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Sox2、EpCAM在三阴乳腺癌及其癌症转移灶中的表达与临床意义
目的 检测Sox2、EpCAM在三阴乳腺癌及其癌症转移灶中的表达并探讨其临床意义.方法 选择2015年1月至2016年12月我院收治的30例发生癌症转移的三阴乳腺癌患者,作为观察组.并选取同期的非三阴乳腺癌患者30例作为对照组,对观察组和对照组癌症原发灶及转移灶进行 Sox2、EpCAM的表达分析.结果 观察组30例三阴乳腺癌中,TNM分期越高,Sox2的表达越高,Ⅲ期阳性率显著高于Ⅰ期和Ⅱ期,差异有统计学意义(P<0.05),而EpCAM的表达差异不具有统计学意义(P>0.05);组织学分级越高,Sox2、EpCAM的表达也越高,Ⅲ级阳性率显著高于Ⅰ级和Ⅱ级,差异有统计学意义(P<0.05).Sox2在观察组转移灶的阳性表达率(93.3%)高于原发灶(70.0%),且显著高于对照组(43.3%),差异具有统计学意义(P<0.05);EpCAM 在观察组转移灶中的阳性表达率(86.7%)与原发灶(80.0%)相比,差异无统计学意义(P>0.05),与对照组(53.3%)相比,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 在三阴乳腺癌中SOX2、EpCAM蛋白均呈高表达,可作为临床检测三阴乳腺癌的一个参考指标,且在转移灶中显著表达,也可作为癌症转移的辅助诊断指标.
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上皮细胞粘附分子在肝动脉化疗栓塞治疗肝癌中的表达改变及其功能
目的明确肝动脉化疗栓塞（transcatheterhepaticarterialchemoembolization,TACE）治疗对肝细胞癌（hepatocellularcarcinoma,HCC）肿瘤组织中肿瘤干细胞指示分子——上皮细胞粘附分子（epithelialcelladhesionmolecule,EpCAM）表达及肝癌干细胞生物学行为的影响。方法用实时PCR分别检测30例经TACE治疗和30例未经TACE治疗的HCC患者肿瘤组织中EpCAM的表达水平。在此基础上，用EpCAM的siRNA载体，在HCC细胞系HepG2和高侵袭性的MHCC-97H中检测EpCAM对抗肿瘤药物作用的影响；在MHCC-97H细胞系中，检测降低EpCAM表达对MHCC-97H侵袭作用的影响。结果接受TACE治疗的HCC患者肿瘤组织中的EpCAM表达水平升高（P＜0.05）。与对照组相比，在HepG2细胞中转染EpCAM的siRNA能够显著上调HepG2细胞对分子靶向抗肿瘤药物索拉非尼以及细胞毒性化疗药物奥沙利铂和表柔比星的敏感性。在MHCC-97H中转染EpCAM的siRNA能够显著抑制其侵袭作用。结论 TACE治疗可引起HCC组织中EpCAM的表达水平明显升高；降低HCC细胞中EpCAM表达水平，可导致HCC细胞的肿瘤干细胞特征如侵袭性显著下降，对抗肿瘤药物的敏感性升高。
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CDCP1EpCAM在高危HPV致宫颈癌的表达情况
宫颈癌是一种常见的妇科癌症,世界每年有超过100万例新发病例,高危型人乳头瘤病毒(High risk human papilloma virus,HR-HPV)持续感染是宫颈癌的主要危险因素[1].含CUB结构域蛋白1(CUBdomain-containing protein 1,CDCP1)为一种新的肿瘤干细胞标志物,其表达失调与多种癌症的发生、发展相关,且与肿瘤预后呈相关性[2].本研究拟通过研究HR-HPV阳性宫颈癌患者、宫颈上皮内瘤变(Cervical Intraepithelial Neoplasia,CIN)患者等宫颈组织中CDCP1、EpCAM表达水平差异,分析CDCP1、EpCAM在高危HPV致宫颈癌患者中的表达情况.
