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血清肿瘤标志及热休克蛋白60联合检测对胃癌早期诊断的价值
目的:探讨血清肿瘤相关抗原CA199、CA242、CA724及HSP60的含量与胃癌的关系.方法:采用电化学发光法、放射免疫法及酶联免疫法分别对63例胃癌患者血清CA199、CA242、CA724及HSP60水平进行检测,并与30例慢性萎缩性胃炎伴重度不典型增生(CAGD)、30例正常对照组比较,分析其与胃癌恶性程度、转移和临床分期的关系.结果:胃癌患者血清CA199、CA242、CA724及HSP60水平均明显高于CAGD与正常对照组(P<0.01),血清CA199、CA242、CA724及HSP60的阳性率与胃癌恶性程度、转移和临床分期有关(P<0.05),4项联合检测敏感度及特异度分别可达85.6%和92.3%,4项指标联合检测可明显提高胃癌诊断的敏感度及特异度.结论:胃癌患者血清CA199、CA242、CA724及HSP60水平是胃癌发生、发展的重要因素,4项联合检测对胃癌患者诊断、治疗和预后判断等具有重要意义.
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缺氧对人视网膜色素上皮细胞蛋白质表达的影响
目的 为揭示缺氧对视网膜色素上皮(RPE)细胞的影响及与脉络膜新生血管(CNV)生成的关系提供实验依据.方法 实验研究.分别从对数生长期的正常及缺氧状态人RPE细胞中提取蛋白样本后行等电聚焦电泳(IEF),随后采用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行第二次分离.采用考马斯亮蓝染色法对凝胶进行显色固定,Image Master 2D Elite软件行分析配比,筛选出正常和缺氧RPE细胞表达明显差异的蛋白质斑点,随机选取差异斑点进行质谱分析,数据经蛋白质组数据库检索得出蒡异表达蛋白.结果 正常组分离蛋白斑点578个,组内匹配率92.90%;缺氧组559个,匹配率91.41%;两组间蛋白斑点匹配率为85.47%.发现volume值改变超过2倍的点共92个,其中32个点表达卜调,60个点表达下调.选择7个蛋白斑点行质谱分析,成功鉴定5种差异表达蛋白质(3个斑点为相同的蛋白):表达上调为热休克蛋白70、热休克蛋白60;表达下调的为β肌动蛋白、β微管蛋白以及过氧化还原蛋白3.结论 缺氧状态下RPE细胞表达差异蛋白可引起细胞应激能力明显增强,而主要细胞骨架蛋白下调,细胞维持形态、保持内部结构有序性的能力下降;本研究首次发现人RPE细胞在缺氧状态下热休克蛋白60表达上调,此蛋白的进一步研究可能能够发现新的CNV致病途径;蛋白质组学方法为CNV相关疾病的研究提供了-个很好的参考平台.
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热休克蛋白60在扩张型心肌病中的意义
目的探讨心肌组织中热休克蛋白60(HSP 60)在扩张型心肌病(DCM)发生、发展中的作用.方法应用免疫组化方法检测15例DCM患者及10例对照者心肌组织中HSP 60的表达和分布.结果DCM患者心肌组织中HSP 60的表达较对照组明显增加(P＜0.05),而且发现HSP 60阳性细胞主要局限于心肌纤维的连接区域.结论DCM患者心肌组织中HSP 60的过高表达,可能与DCM的发生发展有关.
