿关节炎及正常滑膜细胞,第2-4代细胞用免疫磁珠法筛选滑膜CD68~+细胞和CD68~-细胞,在接种72 h后加入实验各组分别在培养液中加入终体积分数分别为5,10,20 mL/L的昆明山海棠药液处理24 h和48 h.同时设立不加药物的阴性对照及不加细胞空白对照.主要观察指标:相差倒置显微镜、扫描电镜观察细胞形态,用MTT法测定细胞增殖情况,流式细胞仪检测和TUNEL.法检测细胞凋亡.结果:分选后滑膜CD68~-细胞为成纤维样细胞,滑膜CD68~+细胞为滑膜巨噬样细胞.施予干预因素后,各组有部分细胞体积缩小,胞膜皱缩,微绒毛和伪足减少或消失,部分细胞可见团块脱落形成凋亡小体.当昆明山海棠体积分数为2%时,各组细胞均有不同程度抑制,显示昆明山海棠有细胞毒性,对类风湿关节炎滑膜CD68~-、CD68~+细胞的抑制效应和诱导细胞效应强于同种正常滑膜细胞(P<0.01).在药物体积分数为1%时,对类风湿关节炎滑膜细胞有明显抑制效应(P<0.01).昆明山海棠对诱导类风湿关节炎滑膜细胞凋亡作用有明显时间依赖性和剂量依赖性,且凋亡率与相同条件下的抑制率表现出较好的直线相关关系(r=0.497,P<0.01).结论:昆明山海棠对于类风湿关节炎滑膜巨噬样细胞和滑膜成纤维样细胞有诱导凋亡和明显抑制异常增殖作用.在一定浓度下,昆明山海棠对于正常滑膜细胞毒性较小且对类风湿关节炎滑膜细胞的有较明显抑制异常增殖和诱导细胞凋亡的效应.
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昆明山海棠对胶原性关节炎大鼠免疫功能的干预作用及其机制
目的:观察昆明山海棠(THH)对胶原性关节炎(CIA)大鼠免疫功能的干预作用,探讨其可能的作用机制.方法:SD大鼠50只,随机分为正常组(n=10)和CIA模型制备组(n=40),用鸡Ⅱ型胶原(CⅡ)诱导大鼠制备CIA模型.再将造模成功的36只大鼠随机分为模型组、地塞米松组及200和400 mg·kg-1THH干预组.在实验过程中观察各组大鼠足爪肿胀度和关节炎指数(AI)等变化.实验第35天,采用ELISA法检测血清中抗CⅡ抗体水平;MTT法检测脾T细胞和B细胞增殖活性;ELSIA法检测脾组织白细胞介素12(IL-12)、IL 23和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;取各组大鼠足爪组织行HE染色,观察组织病理学变化.结果:与正常组比较,模型组大鼠AI明显上升(P＜0.01),血清抗CⅡ抗体水平、脾T细胞和B细胞增殖活性、脾组织中IL-12、IL-23和TNF-α水平明显升高(P＜0.01);大鼠足爪皮下组织细胞排列紊乱且有大量炎性细胞浸润及血管增生.与模型组比较,400 mg·kg1THH干预组大鼠一般状况得到明显改善,足爪肿胀度和AI明显下降(P＜0.01),脾T细胞和B细胞增殖活性明显下降(P＜0.01),血清中抗CⅡ抗体水平明显降低(P＜0.01),脾组织中IL-23、TNF-α和IL-12水平均明显降低(P＜0.01),大鼠足爪组织病理学改变明显减轻.200 mg· kg-1 THH组大鼠上述指标无明显变化(P＞0.05).结论:高剂量(400mg·kg-1)THH对CIA大鼠关节炎有明显抑制作用,其机制可能是THH能明显抑制T和B淋巴细胞的增殖反应,并抑制脾组织中IL-23、TNF-α和IL-12和血清中抗CⅡ抗体水平,进而明显改善大鼠足爪组织病理学变化.
