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儿童急性呼吸道博卡病毒感染
了解博卡病毒(Human Bocavirus, HBoV)在我国儿童急性呼吸道疾病中的感染情况.采用PCR扩增的方法对2005年10月～2006年1月收集的72例急性呼吸道感染的住院儿童鼻咽抽吸物(nasopharyngeal aspirates,NPA)进行了HBoV 基因检测.将PCR阳性产物进行TA克隆,测序,并将所测序列与GenBank中HBoV序列进行比较分析.72份标本中共检测到6份HBoV 阳性扩增产物,阳性率为8.3% (6/72),该6例HBoV阳性患儿临床均有肺炎或支气管肺炎症状.由此可以初步看出HBoV可能也是儿童急性呼吸道感染中较为重要的一个病原,且可能与儿童急性下呼吸道感染存在相关性.
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中国厦门地区献血者细小病毒B19感染情况研究
目的:了解中国厦门地区献血者细小病毒B19感染情况.方法:对中国厦门地区部分献血者标本进行细小病毒B19核酸检测和抗体检测,对核酸检测阳性标本进行序列测定和基因型分析.结果:在总共10 452人份献血者标本中检出6例B19核酸阳性,阳性率0.06％,阳性标本的DNA定量结果为3.59×102-1.07×104IU/ml:6例核酸阳性标本测序分析结果均为基因Ⅰ型.B19-IgM抗体阳性率为4.64％ (50/1078),B19-IgG阳性率16.79％ (181/1078);B19-IgG阳性率随年龄增加而升高(x2=7.964,P＜0.05),与性别差异无关.结论:中国厦门地区献血者细小病毒的总体感染率较其他地区偏低,但也存在一定比例的病毒血症,在今后的输血保障工作中应引起重视.
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吉林省供血者人类细小病毒B19 IgG抗体的调查
目的了解吉林省供血者人类细小病毒感染的流行病学情况,为评估我国B19病毒的感染状况提供基础数据.方法用间接ELISA方法检测血清中的抗B19 IgG抗体.结果在184份血清中,抗B19 IgG抗体总检出率为55.43%.女性抗体阳性率高于男性,差异有统计学意义(P＜0.05),年龄段在35～45岁之间的献血人员抗体阳性率高.结论本研究数据提示吉林省地区献血人员B19病毒感染率较高,有必要进行进一步B19 DNA的调查研究,为输血安全和血液制品安全提供保障.
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西藏藏族人群中细小病毒B19基因与内地汉族人群的差异
目的 分析人细小病毒B19及人细小病毒4(PARV4)在西藏藏族人群中与内地汉族人群中的基因特点.方法 采用建立的B19与PARV4 PCR筛查方法,分别从西藏藏族人群中与内地汉族人群血液标本中获得人细小病毒B19及PARV4的部分基因片段,经纯化、测序后,进行基因进化树分析.结果 共获得10个B19 VP1基因片段序列(西藏,2个;四川,3个;浙江,5个);10个PAV4ORF1基因片段序列(西藏,2个;四川,2个;云南,1个;浙江,5个);西藏藏族人群中细小病毒B19基因与内地汉族人群同属基因1A亚型,但为不同进化分支;而西藏藏族与内地汉族人群PAV4基因属同一分支.结论 细小病毒B19基因在西藏藏族与内地汉族人群中的差异分析为该病的检测与控制提供了参考.
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南京95例肝病患者中3种人细小病毒感染的检测与分析
目的 建立人细小病毒B19、人博卡病毒(HBoV)及人细小病毒4(PARV4)分子检测方法,并应用于南京95例肝病患者血浆中三种人细小病毒的感染情况分析.方法 分别建立人细小病毒B19、HBoV及PARV4感染的巢式PCR方法,确定其灵敏度与特异性；并对南京市某医院95例住院肝病患者血浆中三种人细小病毒的感染情况进行检测,并对检测结果进行统计学分析.结果 建立的三种巢式PCR方法特异性好,检测灵敏度均可达10个拷贝.95例肝病患者血浆中检出B19感染2例(2.1％),HBoV感染9例(9.5％),且发现在5例药物性肝炎患者中检出HBoV阳性3例,但未检出PARV4.结论 人细小病毒B19、人博卡病毒(HBoV)及人细小病毒4(PARV4)巢式PCR检测方法灵敏特异.从肝病患者血浆中检出了B19及HBoV.