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来源于乳腺癌正常组织乳腺干细胞的安全性
背景：乳腺干细胞的培养对研究乳腺的发育及乳腺癌具有重要的意义。
目的：找到一种易操作的体外分离培养乳腺干细胞的方法，并验证其安全性。
方法：分离培养乳腺癌旁正常组织中乳腺上皮细胞，流式细胞仪分选CD49f和EPCAM阳性细胞进行干细胞表面标记分析及细胞集落形成能力分析，然后在乳腺干细胞、乳腺癌组织和乳腺癌旁正常组织中提取mRNA，实时荧光定量PCR检测C-erbB-2和Maspin基因的表达。
结果与结论：①成功培养出人乳腺干细胞，并且细胞表面特异性标志物CD49f，EPCAM高表达；②集落形成能力分析可见混合集落、腔上皮细胞集落、肌上皮细胞集落；③乳腺干细胞C-erbB-2低表达，而Maspin高表达，证明来源于乳腺癌正常组织的乳腺干细胞具有生物安全性。 -
EpCAM蛋白激活DC诱导抗原特异性CTL治疗卵巢癌的实验研究
目的:探讨EpCAM蛋白激活树突细胞(DC)诱导产生CD8+细胞毒T淋巴细胞(CD8+ CTL)进行卵巢癌免疫治疗的效果,为卵巢癌的临床治疗提供帮助.方法:利用EpCAM蛋白诱导成熟DC同时检测DC表面分子和白介素(IL)-10与IL-12表达量的变化,随后通过EpCAM-DC诱导EpCAM抗原特异性CD8+ CTL,继而检测EpCAM-DC-CD8+ CTL对正常卵巢上皮细胞IOSE80和卵巢癌细胞SKVO3的杀伤效果,同时检测干扰素(IFN)-γ释放量.随后进一步检测EpCAM-DC-CD8+ CTL对卵巢癌移植裸鼠的肿瘤抑制程度,并通过病理学染色检测治疗后肿瘤组织变化情况.结果:与PBS刺激相比,EpCAM蛋白能够显著上调DC表面分子DC80、DC83、DC86和HLA-DR水平,依次达到4.79、4.85、4.60和10.91倍;同时EpCAM蛋白显著提高IL-12释放和显著抑制IL-10分泌(P<0.05).DC-CD8+ CTL与EpCAM-DC-CD8+ CTL均引起少量IOSE80细胞凋亡(P>0.05),但EpCAM-DC-CD8+ CTL对SKVO3细胞杀伤率是DC-CD8+ CTL的6.82倍(P<0.05).动物实验表明,经EpCAM-DC-CD8+ CTL治疗后,BALB/c-nu/nu卵巢癌移植肿瘤体积比明显低于PBS组以及DC-CD8+ CTL组,分别达到0.27和0.28倍(P<0.05).HE染色显示 EpCAM-DC-CD8+CTL治疗导致肿瘤组织出现明显的病理学改变.结论:EpCAM蛋白刺激促进了DC成熟继而诱导产生EpCAM特异性CD8+ CTL,EpCAM-DC-CD8+ CTL能够高效的杀伤肿瘤细胞并延迟肿瘤生长,对卵巢癌临床免疫治疗具有重要意义.
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胃癌表达EpCAM和CK19临床意义的研究
目的 探讨胃癌中CK19和EpCAM的表达的临床意义.方法 利用组织芯片-免疫组化技术,对术后病理诊断明确的胃癌31例,良性病变7例和正常胃粘膜16例的组织标本制成一张组织芯片,用免疫组化SP法检测组织芯片中CK19和EpCAM的表达,从循证诊断角度分析两者在胃癌中的诊断价值.结果 (1)CK19、EpCAM在良性病变和胃癌组织中的表达率显著高于正常组织中,差异性显著(P＜0.05); (2)CK19、EpCAM在胃癌的循征医学诊断中有一定的价值,其中以EpCAM、及其与CK19并联实验的价值高.结论 CK19和EpCAM可以帮助胃癌的早期诊断.