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瑞舒伐他汀逆转动脉粥样硬化斑块及其与斑块稳定性的实验研究
目的 探讨动脉粥样硬化斑块发生、发展和破裂机制,以及瑞舒伐他汀对动脉粥样硬化斑块及其稳定性的影响.方法 18只普通健康大耳白兔随机分为对照组(6只)、高脂组(6只)和瑞舒伐他汀干预治疗组(6只).建立动脉粥样硬化动物模型.分别采用酶比色法、氧化酶终点法检测血清甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)水平;双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法、HE染色和免疫组织化学染色检测血清白细胞介素-6(IL-6)和热休克蛋白60(hsp60)表达水平;图像分析软件计算血管面积、斑块面积、斑块比例及hsp60阳性表达面积.结果 至实验结束时,瑞舒伐他汀干预治疗组动物血清甘油三脂、总胆固醇和低密度脂蛋白-胆固醇水平以及IL-6和hsp60表达水平均低于高脂组(P
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血清抗幽门螺杆菌热休克蛋白60抗体与消化性溃疡的关系
目的:探讨幽门螺杆菌(Hp)感染患者血清抗幽门螺杆菌热休克蛋白60(Hsp 60)抗体与消化性溃疡的关系.方法:检测胃溃疡、十二指肠球部溃疡、慢性浅表性胃炎患者Hp感染及血清抗幽门螺杆菌Hsp 60抗体表达情况.结果:(1)血清抗幽门螺杆菌Hsp 60抗体阳性表达仅见于Hp阳性患者.Hp阳性胃溃疡、十二指肠球部溃疡患者血清抗幽门螺杆菌Hsp抗体阳性率明显高于慢性浅表性胃炎患者(均P＜0.05).(2)26例血清抗幽门螺杆菌Hsp抗体阳性的消化性溃疡患者在Hp根除及洛赛克疗程结束后4周,其中7例抗体转为阴性.结论:血清抗幽门螺杆菌Hsp 60抗体可能与Hp感染所致消化性溃疡的发生有关;血清抗幽门螺杆菌Hsp 60抗体不能作为近期判断Hp根除与否的标准.
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胃癌高发区血清抗幽门螺杆菌热休克蛋白60抗体与胃黏膜病变的关系
热休克蛋白(heat shock protein,HSP)是一种应激蛋白,广泛存在于原核及真核细胞中,有维持细胞蛋白自身稳定及结合受体调节细胞周期等许多功能.目前已知所有的幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)菌株都产生HSP,其中HSPB是人HSP60的同源物.
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原发性干燥综合征患者唇腺中热休克蛋白60与细胞外基质金属蛋白酶诱导因子的表达及意义
目的 探讨热休克蛋白60 (heat shock protein 60,HSP60)、细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer,CD147)在原发性干燥综合征(primary Sj(o)gren syndrome,PSS)发病过程中的作用及意义.方法 采用免疫组织化学染色链霉菌抗生物素-蛋白过氧化酶法(SP法)对52例PSS患者、30例正常对照组唇腺中HSP60 、CD147表达进行观察,并对二者的表达进行相关性分析.结果 PSS组HSP60均阳性高表达,导管区表达面积PSS组2 585.96(1 053.18) μm2 vs正常对照组1013.50(711.25) μm2,表达光密度PSS组0.25(0.11) vs正常对照组0.10(0.01)(P＜0.01),腺泡区表达面积PSS组2 0267.50(8 327.75) μm2 vs正常对照组6 419.00(720.00) μm2,表达光密度PSS组0.172(0.078) vs正常对照组0.074(0.01)(P＜0.01),HSP60表达随淋巴细胞浸润灶数的增加而表达增强.CD147在PSS组均阳性高表达,导管区表达水平,面积PSS组2 990.50(1 172.75) μm2 vs正常对照组982.00(162.00) μm2,表达光密度PSS组0.200(0.19) vs正常对照组0.10(0.00)(P＜0.01),腺泡区表达面积PSS组15 980.00(14 444.00) μm2 vs正常对照组7 873.00(6 057.00)μm2,表达光密度PSS组0.14(0.07) vs正常对照组0.80(0.02)(P＜0.01),CD147表达随淋巴细胞浸润灶数的增加而表达增强.HSP与CD147的表达呈正相关(P＜0.01).结论 HSP60、CD147在PSS患者唇腺组织中异常表达,均参与PSS的发病过程.
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热休克蛋白60与冠状动脉粥样硬化关系的研究进展
热休克蛋白(heat shock proteins,HSP)是物体在受热、缺血、缺氧或代谢毒物等因素刺激时于细胞内迅速增加的一组蛋白质,故又称应激蛋白(stress proteins,SP).