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中西医结合治疗口腔扁平苔藓43例临床观察
目的:观察局部注射醋酸泼尼松龙悬浊液,联合使用昆明山海棠与局部注射醋酸泼尼松龙悬浊液治疗口腔扁平苔癣的临床效果,为评价治疗OLP的效果提供参考.方法:治疗组口服昆明山海与局部注射醋酸泼尼松龙悬浊液43例病;对照组局部注射醋酸泼尼松龙悬浊液40例,观察比较两组患者治疗前与治疗后的痊愈率及复发率.结果:随访83例治疗四个疗程后治疗组痊愈42例,3年后复发8例,对照组痊愈34例,3年后复发10例,显示对照组痊愈率低于治疗组,复发率高于治疗组.结论:联合使用昆明山海棠与局部注射醋酸泼尼松龙悬浊液治疗口腔扁平苔癣(OLP)有较高的治愈率,有临床应用价值.
关键词： 口腔扁平苔癣(OLP) 联合使用 昆明山海棠 醋酸泼尼松龙 -
昆明山海棠对CIA大鼠IL-6、IL-17及IFN-γ含量的影响
目的：探讨昆明山海棠(tripterygium hypoglaucum hutch，THH)对胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis，CIA)大鼠模型血清中细胞因子IL-6、IL-17及IFN-γ含量影响。方法：以牛Ⅱ型胶原(bovine collagen typeⅡ，CⅡ)和不完全弗氏佐剂免疫大鼠，建立大鼠CIA动物模型。设正常对照组、CIA动物模型组、糖皮质激素阳性对照组和昆明山海棠治疗组，每组各10只。收集大鼠血清，采用ELISA测定IL-6、IL-17及IFN-γ含量。结果：糖皮质激素阳性对照组和昆明山海棠治疗组的IL-6、IL-17及IFN-γ含量均明显低于CIA动物模型组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论：昆明山海棠能够有效抑制胶原诱导大鼠关节炎的免疫反应，对CIA大鼠模型有积极的治疗作用。
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类风湿性关节炎大鼠模型在昆明山海棠作用下关节炎指数的评分改变
目的：探讨昆明山海棠(THH)对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型关节炎指数(AI)评分的影响。方法：建立大鼠CIA动物模型，共选40只Wistar大鼠，设空白对照组、CIA模型组、地塞米松组和THH组，各10只。在实验因素干预后对各组大鼠AI评分并进行比较。结果：在造模后1 d，CIA模型组、地塞米松组和昆明山海棠组的AI评分均明显高于空白对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，说明大鼠造模成功；在治疗后1 d，昆明山海棠组和地塞米松、对照组的AI值均明显低于CIA模型组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论：昆明山海棠对CIA大鼠模型有积极的治疗作用。
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昆明山海棠对胶原诱导型关节炎大鼠的作用及可能机制
探讨昆明山海棠(THH)对胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠的作用及可能机制.取60只大鼠随机分6组,建立CIA大鼠模型,分别采用不同剂量的THH每天灌胃1次,连续30 d.动态观察关节炎指数(AI)及关节的病理改变,用RT-PCR及免疫组化法分别检测HIF-1α mRNA及其蛋白的表达.结果显示,THH可明显抑制CIA大鼠的足爪肿胀,减轻滑膜增殖及炎症反应,降低HIF-1α表达,其中以中剂量THH的治疗效果佳.以上结果表明THH治疗CIA大鼠具有明显疗效,其作用机制可能与降低外周血以及滑膜组织内的HIF-1α的表达有关.
关键词： 昆明山海棠 Ⅱ型胶原诱导型关节炎 大鼠 机制 -
昆明山海棠治疗糜烂型口腔扁平苔藓25例报道
目前临床上对糜烂型口腔扁平苔藓(OLP)的治疗尚无理想方法,复发率很高.昆明山海棠具有激素样作用,是较强的免疫抑制剂,可与激素合并用药,或逐渐减少激素用量而达到治疗目的[1].本文介绍昆明山海棠分别与确炎舒松、中药方剂和左旋咪唑合并治疗25例糜烂型OLP的经验.1 病例和方法1.1 病例 1996年2月～1998年6月口腔门诊糜烂型OLP病人25例,男7例,女18例,年龄34～57岁,病程6月～10a.糜烂充血面积至少有一处1.5cm2以上,复发间隔时间平均(4±1)周.发病期间无受孕及需生育者.6周内未接受免疫治疗.
