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益气除痰方对肺癌移植鼠内质网分子伴侣蛋白GRP94表达的影响
目的：观察益气除痰方对脾虚Lewis肺癌移植鼠内质网分子伴侣蛋白GRP94表达的影响，探讨其抗癌的可能作用机制。方法采用苦寒泻下加饥饱失常方式建立脾虚小鼠模型，再将无血清培养基制备的癌细胞悬液接种至脾虚C57BL/6小鼠背侧，制作脾虚Lewis肺癌小鼠模型。将48只成模小鼠随机分为模型组、化疗组、联合用药组及益气除痰方低、中、高剂量组，每组8只。各给药组给予相应药物干预。给药14 d后处死小鼠，检测肿瘤体积和质量；HE染色观察各组移植瘤组织形态，免疫组化、Western blot和RT-PCR检测肿瘤组织GRP94蛋白和基因表达。结果与模型组比较，化疗组、联合用药组及益气除痰方中、高剂量组肿瘤体积、肿瘤质量明显降低（P＜0.05，P＜0.01），肿瘤细胞大量坏死，GRP94蛋白表达明显降低（P＜0.01）；与化疗组比较，联合用药组GRP94蛋白表达明显降低（P＜0.01）。结论益气除痰方联合化疗可有效治疗Lewis肺癌小鼠，其机制可能与其下调内质网分子伴侣蛋白GRP94表达、逆转肿瘤细胞自身保护机制相关。
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白藜芦醇减轻异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌细胞肥大
目的 探讨白藜芦醇(RES)对异丙肾上腺素(ISO)诱导的大鼠心肌细胞肥大的保护作用及对心肌肥大时内质网应激相关因子GRP78和GRP94表达的影响.方法 建立ISO诱导大鼠心肌细胞肥大模型,将乳鼠心肌细胞分为正常对照组、异丙肾上腺素组(加入ISO 0.3 μg/mL作用48 h)、白藜芦醇干预组(RES 11.4 μg/mL作用48 h)和白藜芦醇对照组.采用Leica 2Q500图像分析系统检测心肌细胞表面积和心肌肥大标志基因心房钠尿肽(ANP)表达,评价心肌细胞肥大程度;检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性和丙二醛(MDA)含量;实时定量PCR,检测ANP mRNA基因表达和Western blot分析GRP78和GRP94的蛋白表达.结果 异丙肾上腺素注射液组与正常对照组比较,ISO作用心肌细胞48 h诱导心肌细胞肥大后,内质网应激相关因子GRP78和GRP94蛋白表达均增高(P<0.01,P<0.05);白藜芦醇干预组与异丙肾上腺素组比较,RES干预可以有效抑制ISO诱导的心肌细胞肥大(P<0.05);同时降低GRP78和GRP94的蛋白表达(P<0.05,P<0.01),减少细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)的释放(P<0.05).结论 RES通过抑制心肌细胞内质网GRP78和GRP94表达,发挥对心肌肥大的保护作用.
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内质网应激蛋白在糖尿病心肌损伤大鼠表达的变化
目的 检测内质网应激蛋白Grp78及Grp94在糖尿病心肌损伤大鼠中表达的变化,探讨内质网应激在糖尿病心肌损伤中发挥的作用. 方法 Wistar大鼠随机分为正常对照(A)组及糖尿病模型(B)组,B组腹腔注射STZ 35 mg/kg制备.两组均饲养至20周龄时取大鼠尾静脉血测FPG、FIns,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).取大鼠心肌组织检测肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)活力.心肌组织HE染色,免疫组化法检测Grp78及Grp94表达变化,RT-PCR测定Grp78 mRNA、Grp94 mRNA的表达. 结果 B组FPG、FIns、HOMA-IR、CK和LDH均高于A组(P均＜0.05).B组心肌纤维肥大,走形较为紊乱,出现核固缩、裂解及丢失现象,心肌细胞变性、坏死,横纹肌消失；B组Grp78和Grp94免疫组化阳性指数(IPI)高于A组(P均＜0.01)；RT-PCR产物琼脂糖凝胶电泳显示,B组Grp78 mRNA及Grp94mRNA条带较A组变粗变亮,Grp78 mRNA、Grp94 mRNA表达量增加(P均＜0.01). 结论 内质网应激蛋白Grp78及Grp94在糖尿病心肌损伤大鼠中表达比正常大鼠增加,内质网应激可能在糖尿病心肌损伤中发挥作用.