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妊娠期妇女人细小病毒B19感染与死胎及胎儿畸形关系的研究
目的 了解妊娠期妇女人细小病毒B19（human parvovirus B19,简称B19）感染与死胎及胎儿畸形的关系。方法 采用前瞻性的研究方法，应用聚合酶链反应（PCR）技术对335例孕妇血清进行B19 DNA检测，并随访其妊娠结局。结果 在335例孕妇中，血清B19 DNA阳性67例，B19 DNA阴性268例。其中在67例B19 DNA阳性者中，发生4例死胎和1例无脑儿，在268例B19 DNA阴性者中，无一例发生死胎和胎儿畸形，阳性与阴性者间比较，差异有显著性(P<0.05)。两者正常分娩的新生儿外观均无异常。结论 妊娠期妇女感染B19可导致死胎和胎儿畸形发生。
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应用巢式聚合酶链式反应技术检测孕妇人微小病毒B19非结构蛋白DNA
目的探讨巢式PCR技术检测人微小病毒B19(B19病毒)非结构蛋白DNA的灵敏性及特异性.方法参照经典的巢式PCR技术检测B19病毒结构蛋白DNA的方法,检测30例孕妇血清及胎盘绒毛组织中的B19病毒结构蛋白及非结构蛋白DNA.并与人巨细胞病毒、乙肝病毒、丙肝病毒、腺病毒等及人类基因组DNA同批作巢式PCR检测,以观察巢式PCR检测B19病毒非结构蛋白DNA的特异性.结果 (1)巢式PCR检测B19病毒非结构蛋白DNA的小检出量为0.005 fg,灵敏性可达0.005 fg.(2)B19 病毒质粒模板在103 bp处出现靶条带,而人巨细胞病毒、乙肝病毒、丙肝病毒、腺病毒等及人类基因组DNA均无扩增产物产生.(3)孕妇血清及胎盘、绒毛组织中的B19病毒结构蛋白检出率均为26.7%(8/30),而非结构蛋白DNA检出率在血清中为33.3%(10/30),胎盘、绒毛组织中均为26.7%(8/30).两者比较,差异均无显著性(P>0.05).结论巢式PCR技术检测B19病毒非结构蛋白DNA是一种灵敏、特异、简便、快速诊断B19病毒感染的新方法.
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人类细小病毒B19感染与新生儿高间接胆红素血症
目的探讨人类细小病毒B19(HPVB19)感染与新生儿高间接胆红素血症(新生儿高胆)发生的关系.方法对136例新生儿高胆及123例正常新生儿用聚合酶链反应技术进行血液HPVB19-DNA的检测.结果 136例新生儿高胆的患儿HPVB19-DNA阳性者48例,阳性率35.3%,123例正常新生儿HPVB19-DNA阳性者12例,阳性率9.8%,两组之间阳性率比较有非常显著性差异(χ\+2=23.7,P＜0.005).结论新生儿高胆的发生与HPVB19感染有关.
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人类细小病毒B19感染与小儿急性特发性血小板减少性紫癜
目的探讨人类细小病毒B19(HPVB19)感染与小儿急性特发性血小板减小性紫癜(ITP)发生的关系.方法对23例小儿急性ITP及17例对照组小儿用聚合酶链反应技术进行HPVB19-DNA的检测.结果23例急性ITP患儿HPVB19-DNA阳性者7例,阳性率30.4%,17例对照组小儿HPVB19-DNA检测均阴性,两组间阳性率比较有非常显著性差异(X2=4.096,P＜0.05).结论小儿急性ITP的发生与HPVB19感染有关.
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血清与骨髓中细小病毒B19的检测及相关疾病探讨
目的建立巢式PCR方法进行血清与骨髓标本中细小病毒B19(PVB19)的检测,并比较两者间的差异,进一步探讨某些疾病与PVB19感染的可能关系.方法对住院治疗的108例血液病患儿、133例正常儿童以及23例成人血液病患者的血清标本应用巢式PCR进行PVB19 DNA检测.108例患儿中有37例同时收集血清与骨髓涂片进行PCR扩增,另外有37例同时应用ELISA方法进行PVB19特异性IgM检测.结果 ELISA实验中的37例有2例(2/37,5.4%)PVB19特异性IgM阳性.而巢式PCR检测阳性为11例(11/37,29.7%).血液病患儿PVB19 DNA总阳性率为27.8%,其中ITP患儿中阳性率为26.9%,白血病患儿中阳性率83.3%;成人医院收集的血液标本中阳性率为26.1%;正常儿童中未检测到PVB19 DNA.同时收集了血清与骨髓涂片的37例标本中血清PVB19 DNA阳性率27.0%(10/37),骨髓涂片总检出率为37.8%(14/37).结论巢式PCR方法与ELISA实验比较具有灵敏度高、特异性强的特点,而血清标本的敏感性要低于骨髓标本,在ITP、白血病等患者中PVB19有较高的检出率.