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EPCAM在食管鳞状细胞癌中的表达及其与预后的关系
目的 检测EPCAM在食管鳞状细胞癌组织中表达情况,探讨其与临床病理参数的关系及对食管鳞状细胞癌预后的临床意义.方法 应用免疫组织化学方法(Elivision法)检测90例食管鳞状细胞癌组织中EPCAM的表达情况并分析EPCAM与食管鳞状细胞癌临床病理特征及预后的关系.结果 EPCAM在食管鳞状细胞癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织.EPCAM在食管鳞状细胞癌的阳性表达与患者的年龄、性别、有无脉管浸润、组织学分级、TNM分期、淋巴结转移无关,而与浸润深度正相关；EPCAM、浸润深度、淋巴结转移是影响食管鳞状细胞癌预后的独立预后因素.结论 EPCAM可能提示食管鳞状细胞癌发展的恶性进程,其高表达提示食管鳞状细胞癌患者预后不良,有望成为一个新的相对独立的食管鳞状细胞癌预后预测指标.
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FICE染色内镜联合EpCAM检测对肠化型Barrett的诊断价值
近年来,Barrett食管(BE)发病率逐年升高,容易引发食管下段腺癌[1,2].在BE患者中,癌变率高的病理类型为含杯状细胞[3]的特殊肠化型BE,而临床上采用的胃镜检查结合活检诊断BE具有较大的局限性[4],容易导致误诊或漏诊[5].本文拟对反流性食管炎患者采用FICE染色内镜联合EpCAM检测与FICE染色内镜联合CK7检查,旨在对比两组的诊断效果.
关键词： 肠化型Barrett FICE染色内镜 EpCAM -
人EpCAM蛋白胞外区基因原核表达载体的构建及鉴定
目的：构建人EpCAM蛋白胞外区基因原核表达载体。方法通过聚合酶链式反应来扩增人EpCAM分子胞外区的编码基因，将目的基因克隆至T载体，通过酶切反应构建pET32a-EpCAM和pcold-TF-EPCAM重组表达载体。结果 EpCAM胞外区基因成功与pET32a和pcold-TF质粒连接。结论本研究通过构建Ep-CAM胞外区的原核表达载体，为深入研究EpCAM分子的功能提供了实验基础。
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结直肠癌中CD44和上皮细胞黏附分子相关基因与通路的生物信息学研究
目的 寻找结肠癌干细胞表面标志物CD44和上皮细胞黏附分子(EpCAM)表达密切相关的基因及其参与的生物过程.方法 通过生物信息学方法,利用基因表达精选集(GEO)数据库中结直肠癌基因芯片数据,结合R2平台,筛选出与CD44和EpCAM表达显著相关的基因,分析相关基因在不同性别、肿瘤家族史、是否饮酒、Dukes分期中的表达差异,并对比相关基因在其他肿瘤及正常人体组织中的表达情况.同时,利用基因本体及京都基因和基因组百科全书(KEGG)工具对与CD44和EpCAM表达显著相关基因进行基因本体和KEGG通路分析.利用R2平台内嵌统计学工具,采用单因素方差分析和连续校正的四格表卡方检验等进行统计学分析.结果 在此数据集315份结直肠癌标本中均检测出CD44和EpCAM表达,分别筛选出与CD44和EpCAM表达显著相关基因888个和6 316个.CD44与EpCAM共同正相关,且在全部315份样本中均有表达的5个基因的表达与不同性别、肿瘤家族史、是否饮酒、Dukes分期均无明显关系(P均＞0.05).通过与其他肿瘤及正常人体组织中的表达情况进一步对比发现,溶质载体家族12成员2(SLC12A2)、中心粒1蛋白组中心粒蛋白B(POC1B)2个基因在结直肠癌中的表达较其他肿瘤明显增高(F=289.422、128.456,P均＜0.01),并在结直肠癌中的表达较正常人体组织明显增高(F=349.519、128.456,P均＜0.01).对基因本体分析后发现,CD44和EpCAM表达均相关的基因共同涉及15条基因本体语义.对与CD44和EpCAM均相关的基因进行KEGG通路分析后发现,分别有7条和10条通路,差异均有统计学意义(P均＜0.01).结论 CD44和EpCAM在结直肠癌中普遍表达,与CD44和EpCAM表达相关的基因参与了多种肿瘤生物过程.