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Ⅰ期非小细胞肺癌GRP94和淋巴结微转移与预后相关性分析
目的 肺癌的局部淋巴结微转移是肺癌患者术后复发的重要原因.本研究探讨葡萄糖调节蛋白94(glucose regulated protein 94,GRP94)和非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)之间的联系及GRP94在Ⅰ期NSCLC患者淋巴结中表达情况与患者预后的相关性,为患者的术后治疗提供理论依据.方法 采用免疫组化(immunohistochemical,IHC)法检验2011-02-01-2014-01-31佳木斯大学附属第一医院胸外科54例Ⅰ期NSCLC组织及10例肺良性病变患者正常肺组织GRP94的表达;IHC法检验所选54例Ⅰ期的NSCLC患者及10例肺良性病变患者的肺门(N1)淋巴结、隆突下(N2)淋巴结中GRP94表达情况;随访所选54例患者预后(无癌生存时间).结果 54例患者癌组织中GRP94阳性表达率为100%(54/54),10例正常肺组织中无GRP94表达,差异有统计学意义,χ2=56.640,P<0.001.108枚肺癌患者淋巴结中有22枚GRP94表达阳性,20枚正常淋巴中GRP94未见表达,差异有统计学意义,χ2=3.593,P=0.058.8例N1淋巴结GRP94阳性表达患者与36例淋巴结中未见GRP94表达患者生存曲线对比,差异无统计学意义,χ2=0.264,P=0.608.6例N2淋巴结GRP94阳性表达患者与36例淋巴结中未见GRP94表达,患者生存曲线对比,差异有统计学意义,χ2=7.282,P=0.007.多因素分析显示,N2淋巴结微转移是Ⅰ期NSCLC患者预后不良危险因素,P=0.008.结论 GRP94与肺癌的发生发展具有一定的相关性,N2淋巴结微转移的患者对比不存在N2淋巴结微转移的患者,生存率显著降低.N2淋巴结微转移是Ⅰ期NSCLC患者预后较差危险因素.
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内质网应激预处理对肝毒性药物导致原代大鼠肝细胞损伤的保护作用研究
目的 探讨大鼠肝细胞的内质网应激预处理对临床相关肝毒性药物肝细胞损伤的保护作用.方法 (1)将培养的原代大鼠肝细胞分为8组,分别予以不同浓度的衣霉素和毒胡萝卜素进行干预,尔后检测葡萄糖调节蛋白78 GRP78、葡萄糖调节蛋白94 GRP78.(2)衣霉素和毒胡萝卜素干预作用24 h后,可造成50％ ～ 75％的细胞死亡.对肝细胞进行预处理后,再使用顺铂、百草枯和利福平对细胞进行干预,检测细胞生存率.结果 内质网应激诱导剂(毒胡萝卜素、衣霉素)对于GRP78和GRP94的表达表现出剂量相关的诱导作用,随着浓度的增加其表达量也逐渐增加,其变化具有明显的统计学意义(P＜0.05).而临床相关的毒性药物(顺铂、利福平、百草枯)对细胞的损伤可明显地因毒胡萝卜素和衣霉素的内质网应激预处理而减轻,其结果具有统计学意义.结论 内质网应激预处理对临床相关肝毒性药物导致原代大鼠肝细胞损伤具有保护作用.这些结果提示在药物导致的肝损伤中内质网应激或许起到了一定作用.