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人细小病毒B19 VP1独特区基因变异的研究
目的获取人细小病毒B19(HPV B19) VP1 独特区基因,并进行序列测定及变异分析,为研制诊断试剂及预防疫苗创造条件.方法应用聚合酶链反应(PCR)技术从1例急性特发性血小板减少性紫癜患儿的血清中扩增HPV B19 VP1 独特区基因片段,将其克隆至pGEM-T easy载体,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,测定目的基因的序列.结果成功地扩增到HPV B19 VP1 独特区全长基因,长度为705个核苷酸,测定结果与Genbank中Gallinella G 和 Venturoli S所发表的HPV B19 VP1 独特区全长基因序列比较,有2处核苷酸发生突变,但所编码的氨基酸均未发生变化.结论 (1)HPV B19 VP1 独特区有基因变异;(2)构建了HPV B19 VP1 独特区基因的重组质粒,所获实验结果为深入研究奠定了基础.
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人细小病毒B19感染与死胎关系的初步研究
人细小病毒B19是动物病毒中体积小、结构简单的一种单链线状DNA病毒,是引起非免疫性胎儿水肿和死胎的重要病原.国外研究已有10年,国内研究则刚刚起步.作者收集了23例不明原因死胎组织进行B19DNA检测,并取同期人工流产胎组织40例作对照.旨在探讨国内B19病毒感染状况及其与死胎的关系.
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细小病毒B19感染的研究进展
人细小病毒B19(human parvovirus B19,B19)业已证明是细小病毒属中同人类疾病相关的一种小DNA病毒,可引起急性再生障碍性贫血(再障),传染性红斑、关节炎、紫癜等多种儿童疾病[1,2].儿童有较高的感染率和发病率,同时也是B19感染的主要传播者[3],国内对该病的研究较少,现就B19的生物学特性及其感染后的临床表现、发病机制,实验室诊断及治疗进展综述如下.
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巢式PCR检测恶性淋巴瘤患儿骨髓人细小病毒B19DNA
目的:用巢式聚合酶链反应(PCR)技术检测恶性淋巴瘤患儿骨髓中人细小病毒B19感染状态.方法:收集住院期间29例患有恶性淋巴瘤的患儿骨髓标本,对照组为非血液系统疾病的患儿骨髓标本26例行病例对照研究,用巢式PCR检测B19-DNA.结果:29例恶性淋巴瘤患儿骨髓中B19-DNA阳性9例,阳性率为31.0%,与对照组比较差异非常显著(P＜0.01);结论:提示恶性淋巴瘤患儿是B19-DNA的易感群体.化疗及免疫功能低下的淋巴瘤患儿发生B19感染易引起持续感染致慢性贫血.
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人类微小病毒B19致小儿心脏损害15例临床分析
人类微小病毒B19(HPVB19)是微小病毒属中惟一使人类致病的一种病原体,是一种小DNA病毒,其感染后可引起小儿多种病症,如再生障碍性贫血危象、血小板减少性紫瘢、关节炎、脑炎、川崎病等已屡有报道,但引起心脏损害的病例国内罕见报道.现将本院经聚合酶链(PCR)确诊HPVB19感染引起心脏损害的15例报告如下.
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人细小病毒B19感染与过敏性紫癜
目的探讨过敏性紫癜与人细小病毒B19感染的关系及免疫状况.方法采用ELISA法对42例过敏性紫癜患儿血清进行B19病毒抗体IgM检测,同时采用流式细胞仪检测42例过敏性紫癜患儿的T细胞亚群、自然杀伤细胞(NK)细胞活性.结果① 42例过敏性紫癜患儿血清B19抗体IgM阳性13例(30.95%),28例对照组阳性1例,两组差异有非常显著性意义(P<0.01);②过敏性紫癜患儿存在T细胞亚群异常,NK细胞活性降低.结论①福建省过敏性紫癜人群有较高B19病毒感染率. ②过敏性紫癜与B19病毒感染有较密切关系.③过敏性紫癜患儿存在T细胞功能紊乱,NK细胞活性降低,B19相关性过敏性紫癜患儿NK细胞活性降低更为显著.