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热休克蛋白60对动脉粥样硬化大鼠心肌血管内皮生长因子和缺氧诱导因子-1α表达的影响
目的：研究口服热休克蛋白60（HSP60）对动脉粥样硬化（AS）大鼠心肌血管内皮生长因子（VEGF）和缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）表达的影响。方法40只4周龄健康雄性SD大鼠，体质量（100±10）g。随机分为4组：健康对照组（C组），AS 未干预组（AS组），造 AS模型前口服 HSP60组（H1组），造模后口服HSP60组（H2组），以上4组每组10只。本实验采用高脂饲料造AS模型，于大鼠180日龄时采血后处死，并取大鼠心肌作为标本。反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组织化学检测心肌VEGF和 HIF-1α表达情况。结果 C组、AS组、H1组、H2组大鼠心肌VEGF mRNA表达分别为：0．37±0．04，0．87±0．05，0．44±0．03，0．58±0．04；HIF-1αmRNA表达分别为：0．46±0．06，0．94±0．03，0.55±0．05，0．62±0．06；VEGF免疫组织化学阳性表达分别为：4．5±0．5，9．2±0．6，5．3±0．4，8．1±0．5；HIF-1α免疫组织化学阳性表达分别为：5．8±0．7，13．9±0．4，7．0±0．6，10．4±0．8。结论 AS大鼠心肌VEGF和 HIF-1α表达较正常对照组增高，口服 HSP60能降低VEGF和 HIF-1α表达，即减轻心肌缺血缺氧性损伤和血管内皮炎症反应程度，而且越早口服，效果越好。
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泌尿生殖道沙眼衣原体感染者血清抗衣原体免疫优势蛋白抗体的检测
目的 检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染者血清中的抗衣原体质粒编码蛋白3(Pgp3)、抗外膜蛋白复合物B蛋白C端肽(OmcBc)、抗ct841编码蛋白(CT841)和抗热休克蛋白60(HSP60)抗体.方法 将编码上述4种蛋白基因的重组质粒和空质粒转化入大肠杆菌,IPTG诱导表达,并用谷胱甘肽磁珠进行纯化后包被ELISA孔板.收集天津医科大学总医院性病门诊泌尿生殖道沙眼衣原体感染者和未感染者血清各20份.ELISA法检测血清中上述蛋白抗体.结果 20份沙眼衣原体感染者血清中Pgp3、OmcBc、CT841和HSP60抗体的检出率分别是14例(70％)、9例(45％)、8例(40％)、5例(25％);20份无沙眼衣原体感染者血清中,仅1例检测到HSP60抗体.结论 上述4种衣原体蛋白中,Pgp3的抗原性强,抗体检出率高;HSP60的抗原性弱,抗体检出率低.
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银屑病皮损中Toll样受体4、NF-κBp65、HSP60的表达
目的 研究Toll样受体4(TLR4)、NF-κBp65、HSP60在银屑病患者皮损中的表达水平及其与银屑病严重程度的关系.方法 采用S-P免疫组化法检测30例进行期寻常性银屑病皮损及10例正常皮肤石蜡标本中的TLR4、NF-κBp65、HSP60的表达,对其在皮损中的表达水平进行相关性分析,并将结果与PASI评分进行相关性分析.结果 与正常人对照组相比,寻常性银屑病皮损角质形成细胞中的TLR4、NF-κBp65、HSP60的表达明显上调,差异有统计学意义(P＜0.05).TLR4、NF-κBp65与HSP60表达水平与患者PASI评分之间均存在正相关(P＜0.01).银屑病患者TLR4、NF-κBp65、HSP60的表达水平间均呈正相关(P＜0.05).结论 TLR4、NF-κBp65、HSP60的表达上调可能与银屑病发病及严重程度有关.HSP60可能与TLR4/NF-κBp65信号转导途径有关.
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沙眼衣原体热休克蛋白60抗原基因的克隆和表达
目的对沙眼衣原体热休克蛋白60(Chsp60)进行表达和纯化,以获得高纯度的蛋白抗原.方法应用PCR扩增技术分离Chsp60的基因全长,采用基因工程的方法,应用融合表达载体重组、克隆得到Chsp60特异抗原基因的重组菌株,经诱导表达获得重组融合蛋白,并经亲和层析获得纯品.结果得到了热休克蛋白60重组克隆菌株,成功地诱导表达并纯化了相对分子质量为87000的融合蛋白,纯度达90%以上,产量为2.5mg/L.结论获得的相对分子质量为60000的特异性抗原可用于检测衣原体感染患者血清中的抗体,有助于探讨Chsp60在免疫发病中的作用.