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宫颈癌组织中MHC-Ⅰ类抗原呈递相关蛋白CNX HSP90 GRP94的表达及意义
目的:探讨宫颈炎和宫颈癌组织中CNX、HSP90、GRP94蛋白和HPV16感染在维吾尔族和汉族妇女中的表达及相关关系.方法:采用免疫组化SP法和PCR技术检测宫颈炎组织66例(汉族39例,维吾尔族27例)以及宫颈癌组织92例(汉族30例,维吾尔族62例)中CNX、HSP90、GRP94蛋白的表达和HPV16的感染情况.结果:CNX蛋白在维、汉宫颈癌组织中的阳性率低于维、汉宫颈炎组织中阳性率表达(67.39%,86.36%)(P<0.05).并且,CNX蛋白的阳性率在宫颈炎组织中维吾尔族高于汉族(100%,76.92%)(P<0.05).HSP90和GRP94蛋白在维、汉宫颈癌组织中的阳性率表达高于维、汉宫颈炎组织(77.17%,56.06%;77.17%,60.60%)(P<0.05).宫颈癌组织中HSP90蛋白阳性率表达维吾尔族低于汉族(74.19%,83.33%)(P<0.05).HPV16感染在宫颈炙及宫颈癌中的阳性率均为维吾尔族高于汉族(P<0.05).通过相关性研究发现,在维吾尔族妇女宫颈癌组织中HSP90与GRP94呈正相关性(r=0.249,P<0.05).HSP90蛋白的阳性表达率与HPV16型感染在宫颈癌组织中呈显著正相关(r=0.361,P<0.05).结论:通过对CNX、HSP90、GRP94蛋白和HPV16联合检测能提高宫颈癌的栓出率.
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GRP94在四氯化碳诱导大鼠肝纤维化过程中的动态变化
目的:观察糖调节蛋白(CRP94)在四氯化碳(CCl4)促大鼠肝纤维化过程中的动态变化,探究GRP94与肝纤维化的关系.方法:选择25只雌性SD大鼠随机分为对照组和模型组,对照组皮下注射油剂2 mL/kg,每周2次,共8周.模型组皮下注射CCl4橄榄油(1:1)2 mL/kg,每周2次,共8周,制备大鼠肝纤维化模型.同时采用RA1000全自动生化分析仪测定血清谷丙转氨酶(ALT);Masson染色观察各组肝组织病理学变化和肝纤维化程度的变化;免疫组化染色法测定肝组织GRP94蛋白表达,通过图像分析系统定量测定GRP94,并将其与肝纤维化程度、肝功能进行相关分析.结果:随着造模时间的延长,模型组大鼠ALT升高,肝纤维化程度加重,肝组织表达GRP94增加,其表达程度与肝功能、肝纤维化程度呈正相关.结论:在肝纤维化形成过程中,GRP94表达逐渐增加,提示其在肝纤维化形成中起促进作用.
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PTSD样大鼠杏仁核内质网分子伴侣GRP 94和caspase-12表达的改变
目的 探讨杏仁核神经元内质网应激(ERS)相关因子葡萄糖调节蛋白94(GRP94)及胱冬酶12(c)在创伤后应激障碍(PTSD)大鼠发生发展中的作用.方法 建立无连续单一刺激(SPS)模型,随机分为SPS刺激后7天组(SPS7d)、14天组(SPS14d)及正常对照组.应用免疫组织化学、Western Blot、RT-PCR和透射电镜技术,检测和观察各组杏仁核神经元GRP94、caspase12 mRNA与蛋白表达及超微结构变化.结果 与正常对照组相比,SPS7d和SPS14d组神经元GRP94蛋白表达水平明显增加,GRP94 mRNA和caspase-12 mRA表达水平也明显增加(P＜ 0.05);SPS各组神经元均有核内异染色质凝聚、边集及粗面内质网扩张等不同程度的改变.结论 SPS刺激可能通过杏仁核神经元GRP94表达增加启动了内质网自稳调节系统及内质网相关的caspase-12凋亡径路,进而参与PTSD的发生.