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细小病毒B19感染与系统性红斑狼疮相关性研究
目的通过检测系统性红斑狼疮(SLE)患者血清中细小病毒B19(PVB19)特异性抗体,观察B19 IgM阳性与SLE病情及活动程度的相关性,探讨PVB19感染与SLE之间可能存在的联系.方法采用德国IBL Hamburg公司PVB19-VP2-IgM、IgG酶联免疫吸附试验(ELISA)检测试剂盒,检测51例SLE患者及20名正常人血清PVB19的特异性抗体.结果51例SLE患者中B19 IgM抗体阳性11例(22%),而正常对照组都为阴性,差异有统计学意义(P＜0.01).根据B19 IgM阳性/阴性对SLE患者分组后发现,B19 IgM阳性组SLE疾病活动评分(SLEDAI)显著高于阴性组(P＜0.05);B19 IgM阳性组与阴性组临床特征相比,除丙氨酸转氨酶(ALT)或天冬氨酸转氨酶(AST)上升差异有统计学意义(P＜0.05)外,其余差异均无统计学意义(P＞0.05).对5例B19 IgM阳性的SLE患者随访2年发现,这些患者临床症状显著改善,SLEDAI评分显著下降(P＜0.05),但自身抗体水平[抗核抗体(ANA)、抗双链DNA(dsDNA)]无显著性改变(P＞0.05),ALT或AST均恢复正常.结论PVB19感染在诱发SLE活动中起作用,但与SLE预后可能无关.
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细小病毒性关节炎四例临床分析并文献复习
目的 通过对我科确诊的4例细小病毒B19(parvovirus B19)关节炎的临床特点的总结,提高对该病的认识.方法 报道4例确诊为细小病毒B19关节炎的临床及实验室检查特点,并进行文献复习.结果 4例患者(男性2例,女性2例),年龄15～55岁,发病年龄中位数为34岁.关节炎同时出现流感样症状、皮疹等表现,外周血细小病毒B19 IgM均阳性,3例患者外周血细小病毒B19DNA检测阳性,除外其他原因所致关节炎,治疗效果肯定,随访1～3年无一例复发.结论 对于某些症状不典型的关节炎,应警惕细小病毒B19关节炎的可能,及时行细小病毒B19抗体及DNA检测,以助诊断.
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细小病毒B19感染与系统性红斑狼疮
细小病毒B19(VB19)感染可以引起与系统性红斑狼疮(SLE)相似的临床和实验室检查特征,表现为SLE样综合征,也可以引起或加重SLE鉴别困难.SLE样综合征常仅符合美国风湿病协会标准4条以下,不常累及心脏和肾脏,很少出现溶血性贫血,自身抗体存在时间短、滴度低.该文对VB19的结构、常见临床过程进行了描述,重点总结了与SLE的关系及诱导病态自身免疫反应的可能机制为VB19利用红细胞糖苷脂、α5β1-整联蛋白、Ku80等细胞受体进入宿主细胞,通过分子模拟或超抗原等作用机制破坏自身免疫耐受,引起自身免疫性疾病的过程.
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细小病毒B19的芯片检测方法构建
目的 运用基因芯片技术构建快速简便检测B19细小病毒的方法,用于B19病毒的大规模筛查和早期诊断.方法 利用Oligo6.0和primer5.0软件分别设计出5对引物(其中每对引物中的1个用Cy5标记)和6个探针,将探针固定在特制的醛基检测芯片上.分别提取B19病毒全基因组质粒、患者组血清、正常组血清的DNA,进行不对称扩增,产物与芯片杂交,观察结果；DNA测序验证芯片检测结果的准确性；观察等倍稀释不对称PCR扩增产物杂交信号的强度变化,检测芯片的灵敏度.结果 电泳结果表明PCR扩增获得的DNA片段和预期表达片段大小一致.芯片杂交结果和DNA测序验证结果完全吻合,芯片杂交信号的强弱会随着DNA浓度的降低而减弱.结论 本研究建立了细小病毒B19的芯片检测方法,该方法并具有较高的灵敏度和特异性.