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复方倍他米松联合昆明山海棠治疗口腔扁平苔藓的临床效果
扁平苔藓是一种原因不明的非感染性疾患,是口腔黏膜病中除复发性口疮外的多见病,是一种典型的慢性疾病,时发时愈,一般药物治疗效果欠佳[1].作者采用复方倍他米松联合昆明山海棠治疗口腔扁平苔藓,取得了较好的疗效,现报告如下.1 资料与方法1.1 一般资料选取2005-2011年在本科门诊就诊的口腔扁平苔藓患者74例,其中男26例,女48例,年龄24～69岁,病程3个月～10年.按照顺序编号分为对照组和治疗组,每组37例.
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昆明山海棠治疗寻常疣和尖锐湿疣
昆明山海棠片,常用来治疗风湿性类风湿性关节炎等,本品有较强的免疫抑制作用[1].在一个偶然的机会,使用昆明山海棠片治愈一例经数十次物理治疗无效的双手寻常疣患者.受启发试用于难治的寻常疣和尖锐湿疣取得满意疗效,报告如下.1一般资料:寻常疣12例,男2例,女10例,年龄14～49岁,病程长2年,短2月.其中手掌指疣2例,足跖疣7例,膝部疣1例,手掌并足跖疣1例,鼻部疣1例.尖锐湿疣71例,男28例,女43例,年龄17～58岁,病程长半年短10天.皮损分布:男性龟头包皮尿道口,女性外阴,男女肛周.皮损范围在1cm2～12cm2.部分病例经病理诊断,其中女性巨尖锐湿疣1例(见照片1,2).``
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昆明山海棠对人单核细胞TNFα、IL－8及基因表达的影响
应用体外细胞培养方法、ELISA及RT-PCR技术,观察昆明山海棠对健康人外周血单核细胞IL-8、TNFα释放及IL-8mRNA表达的影响.结果表明昆明山海棠(0.2mg/mL～1mg/mL)可抑制脂多糖(LPS)诱导的外周血单核细胞IL-8、TNFα释放及IL-8mRNA表达,提示昆明山海棠可从转录水平抑制细胞因子表达,从而实现其抗炎机制.
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昆明山海棠抗接触变应性光皮炎的研究
目的探讨昆明山海棠抗光变态反应的药效学和药理学.方法以氯丙嗪为光敏剂,在长波紫外线(UVA)的作用下建立起BALB/c小鼠的光变态反应动物模型,灌胃给药,测定小鼠耳部的肿胀程度差、重量差及真皮内浸润的单一核细胞数来判断各组药物的药效学;采用免疫组化测定小鼠皮损处角质形成细胞、成纤维细胞及血管内皮细胞的细胞间黏附分子1(ICAM-1)的表达,用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清中干扰素-γ(IFN-y)水平,以阐明昆明山海棠的作用.结果昆明山海棠合剂组的左耳激发前后的厚度差、激发后左右耳的厚度差及组织块的重量差、局部浸润的单一核细胞均小于生理盐水对照(P＜0.01),且小于昆明山海棠单剂组(P＜0.05);昆明山海棠合剂组的皮损中ICAM-1和血清IFN-γ明显低于生理盐水对照组(P＜0.05).结论昆明山海棠合剂组有显著的抗光变态反应作用,其作用比昆明山海棠单剂强,作用机制可能是抑制淋巴细胞IFN-γ的分泌和表皮真皮内ICAM-1的表达,从而减少局部淋巴细胞的浸润,减轻变态反应.
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昆明山海棠提取物预防急性移植物抗宿主病的实验研究
目的 观察昆明山海棠(THH)提取物在急性移植物抗宿主病(aGVHD)中的作用及其可能的作用机制.方法 建立aGVHD模型,BALB/c受鼠清髓性预处理后分别用生理盐水、环孢素A(CsA)、THH及CsA+THH混合物灌胃.观察移植后受鼠aGVHD、生存时间、CIM+/CD8+比率、CD4+ CD25+ T细胞比率及脾细胞Foxp3 mRNA水平.结果 生理盐水组出现典型aGVHD,20天内全部死亡.其余3组aGVHD临床、病理表现及生存时间均改善,组间无差异;CD4+/CD8+比率、受鼠CIM+ CD25+ T细胞比率及脾Foxp3 mRNA表达较生理盐水组升高,以联用组明显.结论 THH可减轻小鼠aGVHD,延长其生存时间.机制可能与增加CD4+ CD25+ T细胞比率,上调Foxp3 mRNA表达,调节CD4+/CD8+比率有关.THH和小剂量CsA联合有协同作用.