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小干扰RNA抑制卵巢癌模型裸鼠移植瘤葡萄糖调节蛋白94的表达及意义
背景：一些实验在模型鼠移植瘤中葡萄糖调节蛋白94被敲除后，细胞黏附中断，刺激肝起源细胞增殖，进而促进肝肿瘤的发生，推测葡萄糖调节蛋白94在肝癌中起到保护作用。
目的：应用小干扰RNA技术抑制裸鼠卵巢癌模型皮下移植瘤内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白94的基因表达，探讨移植瘤中葡萄糖调节蛋白94基因及蛋白表达的变化对移植瘤生长的影响。
方法：从GeneBank中选取人类葡萄糖调节蛋白94基因序列，构建受控于人RNA聚合酶Ⅲ启动子U6的真核表达载体psiSTRIKETM/葡萄糖调节蛋白94。建立人卵巢癌HO-8910细胞株裸鼠皮下接种模型，并将真核表达载体转染入裸鼠移植瘤体内，观察肿瘤生长情况。卵巢癌裸鼠模型经过不同给药方案干预后分为特异性小干扰RNA组，非特异性小干扰RNA组和生理盐水对照组， RT-PCR和免疫组化SP法检测葡萄糖调节蛋白94 mRNA和蛋白在肿瘤内的表达情况，并观察模型裸鼠的移植瘤生长情况。
结果与结论：成功构建RNA干扰质粒载体，所有裸鼠模型均接种成功，5 d后即可见皮下肿瘤形成，14 d左右肿瘤直径达7-10 mm。转染质粒完毕后抑瘤率为65.1%，与非特异性小干扰RNA组和生理盐水对照组比较，差异有显著性意义(P<0.01)。psiSTRIKETM/GRP94治疗后瘤体内葡萄糖调节蛋白94 mRNA和蛋白显著下调(P <0.01)。说明靶向葡萄糖调节蛋白94 mRNA的小干扰RNA可显著抑制人卵巢癌裸鼠移植瘤的生长，其机制可能是诱导葡萄糖调节蛋白94 mRNA和蛋白表达下调所致。 -
GRP94在人增生性瘢痕组织中的表达及曲安奈德对其影响
目的 观察GRP94在人增生性瘢痕组织中的表达及曲安奈德对其影响,探讨GRP94在增生性瘢痕形成中的作用.方法 以10例正常皮肤组织作为对照,采用免疫组化法和免疫印迹法检测10例增生性瘢痕组织中GRP94蛋白的表达;建立人增生性瘢痕移植于裸鼠的模型,以注射生理盐水作为对照,采用免疫组化法检测曲安奈德对GRP94表达的影响.结果 ①GRP94主要在增生性瘢痕和正常皮肤组织的角质形成细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞和炎症细胞的胞浆表达,在少数细胞的胞核中也有表达;在正常皮肤的毛囊、汗腺、皮脂腺中表达.②GRP94在增生性瘢痕和正常皮肤组织中的表达:在表皮中,两者比较其差异无统计学意义(P＞0.05);在真皮中,增生性瘢痕组的GRP94阳性成纤维细胞数(731.67±148.31/mm2)高于正常皮肤组(202.00±188.43/mm2),两者比较,其差异有统计学意义(P＜0.05).免疫印迹结果进一步证实,增生性瘢痕组的GRP94含量(0.43±0.25)高于正常皮肤组(0.14±0.03),两者比较,其差异有统计学意义(P＜0.05).③注射曲安奈德后,增生性瘢痕组织的GRP94阳性成纤维细胞数(平均值为247.50±81.82/mm2)显著减少,与对照组(平均值为485.00±88.18/mm2)比较,其差异有统计学意义(P＜0.05).结论 ①成纤维细胞中GRP94的表达增高可能是增生性瘢痕发病机制之一;②抑制成纤维细胞GRP94的表达可能是激素治疗瘢痕增生的作用机制之一.
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GRP94表达在肺癌细胞对VP-16化疗耐药中的作用
[目的]检测在Ca2+拮抗剂A23187诱导下,人肺腺癌细胞SPCA1中GRiP94的表达水平,并分析其表达在肺癌细胞对VP-16耐药中的作用.[方法]采用RT-PCR、免疫荧光细胞化学方法检测不同浓度A23187处理组细胞的GRP94核酸及蛋白表达,用MTT法测定细胞在VP-16作用下的生存率.[结果]A23187可明显诱导SPCA1细胞GRP94核酸和蛋白表达,且表达水平随A23187呈浓度依赖性增加.MTT法测定结果显示:诱导组细胞(A23187浓度为0.5～6 μmol/L)对VP-16的IC50值明显高于对照组,而且IC50值的升高亦对A23187呈一定的浓度依赖性,当A23187浓度为6 μmol/L时IC50值大.[结论]GRP94的表达与肺腺癌细胞SPCA1对VP-16的耐药性有关,有针对性地抑制GRP94基因表达或功能可能成为肺癌治疗的新方法.
