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骨髓基质细胞体外培养成骨能力的实验研究
骨髓基质细胞具有良好的成骨性能.我们采用细胞培养和原位杂交的方法,对骨髓基质细胞体外培养的增殖活性和成骨表型的表达进行研究,以期为筛选具有较强增殖活性和成骨能力的细胞作移植打下基础.
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Ⅰ型胶原在丝素蛋白-羟基磷灰石类骨质复合生物材料修复兔股骨缺损中的表达
目的 通过检测Ⅰ型胶原蛋白的表达,评价丝素蛋白-羟基磷灰石类骨质复合生物材料的体内成骨性能. 方法 将丝素蛋白-羟基磷灰石类骨质复合生物材料(实验组)和羟基磷灰石(对照组)分别植入新西兰大白兔股骨髓腔内,分别在4周、8周、12周时取出标本,采用免疫组织化学染色方法进行Ⅰ型胶原染色,应用Motic Med 6.0数码医学图像分析系统进行Ⅰ型胶原蛋白积分光密度测量,评价其成骨特性. 结果 显微镜观察及Ⅰ型胶原蛋白积分光密度测量结果显示,在同一时间点,丝素蛋白-羟基磷灰石类骨质复合生物材料成骨性能均高于对照组(P＜0.05). 结论 丝素蛋白-羟基磷灰石类骨质复合生物材料可以增强成骨细胞基质分泌,有效促进新骨形成,具有良好的体内成骨性能.
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功能型骨组织工程支架修复结核性骨缺损
背景：随着抗结核功能型骨组织工程支架研究的深入，结核性骨缺损修复成为当前研究热点之一。目的：评价抗结核功能型骨组织工程支架的制备、药物缓释性能和成骨性能。
方法：应用计算机检索PubMed数据库、中国期刊全文数据库、万方数据库中，相关功能型骨组织工程支架修复结核性骨缺损的文章，中文检索词为“骨组织工程支架，结核，骨缺损”，英文检索词为“Bone tissue engineering scaffold，Tuberculosis，Bone defect”。
结果与结论：抗结核功能型骨组织工程支架具有较好的药物缓释性能、组织相容性、成骨性能及抗结核杆菌性能，能长时间稳定释放药物，增强局部应用抗结核药的效果，解决临床上结核性骨缺损修复困难易复发的难题。目前，研制的抗结核性骨组织工程支架还未达到临床需求。首先，针对结核分枝杆菌的多药物联合治疗常需3或4种抗结核药物的联合使用，而目前抗结核性骨组织工程支架只能达到联合2种药物；其次，抗结核治疗疗程常需6-12个月，现有的抗结核性骨组织工程支架药物释放时还不能满足该需求；制备抗结核性骨组织工程支架材料的文献居多，但应用此种材料在结核动物模型进行的验证实验缺失。 -
跑步锻炼大鼠缺损股骨干内的骨质生长
背景：研究已经证实，力学刺激能够促进骨折的愈合。但是，跑步锻炼所产生的力学刺激能否增加骨材料的骨传导性和促进骨缺损的愈合尚不清楚。
目的：观察跑步锻炼所产生的间接力学刺激对骨缺损愈合和骨材料成骨性能的影响。
方法：在12周龄SD大鼠左股骨远端制作一个直径3 mm、高3 mm的缺损，然后在缺损内塞入同等大小的硫酸钙支架材料。实验组于术后1周开始以10 m/min，45 min/d，5 d/周的策略进行跑步锻炼，持续3周；对照组不给予跑步锻炼。
结果与结论：通过micro-CT分析得到，术后1周时，实验组和对照组的骨缺损内已经有少量的新骨形成。在2，3，4周时，实验组骨缺损内新骨生成量明显高于对照组，差异有显著性意义(P<0.05)。在4周时，组织学切片结果也说明实验组新骨生成情况明显优于对照组。另外，给予跑步锻炼之后，实验组骨缺损内生成的新骨骨密度高于对照组，但差异无显著性意义(P>0.05)。结果表明，适度的跑步锻炼确实能够增加骨材料的成骨性能和加速骨缺损的愈合。 -
可注射性硫酸钙在兔椎体松质骨中成骨性能的研究
目的 观察可注射性硫酸钙在兔椎体松质骨中的成骨降解性能.方法 18只成年新西兰兔随机分为A、B两组,每组9只.其中A组向兔椎体松质骨注入硫酸钙骨水泥(calcium sulfate cement,CSC);B组作为空白对照组不植入材料.在不同时间点(2,6和12周)采用大体观察、X片影像学、组织学等方法观察和评估CSC植入后在椎体松质骨内的成骨和降解情况.结果 术后兔进食,活动正常,标本周围软组织无炎症反应.CSC在植入2周见少量新生骨,6周植入物部分吸收,见大量新生骨,12周植入物全部吸收,并有编织骨形成,成骨量明显高于对照组(P＜0.05).结论 可注射性硫酸钙有良好的生物相容性,植入椎体后成骨作用明显,新生骨与植入材料的吸收降解同步,是一种良好的骨移植材料.
