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脱细胞基质在尿道修复中的应用
细胞外基质(extracellular matrix,ECM)是组织附着的基本框架和代谢场所,目前研究的ECM 替代物主要分为天然材料和人工合成材料.脱细胞基质(acellular matrix grafts,AMGs)材料是对天然的ECM 进行脱细胞处理而获得的天然ECM 替代物,能为细胞创造尽可能接近体内的生长环境.
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器官特异性无细胞基质移植物的研究进展
同种器官供体十分有限和随机,且受到组织配型的限制.去除器官组织中的细胞成分,使宿主对移植物的抗原反应程度降到低,有望使随机的器官特异性无细胞异体或异种基质移植物成功.1964年Grillo等[1]先对皮肤组织进行脱细胞处理,1977年Oliver等[2]通过胰蛋白酶处理皮肤得到无细胞真皮胶原用作临床创面敷料,1989年Badylak SF用猪小肠制备成无细胞基质移植物(acellular matrix grafts,AMGs)成功地进行狗动脉血管搭桥,直至1995年Wainwright[3]研制出无细胞真皮基质(ADM,商品名"AlloDerm")充当复合皮永久性真皮替代物并成功地应用于临床.这些组织经脱细胞处理目的在于清除器官组织内全部细胞,同时保持该组织的细胞外基质(ECM)结构及其生物化学特性[4],以获得组织或器官重建的大效价.此后,多种来源的AMGs被用作器官缺损的生物假体,已经在动物实验和临床试用中获得部分功能重建,成为重建外科崭新的研究领域.
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脱细胞处理对戊二醛固定牛心包的影响
目前国内生物瓣膜使用有增多趋势,但生物瓣膜的耐久性仍影响其应用.再次换瓣的病理显示,损坏瓣膜大多都有明显钙化[1,2].一些实验证明,生物瓣膜的钙化首先是从细胞开始,然后向胶原纤维和弹力纤维蔓延.戊二醛固定引起细胞变化是导致生物瓣膜钙化的主要原因之一[3,4].所以,我们试图通过脱去牛心包内细胞的方法减轻戊二醛固定牛心包的钙化.
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组织工程化脱细胞神经基质移植体的研究进展
组织工程化的细胞外基质成分、细胞或通道的基底物质已经显示出支持轴突再生和功能恢复的巨大潜能.脱细胞处理的神经基质移植体具有良好的仿生性和生物相容性,包含较丰富的促进神经生长的蛋白等成分并适合于种子细胞在其内迁移生长,移植后免疫排斥反应较低,为轴突再生提供适宜的微环境,能够有效地促进轴突再生,是修复周围神经缺损的适宜移植物,将在周围神经损伤修复中占明显优势.
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脱细胞处理的同种异体神经移植研究进展
周围神经损伤的修复是创伤外科难题之一,筛选促进神经再生理想的移植物,是解决这一难题的关键.近年来,在修复周围神经缺损研究中采用脱细胞处理的同种异体神经作为移植物,已取得促进神经再生的效果,展示了较好的应用前景.本文对脱细胞处理移植体的脱细胞处理方法,脱细胞处理后的细胞外基质所含的生物活性物质,以及这些物质的对促进神经再生的生物效应进行综述,以期为此种移植体的深入研究提供参考资料.
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T-1型组织补片应用于下颌阻生智齿拔除术的护理
随着科学技术的飞速发展,越来越多新的医疗材料被临床广泛使用.T-1型脱细胞异体真皮基质口腔黏膜组织补片(简称T-1型组织补片)是近年来用于牙拔除术后修复创面的一种新型材料,它是异体膜状或片状组织经脱细胞处理成的细胞外基质,其独有的三维结构为组织细胞提供了一个生长代谢的场所,植入体内后生物相容性好,使组织细胞能在其上生长,从而完成组织生理性修复.下颌阻生智齿特别是低位阻生及埋伏阻生智齿的拔除是较为复杂的齿槽外科手术.术后局部肿胀、张口受限、出血、感染、干槽是较为常见的反应[1].我科2003年9月-2004年12月对380例下颌阻生智齿拔除术后的患者,采用T-1型组织补片帮助创面的修复,经临床观察,在减少术后反应方面,疗效满意,现报道如下.