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沉默GRP94表达对肺癌A549细胞增殖能力的影响
目的：：探讨沉默GRP94基因对肺癌A549细胞增殖能力的影响及可能机制。方法：分别采用qRT-PCR法、Western blot检测不同肺癌细胞系和肺支气管上皮细胞中GRP94的表达；设计、合成靶向GRP94基因siRNA，通过脂质体转染至人肺腺癌A549细胞中，采用qRT-PCR、Western blot分别检测转染siRNA-GRP94后细胞内GRP94、c-myc及细胞周期蛋白cyclinD1 mRNA及蛋白水平表达的影响；采用CCK-8实验，平板集落实验检测沉默GRP94对细胞的增殖能力的影响。结果：qRT-PCR和Western blot结果显示GRP94在肺癌细胞中的表达较肺支气管上皮细胞显著高表达(P＜0.05，P＜0.01），siRNA-GRP94组中GRP94、c-myc及cyclinD1表达明显下调( P＜0.05）；A549细胞增殖能力受到明显抑制( P＜0.01，P＜0.05）。结论：GRP94在肺癌细胞中高表达，沉默GRP94可明显抑制肺癌A549细胞的增殖能力，其可能通过调控c-myc、cyclinD1表达参与其中。
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老年非小细胞肺癌患者GRP94及GRP78蛋白表达及其临床意义
目的：研究非小细胞肺癌（ NSCLC）中细胞应激因子GRP94及GRP78蛋白表达及其与临床分期及生存期的关系。方法选取该院接受外科手术切除治疗的64例NSCLC患者，应用电话随访的方式了解患者的术后情况和生存期；使用免疫组化技术检测研究对象的病理切片标本中GRP78和GRP94的表达水平。结果 GRP94与GRP78蛋白在 NSCLC肿瘤细胞中明显高表达状态；GRP94、GRP78蛋白的表达与 NSCLC病理类型有关，与分化程度、肿瘤T分期、肿瘤N分期、WHO临床分期具有不同程度的联系，也与肿瘤的大小、浸润、转移有关；与性别和年龄无关。 GRP94及GRP78蛋白的高表达与NSCLC患者生存期及生存率呈明显负相关，其蛋白表达水平越高，患者的生存期越短，生存率越低。结论 GRP78和GRP94是NSCLC发生、发展中的重要因子，可作为肿瘤分期和预测预后的一项指标。
关键词： 非小细胞肺癌(NSCLC) GRP94 GRP78 生存期 -
依那普利叶酸片对高血压伴高同型半胱氨酸血症大鼠左室肥厚干预的研究
目的:观察高同型半胱氨酸对高血压大鼠心肌内质网应激相关因子GRP94、caspase 12表达的影响,及依那普利叶酸片(简称依叶片)对其表达的干预作用.方法:30只雄性成年自发性高血压大鼠(SHR),随机分为对照组、模型组和依叶片组,每组10只.对照组给予普通颗粒饲料喂养同时给予双蒸水灌胃,模型组给予含3％蛋氨酸的颗粒饲料喂养同时给予双蒸水灌胃,依叶片组给予含3％蛋氨酸的颗粒饲料喂养同时给予依叶片粉剂20 mg/kg/d灌胃.实验第8周末,用颈动脉插管法测各组大鼠平均动脉压(MAP),同型半胱氨酸检测仪检测血清同型半胱氨酸(homocystein,Hey)浓度,称取体质量、全心质量及左心室质量计算大鼠心肌肥厚指数HWI及LVEI,通过HE染色观察心肌细胞形态学改变,免疫组化检测大鼠心肌组织中GRP94及caspase12表达水平.结果:①大鼠血清Hcy水平的变化.对照组大鼠血清Hcy值在正常值范围.与对照组相比,模型组大鼠血清Hcy值显著增高(P＜0.01);与模型组相比,依叶片组大鼠血清Hcy值明显降低(P＜0.01).②大鼠HWI、LVEI及MAP的变化.模型组大鼠的HWI及LVEI均明显高于对照组(P＜0.05);依叶片干预后大鼠的HWI及LVEI均明显降低(P＜0.05).对照组与模型组大鼠的MAP均明显增高,但两组大鼠的MAP差异无统计学意义(P＞o.05);与模型组相比,依叶片干预后大鼠的MAP明显降低(P＜0.01).③大鼠心肌细胞内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)相关因子GRP94及caspase12表达.对照组及模型组大鼠心肌细胞GRP94及caspase 12表达均增高.与对照组相比,模型组大鼠心肌细胞GRP94、caspase 12表达增高更为明显(P＜0.05).依叶片干预后大鼠心肌细胞GRP94、caspase12表达明显降低(P＜0.05).结论:高Hcy通过ERS途径使高血压大鼠左室肥厚程度加重;依叶片可有效降低血清Hcy及血压水平,抑制心肌细胞ERS,从而有效逆转左室肥厚,其对左室肥厚干预的分子机制为“H型”高血压的预防及治疗提供了新的理论依据.