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人热休克蛋白60及其自身抗体与冠心病的相关性
目的:探讨人热休克蛋白60(HSP60)及其自身抗体(HSP60 Ab)与冠心病的关系.方法:从我院2007年1月到2007年8月心内科住院患者中入选96例研究对象,分为冠心病(CHD)组[包括急性冠脉综合征(ACS)组、稳定性心绞痛(SAP)组]、胸痛综合征(CPS)组、正常对照组 (各组性别、年龄,高危因素等匹配).用ELISA 方法分别测定血清HSP60和HSP60 Ab浓度.结果:HSP60水平:CHD组的明显高于CPS组和对照组(P<0 01);ACS组的明显高于SAP组(P<0 01);SAP组,CPS组和对照组之间差别无显著性(P>0 05);血清 HSP60 Ab 水平:CHD组的明显高于CPS组和对照组(P<0 01),ACS组明显高于SAP组(P<0 01),SAP组的明显高于对照组和CPS组(P<0 01),对照组和CPS组的差别无显著性(P>0 05);血清HSP60 与HSP60 Ab水平呈正相关(r=0 805,P<0 01),均为预测ACS的独立危险因素(β=0 785,P<0 01).结论:血清HSP60、HSP60 Ab水平与冠心病有明显相关性,可能在冠心病及急性冠脉综合征的发病过程中起着相互协同作用,是预测急性冠脉综合征的独立危险因素.
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食管鳞状细胞癌中热休克蛋白10和60的表达及其意义
目的探讨食管鳞状细胞癌中热休克蛋白(HSP)10、60的表达及其意义.方法应用免疫组化EnVision二步法,观察168例食管鳞状细胞癌和42例切缘食管黏膜中HSP10、60的表达,并比较其阳性率.结果HSP10在食管鳞状细胞癌和切缘食管黏膜表达率分别为53.8%和37.5%,统计学分析结果表明差异无显著意义(P＞0.05);HSP60在食管鳞状细胞癌和切缘食管黏膜表达率分别为92.7%和63.2%,统计学分析结果表明差异有显著意义(P＜0.01).在高、中、低分化食管鳞状细胞癌中HSP10、60的表达差异均无显著意义(P＞0.05),两者的表达与食管鳞状细胞癌区域淋巴结转移无关(P＞0.05).结论HSP60在食管鳞状细胞癌的表达高于切缘食管黏膜,提示其在食管鳞状细胞癌的发生发展中起作用.HSP10、60的表达与食管鳞状细胞癌分化程度、区域淋巴结转移无关.
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热休克蛋白60的研究进展
热休克蛋白是高水平基础表达的一种蛋白,占在正常生长条件下所有类型细胞中蛋白总量的5%-10%.当细胞处于应激条件时(如重金属、热休克、周围气温的变化、糖分损失、游离自由基的作用、病原体传染、组织损伤、精神和生理逆境等)热休克蛋白表达量明显提高[1,2].
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幽门螺杆菌重组热休克蛋白60对U937细胞分泌TNF-α和IL-17的影响
目的：观察幽门螺杆菌重组热休克蛋白60对U937细胞分泌TNF-α与IL-17的影响。方法将由基因定点突变、重组后表达的胃癌来源株的幽门螺杆菌重组热休克蛋白60（rhsp60，即rhsp60组）及非胃癌来源株热休克蛋白60（hsp60，即hsp60组）分别与经佛波酯（PMA）诱导分化的U937细胞共培养，调整各组蛋白终浓度分别为50、100、200μg/mL，并在12、18、24 h时收集上清液，ELISA检测上清液中TNF-α、IL-17水平，设磷酸盐缓冲液对照组。结果rhsp60组与hsp60组TNF-α、IL-17分泌水平均明显高于对照组，且同时间点、同浓度下rhsp60组明显高于hsp60组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 rhsp60与hsp60均可促进U937细胞对细胞因子TNF-α、IL-17的分泌，且胃癌来源的rhsp60使TNF-α、IL-17分泌量更多。