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MiR-429调节肝细胞癌炎性微环境、分化及增殖
目的 观察miR-429对人肝细胞癌(HCC)炎性浸润、分化以及增殖的影响.方法 利用免疫磁珠法分选人肝癌细胞系HCCLM3细胞,得到EpCAM (CD326)阳性以及阴性的细胞.对两种细胞分别进行miR-429的干扰(AntagomiR-429)与过表达(miR-429mimic),通过流式细胞技术、real-time PCR法检测其干预效果.利用CCK-8法检测miR-429过表达及干扰肝癌细胞系的增殖活性并绘制生长曲线.分别利用干扰miR-429的EpCAM阳性HCCLM3细胞及其对照、过表达miR-429的EpCAM阴性HCCLM3细胞及其对照进行NOD-SCID小鼠皮下荷瘤实验,通过免疫组织化学法检测成瘤后癌组织内炎性细胞浸润情况及增殖分化相关蛋白的表达情况.结果 干扰miR-429的表达能降低EpCAM阳性肝癌细胞的比例,反之,过表达miR-429能促使EpCAM阴性肝癌细胞转化为EpCAM阳性细胞.过表达miR-429可增强EpCAM阴性肝癌细胞在小鼠体内的成瘤能力,而干扰miR-429表达可降低EpCAM阳性细胞成瘤率;与对照相比,过表达miR-429的瘤体组织中出现大量的巨噬细胞,提示miR-429可招募炎性细胞浸润从而促进肿瘤发展;AFP染色提示miR-429与肿瘤的低分化有关;Ki67染色结果证实miR-429在体内能够促进肿瘤组织生长.与对照相比,miR-429在体外也可以促进肝癌细胞的增殖,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 miR-429能够在体外、体内水平影响EpCAM阳性细胞的比例,显著影响肝肿瘤微环境、促进肿瘤细胞的增殖活性并降低其分化潜能.
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ALDH1、EpCAM及Ki67mRNA在大肠癌患者循环肿瘤细胞中的表达及意义
目的 探索大肠癌患者循环肿瘤细胞中ALDH1、EpCAM及Ki67 mRNA的表达临床价值.方法 收集56例健康志愿者和55例大肠癌患者术前外周静脉血,从全血中提取单个核细胞总RNA并反转录成cDNA,用荧光定量PCR Taqman探针法检测外周血样本中ALDH1、EpCAM及Ki67的表达.结果 大肠癌组ALDH1、EpCAM及Ki67 mRNA表达显著高于对照组(P＜0.05);ALDH1的表达量与肿瘤浸润程度及淋巴结转移相关,EpCAM的表达量与TNM分期及远处转移相关(P＜0.05).结论 荧光定量PCR检测大肠癌患者循环肿瘤细胞中ALDH1、EpCAM及Ki67 mRNA的表达作为一种简便可行的分子生物学方法,能为大肠癌患者的分期、预后及个体化治疗提供有价值的信息.
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结直肠癌中EpCAM的表达及与DNA倍体改变的关系
目的 探讨结直肠癌细胞中EpCAM(CD326)表达的临床病理学意义及与DNA倍体改变的关系.方法 应用流式细胞直接免疫荧光法检测55例结直肠癌组织及癌旁正常黏膜组织中EpCAM的表达,用阳性率(percentage of positive cells, PPC)、平均荧光强度(mean fluorescence index, MFI)表示;应用细胞周期分析仪对结直肠癌细胞进行细胞周期分析.用细胞定量术分析EpCAM表达和DNA倍体改变的相关性及其在结直肠癌早期诊断、预后中的价值.结果 55例结直肠癌组织中EpCAM蛋白的PPC为(83.48 ±7.07)％,明显高于癌旁正常黏膜组织(43. 56 ±5.29)％ (t =39.22,P＜0.001).55例结直肠癌组织中 EpCAM蛋白 MFI值为28.90(19.60 ～ 45.89),明显高于癌旁正常黏膜组织的4.89(3.79 ～6.28) (Z =-6.45,P＜0.001).癌组织:浸润型+溃疡型νs肿块型(包括浸润型νs溃疡型),中+低分化νs高分化(包括低分化νs中分化),Dukes分期C + D νs A + B,pTNM分期Ⅲ +Ⅳ νs I + Ⅱ,浸润深度PT3 +T4νs PT1 +T2,淋巴结转移pNl vs PN0,差异均有统计学意义,即生物学行为越差,EpCAM蛋白表达MFI值与PPC越高,而与患者年龄、性别无关.DNA含量分析结果显示:55例结直肠癌中39例(70.90％)为多倍体,DNA指数(DNA index, DI)和DNA倍体与肿瘤分化程度、Dukes分期相关,与淋巴结转移无关.同时,在 EpCAM阳性病例中,DI随着EpCAM表达增强而升高(r =0.668, P=0.000);而增殖指标S期细胞比率(S-phase fraction,SPF)和增殖指数(proliferation index, PI)也随着 EpCAM表达增强而升高(r1 =0.664,P1 =0.000;r2 =0.651 ,P2 =0.000).结论 EpCAM在结直肠癌中的表达明显上调,与肿瘤细胞侵袭转移、增殖密切相关,同时检测EpCAM表达和DNA含量分析能为结直肠癌早期诊断和预后判断提供参考依据.