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GRP94生物学特点与肿瘤的关系的研究进展
葡萄糖调节蛋白94又叫做内质网蛋白99,是一种内质网分子伴侣蛋白,与HSP90有50％的同源性.GRP94蛋白可以和Ca2+结合具有蛋白伴侣特性,能协助新合成的多肽转位、折叠、寡聚体的组装、降解,抑制错误折叠蛋白的分泌；GRP94还具有抗原呈递的作用,可以作为肿瘤细胞的伴侣蛋白,参与肿瘤细胞的新陈代谢,保护肿瘤细胞免受有害因素的侵害.GRP94可能与人类多种肿瘤的发生有关,其表达的增高可能是肿瘤发生发展的一个重要因素.GRP94在肿瘤组织中高表达提示相关研究者,应用基因手段抑制GRP94的表达可能能够抑制肿瘤细胞的生长、侵袭和转移、增加肿瘤细胞对化疗药物的敏感性等,并且利用GRP94作为一种新的肿瘤治疗的靶分子或介质可能为肿瘤的基因治疗带来更广泛的应用前景.
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GRP94、Caspase-9在乳腺癌中的表达及意义
目的:探讨不同临床分期的乳腺癌组织中GRP94及Caspase-9的表达情况及其临床意义.方法:应用免疫组织化学法检测符合研究规定标准的50例乳腺癌患者的病理及其癌旁正常组织中的GRP94及Caspase-9的表达.结果:GRP94及Caspase-9在乳腺癌组织中、不同分化程度中、不同临床分期中、有无淋巴结转移中阳性表达率的比较,差异有统计学意义(P＜0.05).GRP94及Caspase-9在不同病理类型、不同肿瘤大小中的阳性表达率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:①在乳腺癌组织中:GRP94高表达,Caspase-9低表达.②二者表达情况可能与乳腺癌发生及进展密切相关.
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GRP78、GRP94在乳腺癌中的表达及其意义
目的:在对乳腺癌的临床研究中,探讨GRP78和GRP94表达水平所提示的临床意义.方法:将符合临床研究标准的患者的病理样本统一采用免疫组化法检测其GRP78、GRP94的表达,将检测结果数值用SPASS统计软件中卡方、spearman法和方差分析进行统计分析.结果:①乳腺癌组织中GRP78阳性表达高于癌旁组织,具有统计学意义(P＜0.01);GRP94表达也具有统计学意义.②在乳腺癌癌组织中,肿瘤大小≤2cm组与＞2cm组GRP78表达无统计学意义(P＞0.05);GRP94同样.③在肿瘤的高、中、低分化组比较GRP78表达具有统计学意义(P＜0.05);GRP94同样.④在淋巴结转移的分析中,有淋巴结转移组较无淋巴结转移组GRP78的阳性表达明显增高,且具有统计学意义(P＜0.01); GRP94表达同样.⑤在临床分期的比较中,临床分期越靠后GRP78的含量越高,具有统计学差异性(P＜0.01);GRP94表达也同样⑥GRP78、GRP94在乳腺癌肿的表达存在正相关.结论:①GRP78、GRP94在乳腺癌组织中呈高表达.②.GRP78、GRP94可能与乳腺癌的发生、发展及预后有关.
