首页 > 文献资料
-
光动力疗法对3T3成纤维细胞、宫颈癌HeLa细胞增殖及凋亡的影响
背景与目的光动力疗法有抑制细胞增殖的作用,这项技术利用细胞吸收光敏剂后,暴露于合适波长的光,即可产生细胞毒性反应.光动力可以通过凋亡或坏死引起细胞死亡.
-
3T3中性红试验在化妆品光毒检测中的应用
目的 研究3T3成纤维细胞中性红摄取试验(3T3 NRU PT)在化妆品安全性评价中取代动物光毒性试验的可行性.方法 选用20种国产特殊用途化妆品,作用丁3T3细胞后,暴露或不暴露于紫外线下,测量540 nm处经化学物质和紫外线照射联合作用细胞的吸光度,分析其平均光效应强度(MPE)、光刺激因子(PIF),细胞存活率,以判断待测物质是否具有光毒性,并与整体动物皮肤光毒性结果进行比较.结果 3T3 NRU PT试验测得20种化妆品的PIF值均<5,MPE值均<0.1,按该试验阈值分类方法,均呈光毒性阴性;动物试验结果表明,未出现皮肤反应≥2分的动物,结果也均为光毒性阴性.3T3 NRU PT试验与动物光毒性结果经校正x2检验比较,差异无统计学意义,其灵敏度、特异度、阳性预测价值、阴性预测价值均为1.结论 3T3 NRU PT试验和豚鼠皮肤光毒性试验的结果一致,该方法可取代化妆品终产品的动物光毒性试验.
-
两种3T3光毒性试验方法在防晒化妆品光毒性评价中的应用
背景:评价化妆品光毒性,传统多采用兔或豚鼠动物实验,即将化学物涂抹在动物背部去毛的皮肤上,经一定时间间隔后暴露于长波紫外线光线下,观察其变化,这些方法费时,费力,且给动物带来很大痛苦.各国实验室都在寻找动物替代实验的方法.目的:采用2种3T3细胞光毒替代试验方法(中性红法与MTT法)评价防晒化妆品引起皮肤光毒性的可能性.设计、时间及地点:动物替代实验,于2008-08/12在中国检验检疫科学研究院毒理学实验室完成.材料:3T3小鼠胚胎成纤维细胞,购于美国ATCC公司.方法:选用SPF值分别为10,15,30的防晒化妆品霜剂和乳液各1种,作用于3T3细胞后,暴露或不暴露于紫外线下,用中性红法与MTT法判定细胞毒性情况.主要观察指标:光刺激因子值.结果:防晒化妆品SPF30-2(霜剂)可能有光毒性,2≤光刺激因子值<5.中性红法与MTT法均得到了相同的结论.结论:3T3细胞光毒性试验用来评价化妆品的光毒性是可行的.
-
建立人肝微粒体-小鼠3T3成纤维细胞模型评价5-羟基雷公藤内酯醇代谢产物的细胞毒性
目的:以环磷酰胺(cyclophosphamide,CPA)和他莫昔芬(tamoxifen,TMX)为模型药物,建立人肝微粒体-小鼠3T3成纤维细胞模型,并用该模型评价5-羟基雷公藤内酯醇(T8)代谢产物的细胞毒性。方法:采用人肝微粒体(加或不加NADPH)-小鼠3T3成纤维细胞模型,测定吸光度(A值)并计算细胞孵育液的EC50值和EC50 shift,以EC50 shift评价代谢产物毒性。结果:模型药物CPA和TMX及创新药物T8的EC50 shift分别为0.34、>4.7和1.2,表明CPA和TMX的代谢物会分别增加和降低细胞毒性,而T8代谢产物不影响或稍许降低对细胞的毒性。结论:本实验成功建立人肝微粒体-小鼠3T3成纤维细胞模型,这为T8进入体内的安全性提供了一定依据,也为候选化合物开发初期在不合成代谢物的情况下初步评价代谢物的细胞毒性提供了一种体外方法。
-
体外3T3成纤维细胞中性红摄取试验对光毒物质的评价
光毒性是指应用于机体局部的物质经暴露于光线后诱发或增强的毒性反应,或者全身系统地应用某一物质后由皮肤光照引发的反应,许多化学物质能诱导产生光毒性效应.传统的光毒性实验方法是将一定量的受试物涂抹在动物去毛的皮肤上,经一定时间间隔后暴露于UVA,观察受试动物皮肤反应并确定该受试物是否具有光毒性.体外3T3成纤维细胞中性红摄取光毒试验(in vitro 3T3 NRu phototoxicitytest,3T3-NRU PT)是经过欧洲体外替代试验有效性验证中心(EVCAM)验证.早经欧盟委员会批准的替代方法之一,已获得欧盟许可和经济合作与发展组织(OECD)认可作为皮肤光毒性试验的替代方法用于欧盟国家的化学物质安全性评价~([1-2]).