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英文文摘
1．香豆素类衍生物蛇床子素对人牙周膜和颌骨骨髓间充质干细胞膜片成骨性能的影响（英）／Gao LN…／／Biomateri-als．-2013，34（38）．-9937-9951
细胞膜片工程是一种无支架的过渡性方法，可在临床前和临床试验中改善由间充质干细胞介导的外伤或病理性损伤牙周组织的再生。然而，细胞膜片生产的佳策略还有待确定。本研究是探讨蛇床子素（一种香豆素类衍生物，从中药中提取得到）对人牙周膜干细胞（PDLSCs）及颌骨骨髓间充质干细胞（JBMMSCs）的细胞膜片形成和成骨性能的生物学影响。我们将匹配患者的 PDLSCs和 JBMMSCs进行分离，通过评价两种细胞类型的细胞增殖能力和碱性磷酸酶（ALP）活性，筛选出细胞培养中合适的蛇床子素浓度。接着，通过评价各类型细胞的胞外基质（ECM）蛋白的生成及成骨相关基因的表达量来选择蛇床子素诱导各类型细胞膜片形成的佳刺激方式。此外，将优化后的 PDLSC 和JBMMSC 膜片移植于裸鼠皮下，以评估其异位骨再生的能力。结果表明：尽管4组中不同蛇床子素浓度对 JBMMSCs的增殖影响无差异（P＞0．05），10-5 m／L 浓度的蛇床子素能显著提高 PDLSCs 和 JBMMSCs 的增殖能力（P＜0．05），10-5 m／L浓度的蛇床子素是提高两种细胞 ALP 活性的佳浓度。根据细胞外基质蛋白（I 型胶原酶、整合素β1和纤连蛋白）的生成及成骨基因（ALP，RUNX2和 OCN）的表达情况，在 PDLSCs整个培养阶段（10 d）或 JBMMSCs 培养早期（前3 d），加入10-5 m／L浓度蛇床子素进行刺激，是蛇床子素作用于细胞膜片形成的有效给药方式（P ＜0．05）。体内移植结果表明蛇床子素介导的 PDLSC 和JBMMSC 膜片，较无蛇床子素干预组形成更多新骨（P＜0．001）。此研究表明适当浓度和给药方式的蛇床子素刺激可增强 ECM生成，并显著影响细胞膜片工程中的细胞行为。 -
吻合血管腓骨移植复合Cem-osteticTM人工骨浆治疗股骨头坏死
股骨头缺血性坏死的治疗可以采用保守和手术两种方法,近年来越来越多的研究表明,采用带血管的骨移植是治疗股骨头坏死的有效方法.然而单纯的骨移植有时存在局部成骨性能不够迅速的缺陷.Cem-ostetiC<'TM>人工骨浆近年在治疗骨不连骨缺损方面方兴未艾.2004年10月至2006年12月,本院对14例(18髋)股骨头缺血性坏死患者采用吻合血管的腓骨游离移植并复合Cem-ostetic<'TM>人工骨浆治疗,取得满意疗效.
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柚皮苷在循环应力刺激下对骨髓基质干细胞成骨性能的影响
我们通过对大鼠骨髓基质干细胞(marrow strom aderived stem cells,MSCs) 提取、诱导和培养,观察MSCs向成骨细胞的增值和分化,探讨柚皮苷在循环应力刺激下对MSCs成骨性能的影响,以为骨组织工程提供种子细胞及临床骨质疏松的防治提供理论依据.
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丝素蛋白-羟基磷灰石类骨质复合生物材料的成骨性能
目的 探讨丝素蛋白-羟基磷灰石类骨质复合生物材料的体外成骨性能.方法 将成骨样细胞株MG-63接种于材料表面并进行体外培养.在不同的时间点,分别检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性、细胞基质钙离子浓度以及骨钙素(osteocalcin,OC)的含量,以此来从不同层次多个角度评价材料的体外成骨性能.结果 丝素蛋白-羟基磷灰石(silk fibroin-hydroxyapatite,SF-HA)组细胞的ALP活性、细胞基质钙离子浓度以及OC的含量均明显高于羟基磷灰石(HA)组.结论 丝素蛋白-羟基磷灰石在细胞成骨的各个阶段均具有良好的体外成骨活性,具有一定的临床应用前景.