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TAG-72、GRP94在乳腺癌中的表达
目的:通过检测人体乳腺癌组织中TAG-72、GRP94的表达情况,分析TAG-72、GRP94在乳腺癌组织中的表达特点,并探讨它们之间的相互关系.方法:应用免疫组化方法检测90例正常乳腺组织、乳腺癌组织中TAG-72、GRP94的表达,同时收集患者的临床病理资料进行相关的统计分析.结果:①GRP94在乳腺癌及正常乳腺组织中的阳性表达率分别为78.89％、21.11％,在正常的乳腺组织中表达相比较乳腺癌组织明显下降,比较后差异具有统计学意义(P＜0.05).GRP94在乳腺癌组织中且无淋巴结转移组中的阳性表达率为63.33％,在乳腺癌组织中且有淋巴结转移组的阳性表达率为93.33％,GRP94的蛋白表达与乳腺癌的淋巴结转移有明显相关性(P＜0.05).②TAG-72在乳腺癌组织中与正常乳腺组织中阳性表达分别为30.00％、94.44％.在正常乳腺组织相较于乳腺癌组织明显升高,比较后差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:①GRP94在乳腺癌组织的阳性表达率明显比正常的乳腺组织中的阳性率高,TAG-72蛋白在正常的乳腺的组织中的阳性表达率比在乳腺癌组织中显著高,故GRP94在乳腺癌中呈高表达,TAG-72在乳腺癌中呈现低表达,与乳腺癌的发生、发展之间有密切关系.②GRP94、TAG-72之间存在负相关性,可能在促进乳腺癌的发生、发展过程中存在着相互的联系.
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脑心通对大鼠脑缺血损伤的保护机制
目的:观察脑心通对大鼠缺血脑组织(纹状体)葡萄糖调控蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、GRP94表达的影响,探讨其对大鼠局灶性脑缺血损伤可能的保护机制.方法:大鼠随机分为假手术组、缺血损伤组(线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型)以及脑心通治疗组(缺血损伤前予脑心通治疗,n=30).应用组织学观察、免疫组织化学及半定量RT-PCR检测缺血不同时段(6、12、24 h)各组大鼠纹状体GRP78、GRP94表达的变化.结果:成功建立大鼠局灶性脑缺血模型.组织学观察表明脑心通治疗组大鼠脑缺血损伤程度较缺血损伤组明显减轻.免疫组织化学检查和RT-PCR检测均发现各时间点假手术组大鼠纹状体GRP78、GRP94表达高于缺血损伤组(P<0.01);缺血后6、12、24 h缺血损伤组、脑心通治疗组GRP78、GRP94表达呈现先升高后降低趋势, 缺血后12 h的表达高;各时间点缺血损伤组GRP78、 GRP94表达低于脑心通治疗组(P<0.05或P<0.01).结论:大鼠纹状体缺血损伤后12 h内出现GRP78、 GRP94表达升高;脑心通能够提高脑缺血损伤组织GRP78、GRP94表达;脑心通可能是通过促进GRP78、GRP94表达来发挥保护内质网功能,减轻脑缺血损伤.
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lncRNA-uc007gqg.1在非酒精性脂肪肝中的表达规律
目的:通过高脂饮食诱发肝脂肪变研究其与lncRNA-uc007gqg.1及GRP94、Caspase-3表达水平的相关性.方法:将80只8周龄新西兰雄性大耳白兔随机分为2组,对照组40只给予标准饮食,实验组40只给予高脂高胆固醇饮食喂养制非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型.随机各取10只分别在造模第1、4、6、8 w检测两组兔的血生化指标;收集肝脏组织观察病理表现;分别以实时定量PCR和Westernblotting检测肝脏组织lncRNA-uc007gqg.1和GRP94、Caspase-3蛋白的表达水平.结果:与对照组相比,实验组ALT、AST、TC、LDL、HDL水平在造模4 w时出现明显增高;ALB、TB、CRP水平在造模6 w时明显增高;GGT、TG、ALT与AST比值水平在造模6、8 w时明显升高(P<0.01);肝细胞脂肪样变明显增加;肝组织lncRNA-uc007gqg.1基因表达水平和GRP94、Caspase-3蛋白表达量逐渐增加(P<0.05).结论:肝组织lncRNA-uc007gqg.1表达水平升高与脂肪肝病变密切相关,可能参与NAFLD疾病进展,提示lncRNA-uc007gqg.1可能是防治该疾病的一个新靶点.