-
以兔自体结膜成纤维细胞为饲养细胞构建上皮细胞植片
近年来用以组织工程技术制备的角膜上皮或口腔黏膜上皮细胞植片成为一种目前治疗角膜缘干细胞缺乏性疾病的新技术[1-2],能够改善角膜缘的功能,恢复角膜表面的完整性.目前的构建体系常用小鼠胚胎组织来源的3T3成纤维细胞作为饲养细胞,但这种含异种细胞的植片可成为异种病原向人体传播的潜在渠道,也存在异种排斥反应的可能性[3].因此寻找更安全的饲养细胞成为完善现有技术的一个关键.本研究观察以兔自体结膜成纤维细胞为饲养细胞、兔口腔黏膜上皮细胞为种子细胞构建上皮细胞植片的可行性.
-
肾安提取液对3T3细胞增殖及α-肌动蛋白表达影响的实验研究
目的:从细胞学方面探讨肾安提取液阻缓肾纤维化的作用及其机理.方法:采用3T3细胞系作为成纤维细胞模型,以碱性成纤维细胞因子(bFGF)为刺激因子,分别进行细胞增殖和免疫组化实验.结果:肾安提取液对3T3细胞的抑制作用呈显著的剂量依赖关系;48 h 6.25 mg/ml, 12.5 mg/ml, 25 mg/ml组、72 h 3.12 mg/ml, 6.25 mg/ml, 12.5 mg/ml, 25 mg/ml组与对照组对细胞增殖的影响比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);其中25 mg/ml组72 h与48 h比较,差异有统计学意义(P<0.05);但与尿毒清组比较差异无统计学意义(P>0.05).肾安提取液对bFGF刺激的α-肌动蛋白(α-actin)表达的抑制作用随剂量增加而增强.结论:提示肾安提取液可能通过抑制bFGF刺激的成纤维细胞的增殖及α-actin表达,从而减缓肾纤维化.
-
3T3中性红摄取光毒性试验的验证研究
目的 验证3T3成纤维细胞中性红摄取实验检测化学物质光毒性试验方法的可行性.方法 使用两种盲样对3T3成纤维细胞进行染毒,用中性红摄取法测定细胞活性.结果 1号样品预测有潜在光毒性,2号样品预测无潜在光毒性.结论 3T3成纤维细胞中性红摄取实验可用于检测化学物质的光毒性.
-
非促分裂酸性成纤维细胞生长因子抑制由放线菌素D诱导的Balb/c3T3细胞的凋亡
目的探讨非促分裂酸性成纤维细胞生长因子(nmaFGF)对放线菌素D(ActD)诱导Balb/c 3T3成纤维细胞凋亡的保护作用.方法利用放线菌素D诱导3T3细胞凋亡的模型,将实验分为空白对照组、ActD处理组和nmaFGF处理组,采用DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪两种分析方法测定nmaFGF对3T3细胞凋亡的影响.并利用Western免疫印迹检测nmaFGF作用于3T3细胞后Akt信号通路中p-Akt分子的表达.结果空白对照组的凋亡率为1.53%;ActD处理组3T3细胞发生明显的细胞凋亡,凋亡率为33.83%;而nmaFGF处理组的细胞凋亡受到显著抑制,凋亡率分别下降到18.97%,15.17%和12.83%,凋亡下降率分别为14.86%,18.66和21.00%.Western半定量检测结果显示,在0.1~10μg/ml的浓度下,随着nmaFGF剂量的增加,p-Akt的表达水平有所增加,3T3细胞的凋亡率随之下降.结论nmaFGF可以通过AKT途径显著抑制由放线菌素D诱导的Balb/c成纤维细胞的凋亡.
关键词: 非促分裂酸性成纤维细胞生长因子 Balb/c 3T3成纤维细胞 AKT 凋亡 -
3T3成纤维细胞和巨噬细胞在含rhbFGF培养基血纤维上的共培养
采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法等方法研究了3T3成纤维细胞和巨噬细胞在含重组人碱性细胞生长因子(rhbFGF)培养基血纤维上的生长行为.结果显示:在低血清含rhbFGF的培养条件下,两种细胞在血纤维能够良好生长.本研究揭示,血纤维不仅可以作为生物支持材料用于三维组织培养,而且也可作为rhbFGF促进细胞生长的生理性载体.