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As2O3对胃癌细胞中肿瘤干性相关因子表达的抑制作用
目的 观察As2O3对胃癌干性相关因子CD44、EpCAM表达的影响,并探讨其可能的作用机制.方法 体外实验:以MGC803细胞株为实验对象,给予4μmol/L的As2O3处理48 h后,Western blot及RT-PCR法检测CD44、EpCAM的表达.体内实验:建立人胃癌MGC803细胞裸鼠移植瘤模型,分为对照组和As2O3(5 mg/kg/天)组,观察裸鼠体内肿瘤的形成及瘤体组织的体积和重量;给药10天后处死裸鼠,分别用Western blot和RT-PCR法检测两组肿瘤中CD44、EpCAM的表达.结果 体外:细胞在用As2O3处理后,与对照组相比,As2O3组中CD44、EpCAM的蛋白和mRNA表达均减少(P＜0.05).体内:与对照组相比,As2O3组中裸鼠的移植瘤体积和重量明显降低;Western blot和RT-PCR检测结果均表明在As2O3组中移植瘤的CD44、Ep-CAM的蛋白和mRNA表达均降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 As2O3在体内和体外水平均抑制了CD44、EpCAM的表达,因此As2O3对胃癌中的肿瘤干细胞种群具有明显的抑制作用.
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嫌色性肾细胞癌和肾嗜酸细胞腺瘤中CK7、Claudin-7、Epcam、vimentin的表达及其临床意义
目的 探讨CK7、Claudin-7、上皮细胞黏附分子(Epcam)和vimentin在嫌色性肾细胞癌(chromophobe renal cell carcinoma,ChRCC)和肾嗜酸细胞腺瘤(renal oncocytoma,RO)中的表达,及其诊断与鉴别诊断的意义.方法 采用免疫组化EnVision两步法检测24例ChRCC和17例RO中CK7、Claudin-7、Epcam和vimentin的表达.结果 CK7、Claudin-7、Epcam和vimentin在ChRCC中的阳性率分别为79.17％ (19/24)、95.83％(23/24)、91.67％(22/24)、8.33％(2/24),在RO中的阳性率分别为23.53％ (4/17)、41.18％ (7/17) 、29.41％ (5/17) 、0(0/17);CK7、Claudin-7和Epcam在这两种肿瘤中的表达差异有统计学意义(P＜0.05);虽然vimentin在两种肿瘤中的表达差异无统计学意义(P＞0.05),但与其它含有嗜酸性细胞的肾脏肿瘤表达差异有显著性.结论 CK7、Claudin-7和Epcam可作为鉴别ChRCC与RO的免疫标志物,vimentin有助于ChRCC、RO与其它含有嗜酸性细胞的肾脏肿瘤鉴别.
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人肝癌组织中EpCAM的表达及其意义
目的 探讨EpCAM在肝细胞癌中的表达及其临床意义,为获取肝癌诊断相关的蛋白分子提供实验资料.方法 采用组织芯片和免疫组化技术检测EpCAM在肝癌组织、癌旁组织及其癌旁正常组织中的表达.结果 EpCAM在肝癌组织、癌旁组织、癌旁正常组织中的阳性率分别为81.7％(49/60)、61.7％ (37/60)、0,三组间差异有统计学意义(P＜0.01).肝癌组织中EpCAM高表达与临床分期、病理分级和民族相关(P＜0.05),与患者年龄、肿瘤直径、AFP值、包膜完整度和门脉瘤栓无关(P＞0.05).EpCAM阳性肝癌患者的生存期短于阴性患者,但两组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 EpCAM在肝癌组织中表达上调,其可能参与原发性肝癌发生、发展的恶性进程.