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脱细胞处理对猪主动脉瓣与同种瓣组织构成及免疫差异的影响
目的 研究脱细胞前后猪主动脉瓣瓣膜与人同种主动脉瓣的组织构成及免疫差异,探讨清除猪主动脉瓣异种抗原的方法.方法 选购液氮冻存人主动脉瓣3条,猪主动脉瓣(液氮保存)4条,使用胰蛋白酶脱细胞处理,制作脱细胞瓣膜支架,分同种瓣-同种瓣脱细胞-猪主动脉瓣-猪主动脉瓣脱细胞4组,提取瓣膜蛋白,使用SDS-PAGE电泳法分析各组蛋白构成;使用各组蛋白提取物诱导U-937细胞移动,测定细胞移动量,分析瓣膜支架存在的免疫原性.结果 胰蛋白酶可有效清除瓣膜细胞.SDS-PAGE蛋白电泳显示,猪主动脉瓣叶成分较同种主动脉瓣叶蛋白组成存在明显差异.脱细胞处理可显著减小猪主动脉瓣与脱细胞同种瓣的差异,但在26 000~43 000之间猪主动脉瓣叶蛋白组分仍明显较同种主动脉瓣叶条带多.U-937细胞移动实验显示脱细胞处理可明显减少细胞移动量,但比较脱细胞同种瓣,脱细胞猪主动脉瓣诱导细胞移动量较多(P<0.05).结论 胰蛋白酶脱细胞处理可降低猪主动脉瓣及同种瓣免疫原性.脱细胞处理后的瓣膜支架存在一定抗原性,其中以猪主动脉瓣脱细胞后抗原性仍较强.
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脱细胞处理对小肠黏膜下层细胞残留及生长因子含量影响的实验研究
目的 探讨机械-酶消化法对小肠黏膜下层(small intestinal submucosa,SIS)细胞残留量及生长因子含量的影响. 方法 取4 h内市售新鲜猪空肠,采用机械处理(去除浆膜层、黏膜层及肌层)、脱脂、胰蛋白酶消化、去垢剂处理及冻干5个步骤制备SIS.每步操作后留取样品(n=4),分别作为A、B、C、D、E组;以新鲜猪空肠作为对照(n=4,F组).HE染色及扫描电镜观察组织学变化;采用Nest-PCR技术测定死亡相关蛋白12(deach associated protein 12,DAP12)含量;ELISA法检测VEGF、bFGF、TGF-β和TNF-α的含量. 结果 组织学及扫描电镜观察显示A、B组有细胞残留,C、D、E组未见细胞残留.Nest-PCR检测示各组均含有DAP12;A~F组DAP12拷贝数分别为(18.01±9.53)、(11.87±2.35)、(0.59±0.27)、(0.29±0.05)、(0.19±0.04)、(183.50±120.13)copy×10~6/cm~2.F组DAP12含量显著高于A~E组(P<0.05),A、B组高于C、D、E组(P<0.05),C、D、E组间比较差异有统计学意义(P<0.05),A、B组间差异无统计学意义(P>0.05).ELISA法检测示A组VEGF、bFGF、TGF-β及TNF-α含量均显著高于其他各组(P<0.05);B、C、D、E组间比较差异无统计学意义(P>0.05). 结论 单纯采用机械法制备SIS有较多细胞残留;机械-酶消化法能有效去除细胞,显著降低DAP12含量,生长因子含量无明显改变.
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异种皮治疗大面积 Ⅱ 度烧伤的研究进展
烧伤创面需要皮肤移植的患者使用自体皮肤组织是首选的治疗方案,然而烧伤面积大的患者往往会遇到自体皮源紧缺的现实问题.异种皮移植或作为辅料应用于大面积烧伤患者很大程度上解决了大面积烧伤患者自体皮肤紧缺的问题,为大面积烧伤患者在烧伤后康复做出巨大的贡献.随着医学技术的发展,异种皮在大面积 Ⅱ 度烧伤中被大量应用.本文对近年来几种异种皮在 Ⅱ 度烧伤中的应用现状作一综述.