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肝细胞癌中干细胞标志物CD133、EpCAM的表达及其临床意义
目的：检测干细胞标志物CD133、上皮细胞黏附分子( epithelial cell adhesion molecule, EpCAM)在肝细胞癌( hep-atocellular carcinoma, HCC)及癌旁肝组织中的表达,探讨其与临床病理特征的关系及对肝癌预后的意义。方法应用免疫组化EnVision两步法检测70例HCC及55例癌旁肝组织中CD133、EpCAM的表达。结果 CD133、EpCAM在HCC中的阳性率明显高于癌旁肝组织( P <0．05)。 HCC 中CD133表达与肿瘤大小及有无肝硬化密切相关( P<0．05), EpCAM表达与肿瘤组织病理学分级及有无脉管浸润相关( P<0．05)。 HCC中CD133与EpCAM阳性存在显著正相关( r=0．467,P<0．01)。 CD133、EpCAM阳性的HCC患者生存期明显短于阴性组( P<0．05)。结论 CD133、EpCAM可能参与HCC的发生、发展,其高表达提示患者预后不良。
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三阴性乳腺癌中EpCAM和Sox2的表达及临床意义
目的：探讨 EpCAM 和 Sox2在三阴性乳腺癌( triple negative breast cancer, TNBC)中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测EpCAM和Sox2在81例TNBC、71例非三阴性乳腺癌( non-triple-negative breast cancer, non-TN-BC)、20例癌旁正常乳腺组织中的表达。结果 TNBC组织中EpCAM、Sox2的阳性过表达率分别为74.1%、54.3%,均高于正常乳腺组织(15.0%和0)(P<0.05)；EpCAM蛋白过表达与TNBC 的组织学分级、淋巴结转移呈正相关( P <0.05)；Sox2蛋白表达与TNBC淋巴结转移、pTNM分期呈正相关( P<0.05)。 EpCAM 和 Sox2蛋白表达可能具有相关性。结论 EpCAM和Sox2蛋白在TNBC中均高表达,可能具有促癌作用及与淋巴结转移相关。
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EpCAM、Oct-4在肝细胞癌中的表达及临床意义
目的 探讨干细胞表面标志物EpCAM和Oct-4在肝细胞癌中的表达分布情况及其与肝细胞癌的关系.方法应用免疫组化S-P法检测65例肝细胞癌和相应癌旁组织中EpCAM和Oct-4的表达、分布情况.结果 肝细胞癌组织中EpCAM和Oct-4蛋白产物阳性表达率分别为43.1％ (28/65)和53.8％ (35/65)(P＜0.05),明显高于相应癌旁组织4.62％(3/65)和7.69％ (5/65),EpCAM在高水平AFP组的肝细胞癌患者中呈高表达(P＜0.05),而Oct-4在无肿瘤包膜组或有门静脉癌拴组的肝细胞癌患者中呈高表达(均P ＜0.05),EpCAM与Oct-4在肝细胞癌中的表达呈正相关(P＜0.05).结论 EpCAM 和Oct-4可能与肝细胞癌的发生、发展相关,Oct-4有可能成为肝癌干细胞表面标记物.
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肿瘤标志物EpCAM在胃癌组织中的表达
目的 利用组织芯片技术研究91例胃癌中EpCAM的表达及临床意义.方法 选取91例胃癌癌灶组织为实验组,随机选取79例取其癌灶远隔组织胃黏膜为对照组.采用组织芯片及免疫组化技术分析组织中EpCAM表达情况,分析胃癌组EpCAM表达与C12结果的差异性.结果 91例胃癌组织中EpCAM阳性率为92.3％;对照组组织EpCAM阳性率为13.9％,两者差异有统计学意义.EpCAM在胃癌组织中的表达与性别、年龄、癌灶部位、瘤体大小、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、pTNM分期、大体分型、病理类型等无明显相关性.91例胃癌患者C12阳性率为44.0％,EpCAM阳性率为92.3％,两者差异有统计学意义.结论 EpCAM可用于胃癌的诊断,不受临床病理资料因素影响;组织EpCAM在胃癌中的诊断价值优于血清C12.
